HAPSITE Smart 第11章 建立标准曲线

May 241file_name建立标准曲线建立标准曲线Calibration本章指南本章指南一、气体定量一、气体定量 1、气体的配置、气体的配置 2、方法调用、方法调用 3、方法编辑、方法编辑 4、方法保存、方法保存 5、数据查阅、数据查阅 May 242file_name三、三、Survey定量定量 1、气体的配置、气体的配置 2、方法调用、方法调用 3、方法编辑、方法编辑 4、数据查阅、数据查阅二、顶空定量二、顶空定量 1、标样配制、标样配制 2、注意事项、注意事项 3、方法编辑、方法编辑 4、样品分析、样品分析 3准备准备1L或或3L的气袋，先用氮气冲洗的气袋，先用氮气冲洗2次后，打入次后，打入少量甲醇溶剂，待挥发完全后，再用氮气将气袋少量甲醇溶剂，待挥发完全后，再用氮气将气袋清洗清洗2次；清洗干净后，用氮气将其充满，充气袋次；清洗干净后，用氮气将其充满，充气袋要注意不要充的过慢，以免将气袋冲爆。要注意不要充的过慢，以免将气袋冲爆。按照按照VOCs浓度换算公式，用微量进样针注入标浓度换算公式，用微量进样针注入标样，混合均匀后便可采集气袋，进行分析。样，混合均匀后便可采集气袋，进行分析。注：注：1、“VOCs浓度换算公式浓度换算公式”在资料中有相关在资料中有相关 文件。文件。2、本次实验参数为：、本次实验参数为：1L气袋、气袋、80ppm浓浓 度标样、打入体积为度标样、打入体积为1.5ul。一、气体定量一、气体定量1、气体配置、气体配置May 244file_name根据检测目标物的特性，如图选根据检测目标物的特性，如图选择框中方法，选择一个合适的方择框中方法，选择一个合适的方法运行。法运行。5运行方法，将气袋接在探头运行方法，将气袋接在探头处采样。采样后，等待方法处采样。采样后，等待方法运行结束后分析。运行结束后分析。May 246file_nameMay 247file_name选择选择“Calibrate”键。键。2、方法调用、方法调用May 248file_name选择之前做样的那个方法。选择之前做样的那个方法。如图！如图！May 249file_name进入到方法进入到方法编辑对话框，编辑对话框，被选中的方被选中的方法显示在图法显示在图中位置。中位置。选择选择“Browse”调用数调用数据文件，据文件，即用之前即用之前的方法分的方法分析的数据。析的数据。如下图所如下图所示。示。May 2410file_nameMay 2411file_name注意：所选方法注意：所选方法文件和数据文件文件和数据文件一定要一一对应，一定要一一对应，否则错误的选择否则错误的选择了数据文件，系了数据文件，系统会自动跳出对统会自动跳出对话框提示报错。话框提示报错。May 2412file_name数据文件调用好之后，需要数据文件调用好之后，需要更改几处参数，如图所示。更改几处参数，如图所示。1、“Conc.Ref”改为改为“Analyte”2、“Conc./Factor”改为改为“1”3、“Selection”勾选钩号勾选钩号以上四处参数修改完毕，以上四处参数修改完毕，点击点击“Start”4、点击、点击“Search Setting”,对对谱图中的定性参数进行修改。谱图中的定性参数进行修改。修改界面见下图。修改界面见下图。3、方法编辑、方法编辑May 2413file_name“Min Purity”改为改为“0.01”May 2414file_name在列表中，首先在空白数据表格中右键鼠标，在在列表中，首先在空白数据表格中右键鼠标，在选项中选择选项中选择“Clear All Empty Compound Entries”将体统没有识别的空白项去掉；将体统没有识别的空白项去掉；15“compound”表示物质的名称；表示物质的名称；“CAS#”表示物质在表示物质在NIST库中的编号；库中的编号；“Q.Ion”表示物质的特征离子片断；表示物质的特征离子片断；“Ret.Time”表示物质在色谱柱中的保留时间；表示物质在色谱柱中的保留时间；“Area”表示物质在色谱图中的峰面积；表示物质在色谱图中的峰面积；“Standard”表示物质的类别，有表示物质的类别，有“internal（内标）（内标）”和和“analyte（分析物）（分析物）”两种可供选择，只两种可供选择，只有内标物选择有内标物选择internal，其余物质均选择，其余物质均选择analyte“Conc”表示物质的浓度，根据我们标准物质的含量，自行输入。除了内标物质的浓度无法更改，其余表示物质的浓度，根据我们标准物质的含量，自行输入。除了内标物质的浓度无法更改，其余物质的浓度，用鼠标点击之后输入数字键便可以更改；物质的浓度，用鼠标点击之后输入数字键便可以更改；“IS Ref”表示内标物选择，如果为一种内标物，此项均为表示内标物选择，如果为一种内标物，此项均为1，无需修改，若标准物有两种或两种以上，无需修改，若标准物有两种或两种以上，便需要对其他物质进行修改。