常用动物实验技术简介课件

动物实验安全与常用技术动物实验安全与常用技术 西部实验动物联席会议秘书长 四川省科技厅动管办专委会委员 成都达硕实验动物有限公司总经理 钟浩钟浩引引 言言实验动物：指经人工饲养、繁育，对其携带的微生物及寄生虫实行控制，具有明确遗传背景，应用于科学研究、教学、生产和检验等方面的动物。实验用动物包括：实验动物，野生动物，经济动物。如大白鼠、小白鼠、裸鼠、豚鼠、家兔、比格犬、恒河猴、小型猪、沙鼠等。m实验动物是一切生命科学的支撑条件，广泛应用于医药研发、教学实验、药品生产、生物检验等方面。m实验动物为人类健康和社会进步作出了巨大贡献。引 言引 言目前我国实验动物生产量已达万只()，使用量高达万只，高于欧盟国万只的总和。我国实验动物环境设施规模和质量不断提升，实验动物进出口越来越频繁，新品系不断引进，使得我国实验动物资源日趋丰富。实验动物在生产、使用过程中，存在感染、繁殖病原体的可能以及向环境扩散病原微生物的危险，对人和环境造成生物安全危害。实验动物工作中的危害源 实验动物 人兽共患病 实验性病原体 克隆机转基因动物的潜在生物危害 动物实验设施设备 操作 运输管理措施、环保管理废气管理污水管理垫料管理尸体处置试剂管理实验材料管理 常见人兽共患病源及防护 隔离、检疫、免疫、消毒m汉坦病毒m弓形体m沙门氏菌m狂犬病毒m布氏杆菌m钩端螺旋体m志货氏菌m猴病毒m结核杆菌引 言m年长春市某高校中药系实验室发生学生感染流行性出血热事件，名学生中有名学生受感染。整个事件起因也是因实验操中被动物抓咬伤而造成的。m广州市年一起流行性出血热实验室感染事件m年月日，东北农业大学应用技术学院畜禽生产教育班名学生在动物医学学院实验室进行“羊活体解剖学实验”，年月开始，连续高烧很多天，四肢乏力，关节疼痛，后确诊为感染布鲁氏菌病，年月日至月日，东北农业大学共有名学生和一名教师被确诊感染布鲁氏菌病。引 言 实验动物生物安全问题已引起国、内外高度重视。年我国实施新版实验动物国家标准，其中规定：实验用大小鼠的等级提高到级。年北京市实验动物管理条例，修改和增加了实验动物生物安全方面内容，年第二届北京实验动物科学国际论坛上，日本国立大学生物安全委员会委员长佐藤浩教授提出，生物安全已成为实验动物研究中不容忽视的重要因素。m实验动物生物安全:是对实验动物可能产生的潜在风险或现实危害的防范和控制。m由实验动物造成的各种风险和危害包括：m 生产和使用实验动物中的各个环节，如实验动物的引种、保种、繁育、运输、进出口，使用实验动物(包括感染和非感染实验动物)进行动物实验、从事科研活动等过程中实验动物都有可能造成各种危害。引 言实验动物生物安全的条件与保障国家、地方法律、法规合格的实验动物与设施严格、标准化的操作废弃物的正确处理实验动物生物安全应急预案 引 言国家或地方实验动物主要法规、标准、实验动物管理条例（）、实验动物质量管理办法（修订版）（）、实验动物许可证管理办法（试行）（）、实验动物种子中心管理办法、省级实验动物质量检测机构技术审查准则.四川省实验动物管理条例年月日国家或地方实验动物主要法规、标准实验动物微生物等级及监测实验动物微生物等级及监测实验动物寄生虫等级及监测实验动物寄生虫等级及监测实验动物环境及设施实验动物环境及设施哺乳类实验动物的遗传质量控制哺乳类实验动物的遗传质量控制实验动物配合饲料通用质量标准实验动物配合饲料通用质量标准实验动物配合饲料卫生标准实验动物配合饲料卫生标准国家或地方实验动物主要法规、标准m 实验动物生产许可证 实验动物使用许可证 国家或地方实验动物主要法规、标准m实实验验动动物物的的生生产产和和使使用用许许可可证证必必须须经经监监测测机机构构检检测测合合格格后后发发给给单单位位和和个个人人，严严禁禁转转借借、转转让让和和出出租租或或者者超超许许可可证证范范围围使使用用，如如果果出出现现上上述述情情况况，科科技技厅厅主主管管部部门门将将暂暂扣扣许许可可证证，责责令令限限期期整整改改；，对对无无证证使使用用实实验验动动物物的的机机构构与与个个人人将将实实施施行行政政处处罚罚，情情节节严严重重的的将将依依法追究民事或刑事责任。法追究民事或刑事责任。实验动物分为四级：一级为普通级（）；二级为清洁级（）；三级为无特定病原体（）级；四级为无菌级（包括悉生动物）。目前比格犬、恒河猴、小型猪等大动物多为普通级，大、小鼠均为清洁级以上，豚鼠、家兔等有普通级、清洁级、级。