权威细胞免疫治疗开展情况培训ppt课件

权权威威细细胞免疫治胞免疫治疗疗开开展情况展情况权威细胞免疫治疗开展情况1细胞免疫治疗在辽宁省人民医细胞免疫治疗在辽宁省人民医院的临床应用情况院的临床应用情况 辽宁省人民医院肿瘤科：赫丽杰辽宁省人民医院肿瘤科：赫丽杰 权威细胞免疫治疗开展情况2细胞免疫治疗在辽宁省人民医院的临床应用情况 权威我院生物治疗发展史我院生物治疗发展史n n1999年：开始LAK细胞和肿瘤疫苗的工作n n2002年：开始利用CIK应用到恶性肿瘤的临床工作中，至今累计病例千余例。n n2010年底：在原有实验室基础上，建成了符合GMP标准的细胞治疗实验室。n n2011年始：开展DC细胞治疗肿瘤的工作，并更新CIK细胞的培养方法，使细胞更加丰富，治疗效果更佳。权威细胞免疫治疗开展情况3我院生物治疗发展史1999年：开始LAK细胞和肿瘤疫苗的工作肿瘤生物治疗中心建立肿瘤生物治疗中心建立n n2011年1月27日新建的实验室通过了辽宁省疾控中心认证，成为国际先进的整体万级、局部百级洁净，符合GMP标准的细胞治疗实验室！n n临床制定了规范化的诊疗流程2011年年3月月10日日 辽宁省人民医院肿瘤生物辽宁省人民医院肿瘤生物治疗中心正式成立！治疗中心正式成立！2011年年3月月15日日GMP 标准实验室正式启动标准实验室正式启动运行！运行！权威细胞免疫治疗开展情况4肿瘤生物治疗中心建立2011年1月27日新建的实验室通过了辽肿瘤生物治疗中心概况肿瘤生物治疗中心概况n n肿瘤生物治疗门诊室肿瘤生物治疗门诊室n n细胞单采室：血细胞单采分离机细胞单采室：血细胞单采分离机1 1台台 n nGMPGMP细胞实验室：有生物安全柜，细胞实验室：有生物安全柜，CO2CO2培养箱，培养箱，-80-80度低温度低温冰箱，离心机等一批先进的细胞培养的实验设备，在国内冰箱，离心机等一批先进的细胞培养的实验设备，在国内外同类实验室中处于领先地位。外同类实验室中处于领先地位。n n细胞质检室细胞质检室权威细胞免疫治疗开展情况5肿瘤生物治疗中心概况肿瘤生物治疗门诊室权威细胞免疫治疗开展情细胞免疫治疗的项目及方案细胞免疫治疗的项目及方案n n项目：自体细胞因子诱导杀伤（CIK）细胞 抗原致敏树突状细胞（DC）n n方案：单纯CIK+DC治疗 CIK+DC联合化疗权威细胞免疫治疗开展情况6细胞免疫治疗的项目及方案项目：权威细胞免疫治疗开展情况6细胞免疫治疗的适应症细胞免疫治疗的适应症n n手术后的患者手术后的患者 n n手术及放疗后的患者手术及放疗后的患者n n手术及化疗后的患者手术及化疗后的患者n n手术及放、化疗以后的患者手术及放、化疗以后的患者n n放化疗后的患者放化疗后的患者n n对于很多放、化疗无效或不接受放、化疗的患者，对于很多放、化疗无效或不接受放、化疗的患者，单独使用单独使用DC/CIKDC/CIK免疫治疗，仍然有效且无毒副作免疫治疗，仍然有效且无毒副作用。用。n n癌性胸、腹腔积液患者。癌性胸、腹腔积液患者。权威细胞免疫治疗开展情况7细胞免疫治疗的适应症手术后的患者 权威细胞免疫治疗开展情况7细胞免疫治疗的禁忌症细胞免疫治疗的禁忌症n n细胞因子过敏n nT细胞淋巴瘤权威细胞免疫治疗开展情况8细胞免疫治疗的禁忌症细胞因子过敏权威细胞免疫治疗开展情况8细胞免疫治疗临床规范化实施流程细胞免疫治疗临床规范化实施流程n n病例选择n n治疗过程：单采体外诱导回输n n临床观察指标权威细胞免疫治疗开展情况9细胞免疫治疗临床规范化实施流程病例选择权威细胞免疫治疗开展情细胞免疫治疗病例选择细胞免疫治疗病例选择n n入选标准：年龄大于年龄大于1818岁；岁；病理组织学或细胞学确诊为肿瘤患者；病理组织学或细胞学确诊为肿瘤患者；卡氏体力状况评分标准卡氏体力状况评分标准6060分以上；分以上；预计生存期至少大于预计生存期至少大于3 3个月；个月；签署知情同意书；签署知情同意书；如若可以接受手术治疗或其它方式能够获得一定数如若可以接受手术治疗或其它方式能够获得一定数量的肿瘤组织件或细胞的患者最佳。