常见标本的采集及送检-课件

常见标本的采集及送检常见标本的采集及送检常见标本的采集及送检1内内 容容一、血培养标本的采集一、血培养标本的采集二、脑脊液标本的采集二、脑脊液标本的采集三、胸腹水标本的采集三、胸腹水标本的采集四、痰标本的采集四、痰标本的采集五、咽拭子标本的采集五、咽拭子标本的采集六、菌痢及沙门菌感染便标本采集六、菌痢及沙门菌感染便标本采集七、开放性脓肿标本的采集七、开放性脓肿标本的采集八、尿标本的采集八、尿标本的采集九、阴道及宫颈分泌物采集九、阴道及宫颈分泌物采集十、男性尿道口标本采集十、男性尿道口标本采集十一、前列腺标本的采集十一、前列腺标本的采集内 容一、血培养标本的采集2一、血培养标本的采集一、血培养标本的采集n n(一一)血培养的送检指征血培养的送检指征1.1.症状指征：发热症状指征：发热38C38C、皮疹、皮疹、肝脾肿大、关节疼痛、神志肝脾肿大、关节疼痛、神志不清、昏迷或休克。不清、昏迷或休克。2.2.疾病指征：化脓性病灶或损疾病指征：化脓性病灶或损害、粘膜损伤性疾病、肝脏害、粘膜损伤性疾病、肝脏疾病、糖尿病、血液性疾病、疾病、糖尿病、血液性疾病、恶性肿瘤、艾滋病、呼吸道恶性肿瘤、艾滋病、呼吸道感染或呼吸衰竭、长期输液感染或呼吸衰竭、长期输液或导管介入疾病，血透析患或导管介入疾病，血透析患者。者。一、血培养标本的采集(一)血培养的送检指征3n n(二)何时采集血培养阳性率高1.患者出现寒战，体温升高之前。2.使用抗菌药物之前，应立即采集血培养（心内膜炎例外）。3.如病情需要不能暂时停用抗菌药物的患者，患者无明显的寒战阶段，应在第二次用药前采血，因为此时血液中抗菌药物的浓度最低。(二)何时采集血培养阳性率高44.患者有明显的发热前期症状，可在患者寒战前或寒战后1小时内采血也可提高阳性率，因为在1小时内由机体释放的杀菌因子还不会把细菌全部杀灭。5.对于发热原因不明，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，先从不同体位采集2-3次血标本间隔大于或等于1小时，24-36小时后估计体温升高之前再采集2份以上，若24小时培养结果阴性，应重新采集血标本。4.患者有明显的发热前期症状，可在患者寒战前或寒战后1小时内56.6.怀疑急性心内膜炎时应在怀疑急性心内膜炎时应在抗生素治疗前抗生素治疗前1-2h1-2h内分别内分别从从3 3个不同部位采集个不同部位采集3 3份份血标本进行培养；怀疑血标本进行培养；怀疑亚急性心内膜炎时，应亚急性心内膜炎时，应在抗生素治疗前在抗生素治疗前1-2h1-2h内分内分别在别在3 3个不同部位采集血个不同部位采集血标本，间隔时间大于或标本，间隔时间大于或等于等于15min15min，若，若2424小时培小时培养阴性，重新采集养阴性，重新采集2-32-3份份或更多标本。或更多标本。6.怀疑急性心内膜炎时应在抗生素治疗前1-2h内分别从3个不6 血培养时间的重要性血培养时间的重要性发热高峰发热高峰 血培养时间的重要性发热高峰7n n(三)多次采集血培养的原因1.血循环中的细菌，有“暂时性”与“持续性”之分。多次采血可提高阳性检出率。2.血流感染：有原发性和继发性之分，许多血流感染来源于肺，尿路，肝脏，肠道和伤口，血培养阳性有助于循环外感染的诊断。(三)多次采集血培养的原因83.菌血症患者多数为间歇性，病原菌是周期性出现在血流中，随之为无细菌期，不管临床症状经历的严重程度，但患者血液中病原菌浓度水平相当低，据此要求临床多次采集血液标本进行培养，可提高阳性检出率，但24小时内一般不超过3次，成人每次采血量10-20ml，儿童3-5ml，婴幼儿1-2ml。3.菌血症患者多数为间歇性，病原菌是周期性出现在血流中，随之9 采集的套数、采集的套数、%血培养阳性结果血培养阳性结果 采集的套数、%血培养阳性结果10n n(四)如何采集血培养标本1.皮肤消毒程序：（1）70%酒精擦拭静脉穿刺部位30秒，碘酊或碘伏作用90秒，消毒直径3cm以上。（2）70%酒精脱碘。（3）对碘过敏者，用70%酒精消毒60秒，待酒精挥发干燥后采血。