岗前培训内容

微生物标本的正微生物标本的正确采集与运送确采集与运送金秀县人民医院金秀县人民医院感控科感控科主要内容v血培养标本采集与运送血培养标本采集与运送v痰培养标本采集与运送痰培养标本采集与运送v尿培养标本采集与运送尿培养标本采集与运送v大便培养标本采集与运送大便培养标本采集与运送v手术切口与软组织感染标本采集与运送手术切口与软组织感染标本采集与运送v胸水标本如何送检胸水标本如何送检v化脓和创伤标本采集与运送化脓和创伤标本采集与运送v穿刺液标本采集与运送穿刺液标本采集与运送v眼、耳、鼻、咽拭子标本眼、耳、鼻、咽拭子标本采集与运送采集与运送世界人口死因世界人口死因 感染性疾病：感染性疾病：2525 抗生素时代，感染仍是人类健康抗生素时代，感染仍是人类健康的主要的主要“杀手杀手高死亡率原因高死亡率原因v新新现传染病：染病：近近30年，已有近年，已有近30种新的病原种新的病原生物，其中包括生物，其中包括HIV、SARS、禽流感和各、禽流感和各种新型肝炎病毒等引起的各种疾病。种新型肝炎病毒等引起的各种疾病。v再再现传染病：染病：以往已被以往已被认为得到很好控制的得到很好控制的传染病，如染病，如结核、登革核、登革热等的流行和等的流行和传播又播又重新抬重新抬头。v低免疫人群急低免疫人群急剧上升：艾滋病、移植医学国上升：艾滋病、移植医学国际间交通的快速便捷使得当今疾病交通的快速便捷使得当今疾病传播无国界的概念。播无国界的概念。v气候气候变暖，人口快速增暖，人口快速增长，都市化，都市化进程加快，伴程加快，伴随人口密度和人口流随人口密度和人口流动增加，清增加，清洁水源缺乏和水源缺乏和卫生生设施的不完善，以及生施的不完善，以及生态破坏造成人与媒介生破坏造成人与媒介生物接触物接触时机增多机增多动物微生物向人物微生物向人类的的袭击等。等。v人人类还没有足没有足够的能力的能力战胜病原体。病原体。v病原微生物的耐病原微生物的耐药性性产生的速度已超生的速度已超过新型抗生新型抗生素素创造的速度造的速度细菌耐菌耐药性的快速开展性的快速开展)。提高感染提高感染样本送本送检率率 加加强细菌耐菌耐药监测 关注关注细菌性疾病的病原学菌性疾病的病原学诊断，已成断，已成为临床工作者、床工作者、临床微生物与微生物工作者、床微生物与微生物工作者、药学家和从事感染控制的工作者共同关注的学家和从事感染控制的工作者共同关注的热门焦点。焦点。成功治成功治疗感染症的因素感染症的因素 成功成功别离病原菌离病原菌 标本收集、运送、保存本收集、运送、保存 标本本处理方法理方法 检验技技师专业知知识 医医师判判读病原菌培养病原菌培养结果果 选择适当治适当治疗方法方法 正确的微生物学正确的微生物学检验始自正确的始自正确的标本采集。本采集。标本采集和运送是细菌培养成功的最最重要的关键 由于标本的采集和运送常由护士或医生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道问题所在之处，造成的后果是:临床医生最不能接受的问题:阳性率低临床医生要合理用好两种数据床医生要合理用好两种数据v1.本地区、本本地区、本单单位病原流行病学位病原流行病学资资料，指料，指导导经验经验用用药药。微生物室、院感科、微生物室、院感科、临临床科室床科室 v2.药药敏敏试验报试验报告，告，纠纠正正经验经验用用药药。v 重重视视病原学病原学检查检查,尽可能在尽可能在应应用抗菌用抗菌药药物之物之前留取前留取标标本送本送检检。以提高病原学。以提高病原学诊诊断率断率,为选为选药药和和调调整整药药物提供依据。物提供依据。国内微生物国内微生物标本的采集目前存在的本的采集目前存在的问题：标本送本送检率低率低从全国来看，抗感染治从全国来看，抗感染治疗前，送前，送检相关相关标本可能只占本可能只占应送送标本的一半本的一半左右，与抗菌左右，与抗菌药物物应用率之高形成用率之高形成鲜明的反明的反差。一些医差。一些医师在在经验性治性治疗受挫前方送受挫前方送标本，本，此此时已失去阳性培养的已失去阳性培养的时机。机。标本有缺陷本有缺陷正确收集各种正确收集各种临床床标本，本，关注特关注特检标本采本采样与送与送检的方法和条件，是的方法和条件，是完成病原学完成病原学诊断的先决条件。断的先决条件。微生物让人类步步为营，微生物让人类步步为营，我们应该追求：我们应该追求：“准确的病原学诊断准确的病原学诊断“针对性病原学治疗针对性病原学治疗正确的微生物标本采集和运送，正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！是准确的病原学诊断的前提！标本本标准化采集的重要性准化采集的重要性v正确采集、正确采集、处理与运送理与运送细菌培养的菌培养的标本直接关系到本直接关系到致病菌培养的正确性与阳性率的上下，是致病菌培养的正确性与阳性率的上下，是临床床细菌菌检验成功的关成功的关键。v标本本质量的好坏直接影响量的好坏直接影响诊断断结果的正果的正误，不当的，不当的标本可本可导致假阴性、假阳性致假阴性、假阳性结果的出果的出现，因此，因此标本本采集与采集与处理的理的标准化是准确、及准化是准确、及时地向地向临床提供重床提供重要的要的临床感染信息的根底。床感染信息的根底。v好的微生物好的微生物检验标本可提升本可提升实验室工作效率及病患室工作效率及病患照照顾质量，降低医量，降低医疗本本钱。v及及时时采采集集微微生生物物标标本本作作病病原原学学检检查查早早期期采采集集v在抗菌药物使用前采集标本早期采集在抗菌药物使用前采集标本早期采集v采样时严格执行无菌操作无菌采集采样时严格执行无菌操作无菌采集 v采样后立即送检采样后立即送检v标标本本容容器器须须灭灭菌菌处处理理，但但不不得得使使用用消消毒毒剂剂无菌采集无菌采集 v不能用棉拭子送检，宜用运送培养基不能用棉拭子送检，宜用运送培养基v送检标本应注明来源和检验目的送检标本应注明来源和检验目的微生物标本采集与运送原那么如何提高细菌阳性检出率如何提高细菌阳性检出率标本采集时机标本采集时机标本采集方法标本采集方法标本的质与量标本的质与量标本的运送与保存标本的运送与保存镜检筛选合格标本镜检筛选合格标本高质量、多种别离培养基高质量、多种别离培养基培养环境培养环境二、标本的处理二、标本的处理v一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检即送检v厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送。