生物碱类药物分析--课件

生物碱类药物的分析生物碱类药物的分析1ppt课件生物碱类药物的分析1ppt课件一类存在于生物体内的含含氮氮有机化合物，绝大部分存在于植物体内，少数存在于动物体内。生物碱2ppt课件一类存在于生物体内的含氮有机化合物，绝大部分存在于植物体内，第一节结构与性质一、苯一、苯烃胺胺类本本类药物物的的结构构特特征征为N在在侧链上上，为脂脂肪肪胺胺。性性质：1.碱碱性性较强，与与酸酸易易成成盐：盐酸酸麻麻黄黄碱碱、盐酸酸伪麻黄碱麻黄碱2.旋光性：旋光性：盐酸麻黄碱，左旋；酸麻黄碱，左旋；盐酸酸伪麻黄碱，右旋麻黄碱，右旋3.紫外吸收：芳紫外吸收：芳环4.氨基醇氨基醇结构：双构：双缩脲反反应盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱3ppt课件第一节 结构与性质一、苯烃胺类盐酸麻黄碱盐酸伪麻黄碱3ppt二、托烷类硫酸阿托品硫酸阿托品氢溴酸山莨菪碱氢溴酸山莨菪碱性质：性质：1.水解性：水解产生莨菪酸和莨菪碱水解性：水解产生莨菪酸和莨菪碱2.碱性较强，与酸易成盐：硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱碱性较强，与酸易成盐：硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱3.旋光性，氢溴酸山莨菪碱为左旋体，阿托品为外消旋体旋光性，氢溴酸山莨菪碱为左旋体，阿托品为外消旋体4ppt课件二、托烷类硫酸阿托品氢溴酸山莨菪碱性质：1.水解性：水解产生三、喹啉类硫酸奎宁硫酸奎宁性质：性质：1.碱性碱性组成：喹啉环组成：喹啉环+喹核碱喹核碱喹核碱碱性较强，与硫酸成盐喹核碱碱性较强，与硫酸成盐2.旋光性旋光性奎宁左旋体，奎尼丁右旋体奎宁左旋体，奎尼丁右旋体5ppt课件三、喹啉类硫酸奎宁性质：5ppt课件盐酸吗啡盐酸吗啡磷酸可待因磷酸可待因四四 异喹啉类异喹啉类性质性质1.吗啡结构：酚羟基显酸性，叔胺基团吗啡结构：酚羟基显酸性，叔胺基团显碱性显碱性2.吗啡溶解性：既可溶于氢氧化钠溶液又可吗啡溶解性：既可溶于氢氧化钠溶液又可溶于盐酸溶液溶于盐酸溶液3.可待因：无酚羟基，不能溶于氢氧化钠溶可待因：无酚羟基，不能溶于氢氧化钠溶液液6ppt课件盐酸吗啡磷酸可待因四 异喹啉类性质1.吗啡结构：酚羟基显硝酸士的宁硝酸士的宁利血平利血平1122五、吲哚类五、吲哚类性质：性质：1碱性：均含有两个碱性氮原子，士的宁碱性：均含有两个碱性氮原子，士的宁N1碱性较强，与硝酸成盐；利血平碱性较强，与硝酸成盐；利血平N1空间位阻，碱性空间位阻，碱性较弱，不能成盐。较弱，不能成盐。2水解性：利血平含有酯键，弱碱或受热条件下易水解性：利血平含有酯键，弱碱或受热条件下易水解水解3还原性和荧光性：利血平在光照和氧气存在下极还原性和荧光性：利血平在光照和氧气存在下极易被氧化，氧化产物为黄色，并带有黄绿色荧光，易被氧化，氧化产物为黄色，并带有黄绿色荧光，进一步氧化，显蓝色荧光进一步氧化，显蓝色荧光7ppt课件硝酸士的宁利血平1122五、吲哚类性质：1碱性：均含有两个碱咖啡因咖啡因茶碱茶碱性质：性质：几乎不显碱性几乎不显碱性茶碱显酸性，可溶于碱性茶碱显酸性，可溶于碱性水溶液水溶液六、黄嘌呤类六、黄嘌呤类8ppt课件咖啡因茶碱性质：六、黄嘌呤类8ppt课件第二节鉴别试验一、一般一、一般鉴别试验（一）沉淀反（一）沉淀反应：生生物物碱碱类药物物在在酸酸性性水水溶溶液液中中，可可与与生生物物碱碱沉沉淀淀剂反反应，生成生成难溶于水的物溶于水的物质常用的生物碱沉淀常用的生物碱沉淀试剂为：K K2 2HgIHgI4 4、KBiIKBiI4 4、I I2 2KIKI、二、二氯化汞、磷化汞、磷钼酸、硅酸、硅钨酸等。酸等。