血流感染的实验室诊断实用版课件

血流感染的实验室诊断血流感染的实验室诊断1血流感染的实验室诊断血流感染的实验室诊断血流感染的实验室诊断1血流感染概述血流感染概述2自动化血培养系统自动化血培养系统3标本采集和运送标本采集和运送4阳性报警后处理方法阳性报警后处理方法5如何判断是否污染如何判断是否污染1血流感染概述2自动化血培养系统3标本采集和运送4阳性报警后一、血流感染概述一、血流感染概述一、血流感染概述（一）血流感染的定义（一）血流感染的定义血流感染（血流感染（bloodstream bloodstream infections,BSIinfections,BSI）是指各种病原微生物侵）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体所有脏器造成损害，细胞因子释放，对机体所有脏器造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病。身感染性疾病。（一）血流感染的定义血流感染（bloodstream inf（二）血流感染的类型（二）血流感染的类型菌血症（菌血症（bacteremiabacteremia）细菌侵入血流，尚未大量繁）细菌侵入血流，尚未大量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。殖且未引发临床症状，往往是一过性的。败血症（败血症（septicemiasepticemia）细菌进入血液大量繁殖，分）细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。脓毒败血症（脓毒败血症（pyemiapyemia）细菌进入血液大量繁殖，分）细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴有泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴有多发性脓肿或败血性休克。多发性脓肿或败血性休克。毒血症（毒血症（toxemiatoxemia）细菌毒素或代谢产物进入血液）细菌毒素或代谢产物进入血液引起的临床病症。引起的临床病症。（二）血流感染的类型菌血症（bacteremia）细菌侵入血（三）血培养的现状（三）血培养的现状l送检率低送检率低送检量送检量（瓶（瓶/日）日）床位床位中国大陆三甲医院中国大陆三甲医院2020505010001000中国香港玛丽医院中国香港玛丽医院20020014001400中国台湾台大医院中国台湾台大医院30030020002000美国美国John HopinksJohn Hopinks30030040040010391039（三）血培养的现状送检率低送检量床位中国大陆三甲医院205（三）血培养的现状（三）血培养的现状不正确采样不正确采样污染问题污染问题 皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。阳性检出率低阳性检出率低检验周期长检验周期长 （三）血培养的现状不正确采样检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，90%以上是致病菌。检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可能性更低。检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，90%以上是致病菌。菌血症（bacteremia）细菌侵入血流，尚未大量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。五、如何判断是否污染？阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染观察培养曲线 涂片、转种血平板 革兰染色 镜检 报告危急值儿童采血量为35ml/瓶，采取儿童瓶。检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，90%以上是致病菌。重新涂片，作瑞氏染色血流感染（bloodstream infections,BSI）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体所有脏器造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病。儿童采血量为35ml/瓶，采取儿童瓶。阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染二、全自动血培养系统二、全自动血培养系统检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌二、自动化血培养系统二、自动化血培养系统我院使用的是我院使用的是BacT/BacT/ALERT 3D ALERT 3D 全自动细全自动细菌、分枝杆菌培养系菌、分枝杆菌培养系统统工作原理工作原理 细菌在培养基中代细菌在培养基中代谢基质时产生谢基质时产生CO2,CO2,并并水解成水解成H+H+，H+H+透过透过瓶底滤过膜，瓶底乳瓶底滤过膜，瓶底乳胶感应器颜色由墨绿胶感应器颜色由墨绿色变成黄色。色变成黄色。二、自动化血培养系统我院使用的是BacT/ALERT 3二、自动化血培养系统二、自动化血培养系统仪器培养孔底的仪器培养孔底的光电探测器测量光电探测器测量反射光变化并按反射光变化并按相应公式计算。相应公式计算。判读公式判读公式 加速度法加速度法 速率法速率法 起始阈值法起始阈值法二、自动化血培养系统仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并三、标本采集和运送三、标本采集和运送三、标本采集和运送（一）标本采集（一）标本采集采集时间采集时间 1.1.尽可能在抗菌药物使用前；尽可能在抗菌药物使用前；2.2.对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药前采集；药前采集；3.3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心内膜炎（持续性菌血症）例外；心内膜炎（持续性菌血症）例外；4.4.怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超过超过3939才抽血，而错过时机。才抽血，而错过时机。（一）标本采集采集时间（一）标本采集（一）标本采集寒战后体温高峰前寒战后体温高峰前细菌含量最高。细菌含量最高。血液细菌含量随着血液细菌含量随着体温从最高峰逐渐体温从最高峰逐渐下降而越来越少。下降而越来越少。血液采样的最佳时血液采样的最佳时间是在寒战后和发间是在寒战后和发热高峰前，此时阳热高峰前，此时阳性检出率最高。性检出率最高。（一）标本采集寒战后体温高峰前细菌含量最高。（一）标本采集（一）标本采集l采血量 成人采血量为510ml/瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。儿童采血量为35ml/瓶，采取儿童瓶。（一）标本采集采血量五、如何判断是否污染？采血后的血培养瓶应立即送检，不得超过2h。我院使用的是BacT/ALERT 3D 全自动细菌、分枝杆菌培养系统阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染若革兰染色镜检未发现细菌，怎么办？五、如何判断是否污染？重新涂片，作瑞氏染色败血症（septicemia）细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心内膜炎（持续性菌血症）例外；血液细菌含量随着体温从最高峰逐渐下降而越来越少。