送。v其他所有的标本采集后最好在其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。之内送到实验室。假设不能及时送检，标本应置于一定环境中保存，假设不能及时送检，标本应置于一定环境中保存，如支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在如支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4环境中，脑脊液等那么要在环境中，脑脊液等那么要在25保存。保存。v患者标本中可能含有大量致病菌，不管标本运送患者标本中可能含有大量致病菌，不管标本运送距离远近，都必须注意平安防护。标本切勿污染距离远近，都必须注意平安防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止送检容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出。过程中倒翻或碰破流出。最有价值的细菌学检测工程q 血液培养血液培养q 脑脊液培养脑脊液培养q 脓液培养脓液培养q 痰液培养痰液培养q 粪便培养粪便培养q 尿液培养尿液培养q生殖道标本培养生殖道标本培养q厌氧标本培养厌氧标本培养q其他无菌体液培养其他无菌体液培养一、血培养标本采集与运送一、血培养标本采集与运送法国生物梅里埃 BacT-ALERT 3D120 血培养仪血培养概念:v采集患者的血液或无菌体液标本采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验送至微生物实验室培养检测室培养检测.v检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在.v如有细菌如有细菌,那么极有可能为致病的细菌那么极有可能为致病的细菌.v进一步进行鉴定进一步进行鉴定/药敏试验药敏试验.完整的血培养过程vv医师开出医嘱医师开出医嘱vv护理人员收集送检样本护理人员收集送检样本vv实验室检测、别离并鉴定导致血流感实验室检测、别离并鉴定导致血流感染的微生物染的微生物vv三级报告：为临床医生提供抗菌药物三级报告：为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果敏感性试验结果目前血培养的问题：采血时机不适宜采血时机不适宜采血套数不够采血套数不够采血量缺乏采血量缺乏只做需氧培养，不同时做厌氧培养只做需氧培养，不同时做厌氧培养采血前或采血时正在使用抗生素治疗采血前或采血时正在使用抗生素治疗“只有在只有在发热时，才需要，才需要进行血培养。行血培养。关于血培养指征关于血培养指征想想采采就就采采答 案：血培养的指征当疑心血流感染或脓毒症时，应常规行血培养当疑心血流感染或脓毒症时，应常规行血培养当疑心血流感染或脓毒症时，应常规行血培养当疑心血流感染或脓毒症时，应常规行血培养疑心患者有血流感染的病症有：疑心患者有血流感染的病症有：疑心患者有血流感染的病症有：疑心患者有血流感染的病症有：不明原因的发烧不明原因的发烧不明原因的发烧不明原因的发烧(3838)或体温过低或体温过低或体温过低或体温过低(3636)白细胞增多白细胞增多白细胞增多白细胞增多 10,000/ul10,000/ul，粒细胞减少，粒细胞减少，粒细胞减少，粒细胞减少 1,000ul1,000ul休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直严重的局部感染严重的局部感染严重的局部感染严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，染，染，染，)心率异常加快心率异常加快心率异常加快心率异常加快低血压或高血压低血压或高血压低血压或高血压低血压或高血压呼吸频率加快呼吸频率加快呼吸频率加快呼吸频率加快“何何时采血采血进行血培养，无特殊行血培养，无特殊时间要求。要求。关于采血时机关于采血时机答 案：采集血培养样本的最正确时间v尽可能在患者寒战或开始发热时尽可能在患者寒战或开始发热时采血采血v在患者接受抗生素治疗前采血在患者接受抗生素治疗前采血v如患者已经应用抗菌药物进行治如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培疗，应在下一次用药之前采血培养养 细菌量 体温 时间上升幅度采血部位 v通常采血部位为肘静脉。通常采血部位为肘静脉。v疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。动脉采血为宜。v对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者，在病对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者，在病灶或者髂前后上棘处严格消毒后抽灶或者髂前后上棘处严格消毒后抽取骨髓取骨髓1ml作增菌培养。作增菌培养。常规血培养不宜从静脉导管或静脉常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置中采集，检出污染或定植留置装置中采集，检出污染或定植菌的可能性较大。除非疑心导管相菌的可能性较大。除非疑心导管相关性血流感染，请参照导管相关性关性血流感染，请参照导管相关性血流感染的采血方法。血流感染的采血方法。“为减减轻患者痛苦，只从一个穿刺部患者痛苦，只从一个穿刺部位采一份血液位采一份血液标本即可。本即可。关于采血套数及部位关于采血套数及部位根本概念vv成人成人“一套一套 血培养应该包括需氧瓶血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个，也叫和厌氧瓶各一个，也叫“一份一份vv注意：一次穿刺采血，算注意：一次穿刺采血，算“一套，一套，采集第二套应从另一个穿刺点获得。采集第二套应从另一个穿刺点获得。vv儿童一般只做需氧培养，儿童一般只做需氧培养，vv但仍需从多个部位采集屡次。特殊患但仍需从多个部位采集屡次。特殊患者才考虑厌氧培养。者才考虑厌氧培养。