9ppt课件第二节 鉴别试验一、一般鉴别试验9ppt课件生物碱生物碱+生物碱生物碱显色色试剂=呈呈现不同不同颜色色显色色试剂：浓硫酸、硫酸、浓硝酸、硝酸、钼硫酸、甲硫酸、甲醛硫酸等硫酸等磷酸可待因的磷酸可待因的鉴别：取取本本品品1mg，置置白白瓷瓷板板上上，加加含含亚硒硒酸酸2.5mg的的硫硫酸酸0.5ml，立即立即显绿色，色，渐变蓝色。色。10ppt课件生物碱+生物碱显色试剂=呈现不同颜色10ppt课件（三）熔点测定法例：磷酸可待因（例：磷酸可待因（10版版药典）典）加加入入20NaOH溶溶液液至至白白色色沉沉淀淀出出现，用用玻玻璃璃棒棒摩摩擦擦器器壁壁使使沉沉淀淀完完全全，滤过；沉沉淀淀用用水水洗洗净，在在105干干燥燥1小小时，依法，依法测定，熔点定，熔点为154-158。11ppt课件（三）熔点测定法11ppt课件（四）紫外吸收光（四）紫外吸收光谱法法（五）（五）红外吸收光外吸收光谱法法（六）薄（六）薄层色色谱法法12ppt课件（四）紫外吸收光谱法12ppt课件（1）双）双缩脲反反应芳芳环侧链氨基醇氨基醇结构的特征反构的特征反应盐酸麻黄碱、酸麻黄碱、盐酸酸伪麻黄碱麻黄碱蓝紫色蓝紫色13ppt课件（1）双缩脲反应 芳环侧链氨基醇结构的特征反应蓝紫色1（2）Vitali反应托托烷类生物碱的特征反生物碱的特征反应莨菪酸莨菪酸结构构硫酸阿托品，硫酸阿托品，氢溴酸溴酸东莨菪碱莨菪碱硫酸阿托品硫酸阿托品加发烟硝酸加发烟硝酸5滴滴水浴蒸干水浴蒸干放冷放冷加乙醇加乙醇23滴润湿滴润湿加固体加固体KOH一粒一粒显深紫色显深紫色14ppt课件（2）Vitali反应托烷类生物碱的特征反应加发烟硝酸5滴水（3）绿奎宁反应C6位含氧位含氧喹啉啉类生物碱生物碱在在此此生生物物碱碱的的微微酸酸水水溶溶液液中中，加加微微过量量溴溴水水或或者者氯水水，再再加氨溶液，加氨溶液，应呈翠呈翠绿色。色。硫酸奎宁硫酸奎宁溴水或者氯水溴水或者氯水氨试液氨试液翠绿色翠绿色15ppt课件（3）绿奎宁反应C6位含氧喹啉类生物碱硫酸奎宁溴水或者氯水氨（4）紫脲酸铵反应黄黄嘌呤呤类生物碱生物碱16ppt课件（4）紫脲酸铵反应黄嘌呤类生物碱16ppt课件吲哚类生物碱的特征反生物碱的特征反应与香草与香草醛缩合：利血平合：利血平+香草香草醛=玫瑰玫瑰红色色与与对二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛缩合：合：取取利利血血平平约0.5mg，加加对二二甲甲氨氨基基苯苯甲甲醛5mg，冰冰醋醋酸酸0.2ml与与硫硫酸酸0.2ml，混混匀匀，即即显绿色色，再再加加冰冰醋醋酸酸1ml，转变为红色。色。17ppt课件吲哚类生物碱的特征反应17ppt课件1 1、甲醛、甲醛-硫酸反应硫酸反应 MarquisMarquis反应反应含酚羟基的异喹啉生物碱的特征反应：盐酸吗啡含酚羟基的异喹啉生物碱的特征反应：盐酸吗啡2、还原反应、还原反应盐酸吗啡盐酸吗啡+稀铁氰化钾稀铁氰化钾=伪吗啡伪吗啡+亚铁氰化钾亚铁氰化钾亚铁氰化钾亚铁氰化钾+三氯化铁三氯化铁=亚铁氰化铁，显蓝色亚铁氰化铁，显蓝色18ppt课件1、甲醛-硫酸反应 Marquis反应含酚羟基的异喹啉生第三节特殊杂质检查一、利用药物和杂质在物理性质上的差异硫酸奎宁中硫酸奎宁中“氯仿氯仿-乙醇中不溶物乙醇中不溶物”的检查的检查硫酸阿托品中硫酸阿托品中“莨菪莨菪碱碱”的检查的检查*利血平中利血平中“氧化产物氧化产物”的检查的检查利用旋光度的差异利用旋光度的差异利用溶解行为的差异利用溶解行为的差异利用对光选择性吸收的差异利用对光选择性吸收的差异19ppt课件第三节 特殊杂质检查一、利用药物和杂质在物理性质上的差异二、利用药物和杂质在化学性质上的差异（一）酸碱性的差异（一）酸碱性的差异硫酸阿托品中其他生物碱的硫酸阿托品中其他生物碱的检查原理：其他生物碱的碱性比阿托品弱原理：其他生物碱的碱性比阿托品弱方方法法：取取本本品品0.25g，加加盐酸酸溶溶液液1ml溶溶解解，用用水水稀稀释成成15ml，分取，分取5ml，加氨，加氨试液液2ml，不得立即，不得立即发生生浑浊。