例如本例中，便需要对其他物质进行修改。例如本例中，TRIS为内标为内标1，BPFB为内标为内标2，系统会自动根据其出现的位，系统会自动根据其出现的位置将其余的物质与其匹配。置将其余的物质与其匹配。16file_name1、以上工作完成之后，需要将表格、以上工作完成之后，需要将表格模式更改为模式更改为“Calibrate Library”2、再运行一次、再运行一次“Start”。3、系统计算好之、系统计算好之后，选择后，选择“Calibration”，会出现一条标，会出现一条标准曲线。准曲线。May 2417file_name首先将编辑好的首先将编辑好的“Library”进行进行保存，点击保存，点击“Save Library”再将该方法进行保再将该方法进行保存，点击存，点击“View/Edit”,出出现下一页的对话框。现下一页的对话框。4、方法保存、方法保存May 2418file_name1、进入到了、进入到了“Methods Editor”对话框，对话框，选择选择“Search Model”下来菜单，下来菜单，选择选择“Qualitative&Quantitative”，对于之后的方法对于之后的方法进行定性和定量进行定性和定量分析。分析。2、点击、点击“Save”，进入，进入下一页对话框。下一页对话框。May 2419file_name将方法文件进行修改，将方法文件进行修改，点击点击“OK”完成操作。完成操作。注意：保存方法文件，注意：保存方法文件，一定要注意文件名是一定要注意文件名是否和系统默认的相同，否和系统默认的相同，若相同，保存的文件若相同，保存的文件会覆盖之前系统文件。会覆盖之前系统文件。May 2420file_name在正常分析样品时，可在正常分析样品时，可以选择编辑好的定量方以选择编辑好的定量方法运行。运行结束，选法运行。运行结束，选择谱图上方的按键，进择谱图上方的按键，进入到入到“Result Report”中，如下图所示。中，如下图所示。5、数据查阅、数据查阅May 2421file_name分选项共三项：分选项共三项：Summary、Qualitative、Quantitative返回返回May 2422file_name二、顶空定量二、顶空定量顶空方法，即水样的检测方法，其灵顶空方法，即水样的检测方法，其灵敏度较高，因此在配置标准样品时要敏度较高，因此在配置标准样品时要注意浓度。注意浓度。我们推荐配置成我们推荐配置成10ppb浓度的液体标浓度的液体标样。同气体定量方法中选用的标样相样。同气体定量方法中选用的标样相同，为同，为80ppm的混标。在的混标。在40ml顶空顶空瓶中加入瓶中加入20ml的蒸馏水，再选用微的蒸馏水，再选用微量进样针打入量进样针打入2.5ul的混标，混合均的混标，混合均匀后放入顶空仪中平衡匀后放入顶空仪中平衡15min，然后，然后将进样针插入顶空瓶中运行方法。将进样针插入顶空瓶中运行方法。若标样浓度过大，如若标样浓度过大，如2000ppm，可，可以先用以先用1000ml容量瓶配置成容量瓶配置成10ppb浓度的标液后，再向顶空瓶中加入浓度的标液后，再向顶空瓶中加入20ml的标液。的标液。1、标样配制、标样配制May 2423file_name需要特别注意的是，顶空的方法中，仪器是不自动打入内标的，换句话，需要特别注意的是，顶空的方法中，仪器是不自动打入内标的，换句话，在顶空的数据中是找不到在顶空的数据中是找不到TRIS和和BPFB两种仪器自带内标物。两种仪器自带内标物。因此进行顶空方法的定量，需要手动的添加内标物，以此来进行定量。因此进行顶空方法的定量，需要手动的添加内标物，以此来进行定量。我们选择的内标物为我们选择的内标物为“四溴氟苯四溴氟苯”CAS#460-00-4；其浓度为；其浓度为80ppm，打入打入2.5ul与与20ml的顶空瓶中，混合均匀后水中浓度为的顶空瓶中，混合均匀后水中浓度为10ppb。2、注意事项、注意事项May 2424file_name顶空的定量方法和前一节中顶空的定量方法和前一节中气体的定量方法相同，这里，气体的定量方法相同，这里，重复的内容将被省略。重复的内容将被省略。选择方法。选择方法。3、方法编辑、方法编辑May 2425file_name首先可以打开分析好的数据，将手动加入的内标首先可以打开分析好的数据，将手动加入的内标“四溴氟苯四溴氟苯”找到，找到，其出峰时间在顶空其出峰时间在顶空25min分析的方法中，大概在分析的方法中，大概在11min出现。出现。May 2426file_name上下两图为顶空定上下两图为顶空定量和气体定量的区量和气体定量的区别。别。顶空定量顶空定量气体定量气体定量由于顶空方法没有由于顶空方法没有加入加入TRIS和和BPFB两种内标，因此系两种内标，因此系统在定性时，在统在定性时，在Library中没有出现。