vv 采血套数Weinstein et al.Detection of Bloodstream Infections in Adults:How Many Weinstein et al.Detection of Bloodstream Infections in Adults:How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol.2007;45:3546-3548BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol.2007;45:3546-3548表皮葡萄球菌的临床意义2 23 3套血培养，有助于污染的判断。套血培养，有助于污染的判断。Tokars,JI.Clin Infect Dis 2004;39:333Tokars,JI.Clin Infect Dis 2004;39:333 采集采集1套无法判套无法判断是病原菌还断是病原菌还是污染菌。是污染菌。答 案：关于血培养套数与采血部位vv每位患者每次采血最少每位患者每次采血最少2套，套，3套更好套更好vv初发患者，绝不能只采初发患者，绝不能只采1套标本套标本vv 多个穿刺部位采血。因多部位同时发多个穿刺部位采血。因多部位同时发vv 生污染的几率较小，便于对结果进判断生污染的几率较小，便于对结果进判断vv 要求：从两侧上肢静脉采血，要求：从两侧上肢静脉采血，“双瓶双侧双瓶双侧采血培养。必要时从下肢静脉采血做第三套采血培养。必要时从下肢静脉采血做第三套血培养。血培养。vv “两套血培养采集两套血培养采集间隔无特殊要求。隔无特殊要求。关于采血间隔关于采血间隔答案：关于标本采集间隔时间5.血培养次数和采血时间血培养次数和采血时间只要疑心血液细菌感染，应即刻采集。只要疑心血液细菌感染，应即刻采集。采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行，在采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行，在1h内采集内采集23次做血培养。次做血培养。对间歇性寒战或发热应在寒战或体温顶峰到来之前对间歇性寒战或发热应在寒战或体温顶峰到来之前0.51h 采集血液，或于寒战或发烧后采集血液，或于寒战或发烧后1h进行。进行。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3d，每天采，每天采2 份。份。可疑细菌性心内膜炎，在可疑细菌性心内膜炎，在1到到2小时内采集小时内采集3份血标本，如果份血标本，如果24小时后阴性，再采集小时后阴性，再采集3份以上标本份以上标本 “每瓶采集多少血液无特殊要求。每瓶采集多少血液无特殊要求。关于采血量关于采血量采血量(ml)与检出率的关系 Overall血培养物每增加一毫升，真性菌血症血培养物每增加一毫升，真性菌血症成年人微生物的检出率增加成年人微生物的检出率增加3 但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质补体、抗体、抗生素。所以血液与肉汤的最正确比例补体、抗体、抗生素。所以血液与肉汤的最正确比例为为1：51：10答 案：关于采集血液量vv采血量是影响灵敏度最关键因素采血量是影响灵敏度最关键因素vv成成人人一一份份标标本本2个个培培养养瓶瓶需需氧氧厌厌氧氧，每每瓶瓶810ml，共共20ml；要要求求至至少少采采两两份份标本，即标本，即40ml。vv儿儿童童一一般般只只需需采采集集需需氧氧瓶瓶，在在保保证证采采集集血血量量1总血量下，一般为总血量下，一般为15mlvv采采血血量量缺缺乏乏时时应应优优先先保保证证需需氧氧瓶瓶，因因临临床床90以以上上的的感感染染为为需需氧氧菌菌或或兼兼性性需需氧氧菌菌感感染染vv 先采生化、凝血先采生化、凝血标本，再采血培养本，再采血培养标本。本。关于关于各种血液标本的各种血液标本的采集顺序采集顺序v血培养对无菌操作的要求比注射、采集血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。生化、凝血等其它标本要高。v所以要最先采集血培养标本。所以要最先采集血培养标本。v污染率的指标是污染率的指标是 100 organisms/mL 所以采血量一定要足所以采血量一定要足够！菌血症病人血中细菌浓度血培养中需氧瓶与厌氧瓶的分配v对于常规的血培养，建议采取包括需氧和厌氧的一套血培养瓶v当采血量不能满足推荐的采血量时，首先应进行需氧瓶的培养v一套完整的血培养应该包括需氧+厌氧X2个部位v肠脓毒症、女性生殖道感染、褥疮及呼吸道来源的感染患者v入住ICU或近期做过腹部外科手术的患者v严重烧伤和外伤的患者v伴有严重心血管疾病、糖尿病、恶性肿瘤、移植v 和免疫抑制的患者v新生儿、儿科及老年患者v其他有厌氧菌感染高危因素或临床高度疑心有厌v 氧菌感染的患者以下情况必须常规做厌氧血培养厌氧瓶在血流感染诊断中的意义倪语星血培养标本的拒收v瓶子上帖的标签错误或未帖标签。瓶子上帖的标签错误或未帖标签。v血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。v血液凝固。血液凝固。培养基的选择v推荐使用商品化的培养基推荐使用商品化的培养基v使用添加抗菌药物吸附剂的血培养使用添加抗菌药物吸附剂的血培养瓶有助于提高已接受抗菌药物治疗瓶有助于提高已接受抗菌药物治疗患者血培养的检出率，增加细菌的患者血培养的检出率，增加细菌的别离率和别离速度，但同时也会增别离率和别离速度，但同时也会增加污染菌的检出率。加污染菌的检出率。