对酒精过敏者可用1%新洁尔灭消毒皮肤。(四)如何采集血培养标本112.培养瓶消毒：70%酒精擦拭血培养瓶橡皮赛塞，作用60秒，用无菌棉签清除塞子表面残余酒精。3.穿刺时，手不可再触碰穿刺点，抽血后直接注入血培养瓶，轻轻颠倒瓶子以防止血液凝固。立即送检。2.培养瓶消毒：70%酒精擦拭血培养瓶橡皮赛塞，作用60秒，12消毒剂与血培养污染率消毒剂与血培养污染率消毒剂与血培养污染率13n n(五五)血培养标本采集注意事项血培养标本采集注意事项1.1.严格做好无菌操作，避免体表正常菌群污染。严格做好无菌操作，避免体表正常菌群污染。2.2.不要和其他检测项目同时采集，或者最先采集。不要和其他检测项目同时采集，或者最先采集。3.3.切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。4.4.不宜从静脉导管或静脉留置导管口取血，若血液不宜从静脉导管或静脉留置导管口取血，若血液标本采集自留置管，中心静脉管内，应在申请单标本采集自留置管，中心静脉管内，应在申请单上注明上注明5.5.若自导管设施采血，必须同时静脉取血，以求对若自导管设施采血，必须同时静脉取血，以求对比和解释。比和解释。(五)血培养标本采集注意事项14常见标本的采集及送检-课件15n n(六)血培养标本采集后的送检1.注入标本后的血培养瓶应立即送到临床细菌室，如因某些原因不能立即送检时，常规运送时间小于2h，应将培养瓶置于室温保存，切勿置于冰箱冷藏。2.送检过程中，如天气寒冷一定采取保暖措施。3.化验单上要注明准确的采集时间和采血量。(六)血培养标本采集后的送检16二、脑脊液标本的采集二、脑脊液标本的采集n n(一)采集脑脊液注意事项1.最好在抗生素治疗前采集标本2.穿刺过程中要严格无菌操作，防止污染3.如果只采集了一管脑脊液，应先送细菌室4.做脑脊液培养的同时建议做血培养二、脑脊液标本的采集(一)采集脑脊液注意事项17n n(二二)脑脊液标本的运送脑脊液标本的运送 脑脊液中常见的致病菌有脑膜炎双球菌，肺脑脊液中常见的致病菌有脑膜炎双球菌，肺炎链球菌，这些菌生长条件高，离开机体时间长，炎链球菌，这些菌生长条件高，离开机体时间长，细菌会因为不适应外部环境而死亡，同时，上述细菌会因为不适应外部环境而死亡，同时，上述细菌容易产自溶酶，放置时间长，细菌会自溶，细菌容易产自溶酶，放置时间长，细菌会自溶，而且上述菌对外界抵抗力弱，寒冷干燥均可导致而且上述菌对外界抵抗力弱，寒冷干燥均可导致死亡，因此，脑脊液标本采集后应立即送至细菌死亡，因此，脑脊液标本采集后应立即送至细菌室，而且送检过程中要注意保温（室，而且送检过程中要注意保温（25-37C),25-37C),防止防止干燥和日光直射。干燥和日光直射。(二)脑脊液标本的运送18三、胸腹水标本的采集三、胸腹水标本的采集n n(一)如何正确采集胸腹水标本1.无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本2.标本采集量一般为5-10ml，不能用拭子沾取标本送检3.标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中送检4.可在容器中先加入灭菌肝素然后再加入标本，以防止穿刺液凝固，也可将标本直接加入血培养瓶三、胸腹水标本的采集(一)如何正确采集胸腹水标本19n n(二)标本采集过程中的注意事项1.一定要严格履行无菌操作，注意防止污染2.标本与抗凝剂的比例一般为1：10（0.5ml肝素可抗凝5ml标本）3.标本采集后要充分与抗凝剂混合并立即送检4.若不能及时送检，室温保存不能超过24小时，若做真菌培养要4C保存。(二)标本采集过程中的注意事项20四、痰标本的采集四、痰标本的采集n n(一)痰培养标本采集时间及频率1.在抗生素使用前采集痰标本2.最好在清晨采集痰标本，因多数患者在清晨痰较多，且含菌量也多，即使对痰量少的患者，也以清晨最为容易3.对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2-3天。