寒战后体温高峰前细菌含量最高。检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，90%以上是致病菌。成人采血量为510ml/瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。观察培养曲线 涂片、转种血平板 革兰染色 镜检 报告危急值败血症（septicemia）细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。重新涂片，作瑞氏染色观察培养曲线 涂片、转种血平板 革兰染色 镜检 报告危急值阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血平板上是否生长脓毒败血症（pyemia）细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴有多发性脓肿或败血性休克。（二）标本运送（二）标本运送采血后的血培养瓶应立即送检，不得超过采血后的血培养瓶应立即送检，不得超过2h。不能放入冰箱或冷冻，有些苛养菌如肺炎链球菌、不能放入冰箱或冷冻，有些苛养菌如肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。脑膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温。如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温。五、如何判断是否污染？（二）标本运送采血后的血培养瓶应立即送四、阳性报警后处理方法四、阳性报警后处理方法四、阳性报警后处理方法血培养阳性报警后，如何处理？血培养阳性报警后，如何处理？观察培养曲线观察培养曲线 涂片、转种血平板涂片、转种血平板 革兰染革兰染色色 镜检镜检 报告危急值报告危急值若革兰染色镜检未发现细菌，怎么办？若革兰染色镜检未发现细菌，怎么办？重新涂片，作瑞氏染色重新涂片，作瑞氏染色 以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血平板上是否生长平板上是否生长血培养阳性报警后，如何处理？血流感染的实验室诊断实用版课件血流感染的实验室诊断实用版课件阳性曲线阳性曲线阴性曲线阴性曲线假阳性曲线假阳性曲线五、如何判断是否污染？五、如何判断是否污染？五、如何判断是否污染？五、如何判断是否污染？五、如何判断是否污染？（一）阳性检出瓶数（二）细菌种类（三）阳性检出时间（四）重复培养结果五、如何判断是否污染？（一）阳性检出瓶数（一）阳性检出瓶数（一）阳性检出瓶数两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固酶阴性的葡萄球菌，也应考虑为致病酶阴性的葡萄球菌，也应考虑为致病菌菌（一）阳性检出瓶数两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染（二）细菌种类（二）细菌种类检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，菌时，90%90%以上是致病菌。以上是致病菌。检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可能性更低。能性更低。检出棒杆菌、微球菌、气球菌、芽胞杆菌、凝固检出棒杆菌、微球菌、气球菌、芽胞杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌，污染的可能性很大。酶阴性葡萄球菌，污染的可能性很大。（二）细菌种类检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及尽可能在抗菌药物使用前；五、如何判断是否污染？阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温。阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染血流感染（bloodstream infections,BSI）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体所有脏器造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病。仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。败血症（septicemia）细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，90%以上是致病菌。败血症（septicemia）细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。尽可能在抗菌药物使用前；美国John Hopinks检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可能性更低。对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药前采集；寒战后体温高峰前细菌含量最高。皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，90%以上是致病菌。菌血症（bacteremia）细菌侵入血流，尚未大量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。观察培养曲线 涂片、转种血平板 革兰染色 镜检 报告危急值仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。血培养阳性报警后，如何处理？美国John Hopinks血流感染（bloodstream infections,BSI）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体所有脏器造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病。两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固酶阴性的葡萄球菌，也应考虑为致病菌仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可能性更低。成人采血量为510ml/瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。血流感染（bloodstream infections,BSI）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体所有脏器造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病。尽可能在抗菌药物使用前；五、如何判断是否污染？血液细菌含量随着体温从最高峰逐渐下降而越来越少。尽可能在抗菌药物使用前；皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。五、如何判断是否污染？（三）阳性检出时间（三）阳性检出时间阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。阳性报警出现时间小于阳性报警出现时间小于24h24h，一般为血流感染，一般为血流感染 大于大于48h48h，多为污染，多为污染尽可能在抗菌药物使用前；两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染（三）