中没有出现。May 2427file_name首先将内标首先将内标“四四溴氟苯溴氟苯”找到。找到。可以根据其出峰可以根据其出峰时间来判断，也时间来判断，也可以根据名称或可以根据名称或CAS#。然后将其下拉菜然后将其下拉菜单中单中“Analyte”改为改为“Internal”，这样做的目的是这样做的目的是手动指定内标物。手动指定内标物。May 2428file_name再运行了第二次再运行了第二次“Start”之后，系统已经将标准曲线生之后，系统已经将标准曲线生成。之前我们手动选择的内标成。之前我们手动选择的内标“四溴氟苯四溴氟苯”将自动跳到第将自动跳到第一行中，其内标编号也改为一行中，其内标编号也改为1，其余所有物质均根据它的，其余所有物质均根据它的编号自动进行了更改。编号自动进行了更改。May 2429file_name最后需要重点强调的是，运行顶空定量方法，每次运行最后需要重点强调的是，运行顶空定量方法，每次运行前，需要手动打入和制作定量方法时同样量的内标物，前，需要手动打入和制作定量方法时同样量的内标物，即即“四溴氟苯四溴氟苯”，本例中，在运行样品时，需要向，本例中，在运行样品时，需要向40ml的顶空瓶中打入的顶空瓶中打入80ppm的四溴氟苯的四溴氟苯2.5ul。否则得。否则得话，系统会自动提示缺少内标，无法定量，没有定量报话，系统会自动提示缺少内标，无法定量，没有定量报告等。告等。4、样品分析、样品分析返回返回May 2430file_name三、三、Survey定量定量Survey定量只能针对气体，并且是单定量只能针对气体，并且是单一成分的气体，且浓度较大，因此在一成分的气体，且浓度较大，因此在重复使用时，需要对气袋进行多次清重复使用时，需要对气袋进行多次清洗，以保证上一次做样没有残留。洗，以保证上一次做样没有残留。1、配置气袋、配置气袋May 2431file_nameSurvey定量在选择定量在选择“Calibrate”后，选择方后，选择方法类型要改为法类型要改为“Survey”2、方法调用、方法调用May 2432file_name选择选择“Survey”方法方法May 2433file_name1、点击、点击“Brower”，选择，选择Survey方方法运行标样的数据。法运行标样的数据。2、更改参数，与气体定量方法一致。、更改参数，与气体定量方法一致。3、注意：和气体定量方法不一样、注意：和气体定量方法不一样的是，这时右下角的的是，这时右下角的“Start”键键是灰色的，需要点击是灰色的，需要点击“Display”按键，进入下页对话框。按键，进入下页对话框。3、方法编辑、方法编辑May 2434file_name首先将谱图放首先将谱图放到最大，鼠标到最大，鼠标双击谱图中的双击谱图中的峰，然后左键峰，然后左键选中下方的离选中下方的离子碎片图，再子碎片图，再右键将对话框右键将对话框激活，选择激活，选择“Grab Spectrum for Template”。May 2435file_name软件会自动找到该物质，定性的话需要软件会自动找到该物质，定性的话需要点击点击“NIST Search”，系统会将定性的，系统会将定性的结果输入到结果输入到“Compound”中。中。然后在然后在“Conc.”中输入浓度。中输入浓度。May 2436file_name选中选中“Calibrate Library”，点击，点击“Start”。这样标准曲线就已经建立好，右侧即为该物质的标准曲线。这样标准曲线就已经建立好，右侧即为该物质的标准曲线。May 2437file_name首先保存首先保存“library”然后保存方法，将然后保存方法，将“Search Mode”改为改为“Qualitative&Quantitative”。保存方法，。保存方法，即可。即可。May 2438file_name该数据该数据为采集为采集样品的样品的谱图。谱图。Survey定量根定量根据扫描的时间据扫描的时间进行区分。具进行区分。具体结果见下页体结果见下页报告。报告。4、数据查阅、数据查阅May 2439file_name选择选择“Search Reports”，再选择，再选择“Quantitative”，定量的结果便可，定量的结果便可以出现。以出现。其中，定量的值是其中，定量的值是根据运行的时间进根据运行的时间进行区分。行区分。从表中可以看出，从表中可以看出，按照扫描的范围，按照扫描的范围，分为分为20-30；30-40；60-70，可以和上，可以和上一页的谱图进行对一页的谱图进行对比。比。结果也可以导入结果也可以导入Excel中中May 2440file_nameMay 2440file_name联系我们联系我们如有任何问题，请联系如有任何问题，请联系INFICON公司工程师公司工程师电话：电话：021-6209 3094