4.怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰送检四、痰标本的采集(一)痰培养标本采集时间及频率21n n(二)痰标本的采集方法1.自然咳痰法：留取前刷牙，用清水漱口3次，（或硼酸漱口），以除去口腔大部分杂菌，之后用力咳出呼吸道深部的痰液至无菌痰盒内，注意不要有污染，立即盖好盖子。患者痰液较深不易咳出时，可在咳痰前捶背，协助排痰。痰采集量不少于1ml2.经支气管镜抽吸(二)痰标本的采集方法22n n(三三)痰标本的运送及保存痰标本的运送及保存1.1.标本采集后需尽快（标本采集后需尽快（22小时）送至实验室，不及小时）送至实验室，不及时运送可导致肺炎链球菌，流感嗜血杆菌等苛养时运送可导致肺炎链球菌，流感嗜血杆菌等苛养菌的死亡菌的死亡2.2.延迟送检应置于延迟送检应置于4C4C冰箱保存，以免杂菌生长，冰箱保存，以免杂菌生长，（疑为肺炎双球菌，嗜血杆菌感染者不应（疑为肺炎双球菌，嗜血杆菌感染者不应44保存）保存）3.3.对可疑烈性呼吸道传染病（如对可疑烈性呼吸道传染病（如SARSSARS，非炭疽等），非炭疽等）的患者标本，在采集，运送或保存过程中必须注的患者标本，在采集，运送或保存过程中必须注意生物安全防护意生物安全防护(三)痰标本的运送及保存23五、咽拭子标本的采集五、咽拭子标本的采集n n(一一)如何采集咽拭子如何采集咽拭子1.1.采集标本时患者先用清水漱口，由检查者将舌向采集标本时患者先用清水漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌拭子由口外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌拭子由口腔进入，越过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，采集腔进入，越过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，采集鼻咽红肿处标本。鼻咽红肿处标本。2.2.取材后小心将拭子退出，立即放入无菌试管内。取材后小心将拭子退出，立即放入无菌试管内。3.3.若咽部肉眼可见明显发红或有伪膜存在是，应在若咽部肉眼可见明显发红或有伪膜存在是，应在局部擦拭去标本。局部擦拭去标本。4.4.采集标本可在鼻咽部多点采集，以增加灵敏度。采集标本可在鼻咽部多点采集，以增加灵敏度。五、咽拭子标本的采集(一)如何采集咽拭子24n n(二)鼻咽喉拭子采集注意事项1.抗生素使用前采集2.标本采取前数小时不得用消毒药物漱口或涂抹病灶局部3.用棉拭采取标本时应小心，认真，准确地在采集部位采取，避免触及舌、口腔粘膜和唾液，以防污染(二)鼻咽喉拭子采集注意事项254.采集扁桃体标本时，应以扁桃体窝部为宜5.咽部为呼吸和食物的通道，应以晨起后采集为宜6.怀疑为白喉棒状杆菌感染时，应在咽部深层组织中采取标本，避免咽部表面正常菌群的污染7.切忌在舌根处随意采取标本，应付了事4.采集扁桃体标本时，应以扁桃体窝部为宜26n n(三)咽拭子标本的送检 标本采取后，要立即送检，如不立即送检，拭子易干燥，使部分细菌死亡(三)咽拭子标本的送检27六、菌痢及沙门菌感染便标本采集六、菌痢及沙门菌感染便标本采集n n1.由于志贺菌感染的潜伏期段（24-48h），致病力强，少量细菌（10-100个）进入人体即可引起发病。应尽可能在发病急性期（3天内）和应用抗生素治疗前采集脓血，粘液便。n n2.沙门菌感染患者，发病两周以后采集粪便.六、菌痢及沙门菌感染便标本采集1.由于志贺菌感染的潜伏期段（28七、开放性脓肿标本的采集七、开放性脓肿标本的采集n n1.先用无菌生理盐水清洗病灶表面的污染杂菌，用无菌棉拭沾少许无菌生理盐水，以保持标本的湿度，然后采集脓液及病灶深部的分泌物（最好从脓肿底部或脓肿壁取样）后置于无菌容器中，立即送至实验室。n n2.从伤口深部采集渗出物的拭子标本至少要采集2个拭子，其中一个用于细菌培养，另一个用于涂片革蓝染色。