国际上将实验动物分为三个级别；级以上动物种群来源于剖腹产动物，微生物、寄生虫按国标严格控制。实验动物设施分为三级：一级为开放系统；二级为屏障系统；三级为隔离系统。实验动物及其设施的等级实验动物及其设施的等级m隔离系统()是以隔离器()为主体及其附属装置组成的饲养系统。用作饲养无菌动物和已知菌动物。分正、负压隔离器。m 屏障系统()这是清洁级、级动物生产或实验的设施。人、实验动物、饲料、饮水、垫料、空气及其它物品均需进行严格的微生物控制。人流、物流及动物流要分开。m开放系统()只能进行普通级实验动物的生产与实验。实验动物及其设施的等级实验动物及其设施的等级实验动物及其设施的等级实验动物及其设施的等级不同等级动物：必须由省级实验动物监测机构监测合格，发放“实验动物质量监测保合格证”。动物实验中所用动物必须为质量合格动物。实验动物及其设施的等级实验动物及其设施的等级隔离环境以隔离器()为主体及其附属装置组成的饲养系统。用作饲养无菌动物和已知菌动物。洁净度达到一百级。屏障环境 主要用于进行级、清洁级的大鼠、小鼠等小动物实验（配备饲养室及操作室）。洁净走廊洁净走廊动物实验室动物实验室实验动物及其设施的等级普通环境 主要用于进行兔、猫、狗、猴等大动物实验饲养（配备饲养室及操作室）。实验动物及其设施的等级实验动物及其设施的等级 涉及传染性、中毒性、放射性、致癌性、致突致畸及致死性实验等应在有特殊要求的生物安全实验室中进行，应根据生物安全防护的要求进行建筑或改造，按照有关规定执行。将动物生物安全实验室分为四级：动物生物安全实验室一级()动物生物安全实验室二级()动物生物安全实验室三级()动物生物安全实验室四级()实验动物及其设施的等级实验动物及其设施的等级m实验动物生产的生物安全：m 实验动物生产过程中，对实验动物可能造成的各种风险和危害的防范和控制。m 实验动物生产，包括实验动物的引种、保种、繁育、运输、进出口等过程。m 定期进行严格的微生物指标监测。m实验动物引种：实验动物种子来源于国家实验动物保种中心，遗传背景清楚，质量符合国家标准。m实验动物保种和繁育：必须由国家或行业主管部门认可的单位进行。实验动物及其动物实验的操作适用于无菌动物饲养或运输适用于无菌动物饲养或运输小鼠饲养笼小鼠饲养笼大鼠饲养笼大鼠饲养笼实验动物运输：运输实验动物时，所使用的转运实验动物运输：运输实验动物时，所使用的转运工具和笼器具，应当符合所运实验动物的微生物和工具和笼器具，应当符合所运实验动物的微生物和环境质量控制标准。不同品种、品系、性别和等级环境质量控制标准。不同品种、品系、性别和等级的实验动物，不得在同一笼盒内混合装运。的实验动物，不得在同一笼盒内混合装运。实验动物及其动物实验的操作实验动物使用的生物安全：动物及饲养要求:、引进动物进行实验必须具备实验动物质量合格证,隔离检疫一周。、坚持卫生消毒制度：定期对动物房舍和饲养用具进行消毒。、饲养管理人员要定期做健康检查。实验操作要求：实验操作要求：动动物物实实验验人人员员实实验验操操作作过过程程中中做做好好防防护护，穿戴好工作衣、帽、口罩、手套穿戴好工作衣、帽、口罩、手套;严格按标准操作规程进行。严格按标准操作规程进行。一、大鼠的抓取与固定二、小鼠的抓取与固定三、大、小鼠的灌胃四、大、小鼠尾静脉注射五、小鼠腹腔注射 m小鼠的抓取与固定 。m大鼠的抓取与固定 m大、小鼠的灌胃m灌胃时将灌胃针连接在注射器上，吸入药液。m左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物固定。体位为头高尾低。右手持注射器，将灌胃针插入动物口中，沿口腔顶壁和咽后壁徐徐插入食道。大鼠和小鼠一样的操作手法。注意：针插入时应无阻力。若感到阻力或动物挣扎时，应立即停止进针或将针拔出，以免损伤或穿破食道以及误入气管。一般当灌胃针插入小鼠，大鼠或豚鼠后可将药物注入。常用的灌胃量小鼠为，大鼠，豚鼠为。m大、小鼠尾静脉注射小鼠 固定器。m先缓注少量药液，如无阻力，表示针头确实已进入静脉，可继续注入。m注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血或以消毒棉签(棉球)止血。m注意：鼠尾静脉有三根，左右两侧及背侧各一根，多采用左右两侧尾静脉。m大、小鼠腹腔注射 以一只手抓取和固定动物，使腹部向上，以及使鼠头稍朝下大约度角（头低位）。m使针头向前推进左右，再以度角穿过腹肌；定住针头，缓缓注入药液。