20ppt课件二、利用药物和杂质在化学性质上的差异（一）酸碱性的差异20二、利用药物和杂质在化学性质上的差异1、盐酸吗啡中阿扑吗啡的检查本品本品2、磷酸可待因中吗啡的检查、磷酸可待因中吗啡的检查原理：吗啡与亚硝酸钠反应产物在氨碱性条件下显原理：吗啡与亚硝酸钠反应产物在氨碱性条件下显黄棕色黄棕色方法：取本品方法：取本品0.1g，加盐酸溶液使溶解成，加盐酸溶液使溶解成5ml，加亚硝酸钠，加亚硝酸钠试液试液2ml，放置，放置15分钟，加氨试液分钟，加氨试液3ml如显色，与吗啡标准如显色，与吗啡标准液液5.0ml，用同一方法制成的对照液比较，不得更深。，用同一方法制成的对照液比较，不得更深。加水溶解加水溶解加加NaHCO3+碘试液碘试液加乙醚振摇加乙醚振摇乙醚层不得显红色乙醚层不得显红色水层不得显绿色水层不得显绿色21ppt课件二、利用药物和杂质在化学性质上的差异1、盐酸吗啡中阿扑吗三、色谱法硫酸奎宁中其它金硫酸奎宁中其它金鸡纳碱的碱的检查（p147自学）自学）检查方法：供方法：供试品溶液自身稀品溶液自身稀释对照法照法有关物有关物质的的检查方法：方法：HPLC22ppt课件三、色谱法硫酸奎宁中其它金鸡纳碱的检查（p147自学）22p非水溶液滴定法提取酸碱滴定法酸性染料比色法置换酸碱滴定法紫外分光光度法23ppt课件非水溶液滴定法23ppt课件(一一)原理原理指示指示剂或或电位法确定位法确定终点点置置换反反应：强酸置酸置换弱酸弱酸 BH+A-+HClO4BH+ClO4-+HA24ppt课件(一)原理 BH+A-+HClO4BH+ClO4(二二)测定方法定方法取供取供试品，加冰醋酸品，加冰醋酸10-30ml10-30ml溶解。溶解。供供试品品若若为氢卤酸酸盐，应再再加加5%5%醋醋酸酸汞汞的的冰冰醋醋酸酸溶溶液液3-3-5ml5ml加指示加指示剂，用高，用高氯酸滴定液滴定酸滴定液滴定 25ppt课件(二)测定方法 25ppt课件(三三)注意事注意事项除水：加入酸除水：加入酸酐，吸收冰醋酸及高，吸收冰醋酸及高氯酸中的水分酸中的水分温度：滴定液温度：滴定液浓度受温度影响度受温度影响滴定滴定终点：点：电位法或指示位法或指示剂法法 26ppt课件(三)注意事项 26ppt课件(四四)适用范适用范围Kb 10-8pKb8-10时，宜，宜选冰醋酸作冰醋酸作为溶溶剂；pKb为10-12时，宜，宜选冰醋酸与醋冰醋酸与醋酐的混合液作的混合液作为溶溶剂；pKb 为12以上以上时，选用醋用醋酐作作为溶溶剂。27ppt课件(四)适用范围 27ppt课件一般均预先在溶液中加入一般均预先在溶液中加入Hg(Ac)Hg(Ac)2 2 的冰醋酸溶液，的冰醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰。以消除氢卤酸对滴定的干扰。理论量理论量1 13 3倍倍 1.1.氢卤酸盐的测定氢卤酸盐的测定汞污染汞污染28ppt课件一般均预先在溶液中加入Hg(Ac)2 的冰醋酸溶液，以消除氢 取取本本品品约约 0.15g0.15g，精精密密称称定定为为0.1511g0.1511g，加加冰冰醋醋酸酸 10ml10ml，加加热热溶溶解解后后，加加醋醋酸酸汞汞试试液液 4ml 4ml 与与结结晶晶紫紫指指示示液液 1 1滴滴，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1002mo1/L0.1002mo1/L）滴滴定定至至 溶溶 液液 显显 翠翠 绿绿 色色，消消 耗耗 高高 氯氯 酸酸 滴滴 定定 液液（0.1002mo1/L0.1002mo1/L）8.25ml8.25ml，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验 校校 正正，空空 白白 消消 耗耗 高高 氯氯 酸酸 滴滴 定定 液液（0.1002mo1/L0.1002mo1/L）0.81ml 0.81ml。