量的肿瘤组织件或细胞的患者最佳。权威细胞免疫治疗开展情况10细胞免疫治疗病例选择入选标准：权威细胞免疫治疗开展情况10细胞免疫治疗的病例选择细胞免疫治疗的病例选择n n排除标准：排除标准：脏器移植者；脏器移植者；长期使用免疫抑制药物或正在使用的自身免疫性疾病者；长期使用免疫抑制药物或正在使用的自身免疫性疾病者；身体状况较差，伴严重心肺肝及肾功能不良者（心功能不全身体状况较差，伴严重心肺肝及肾功能不良者（心功能不全IVIV级以上；呼吸衰竭；国内肝功能分级级以上；呼吸衰竭；国内肝功能分级C C级以上；肾功能衰竭级以上；肾功能衰竭及尿毒症期）；及尿毒症期）；脑转移并伴意识障碍者；脑转移并伴意识障碍者；精神疾病者；精神疾病者；急性肝炎或其他急性感染病活动期、急性肝炎或其他急性感染病活动期、HIVHIV感染者；感染者；怀孕或哺乳期妇女；怀孕或哺乳期妇女；对本治疗中所有生物试剂过敏者；对本治疗中所有生物试剂过敏者；TT细胞淋巴瘤；细胞淋巴瘤；权威细胞免疫治疗开展情况11细胞免疫治疗的病例选择排除标准：权威细胞免疫治疗开展情况11细胞免疫治疗过程细胞免疫治疗过程 n n每位患者在接受免疫治疗前1-2天内，需完善的检查包括：血常规、血型、感染筛查、肝肾功、血离子、凝血功能、T细胞亚群、肿瘤标志物、心电图、心功能。n n对于有可观测靶病灶的病例，治疗前需进行基线评估，即有至少1个月内的影像检查，如CT、MRI等n n签署知情同意书权威细胞免疫治疗开展情况12细胞免疫治疗过程 每位患者在接受免疫治疗前1-2天内，需完善细胞免疫治疗过程细胞免疫治疗过程n n自体外周血单个核细胞采集：血细胞分离机自体外周血单个核细胞采集：血细胞分离机（PBMCPBMC液液50-60ml50-60ml，即，即 1101109 9及血浆及血浆80ml80ml）n n免疫活性细胞的制备：免疫活性细胞的制备：DC DC培养、培养、CIKCIK培养培养 7-8 7-8天开始收获天开始收获DCDC细胞细胞;12-16;12-16天开始收获天开始收获CIKCIK细胞细胞n n细胞回输：静脉输注细胞回输：静脉输注 CIK CIK、DCDC各分各分4 4次回输，交错进行。次回输，交错进行。每次回输细胞数为每次回输细胞数为CIK110CIK1109 9、DC110DC1107 7一疗程：一疗程：4DC+4CIK 4DC+4CIK 大约大约1 1个月。个月。权威细胞免疫治疗开展情况13细胞免疫治疗过程自体外周血单个核细胞采集：血细胞分离机（PBDC的制的制备流程流程负载肿瘤抗原的成熟负载肿瘤抗原的成熟DCDC细胞细胞细胞回输细胞回输诱导诱导DC细胞细胞肿瘤抗原肿瘤抗原临床疗效监测临床疗效监测 DC 细胞成熟细胞成熟抗原负载抗原负载细胞分选细胞分选14权威细胞免疫治疗开展情况14DC的制备流程负载肿瘤抗原的成熟DC细胞细胞回输诱导DC细胞15INF-、CD3 McAb、IL-2权威细胞免疫治疗开展情况1515INF-、CD3 McAb、IL-2权威细胞免疫治细胞免疫治疗的临床观察指标细胞免疫治疗的临床观察指标n n生活质量改善n n免疫功能检测n n客观疗效评估n n不良反应权威细胞免疫治疗开展情况16细胞免疫治疗的临床观察指标生活质量改善权威细胞免疫治疗开展情观察指标：生活质量的改善观察指标：生活质量的改善主要应用EORTC QLQ-C30生命质量测定表及KPS评分标准评价患者生活质量改善n n卡式评分增加：KPS评分增加20分n n疼痛程度减轻：疼痛减轻50 n n食欲及睡眠的改善n n胸腹水减少权威细胞免疫治疗开展情况17观察指标：生活质量的改善主要应用EORTC QLQ-C30生权威细胞免疫治疗开展情况18权威细胞免疫治疗开展情况18观察指标：免疫功能改善观察指标：免疫功能改善n n治疗前及治疗后1周，采集患者外周血，采用流式细胞仪检测T细胞亚群（CD3、CD4、CD8、CD3/CD56等含量及比例），评估患者治疗前后免疫功能的改善。