七、开放性脓肿标本的采集1.先用无菌生理盐水清洗病灶表面的污29n n3.3.采集脓肿标本注意事项采集脓肿标本注意事项1/.1/.创伤出血敷有药物在创伤出血敷有药物在2h2h以内及烧伤以内及烧伤12h12h内均不采集内均不采集标本，此时获得的阳性结果机会很少。标本，此时获得的阳性结果机会很少。2/.2/.标本采集前一定要先去除表面的定植菌群。标本采集前一定要先去除表面的定植菌群。3/.3/.采集标本时应注意观察脓汁及分泌物的性状，色采集标本时应注意观察脓汁及分泌物的性状，色泽，及有无恶臭等，申请单最好能注明。泽，及有无恶臭等，申请单最好能注明。4/.4/.由于拭子的采集量很少，怀疑有细菌感染时，为由于拭子的采集量很少，怀疑有细菌感染时，为避免细菌对干燥的敏感，采集结束要立即送至实避免细菌对干燥的敏感，采集结束要立即送至实验室。验室。3.采集脓肿标本注意事项皮肤消毒对培养结果至关重要30n n3.脓性分泌物常培养不出细菌的原因1/.首先要区分是否为细菌感染，可经革蓝染色解决此问题。2/.标本中的脓细胞可能是白细胞吞噬掉细菌后中毒死亡的尸体，白细胞及死亡后的尸体释放出某些抑菌物质抑制了细菌的进一步繁殖3/.深部脓液内本是厌氧菌生长，用常规的有氧条件，不会生长3.脓性分泌物常培养不出细菌的原因31八、尿标本的采集八、尿标本的采集n n（一）尿培养的采集时间（一）尿培养的采集时间1.1.多数药物都是通过尿液排泄，因此无论何种采集多数药物都是通过尿液排泄，因此无论何种采集方法均应在抗菌药物应用前采集，通常采集晨起方法均应在抗菌药物应用前采集，通常采集晨起第一次中段尿送检（尿液在膀胱内储存至少第一次中段尿送检（尿液在膀胱内储存至少4 4小时）小时），嘱患者睡前少饮水。，嘱患者睡前少饮水。2.2.怀疑沙门菌感染时，一般在病后怀疑沙门菌感染时，一般在病后2 2周左右采集尿培周左右采集尿培养。养。3.3.怀疑结核分枝杆菌感染时，患者应停药怀疑结核分枝杆菌感染时，患者应停药1-21-2天后采天后采集晨尿或集晨尿或24h24h尿的沉渣部分尿的沉渣部分10-15ml10-15ml送检。送检。八、尿标本的采集（一）尿培养的采集时间32n n（二）尿培养采集方法（二）尿培养采集方法1.1.清洁中段尿采集清洁中段尿采集（1 1）女性：先用肥皂水或）女性：先用肥皂水或0.1%0.1%高锰酸钾溶液清洗外阴及尿高锰酸钾溶液清洗外阴及尿道口，无菌纱布擦拭，用手指将阴唇分开排尿，弃去前段，道口，无菌纱布擦拭，用手指将阴唇分开排尿，弃去前段，留取中段尿于无菌容器中，盖好盖子立即送检。留取中段尿于无菌容器中，盖好盖子立即送检。（2.2.）男性：翻转包皮用肥皂水冲洗，用）男性：翻转包皮用肥皂水冲洗，用0.1%0.1%新洁尔灭消毒新洁尔灭消毒尿道口，无菌纱布擦干，弃去前段尿，留取中段送检。尿道口，无菌纱布擦干，弃去前段尿，留取中段送检。（3 3）.儿童：在多数情况下仅冲洗外阴是不够的，故采集标儿童：在多数情况下仅冲洗外阴是不够的，故采集标本较为困难。尿培养细菌数明显增多，可高度怀疑尿路感本较为困难。尿培养细菌数明显增多，可高度怀疑尿路感染，如菌数居中，有必要导尿或膀胱穿刺取尿。染，如菌数居中，有必要导尿或膀胱穿刺取尿。（二）尿培养采集方法332.2.肾盂尿采集肾盂尿采集3.3.膀胱穿刺采集膀胱穿刺采集4.4.集尿法集尿法5.5.导尿法导尿法（1 1）直接导尿：按常规方法做会阴部消毒后，用导尿管直）直接导尿：按常规方法做会阴部消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。此法有可能将下尿道接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。此法有可能将下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。