每每 1ml 1ml 高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mol/L0.1mol/L）相相当当于于 20.17mg 20.17mg 的的C C1010H H1515NO NO HClHCl。求求含量含量盐酸麻黄碱含量测定盐酸麻黄碱含量测定 ChP(2010)ChP(2010)29ppt课件 取本品约 0.15g，精密称定为0.1511g，加冰 生生物物碱碱的的硫硫酸酸盐盐，在在冰冰醋醋酸酸介介质质中中只只能能被被滴滴定定至至生物碱的硫酸氢盐。生物碱的硫酸氢盐。2.2.硫酸盐的测定硫酸盐的测定30ppt课件 生物碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至生物碱的硫（1 1）硫酸阿托品）硫酸阿托品 取取硫硫酸酸阿阿托托品品约约0.5g0.5g，精精密密称称定定，加加冰冰醋醋酸酸与与酸酸酐酐各各10ml10ml溶溶解解后后，加加结结晶晶紫紫指指示示液液1-21-2滴滴，用高氯酸滴定液滴定，至溶液显纯蓝色。用高氯酸滴定液滴定，至溶液显纯蓝色。HClOHClO4 4直接滴定时，反应摩尔比为直接滴定时，反应摩尔比为111131ppt课件（1）硫酸阿托品31ppt课件（2 2）硫酸奎宁）硫酸奎宁 取硫酸奎宁约取硫酸奎宁约0.2g0.2g，精密称定，加冰醋酸，精密称定，加冰醋酸10ml10ml溶溶解后，加醋酐解后，加醋酐5ml5ml与结晶紫指示液与结晶紫指示液1-21-2滴，用高氯酸滴定滴，用高氯酸滴定液滴定至溶液显蓝绿色。液滴定至溶液显蓝绿色。HClOHClO4 4直接滴定时，反应摩尔比为直接滴定时，反应摩尔比为13 13 32ppt课件（2）硫酸奎宁32ppt课件（3 3）硫酸奎宁片）硫酸奎宁片 取硫酸奎宁片取硫酸奎宁片1010片，除去糖衣后，精密称定，研片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量，置分液漏斗中，加氯化钠细，精密称取适量，置分液漏斗中，加氯化钠0.5g0.5g与与0.1mol/L0.1mol/L氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液10ml10ml，混匀，加氯仿，混匀，加氯仿50ml50ml，振摇，振摇1010分钟，静止，分取三氯甲烷液，用干燥滤纸过滤，弃分钟，静止，分取三氯甲烷液，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液去初滤液，精密量取续滤液25ml25ml，加酸酐，加酸酐5ml5ml与二甲基黄与二甲基黄指示液指示液2 2滴，用高氯酸滴定液滴定至终点。滴，用高氯酸滴定液滴定至终点。HClOHClO4 4直接滴定时，反应摩尔比为直接滴定时，反应摩尔比为141433ppt课件（3）硫酸奎宁片33ppt课件 因因HNOHNO3 3具具有有氧氧化化性性，可可使使指指示示剂剂变变色色，一一般般电电位位法法指示终点。指示终点。3.3.硝酸盐的测定硝酸盐的测定34ppt课件 因HNO3具有氧化性，可使指示剂变色，一般电位法指示无影响，直接测定。如磷酸可待因。无影响，直接测定。如磷酸可待因。4.4.磷酸盐及其有机酸盐的测定磷酸盐及其有机酸盐的测定35ppt课件无影响，直接测定。如磷酸可待因。4.