权威细胞免疫治疗开展情况19观察指标：免疫功能改善治疗前及治疗后1周，采集患者外周血，采观察指标：客观疗效评估观察指标：客观疗效评估n n近期疗效：近期疗效：1.1.靶病灶大小的变化：按照靶病灶大小的变化：按照RECIST1.1RECIST1.1版评定肿瘤版评定肿瘤近期疗效，即以治疗前后影像学检查为依据进行近期疗效，即以治疗前后影像学检查为依据进行评价，分为完全缓解评价，分为完全缓解(CR)(CR)、部分缓解、部分缓解(PR)(PR)、病灶、病灶稳定稳定(SD)(SD)和进展和进展(PD)(PD)2.2.疾病控制率（疾病控制率（DCRDCR）：）：CR+PR+SDCR+PR+SD 反应率（反应率（RRRR）：）：CR+PRCR+PRn n远期疗效：无病生存时间（远期疗效：无病生存时间（DFSDFS）无进展生存时间（无进展生存时间（PFSPFS）总生存（总生存（OSOS）权威细胞免疫治疗开展情况20观察指标：客观疗效评估近期疗效：权威细胞免疫治疗开展情况2观察指标：不良反应观察指标：不良反应 每次输注每次输注CIKCIK或或CIKCIK细胞时均观察有无寒战、发热细胞时均观察有无寒战、发热及过敏等症状，不良反应按照美国国立癌症研究及过敏等症状，不良反应按照美国国立癌症研究所制定的通用药物毒性反应标准（所制定的通用药物毒性反应标准（NCI-CTCNCI-CTC），分），分为为0 0IVIV度。度。权威细胞免疫治疗开展情况21观察指标：不良反应 每次输注CIK或CIK细胞时均观察有无治疗基本流程治疗基本流程疗效观察单个核细胞采集细胞分离、扩增细胞鉴定及无菌检测细胞回输权威细胞免疫治疗开展情况22治疗基本流程疗效观察单个核细胞采集细胞分离、扩增细胞鉴定及无新实验室建成后开展概况新实验室建成后开展概况n n单采例次：6（2011.3.15）肺癌肺癌肺癌肺癌1 1例例例例 直肠癌直肠癌直肠癌直肠癌 1 1例例例例 胃癌胃癌胃癌胃癌1 1例例例例 非霍奇金淋巴瘤非霍奇金淋巴瘤非霍奇金淋巴瘤非霍奇金淋巴瘤1 1例例例例 甲状腺癌甲状腺癌甲状腺癌甲状腺癌1 1例例例例 恶性黑色素瘤恶性黑色素瘤恶性黑色素瘤恶性黑色素瘤1 1例例例例n n回输例次：n n临床疗效及不良反应有待于进一步观察 权威细胞免疫治疗开展情况23新实验室建成后开展概况权威细胞免疫治疗开展情况23权威细胞免疫治疗开展情况24道路曲折 前景光明权威细胞免疫治疗开展情况24 辽宁省人民医院肿瘤科辽宁省人民医院肿瘤科 联系电话：联系电话：1564056117415640561174 024-24016470024-24016470权威细胞免疫治疗开展情况25 既往细胞免疫治疗应用情况既往细胞免疫治疗应用情况n n20022002年我院开始利用年我院开始利用CIKCIK、DC-CIKDC-CIK治疗恶性肿瘤，治疗恶性肿瘤，至今累计病例千余例。至今累计病例千余例。n n不足之处：不足之处：1 1、实验室设备陈旧，实验空间较小，不能满足治疗、实验室设备陈旧，实验空间较小，不能满足治疗的需要；的需要；2 2、缺乏规范化管理、规范化的诊疗流程、规范化的、缺乏规范化管理、规范化的诊疗流程、规范化的临床观察指标、规范化的病例总结等。因此难以临床观察指标、规范化的病例总结等。因此难以评价细胞免疫治疗效果，不利于更好的指导细胞评价细胞免疫治疗效果，不利于更好的指导细胞免疫治疗在临床的应用。免疫治疗在临床的应用。