二、血液中常见的病原体二、血液中常见的病原体种种 类病病 原原 菌菌革革兰阳性球阳性球菌菌金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌革革兰阳性杆阳性杆菌菌结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌革兰阴性球革兰阴性球菌菌脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌革革兰阴性杆阴性杆菌菌大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌真菌真菌念球菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌厌氧菌氧菌拟杆菌、产气荚膜梭菌痰培养标本采集与运送痰培养标本采集与运送我国痰培养现状我国痰培养现状v标本送检率低标本送检率低v苛养菌检出率极低苛养菌检出率极低v结果重复性差结果重复性差v报告速度慢报告速度慢v感染菌与污染菌不易区分感染菌与污染菌不易区分v药敏结果与治疗反响存在差距药敏结果与治疗反响存在差距关于咳痰标本v在抗生素应用前采集痰标本v标本采集后12h内必须立即进行实验室处理v咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 v取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口v深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导v无痰可用35NaCl 5ml雾吸约5min导痰v也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰v对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续23天不建议24h内屡次采集，除非痰液外观性状出现改变v疑心分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检为什么要进行痰标本质量控制v错误的标本处理和报告将导致误诊和不恰当的治疗，特别是常规痰标本中半数以上存在唾液严重污染现象，唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml，途经口咽部的咳痰不可防止地受到污染v因此送至微生物室的标本应认真处理，减少标本错误和标本污染。主要方法是在痰培养之前进行痰涂片的细胞学检查，初步判断是否合格的痰标本v涂片合格，可进行痰培养。镜检不合格标本，通知临床重新留取标本。否那么，不合格的痰标本即使进行培养，出来的结果也是难以解释的，这样的标本进行培养是无意义的6768痰标本合格的标准咳痰标本质量评估：细胞学筛选v涂片结果：低倍镜视野中涂片结果：低倍镜视野中10个鳞状上皮细个鳞状上皮细胞胞SEC，以及，以及25个白细胞个白细胞WBC?全国临床检验操作规程全国临床检验操作规程?第第3版，可进行痰版，可进行痰培养培养v镜检不合格标本，应通知临床重新留取标本镜检不合格标本，应通知临床重新留取标本 一、一、采集目的：采集目的：v一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引物可用于厌氧菌的检测。引物可用于厌氧菌的检测。采集指征采集指征但凡发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、但凡发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性，并伴有胸痛、气急，粘稠或血性，并伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音，外周白细胞总数肺部闻及湿罗音，外周白细胞总数及中性粒细胞比例明显增高，及中性粒细胞比例明显增高，X线线检查提示肺部有炎性浸润或胸腔积检查提示肺部有炎性浸润或胸腔积液，甚至出现感染性休克和呼吸衰液，甚至出现感染性休克和呼吸衰竭等患者，应采集痰液或下呼吸道竭等患者，应采集痰液或下呼吸道标本。标本。对可疑烈性呼吸道传染病如对可疑烈性呼吸道传染病如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等患者、肺炭疽、肺鼠疫等患者采集检验标本时必须注意生物平安采集检验标本时必须注意生物平安防护。防护。v在抗生素应用前采集痰标本在抗生素应用前采集痰标本;v标本采集后标本采集后12h内必须立即进行实验室处理；内必须立即进行实验室处理；v咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本;v取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口;v深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导;v对于细菌性肺炎，痰标本送检每天对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续次，连续23天；不建议天；不建议24h内屡次采集，除非痰液外观性状改内屡次采集，除非痰液外观性状改变；变；v疑心分枝杆菌感染者，应连续收集疑心分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。天清晨痰液送检。v三标本采集方法三标本采集方法v医师或护士直视下采集标本医师或护士直视下采集标本v病人先漱口，去除外表的菌群病人先漱口，去除外表的菌群v教育病人深咳，收集从下呼吸道教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液咳出的痰液v临床上约半数咳痰标本不合格！临床上约半数咳痰标本不合格！咳痰标本咳痰标本一、标本采集一、标本采集v自然咳痰法自然咳痰法 v 以晨痰为佳，尽可能在用抗菌药物之以晨痰为佳，尽可能在用抗菌药物之前采集标本。用力咳出呼吸道深部的痰，将前采集标本。用力咳出呼吸道深部的痰，将痰液直接吐入无菌、清洁、枯燥、不渗漏、痰液直接吐入无菌、清洁、枯燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中，标本量应不吸水的广口带盖的容器中，标本量应1ml。v支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集，但必须注意采集标本时尽可能作规程采集，但必须注意采集标本时尽可能防止咽喉部正常菌群的污染。防止咽喉部正常菌群的污染。v小儿取痰法小儿取痰法v 用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳痰时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上压舌刺激咳痰时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。