（2 2）留置导尿：用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用联控）留置导尿：用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用联控针筒的细针斜穿管壁抽吸尿液，或者拔去闭式引流的集尿针筒的细针斜穿管壁抽吸尿液，或者拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前段尿，留无污染的膀胱内尿送检。袋，弃去导尿管前段尿，留无污染的膀胱内尿送检。2.肾盂尿采集34n n（三）尿培养采集过程注意事项1.清洁中段尿易受会阴部细菌污染，应由医护人员或其指导下采集。2.尽量不采用导尿管采集标本，减少继发感染。3.多次收集或24h尿不能用于培养，以防污染菌误导临床。4.不可从集尿袋的下端管口留取标本，尿袋内的尿液也不能用于培养。（三）尿培养采集过程注意事项355.尿管末端的尿液也不能用于培养，因很难避免没有尿道菌群污染。6.除非是流行病学调查，长期留置导管患者常规尿培养意义不大。7.申请单上需注明患者症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要。5.尿管末端的尿液也不能用于培养，因很难避免没有尿道菌群污染36n n（四）不同方法采集尿标本培养的结果评价（四）不同方法采集尿标本培养的结果评价1.1.清洁中段尿：清洁中段尿：（1 1）菌落数）菌落数50000CFU/ml10 5CFU/ml10 5CFU/ml，纯培养或混合菌生长，纯培养或混合菌生长，其中某种菌落数其中某种菌落数 或或=10 5=10 5者有意义。者有意义。（4 4）3 3种以上细菌生长无意义，报告标本污染。种以上细菌生长无意义，报告标本污染。（四）不同方法采集尿标本培养的结果评价372.导尿：菌落数103cfu/ml，3种以内细菌生长都有意义，对2种主要生长菌需进行细菌鉴定和药敏试验：4种及以上细菌生长无意义，报告标本污染。3.耻骨膀胱穿刺：任意数目都有意义，所有细菌均需做细菌鉴定 及药敏试验。2.导尿：菌落数103cfu/ml，3种以内细菌生长都有意38九、阴道及宫颈分泌物采集九、阴道及宫颈分泌物采集n n1.1.取阴道分泌物之前应避免性生活、阴道冲洗和取阴道分泌物之前应避免性生活、阴道冲洗和上药。上药。n n2.2.尿道和尿道口标本：先用生理盐水局部冲洗，尿道和尿道口标本：先用生理盐水局部冲洗，用无菌拭子或小刮勺插入尿道口用无菌拭子或小刮勺插入尿道口1.5-3cm1.5-3cm，停留，停留1010秒钟，轻轻旋转或轻刮采集标本。秒钟，轻轻旋转或轻刮采集标本。n n3.3.外阴部糜烂或溃疡，先用生理盐水清洗，用无外阴部糜烂或溃疡，先用生理盐水清洗，用无菌拭子擦取病灶边缘的分泌物或吸取用力挤压出菌拭子擦取病灶边缘的分泌物或吸取用力挤压出的组织液。的组织液。n n4.4.阴道及宫颈分泌物：窥阴器下操作，用长的无阴道及宫颈分泌物：窥阴器下操作，用长的无菌棉签采集阴道分泌物或先用长拭子擦去宫颈口菌棉签采集阴道分泌物或先用长拭子擦去宫颈口及其周围分泌物，换用另一拭子伸入宫颈内及其周围分泌物，换用另一拭子伸入宫颈内1-2cm1-2cm处缓缓旋转数周，让拭子充分吸取分泌物。处缓缓旋转数周，让拭子充分吸取分泌物。九、阴道及宫颈分泌物采集1.取阴道分泌物之前应避免性生活、39十、男性尿道口标本采集及最佳时间十、男性尿道口标本采集及最佳时间n n1.男性尿道口感染的标本取材时间最好在排尿前或后1小时。n n2.清洗尿道口，尿道口用无菌纱布或棉球擦拭，采取从尿道口溢出的分泌物或用白金拭子插入尿道口2-4cm轻轻旋转后取出。n n3.如无脓液溢出，可从阴茎的腹面向龟头方向按摩，促使分泌物溢出。十、男性尿道口标本采集及最佳时间1.男性尿道口感染的标本取材40十一、前列腺标本的采集十一、前列腺标本的采集n n1.用前列腺按摩法采集前列腺按摩液。n n2.清洗尿道口，冲洗尿道膀胱，从肛门用手指按摩前列腺，使前列腺液溢出，用无菌容器收集。n n3.如无肉眼可见的脓液，可用灭菌拭子轻轻伸入前尿道内，旋转拭子，采集标本。十一、前列腺标本的采集1.用前列腺按摩法采集前列腺按摩液。41谢谢谢谢42