权威细胞免疫治疗开展情况26既往细胞免疫治疗应用情况2002年我院开始利用CIK、DC-l 11 clinical trials.l 867 patients,.426 patients were treated.l Most trials included patients with HCC,gastric cancer,and Hodgkin,non-Hodgkin disease.l In 10 of 11 studies,autologous CIK cells were used.权威细胞免疫治疗开展情况27 11 clinical trials.权威细胞免疫治疗开展lThe 1-,3-and 5-year DFS in patients receiving CIK cells when compared to no CIK cell treatment(127 patients)Conclusion:Adjuvant immunotherapy with cytokineinduced killer cells mayprevent recurrence and improve quality of life and progression-free survival rates in patients with cancer.权威细胞免疫治疗开展情况28The 1-,3-and 5-year DFS in p生物中心概况生物中心概况n n医生医生1010人、博士人、博士2 2人，硕士人，硕士5 5人、护士人、护士7 7人；技术人员人；技术人员7 7人人n n主任医师主任医师3 3人，副主任医师人，副主任医师3 3人，主治医师人，主治医师1 1人，医师人，医师3 3人。人。n n病床病床3030张；张；n n单采室：单采室：血细胞单采分离机血细胞单采分离机1 1台台 n n肿瘤生物治疗门诊肿瘤生物治疗门诊权威细胞免疫治疗开展情况29生物中心概况医生10人、博士2人，硕士5人、护士7人；技术人概念：是机体内最有效、功能最强的专职抗原提呈细胞（APC）它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原未成熟DC具有较强的捕获抗原及迁移能力成熟DC能有效激活初始型T细胞处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节DCDC，树突状细胞免疫疗法，树突状细胞免疫疗法权威细胞免疫治疗开展情况30概念：是机体内最有效、功能最强的专职抗原提呈细胞（APC）D肿瘤患者的抗原提呈缺陷n n做为抗原递呈细胞的做为抗原递呈细胞的DCDC细胞数量不足。细胞数量不足。n n肿瘤细胞分泌大量的抑制因子如转化生长因子（肿瘤细胞分泌大量的抑制因子如转化生长因子（TGF-TGF-）等抑制免疫反应。等抑制免疫反应。n n缺乏危险信号，缺乏危险信号，DCDC细胞不能完全成熟。细胞不能完全成熟。n n肿瘤细胞形成生理屏障阻碍肿瘤细胞形成生理屏障阻碍DCDC摄取抗原。摄取抗原。n n肿瘤患者体内存在过量的调节性肿瘤患者体内存在过量的调节性T T淋巴细胞淋巴细胞(Treg)(Treg)产生免疫产生免疫抑制效应。抑制效应。要避开这些因素的影响，体外诱导激活树突状细胞是最高效的一种方法！权威细胞免疫治疗开展情况31肿瘤患者的抗原提呈缺陷做为抗原递呈细胞的DC细胞数量不足。要DCDC杀瘤机制杀瘤机制n n在机体的抗肿瘤免疫反应中，细胞免疫是主要形式。在机体的抗肿瘤免疫反应中，细胞免疫是主要形式。而产生的而产生的CD8+CD8+的细胞毒性的细胞毒性T T细胞细胞(CTL)(CTL)是有效的抗肿瘤是有效的抗肿瘤细胞免疫的核心。细胞免疫的核心。n n在体外以肿瘤抗原专一地冲击致敏、激活在体外以肿瘤抗原专一地冲击致敏、激活DCDC，将摄取，将摄取了肿瘤抗原的了肿瘤抗原的DCDC回输至体内，携带肿瘤抗原的回输至体内，携带肿瘤抗原的DCDC再将再将抗原信息提呈给抗原信息提呈给T T细胞时，活化了细胞时，活化了T T细胞，从而诱导机细胞，从而诱导机体产生了具有特异性杀伤肿瘤细胞的体产生了具有特异性杀伤肿瘤细胞的CTLCTL，因而对肿，因而对肿瘤产生一定的治疗作用。