v v 注意：对可疑烈性呼吸道传染病如注意：对可疑烈性呼吸道传染病如SARS、肺炭疽、肺炭疽、肺鼠疫等患者采集检验标本时必须注意生物平安防护。肺鼠疫等患者采集检验标本时必须注意生物平安防护。标本质量标本质量脓痰脓痰粘液样痰粘液样痰唾液唾液oror诱导痰诱导痰 (?)(?)带血痰带血痰用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格呼吸道标本的涂片评估模式肺炎肺炎-可接受的可接受的不合格标本不合格标本评述评述很少的鳞状上皮细胞很少的鳞状上皮细胞10个个/低倍视野低倍视野可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，说明在采集时受到了上呼吸道分泌物的说明在采集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。污染或口水的污染。很多的中性粒细胞很多的中性粒细胞很少有或没有中性粒很少有或没有中性粒细胞细胞免疫抑制的病人也会免疫抑制的病人也会出现中性粒细胞减少出现中性粒细胞减少中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养要培养很多中性粒细胞混合有形很多中性粒细胞混合有形态多样的细菌（革兰氏阴态多样的细菌（革兰氏阴性杆菌，纺锤形，革兰氏性杆菌，纺锤形，革兰氏阳性球菌）阳性球菌）吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只会培养出正常菌群，所以革兰氏培养只会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断的方法。染色是用于诊断的方法。许多或中等量的中性粒细许多或中等量的中性粒细胞，以一种形态的细菌胞，以一种形态的细菌为主为主酵母菌样，酵母菌是酵母菌样，酵母菌是一种很少引起肺炎的一种很少引起肺炎的细菌，常由口腔污染细菌，常由口腔污染成双革兰氏阳性球菌，短链成双革兰氏阳性球菌，短链=肺炎链球肺炎链球菌菌革兰氏阳性菌成群排列革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球金黄色葡萄球菌菌革兰氏阴性球杆菌（小）革兰氏阴性球杆菌（小）=流感嗜血杆流感嗜血杆菌菌革兰氏阴性杆菌大且肥厚革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯肺炎克雷伯菌或其他肠道菌菌或其他肠道菌革兰氏阴性双球菌革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌卡他莫拉菌许多不着色的有折射的杆许多不着色的有折射的杆状细菌状细菌可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染色。染色所染色。痰标本中常见病原体痰标本中常见病原体细菌细菌金黄色葡萄球菌、凝固金黄色葡萄球菌、凝固酶酶阴性葡萄球菌、肺炎阴性葡萄球菌、肺炎链球球菌、菌、A群群链球菌、球菌、肠球菌、卡他莫拉菌、球菌、卡他莫拉菌、脑膜炎奈膜炎奈瑟菌、白喉棒状杆菌、瑟菌、白喉棒状杆菌、类白喉棒状杆菌、白喉棒状杆菌、结核分枝核分枝杆菌、炭疽芽胞杆菌、流感嗜血杆菌、克雷伯杆菌、杆菌、炭疽芽胞杆菌、流感嗜血杆菌、克雷伯杆菌、铜绿假假单胞菌、大胞菌、大肠埃希菌、百日咳杆菌、埃希菌、百日咳杆菌、军团菌、菌、支原体和衣原体等支原体和衣原体等 真菌真菌 白假丝酵母菌、隐球菌、曲霉菌和毛霉菌等白假丝酵母菌、隐球菌、曲霉菌和毛霉菌等 病毒病毒 腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、冠状病毒和麻疹病毒巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、冠状病毒和麻疹病毒等。等。运送和保存运送和保存v应在2h之内送至实验室，否那么应4冷藏，但放置时间不可超过24h。本卷本卷须知知1.1.痰痰标本不能及本不能及时送送检者，可者，可暂存存44冰箱。室温下耽冰箱。室温下耽误数小数小时，定植于口，定植于口咽部的非致病菌咽部的非致病菌过度生度生长而肺炎而肺炎链球球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌检出率出率那么明那么明显降低。降低。2.2.在在临床上咳痰仍是床上咳痰仍是诊断肺部感染最断肺部感染最常用的常用的标本，但咳痰也最易被口咽部本，但咳痰也最易被口咽部正常菌群正常菌群污染。痰液染。痰液标本的本的细菌学菌学检验，必，必须区分是病原菌区分是病原菌还是来自上呼是来自上呼吸道的正常菌群。吸道的正常菌群。经过洗洗涤处理的痰理的痰液或自气管液或自气管镜采集及气管穿刺所采集及气管穿刺所获标本，本，结果比果比较可靠。可靠。3.3.由于口腔和咽部存在大量的革兰阳性和革兰阴性厌由于口腔和咽部存在大量的革兰阳性和革兰阴性厌氧细菌，而且缺乏可靠的方法区分它们究竟是致病氧细菌，而且缺乏可靠的方法区分它们究竟是致病菌还是定植菌，因此菌还是定植菌，因此不主张对咳痰标本进行厌氧菌不主张对咳痰标本进行厌氧菌培养。培养。4.4.约有约有1/41/41/21/2肺部感染患者可能发生菌血症，应同肺部感染患者可能发生菌血症，应同时做血培养。时做血培养。尿培养标本采集与运送尿培养标本采集与运送v每年每年850万例尿路感万例尿路感染染,90%为女性为女性v1/2.5个妇女在一生个妇女在一生中会得中会得UTIv下行性感染：血流下行性感染：血流肾脏肾脏膀胱金黄色膀胱金黄色葡萄球菌，酵母菌，葡萄球菌，酵母菌，结核分枝杆菌结核分枝杆菌v上行性感染：尿道上行性感染：尿道膀胱膀胱肾盂肾盂 血流血流一、标本采集一、标本采集v采集方法采集方法 采集清洁中段尿睡前少饮水，以采集清洁中段尿睡前少饮水，以晨尿最好，对尿道口用清水冲洗。晨尿最好，对尿道口用清水冲洗。v必要时导尿或膀胱穿刺留尿标本，但要注意必要时导尿或膀胱穿刺留尿标本，但要注意导尿容易引起逆行性感染。导尿容易引起逆行性感染。一尿培养一尿培养标本送本送检指征指征1.1.有典型的尿路感染病症；有典型的尿路感染病症；2.2.有肉眼有肉眼脓尿或血尿；尿或血尿；3.3.尿常尿常规检查白白细胞或胞或亚硝酸硝酸盐阳性；阳性；4.4.