磷酸盐及其有机酸盐（一）原理二、提取酸碱滴定法二、提取酸碱滴定法适用于碱性比较强的的药物分析。适用于碱性比较强的的药物分析。(pKb=6-9)36ppt课件（一）原理二、提取酸碱滴定法适用于碱性比较强的的药物分析。(取供试品溶于水或稀矿酸中，加入适当的碱性试剂使生物碱游离，再用合适的有机溶剂分次振摇提取，合并提取液，用水洗涤除去混存的碱性试剂和水溶性杂质，再用无水硫酸钠或植物胶脱水，滤过，即得游离生物碱的有机溶剂提取液37ppt课件取供试品溶于水或稀矿酸中，加入适当的碱性试剂使生物碱游离，再用用内内容容量量移移液液管管，精精密密量量取取本本品品10ml，以以水水洗洗出出移移液液管管内内的的附附着着液液，置置分分液液漏漏斗斗中中，加加氨氨试液液使使成成碱碱性性，用用氯仿仿振振摇提提取取至至少少4次次，第第一一次次25ml，以以后后每每次次各各15ml，至至可可待待因因提提尽尽为止止，每每次次得得到到的的氯仿仿液液均均用用同同一一份份水水10ml 洗洗涤，洗洗液液用用氯仿仿5ml 振振摇提提取取，合合并并氯仿仿液液，置置水水浴浴上上蒸蒸干干，精精密密加加硫硫酸酸滴滴定定液液(0.01mol/L)25ml，加加热溶溶解解，放放冷冷，加加甲甲基基红指指示示液液2 滴滴，用用氢氧氧化化钠滴滴定定液液(0.02mol/L)滴滴定定。每每 1ml 的的 硫硫 酸酸 滴滴 定定 液液(0.01mol/L)相相 当当 于于 84.88mg的的C18H21NO3H3PO43/2H2O。38ppt课件用内容量移液管，精密量取本品10ml，以水洗出移液管内的附着1.1.碱化试剂碱化试剂 最常用氨试液最常用氨试液*优优点点：使使大大部部分分生生物物碱碱游游离离，不不会会和和生生物物碱碱发发生生反应，不易乳化，易挥发，易除去，无干扰。反应，不易乳化，易挥发，易除去，无干扰。（三）注意事项39ppt课件碱化试剂 最常用氨试液*（三）注意事项39ppt课件2.2.提取溶剂提取溶剂 （1 1）提取溶剂选择的原则）提取溶剂选择的原则 对对生生物物碱碱溶溶解解度度大大，而而对对其其他他共共存存物物溶溶解解度度尽可能小；与生物碱及碱化试剂不起任何反应。尽可能小；与生物碱及碱化试剂不起任何反应。（2 2）常用的提取溶剂）常用的提取溶剂 最常用氯仿最常用氯仿*40ppt课件2.提取溶剂 40ppt课件3.滴定指示剂要要求求：变色色范范围在在酸酸性性区区域域的的指指示示剂；被被滴滴定定生生物物碱碱的的化化学学计量点，量点，应在在选用的指示用的指示剂变色范色范围内。内。注：甲基红：注：甲基红：4.2-6.3，溴酚蓝：，溴酚蓝：3.0-4.641ppt课件3.滴定指示剂要求：变色范围在酸性区域的指示剂；被滴定生物碱三、酸性染料比色法生生物物碱碱与与某某些些酸酸性性染染料料，在在一一定定PH条条件件下下可可定定量量结合合显色，然后用比色法色，然后用比色法测定含量。定含量。特特点点：灵灵敏敏度度高高、方方便便，并并且且具具有有一一定定专属属性性和和准准确确性性。适用于含量适用于含量较低的低的样品品测定。定。*42ppt课件三、酸性染料比色法生物碱与某些酸性染料，在一定PH条件下可定（一）基本原理在适当的介在适当的介质中，中，BH+.In-（水相）（水相）B+H+BH+HIn H+In-BH+.In-（有机相）（有机相）+43ppt课件（一）基本原理在适当的介质中，BH+.In-B+H+供试品溶液的制备：取本品供试品溶液的制备：取本品20片，精密称定，研片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硫酸阿托品细，精密称取适量（约相当于硫酸阿托品2.5mg），），置置50ml量瓶中，加水振摇使硫酸阿托品溶解并稀释量瓶中，加水振摇使硫酸阿托品溶解并稀释至刻度，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。