瘤产生一定的治疗作用。权威细胞免疫治疗开展情况32DC杀瘤机制在机体的抗肿瘤免疫反应中，细胞免疫是主要形式。而DC应用应用n n目前，目前，DCDC疗法，在我国已被批准用于肿瘤患者的疗法，在我国已被批准用于肿瘤患者的临床治疗，已上全国及辽宁省医疗服务价格项目临床治疗，已上全国及辽宁省医疗服务价格项目规范，也是目前国内唯一被批准应用于临床的肿规范，也是目前国内唯一被批准应用于临床的肿瘤疫苗类治疗方法，已经大量应用于肿瘤的临床瘤疫苗类治疗方法，已经大量应用于肿瘤的临床免疫治疗。（免疫治疗。（FDAFDA批准批准ProvengeProvenge的治疗晚期前列腺的治疗晚期前列腺癌疫苗癌疫苗)n n对肿瘤切除术后的癌症患者在术后进行对肿瘤切除术后的癌症患者在术后进行CIKCIK过继免过继免疫治疗，杀灭残存的肿瘤细胞同时，结合疫治疗，杀灭残存的肿瘤细胞同时，结合DCDC疗法，疗法，可激发机体特异性抗肿瘤免疫，达到长期对肿瘤可激发机体特异性抗肿瘤免疫，达到长期对肿瘤细胞的控制杀伤效果。细胞的控制杀伤效果。权威细胞免疫治疗开展情况33DC应用目前，DC疗法，在我国已被批准用于肿瘤患者的临床治疗DC的制的制备流程流程负载肿瘤抗原的成熟负载肿瘤抗原的成熟DCDC细胞细胞细胞回输细胞回输诱导诱导DC细胞细胞肿瘤抗原肿瘤抗原临床疗效监测临床疗效监测 DC 细胞成熟细胞成熟抗原负载抗原负载细胞分选细胞分选34权威细胞免疫治疗开展情况34DC的制备流程负载肿瘤抗原的成熟DC细胞细胞回输诱导DC细胞 DC DC细胞疫苗的优势细胞疫苗的优势n n整个治疗过程病人简单易行，非常轻松，无痛苦和不适。整个治疗过程病人简单易行，非常轻松，无痛苦和不适。n n培养所需的淋巴细胞数量少，不需要采集大量的外周血。培养所需的淋巴细胞数量少，不需要采集大量的外周血。n n诱导并激活病人自身的特异性抗肿瘤免疫反应。诱导并激活病人自身的特异性抗肿瘤免疫反应。n n诱导产生免疫记忆，使机体获得持久的抗肿瘤免疫力。诱导产生免疫记忆，使机体获得持久的抗肿瘤免疫力。n n可治疗的肿瘤种类广，对国内发病率较高的肿瘤如消化道可治疗的肿瘤种类广，对国内发病率较高的肿瘤如消化道肿瘤（胃癌、直肠癌）、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、肾癌、肿瘤（胃癌、直肠癌）、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、肾癌、白血病等都有一定的疗效。白血病等都有一定的疗效。n n与与CIKCIK细胞治疗可以协同进行，达到互补的效果。细胞治疗可以协同进行，达到互补的效果。35权威细胞免疫治疗开展情况35 DC细胞疫苗的优势整个治疗过程病人简单易行，CIKCIK，细胞因子诱导的杀伤细胞免疫疗法，细胞因子诱导的杀伤细胞免疫疗法n nCIKCIK细胞是一种用外周血单个核细胞（细胞是一种用外周血单个核细胞（PBMCPBMC），在体外经过多种），在体外经过多种细胞因子培养激活后，获得的对肿瘤细胞具有高效溶解毒性的一细胞因子培养激活后，获得的对肿瘤细胞具有高效溶解毒性的一群异质细胞。群异质细胞。n n又称为又称为NKNK细胞样细胞样T T淋巴细胞：主要组成包括淋巴细胞：主要组成包括CD3+CD8+CD3+CD8+双阳性细胞、双阳性细胞、CD3+CD4+CD3+CD4+双阳性细胞以及双阳性细胞以及CD3+CD56+CD3+CD56+双阳性细胞（主要效应细胞）。双阳性细胞（主要效应细胞）。n n特点：兼具有特点：兼具有T T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性、淋巴细胞强大的抗肿瘤活性、NKNK细胞的非细胞的非MHCMHC限制限制性杀瘤优点。性杀瘤优点。