有不明原因的有不明原因的发热，无其他局部病症；，无其他局部病症；5.5.留置留置导尿管的患者出尿管的患者出现发热；6.6.膀胱排空功能受膀胱排空功能受损；7.7.泌尿系泌尿系统疾病手疾病手术前；前；8.8.有尿路感染病症者，前次培养有尿路感染病症者，前次培养结果阴性或抗果阴性或抗菌治菌治疗48h48h后仍持后仍持续发热。9.9.抗生素停抗生素停药后，感染病症再次出后，感染病症再次出现。二尿培养二尿培养标本采集方法本采集方法 标本采集本采集应在使用抗生素之前，防止消在使用抗生素之前，防止消毒毒剂污染染标本。本。1 1清清洁中段尿中段尿留取清晨清留取清晨清洁中段尿中段尿标本，先用肥皂水仔本，先用肥皂水仔细清洗会阴部，再用清洗会阴部，再用清水冲洗尿道口周清水冲洗尿道口周围；将前段尿排去，；将前段尿排去，留取中段尿留取中段尿10ml10ml左右于无菌容器内，立左右于无菌容器内，立即加盖送即加盖送检，2h2h内接种。内接种。该方法方法简单、易行，是最常用的尿易行，是最常用的尿标本收集方法，但本收集方法，但是容易受到会阴部是容易受到会阴部细菌菌污染。染。2 2耻骨上膀胱穿刺耻骨上膀胱穿刺使用无菌注射器直使用无菌注射器直接从耻骨上接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液，是液，是评估膀胱内估膀胱内细菌感染的菌感染的“金金标准准方法，主要用于方法，主要用于厌氧菌培养或留取氧菌培养或留取标本困本困难的的婴儿尿儿尿标本的采集。本的采集。3直接直接导导尿尿 按常按常规规方法方法对对会阴局部会阴局部进进行消毒后，用行消毒后，用导导尿管直尿管直接接经经尿道插入膀胱，尿道插入膀胱，获获取膀胱尿液，可减少尿液取膀胱尿液，可减少尿液标标本本污污染，染，准确地反映膀胱感染情况。但有可能下尿道准确地反映膀胱感染情况。但有可能下尿道细细菌菌进进入膀胱，入膀胱，导导致致继发继发感染，一般不提倡使用。感染，一般不提倡使用。4小儿收集包小儿收集包 无自控能力的小儿可用收集包收集尿液，无自控能力的小儿可用收集包收集尿液，这这种种装置由于很装置由于很难难防止会阴部菌群防止会阴部菌群污污染染产产生假阳性，所以只有在生假阳性，所以只有在检验结检验结果果为为阴性阴性时时才有意才有意义义。如果。如果检验结检验结果果为为阳性，阳性，应结应结合合临临床床进进行分析，必要行分析，必要时时可使用膀胱上穿刺或可使用膀胱上穿刺或导导尿法留取尿法留取标标本本进进行复行复检检。5留置留置导导尿管收集尿液尿管收集尿液 用用导导尿管尿管导导取取10-15ml尿液置尿液置灭灭菌容菌容器内送器内送检检。长长期留置期留置导导尿管者，尿管者，应应在更在更换换新新导导尿管后留取尿尿管后留取尿标标本。留置本。留置导导尿患者尿患者应应消毒消毒导导尿管外部及尿管口，采取无菌尿管外部及尿管口，采取无菌操作方法，用注射器通操作方法，用注射器通过导过导尿管吸取尿液。注意防止混入消尿管吸取尿液。注意防止混入消毒毒剂剂，不能从尿液收集袋中采集尿液。，不能从尿液收集袋中采集尿液。三采集三采集时间和和标本运送本运送 1.应选择在抗菌在抗菌药物物应用前或停用抗菌用前或停用抗菌药物物5天后采集天后采集尿液。尿液。2.通常采集清晨第通常采集清晨第1次尿液送次尿液送检，确保尿液在膀胱内停，确保尿液在膀胱内停留留4h以上，使以上，使细菌有足菌有足够时间繁殖。嘱患者睡前少繁殖。嘱患者睡前少饮水以免尿液稀水以免尿液稀释。3.疑心沙疑心沙门菌感染菌感染时应在在发病病2周左右采集尿液培养。周左右采集尿液培养。4.对无病症的患者无病症的患者应连续采集采集3天晨尿送天晨尿送检。5.疑心疑心结核分枝杆菌感染核分枝杆菌感染时，患者，患者应停停药1-2天后采集天后采集晨尿或晨尿或24h尿的沉渣局部尿的沉渣局部10-15ml送送检。6.标本采集后本采集后应立即送立即送检、及、及时接种，室温下保存接种，室温下保存时间不得超不得超过2h夏季保存夏季保存时间应适当适当缩短或冷藏保短或冷藏保存，冷藏保存存，冷藏保存标本必本必须在在6h内内进行接种，但冷藏行接种，但冷藏保存的保存的标本不能用于淋病奈瑟菌培养。本不能用于淋病奈瑟菌培养。四本卷四本卷须知知1.1.由于自然排尿收集的由于自然排尿收集的标本很本很难防止会阴部及防止会阴部及下尿道下尿道细菌菌污染，所以需要定量接种、合理染，所以需要定量接种、合理评价才能判断培养的价才能判断培养的细菌是否与尿路感染有关。菌是否与尿路感染有关。尿尿标本菌落本菌落计数中革数中革兰阴性杆菌数阴性杆菌数105CFU/ml105CFU/ml或革或革兰阳性球菌数阳性球菌数104CFU/ml104CFU/ml时有有临床床诊断意断意义。不是不是绝对的，受多因素影响，的，受多因素影响，综合判断合判断2.2.尿液尿液标本的采集和培养中的本的采集和培养中的问题是是污染染杂菌，菌，故故应严格格进行无菌操作。行无菌操作。3.3.尿尿标本采集后本采集后应立即送立即送检，以免，以免污染，尿液染，尿液中不得加防腐中不得加防腐剂和消毒和消毒剂。v4.除非是流行病学除非是流行病学调查，长期留置期留置导尿管患者常尿管患者常规尿培养没有尿培养没有临床意床意义，大量病原菌常可在，大量病原菌常可在这类患者患者中中检出，出，导尿管留置尿管留置时间延延长易易导致与引起患者尿致与引起患者尿道感染不一致的微生物定植生道感染不一致的微生物定植生长；v5.不可从集尿袋的下端管口留取不可从集尿袋的下端管口留取标本，集尿袋内的本，集尿袋内的尿液也不能用于培养，可能会引起尿液也不能用于培养，可能会引起污染；染；v6.临床常床常让患者留取清患者留取清洁中段尿，中段尿，应该在医在医护人人员监督指督指导下下让患者正确的留取清患者正确的留取清洁中段尿中段尿；v7.由于种种原因，患者常常不能正确地留取清由于种种原因，患者常常不能正确地留取清洁中中段尿，段尿，实验室只是室只是针对尿液尿液标本培养的本培养的结果果进行行评估，或常常由于分析前尿液估，或常常由于分析前尿液标本本污染了多种染了多种细菌无菌无法正确解法正确解释的的结果，可能延果，可能延误了了临床的正确床的正确诊断和断和治治疗。二、常见病原体二、常见病原体尿液中常见病原体：尿液中常见病原体：80%为革兰阴性杆菌，其中以大肠埃希为革兰阴性杆菌，其中以大肠埃希菌最为常见。菌最为常见。20%为革兰阳性菌，其中以肠球菌为多为革兰阳性菌，其中以肠球菌为多见。见。