至刻度，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。对照品溶液的制备：另取硫酸阿托品对照品约对照品溶液的制备：另取硫酸阿托品对照品约25mg，精密称定，置，精密称定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取至刻度，摇匀，精密量取5ml，置，置100ml量瓶中，加量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。例：硫酸阿托品片（例：硫酸阿托品片（05版药典）版药典）44ppt课件 供试品溶液的制备：取本品20片，精密称定，研细，精密称取测试方法：测试方法：精密量取供试品溶液与对照品溶液各精密量取供试品溶液与对照品溶液各2ml，分别置，分别置预先精密加入三氯甲烷预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液酚绿溶液2.0ml，振摇提取，振摇提取2 分钟后，静置使分层，分钟后，静置使分层，分取澄清的三氯甲烷液，照紫外分取澄清的三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法（附可见分光光度法（附录录A），在），在420nm的波长处分别测定吸光度，计算，的波长处分别测定吸光度，计算，并将结果与并将结果与1.027 相乘，即得供试量中含有相乘，即得供试量中含有(C17H23NO3)2H2SO4H2O的重量。的重量。45ppt课件测试方法：45ppt课件(C17H23NO3)2H2SO4H2O标示量标示量%=Ax/AR CR 50 1.027 平均片重平均片重W标示量标示量100%1.027：质量换算因数，指：质量换算因数，指1g无水硫酸阿托品相当于无水硫酸阿托品相当于硫酸阿托品的量。由下式求得：硫酸阿托品的量。由下式求得：(C17H23NO3)2H2SO4H2O的分子量的分子量(C17H23NO3)2H2SO4的分子量的分子量=1.02746ppt课件(C17H23NO3)2H2SO4H2O标示量%=Ax/（三）影响测定结果的因素关关键：酸酸性性染染料料与与有有机机碱碱能能否否定定量量的的形形成成离离子子对，并并完完全全被有机溶被有机溶剂提取。提取。*1.水相最佳水相最佳PH值的的选择：使生物碱均形成阳离子，且酸性染料使生物碱均形成阳离子，且酸性染料电离足离足够阴离子。阴离子。47ppt课件（三）影响测定结果的因素关键：酸性染料与有机碱能否定量的形2.酸性染料种种类的的要要求求：与与生生物物碱碱定定量量结合合；生生成成的的离离子子对在在有有机机相相中中溶溶解解度度较大大，而而染染料料自自身身在在有有机机相相中中不不溶溶或或很很少少溶溶解解；生成的离子生成的离子对有有较高吸光度。高吸光度。常用：常用：溴麝香草酚溴麝香草酚蓝、甲基橙、溴甲酚、甲基橙、溴甲酚绿等等48ppt课件2.酸性染料种类的要求：与生物碱定量结合；生成的离子对在有机3.有机溶剂的选择要求：要求：对离子离子对的提取率高；不能或极少与水互溶。的提取率高；不能或极少与水互溶。常用常用三三氯甲甲烷、二、二氯甲甲烷等。等。4.水分的存在水分的存在 完全无水完全无水49ppt课件3.有机溶剂的选择要求：对离子对的提取率高；不能或极少与水互5.有色杂质的干扰和排除为了了防防止止有有色色杂质的的干干扰。可可对酸酸性性染染料料进行行处理理：用用有有机溶机溶剂提取，除去有色提取，除去有色杂质。50ppt课件5.有色杂质的干扰和排除为了防止有色杂质的干扰。可对酸性染料四、置四、置换酸碱滴定法酸碱滴定法五、紫外分光光度法五、紫外分光光度法51ppt课件四、置换酸碱滴定法51ppt课件