n n应用应用CIKCIK细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。案。权威细胞免疫治疗开展情况36CIK，细胞因子诱导的杀伤细胞免疫疗法CIK细胞是一种用外周CIKCIK细胞的作用机制细胞的作用机制CIKCIK细胞细胞权威细胞免疫治疗开展情况37CIK细胞的作用机制CIK细胞权威细胞免疫治疗开展情况37CIK细胞的特点n n增殖速度快增殖速度快n n杀瘤活性高，兼具有杀瘤活性高，兼具有T T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性淋巴细胞强大的抗肿瘤活性n n杀瘤谱广，兼具有杀瘤谱广，兼具有NKNK细胞的非细胞的非MHCMHC限制性杀瘤优点限制性杀瘤优点n n细胞来源丰富：正常或患者的骨髓或外周血单个核细胞细胞来源丰富：正常或患者的骨髓或外周血单个核细胞均可诱导获得均可诱导获得CIKCIK细胞细胞n n对多重耐药肿瘤细胞同样敏感对多重耐药肿瘤细胞同样敏感n n杀瘤活性不受杀瘤活性不受CsACsA、FK506FK506等免疫抑制剂的影响等免疫抑制剂的影响n n对正常骨髓造血前体细胞无毒性对正常骨髓造血前体细胞无毒性n n能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞Fas-FasLFas-FasL凋亡凋亡权威细胞免疫治疗开展情况38CIK细胞的特点增殖速度快权威细胞免疫治疗开展情况38权威细胞免疫治疗开展情况培训ppt课件39CIKCIK治疗的禁忌症治疗的禁忌症1、细胞因子过敏。2、T细胞淋巴瘤病人应禁用。权威细胞免疫治疗开展情况40CIK治疗的禁忌症权威细胞免疫治疗开展情况4041INF-、CD3 McAb、IL-2权威细胞免疫治疗开展情况4141INF-、CD3 McAb、IL-2权威细胞免疫治 CIK CIK细胞治疗的优势细胞治疗的优势n n整个治疗过程简单易行，病人非常轻松，无痛苦和不适。整个治疗过程简单易行，病人非常轻松，无痛苦和不适。n n培养所需的淋巴细胞数量少，不需要采集大量的外周血。培养所需的淋巴细胞数量少，不需要采集大量的外周血。n n消灭微小残留病灶消灭微小残留病灶n n对多重耐药肿瘤细胞敏感，故可用于治疗某些化疗不敏感对多重耐药肿瘤细胞敏感，故可用于治疗某些化疗不敏感的肿瘤；不宜手术且对化疗和放疗禁忌的肿瘤患者。的肿瘤；不宜手术且对化疗和放疗禁忌的肿瘤患者。n n显效时间短，病人可以马上感到食欲和精神状态的好转以显效时间短，病人可以马上感到食欲和精神状态的好转以及疼痛减轻，使病人对继续接受治疗充满信心。及疼痛减轻，使病人对继续接受治疗充满信心。n n与与DCDC细胞治疗可以协同进行，达到互补的效果。细胞治疗可以协同进行，达到互补的效果。421012109106权威细胞免疫治疗开展情况42 CIK细胞治疗的优势整个治疗过程简单易行，病人细胞回输方案细胞回输方案治疗途径：全身治疗是通过静脉输注进行；治疗途径：全身治疗是通过静脉输注进行；局部治疗是通过介入方法或直接注入病灶部位。局部治疗是通过介入方法或直接注入病灶部位。治疗过程：第治疗过程：第0 0天采集外周血单个核细胞分离培养；天采集外周血单个核细胞分离培养；第第7-87-8天开始收获天开始收获DCDC细胞，分细胞，分4 4次回输，每次间隔次回输，每次间隔3-43-4天；天；第第1010天开始收获天开始收获CIKCIK细胞，分细胞，分4 4次回输次回输,与与DCDC回输交错进行。回输交错进行。总疗程：总疗程：4 DC+4 CIK 4 DC+4 CIK 总疗程约为总疗程约为2020天。天。