此外，真菌感染也增多，尤其是念珠菌此外，真菌感染也增多，尤其是念珠菌尿液中常见病原菌尿液中常见病原菌v革兰染色阳性菌革兰染色阳性菌 革兰染色阴性菌革兰染色阴性菌v金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 淋病奈色菌淋病奈色菌 v 大肠埃希菌大肠埃希菌 v链球菌属菌种链球菌属菌种 沙门菌属菌种沙门菌属菌种 v肠球菌属菌种肠球菌属菌种 肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌v腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌 肠杆菌属菌种肠杆菌属菌种 v棒状杆菌属菌种棒状杆菌属菌种 变形杆菌属菌种变形杆菌属菌种v分枝杆菌属菌种分枝杆菌属菌种 沙雷菌数菌种沙雷菌数菌种v真菌真菌 假单胞菌属菌种假单胞菌属菌种v泌尿系统感染临床诊断根底上，符合下述四条之一即可诊断。1.清洁中段尿或导尿留取尿液非留置导尿培养革兰阳性球菌菌数104cfu/ml、革兰阴性杆菌菌数105cfu/ml.2.耻骨联合上膀胱穿刺留取尿液培养细菌菌数103cfu/ml.3.新鲜尿液标本经离心应用相差显微镜检查1400，在30个视野中有半数视野见到细菌。4.无病症性菌尿症：患者虽然无病症，但在近期通常为1周有内镜检查或留置导尿史，尿液培养革兰阳性球菌浓度104cfu/ml、革兰阴性杆菌浓度105cfu/ml，应视为泌尿系统感染。出现如下情况时，怎样判断？出现如下情况时，怎样判断？尿常规结果尿常规结果尿培养结果尿培养结果可能原因可能原因WBC PRO 计数计数+PRO +计数计数+PRO +计数计数 105培养出一种致病菌培养出一种致病菌预示患者泌尿系统感染。按预示患者泌尿系统感染。按药敏结果选择性用药。药敏结果选择性用药。WBC +PRO +计数计数 105培养出大于两种致病菌培养出大于两种致病菌患者泌尿系统可能感染，但患者泌尿系统可能感染，但标本可能被污染，应重复送标本可能被污染，应重复送检。检。WBC 105培养出大于两种致病菌培养出大于两种致病菌标本污染标本污染大便培养标本采集与运送大便培养标本采集与运送一、标本采集一、标本采集v用药前自然排便，采集脓血、黏液局部用药前自然排便，采集脓血、黏液局部23g。v外观无异常的粪便应从粪便的外表不同部位取材。外观无异常的粪便应从粪便的外表不同部位取材。v液体便取絮状物液体便取絮状物12ml,置无菌容器内送检。置无菌容器内送检。v如排便困难或婴幼儿患者，可用直肠拭子法采集标如排便困难或婴幼儿患者，可用直肠拭子法采集标本。本。v粪便标本送检粪便标本送检 对住院的腹泻成人患者，应采集住院对住院的腹泻成人患者，应采集住院3日内粪便标本送日内粪便标本送检，标本采集后应尽快送检，有条件的提倡使用运送培养基。检，标本采集后应尽快送检，有条件的提倡使用运送培养基。v消化道溃疡、幽门螺杆菌标本可取胃窦和胃体等部位各一块消化道溃疡、幽门螺杆菌标本可取胃窦和胃体等部位各一块胃黏膜活检标本，置入无菌生理盐水中立即送检，或将标本胃黏膜活检标本，置入无菌生理盐水中立即送检，或将标本放于运送培养基，于放于运送培养基，于4保存，保存，24h内送检。内送检。一采集一采集时间腹泻患者腹泻患者应在急性期，并尽可能在使用抗生在急性期，并尽可能在使用抗生素之前采集新素之前采集新鲜粪便；便；伤寒患者在寒患者在发病病2 2周周以后。以后。二采集方法二采集方法1 1自然排便采集法自然排便采集法自然排便后，挑取有自然排便后，挑取有脓血或黏液部位的血或黏液部位的粪便便2-3g2-3g，液状，液状粪便取絮便取絮状物盛于无菌的容器内或置于保存液或增状物盛于无菌的容器内或置于保存液或增菌液中送菌液中送检。2 2直直肠拭子采集法拭子采集法对不易不易获得得粪便或排便便或排便困困难的患者及的患者及婴幼儿，可采用直幼儿，可采用直肠拭子法拭子法采集采集标本，其方法是将拭子前端用甘油湿本，其方法是将拭子前端用甘油湿润。然后插入肛。然后插入肛门约4 45cm5cm幼儿幼儿约2 23cm3cm处，轻轻在直在直肠内旋内旋转，擦取直，擦取直肠外外表粘液后取出，盛入无菌表粘液后取出，盛入无菌试管或保存液中管或保存液中送送检。三三实验室室检查 肠道道细菌大多菌大多为革革兰阴性杆菌，且因阴性杆菌，且因粪便便标本中本中有各种正常菌群，形有各种正常菌群，形态上区分困上区分困难，因此一，因此一般不做直接涂片般不做直接涂片检查。只有当只有当临床疑心床疑心肠道菌群失道菌群失调或或检查霍乱弧菌、霍乱弧菌、结核分枝杆菌、疑似葡萄球菌或核分枝杆菌、疑似葡萄球菌或难辩梭菌引梭菌引起的起的伪膜性膜性肠炎以及真菌性腹泻炎以及真菌性腹泻时，才做直，才做直接涂片接涂片检查。疑似葡萄球菌引起的抗菌素相关性疑似葡萄球菌引起的抗菌素相关性肠炎，可取水炎，可取水样便或便或肠黏膜黏膜样物涂片，革物涂片，革兰染色后染色后镜检，见革革兰阴性杆菌明阴性杆菌明显减少，革减少，革兰阳性球菌大阳性球菌大量散在或成堆葡萄状排列，可提示量散在或成堆葡萄状排列，可提示肠道道菌群失菌群失调。四本卷四本卷须知知v在腹泻在腹泻发病的正确病的正确时间收集收集标本，病人本，病人应尽量在急尽量在急性期性期3d3d内和用内和用药前采集前采集标本，以提高本，以提高检出率。出率。v大便大便标本中含有很多本中含有很多杂菌，菌，粪便便标本的采集本的采集须注意注意防止外界防止外界脏物物污染，尽量采用无菌容器。染，尽量采用无菌容器。v为提高阳性提高阳性检出率，要采集新出率，要采集新鲜标本，立即送本，立即送检。手术切口与软组织感染手术切口与软组织感染标本采集与运送标本采集与运送手术切口、烧伤创面与脓液v采取病灶深部的脓液和分泌物v脓肿采样方法v采样前局部免用抗菌药物或消毒剂皮肤组织标本损伤、脓肿、烧伤、渗出液v标本的选择更大程度上依赖于感染的程度和性质而不是可疑的病原体v对大多数开放伤口，采集前应先去除外表菌群v除非有渗出物，枯燥、结痂伤口一般不做培养v闭合脓肿应取渗出物和脓肿壁标本v开放脓肿处理同开放伤口v烧伤伤口应在广泛清洗和清创术后采集培养。建议取活检标本，伤口外表定量培养不一定有意义v代表性的标本应采自病灶活动区域或基底部有而不仅仅是脓液标本采集、运送方法v未破裂脓肿：不能用拭子。消毒覆于脓肿外表的皮肤，未破裂脓肿：不能用拭子。消毒覆于脓肿外表的皮肤，用注射器将脓肿内容物吸出。然后切开脓肿、引流，用注射器将脓肿内容物吸出。