权威细胞免疫治疗开展情况43细胞回输方案治疗途径：全身治疗是通过静脉输注进行；权威细胞免观察指标观察指标n n一般状态的改善n n免疫功能检测n n疗效评估n n不良反应权威细胞免疫治疗开展情况44观察指标一般状态的改善权威细胞免疫治疗开展情况44一般状态的改善一般状态的改善n n卡式评分增加：KPS评分增加20分n n疼痛程度减轻：疼痛减轻50 n n食欲及睡眠的改善n n胸腹水减少权威细胞免疫治疗开展情况45一般状态的改善卡式评分增加：KPS评分增加20分权威细胞权威细胞免疫治疗开展情况46权威细胞免疫治疗开展情况46免疫功能改善免疫功能改善n n治疗前及治疗后，采集患者外周血，采用流式细治疗前及治疗后，采集患者外周血，采用流式细胞仪检测胞仪检测CD3CD3、CD4 CD4、CD8CD8、CD3/CD56CD3/CD56，评估患者，评估患者治疗前后免疫功能的改善。治疗前后免疫功能的改善。T T T T辅助细胞（辅助细胞（辅助细胞（辅助细胞（%）T T T T抑制细胞（抑制细胞（抑制细胞（抑制细胞（%）NKTNKTNKTNKT细胞（细胞（细胞（细胞（%）治疗前治疗前治疗前治疗前30.244.2130.244.2130.244.2130.244.2128.945.3828.945.3828.945.3828.945.386.530.466.530.466.530.466.530.46治疗后治疗后治疗后治疗后34.213.1234.213.1234.213.1234.213.1224.554.7124.554.7124.554.7124.554.7110.681.4310.681.4310.681.4310.681.43权威细胞免疫治疗开展情况47免疫功能改善治疗前及治疗后，采集患者外周血，采用流式细胞仪检疗效评估疗效评估n n近期疗效：近期疗效：1.WHO 1.WHO标准或标准或RECIST RECIST，分为，分为 CR CR、PRPR、SD SD、PDPD 2.DCR 2.DCR和和RRRRn n远期疗效：远期疗效：DFSDFS、PFSPFS、OSOS 权威细胞免疫治疗开展情况48疗效评估近期疗效：权威细胞免疫治疗开展情况48不良反应不良反应 每次输注每次输注CIKCIK或或DC-CIKDC-CIK细胞时均观察有无寒战、发细胞时均观察有无寒战、发热及过敏等症状，不良反应按照美国国立癌症研热及过敏等症状，不良反应按照美国国立癌症研究所制定的通用药物毒性反应标准（究所制定的通用药物毒性反应标准（NCI-CTCNCI-CTC），），分为分为0 0IVIV度。度。权威细胞免疫治疗开展情况49不良反应 每次输注CIK或DC-CIK细胞时均观察有无寒战治疗基本流程治疗基本流程疗效观察单个核细胞采集细胞分离、扩增细胞鉴定及无菌检测细胞回输权威细胞免疫治疗开展情况50治疗基本流程疗效观察单个核细胞采集细胞分离、扩增细胞鉴定及无权威细胞免疫治疗开展情况51权威细胞免疫治疗开展情况51权威细胞免疫治疗开展情况52道路曲折 前景光明权威细胞免疫治疗开展情况52CIKCIK细胞制备培养细胞制备培养 用血分机获得用血分机获得80ML浓缩血浓缩血2000g20min，20 175cm2培养瓶CIK培养液（含IFN-）第2天加混合细胞因子PMNC层CIK培养隔2-3天补液扩瓶培养瓶内细胞收集、离心、洗涤回输第7天扩瓶后抽样送检（细菌培养和表型分析）第3天扩瓶培养留血浆50ML备用分离出富含白细胞的部分淋巴细胞分离液权威细胞免疫治疗开展情况53CIK细胞制备培养 用血分机获得80ML浓缩血2000g2第7-8天，DC细胞收集、离心、洗涤和回输第5天加肿瘤抗原，第6天加促熟剂，抽样送检第3天补充含半量细胞因子的培养基6孔板1640培养液2000g20min，20 留血浆50ML备用分离出富含白细胞的部分淋巴细胞分离液PMNC层用血分机获得用血分机获得80ML浓缩血浓缩血细胞贴壁120min贴壁细胞进行贴壁细胞进行DC细胞培养方案悬浮细胞进行CIK培养方案树突状突状细胞制胞制备流程流程权威细胞免疫治疗开展情况546孔板1640培养液2000g20min，20 留血浆