然后切开脓肿、引流，取局部脓肿壁送检。送检时，标本都置于厌氧培养基取局部脓肿壁送检。送检时，标本都置于厌氧培养基中中v开放病灶和脓肿：尽量去除外表菌落，用拭子采集病开放病灶和脓肿：尽量去除外表菌落，用拭子采集病灶及底部或边缘的标本，置于需氧培养基中。也可对灶及底部或边缘的标本，置于需氧培养基中。也可对渗出液作需氧培养。不能做厌氧培养渗出液作需氧培养。不能做厌氧培养v烧伤伤口：清创，出现渗出液后以拭子用力采集，仅烧伤伤口：清创，出现渗出液后以拭子用力采集，仅作需氧培养。也可送检活检组织标本作需氧培养。也可送检活检组织标本v脓疱或水疱：酒精消毒使之枯燥，对于患儿用脓疱或水疱：酒精消毒使之枯燥，对于患儿用23号针号针头挑破脓疱，拭子采集脓疱液和基底部标本头挑破脓疱，拭子采集脓疱液和基底部标本v标记：不要只写标记：不要只写“伤口标记标本，应有专门的描述伤口标记标本，应有专门的描述和解剖来源。注明渗出液来自开放伤口还是闭合伤口和解剖来源。注明渗出液来自开放伤口还是闭合伤口标本的采集、运送方法v迅速送往实验室，1小时内不能培养应将标本冷藏v皮肤消毒对培养结果至关重要v革兰染色对标本进行评估。涂片中如出现上皮细胞提示标本已被污染。没有上皮细胞而有白细胞说明标本采集正确v不要仅送检脓液。脓液不能代表伤口特点，应在病灶活动区域或基底部采集标本v小儿要求：小儿感染常出现皮疹如水泡等，应在这些地方仔细采集标本培养以发现病原体v创伤标本如没有炎性细胞可能说明采集了表皮正常菌群，与疾病过程无关，应重新采集传统的棉签会严重影响细菌的生长普通棉签对标本采样的影响 v影响肯定是有的，因为脱脂棉花中含有抑菌成分脂肪酸、树酯、甲醛、氯气、胶水等v张秀珍教授试验，在棉拭子周围出现了清晰的抑菌区v最好是采用人造纤维拭子，尤其是在作淋球菌培养的时候这点尤为重要v不同细菌对棉拭中抑制物质的敏感性是不太相同的，也不是说所有细菌都会被明显抑制您认识这些工具吗：运送培养基？v多用途运送系统：多用途运送系统：需氧、厌氧v低氧化环境：低氧化环境：不会对微生物造成伤害v拭子深入培养基中：拭子深入培养基中：保护苛养菌、厌氧菌v两面以塑料密封：两面以塑料密封：不透气、不漏水、减少污染、维持缺氧环境手术部位医院感染诊断标准卫生部 医院感染诊断标准v临床和或有关检查显示典型的手术部位感染，即使细菌培养阴性，亦可以诊断v污染伤口经清创后的感染属医院内三类切口感染v切口的裂开、脂肪液化不属医院感染，但假设为继发感染那么需列入医院感染，需行分泌物涂片镜检鉴别。局局部泌物涂片发现较多脓细胞者为感染，较多脂肪球而脓细胞不多者为脂肪液化110手术部位感染诊断、送检及报告流程胸水标本如何送检胸水标本如何送检v注入无菌瓶注入无菌瓶涂片：革兰染色，抗酸，真菌检查培养：普通细菌，结核，真菌，厌氧菌(?)v注入血培养瓶注入血培养瓶需氧瓶：10ml厌氧瓶：10ml 感染病的有效诊治和防控：任重道远！v正确的感染病原学诊断v合理使用抗菌药物v提高感染性疾病预后，降低医疗费用v降低细菌耐药v预防感染性疾病传播 化脓和创伤标本采集与化脓和创伤标本采集与运送运送 组织或器官的化或器官的化脓性感染，其病原菌的来源可分性感染，其病原菌的来源可分为两两类：内源性：感染源是炎症局部周内源性：感染源是炎症局部周围器官中的正常菌群，器官中的正常菌群，由于由于损伤等因素等因素进入无菌状入无菌状态的的组织内，内，发生感染。生感染。外源性：感染源是存在于人体外部自然界的微生物，外源性：感染源是存在于人体外部自然界的微生物，由于外由于外伤和直接接触通和直接接触通过人体外表人体外表进入人体，造成感染。入人体，造成感染。脓液的液的细菌学菌学检查对于确定感染的种于确定感染的种类结核性或非核性或非结核性等、提供核性等、提供药物敏感物敏感结果和指果和指导临床治床治疗有重要有重要的意的意义。一一标本采集本采集1 1开放性感染和已开放性感染和已溃破的化破的化脓灶灶标本采集前先用本采集前先用灭菌生理菌生理盐水拭去外表渗出物，尽可能用抽吸或将水拭去外表渗出物，尽可能用抽吸或将拭子深入拭子深入伤口，口，紧贴伤口前沿取口前沿取样，从，从脓肿底部或底部或脓肿壁取壁取样，效果最好。慢性感染，效果最好。慢性感染，污染染严重，很重，很难别离到致病菌，可取感染部位下的离到致病菌，可取感染部位下的组织，研磨成，研磨成组织匀匀浆接种于适宜的培养基。接种于适宜的培养基。2 2封封闭性性脓肿局部消毒后用局部消毒后用针及注射器抽吸及注射器抽吸脓肿壁，将所有物壁，将所有物质置于无菌置于无菌试管内送管内送检，疑，疑为厌氧菌氧菌感染感染时立即作床立即作床边接种或置于接种或置于厌氧氧转运装置送运装置送检针头插一橡皮塞隔插一橡皮塞隔绝空气。但取空气。但取样时，可能会，可能会带入与感染入与感染过程无关的定植程无关的定植细菌。菌。3 3大面大面积创伤感染：可取感染感染：可取感染组织块或沾有或沾有脓汁的内汁的内层敷料送敷料送检。二二 本卷本卷须须知知细细菌菌对对枯燥敏感或只能采集少量枯燥敏感或只能采集少量标标本本时时，用棉拭子采集，用棉拭子采集标标本本后立即放入液体培养基内，或采后立即放入液体培养基内，或采标标本前先将棉拭子沾少本前先将棉拭子沾少许许肉肉汤汤以保持以保持标标本湿度。本湿度。对对于不能立即送于不能立即送检检的的标标本，本，应应放放4保存，培养淋病奈瑟菌保存，培养淋病奈瑟菌和和脑脑膜炎奈瑟菌的膜炎奈瑟菌的标标本除外。本除外。尽可能在用尽可能在用药药前采集前采集标标本。本。采采样样前病灶局部前病灶局部应应防止用抗菌防止用抗菌药药物或消毒物或消毒剂剂。革革兰兰染色染色对标对标本本进进行行评评估。涂片中如出估。涂片中如出现现上皮上皮细细胞提示胞提示标标本本已被已被污污染。没有上皮染。没有上皮细细胞而有白胞而有白细细胞胞说说明明标标本采集正确。本采集正确。有的有的创伤创伤均可有均可有细细菌菌污污染，但不一定染，但不一定发发生感染，因此生感染，因此对别对别离离到的到的细细菌要根据菌要根据创伤创伤的情况、菌量和种数，收集的情况、菌量和种数，收集标标本的本的处处理理过过程、机体免疫力及抗生素的使用情况等多种因素来分程、机体免疫力及抗生素的使用情况等多种因素来分析判断。析判断。穿刺液标本采集与运送穿刺液标本采集与运送 v穿刺液主要包括穿刺液主要包括:脑脊液脊液胆汁胆汁胸水胸水腹水腹水心包液心包液关关节液液鞘膜液鞘膜液在正常人体中，上述体液均是无菌的。有感染的在正常人体中，上述体液均是无菌的。有