植物生理学实验三植物光合速率测定

实验实验3-1 红外线红外线CO2气体分析仪（气体分析仪（CB-1101）法测定植物光合速率）法测定植物光合速率一、实验目的理解植物光合速度测定的方法掌握红外线CO2分析仪测定植物光合速率的原理了解红外线CO2分析仪的操作方法本实验利用本实验利用CO2的变化的变化来测定。来测定。二、实验原理许多由异原子组成的气体分子对红外线都有特异的吸收带。CO2的红外吸收带有四处，其吸收峰分别在2.69m、2.77m、4.26m和14.99m处，其中只有4.26m的吸收带不与H2O的吸收带重叠，红外仪内设置仅让4.26m红外光通过的滤光片，当该波长的红外光经过含有CO2的气体时，能量就因CO2的吸收而降低，降低的多少与CO2的浓度有关，并服从朗伯-比尔定律。分别供给红外仪含与不含CO2的气体，红外仪的检测器便可通过检测红外光能量的变化而输出反映CO2浓度的电讯号。采用开放式气路系统：该系统用双气室IRGA,以气泵为动力，将流经同化室前的空气（参比气）泵入一个气室，流经同化室后的空气（样本气）泵入另一个气室（分析气室），最后将气体排空，由仪器指示参比气和样本气的CO2浓度差，根据流量、同化室中叶片的面积，求出叶片的光合速率。泵流量计进气样品IRGA（C2）参比IRGA(C1)叶室参比室排气植物材料植物材料：小白菜或者甘蓝型油菜：小白菜或者甘蓝型油菜仪器：仪器：CB-1101红外线红外线CO2气体分析仪气体分析仪三、材料三、材料与主要仪器与主要仪器CB-1101CB-1101操作面板及气路图四、实验步骤四、实验步骤1、仪器组装及调零：、仪器组装及调零：，打开电源预热5min打开气泵开关用碱石灰管分别连接面板上的“OUT”和“IN”。利用CO2调零调零调试仪器。调试仪器。2、样品测定、样品测定：将叶片正确放入叶室，并封闭叶室。将叶片正确放入叶室，并封闭叶室。打开开路开关按下初测按钮待数值稳定后按下测终按钮待数值稳定后按下完成按钮记录测定结果【需要记录起始CO2浓度浓度C1、测定完成后、测定完成后CO2浓度浓度C2，叶面温，叶面温度度t，气体流速，气体流速V】五、原始记录五、原始记录 V，C1，C2，S，t V为气体流速，单位L/min;C1，C2为测定启始和反应完成后的CO2浓度，单位L/L；S为光合测定的叶面积，单位为m2，本实验固定为6.510-4 m2；P为气压，单位 bar；t为同化室叶片表面温度，单位。S六、结果计算六、结果计算Pn-净光合速率（单位为molm-2s-1）七、分析讨论七、分析讨论1、测定时为何需要从高空采气？、测定时为何需要从高空采气？2、计算的结果为净光合速率，为什么？、计算的结果为净光合速率，为什么？3、本方法是否可以用于测定植物的呼吸速率，、本方法是否可以用于测定植物的呼吸速率，如果要测定呼吸速率操作过程中应注意什如果要测定呼吸速率操作过程中应注意什么么？4、如果要测定植物的实际光合速率，应如何、如果要测定植物的实际光合速率，应如何操作？操作？5、结合结合自已的自已的植物光合速率结果进行分析讨植物光合速率结果进行分析讨论。论。实验实验3-2 叶绿素含量的测定叶绿素含量的测定一、实验目的二、实验原理1、吸光度具有加和性：混和溶液在某一波长下的吸光度为各组分在该波长下吸光度之和。不同组分在某波长下具有不同的吸光系数。2、叶绿素在红光区具有最大吸收峰，但在不同溶剂下有不同的最大吸收峰波长 在95%乙醇中，叶绿素a和叶绿素b的最大吸收峰的波长分别为665nm和649nm，两者的浓度可根据以下方程组计算求得：Ca=13.95A6656.88A649Cb=24.96A6497.32A665三、三、实验实验材料材料与仪器与仪器实验材料实验材料：小白小白菜叶片或油菜叶片菜叶片或油菜叶片主要仪器：分光光度计主要仪器：分光光度计四、实验步骤称取叶片称取叶片0.050.1g，剪碎或撕碎后剪碎或撕碎后放放入入10mL刻度试管中，加入刻度试管中，加入56mL 95%乙醇，乙醇，置置80水浴锅中，至组织水浴锅中，至组织完全完全变白，取出冷变白，取出冷却却。用用95%乙醇定容至乙醇定容至10mL，摇匀。以，摇匀。以95%乙醇为空白，在波长乙醇为空白，在波长665nm、649nm下测定下测定吸光度。吸光度。五、原始数据记录五、原始数据记录 A665，A649，W，V六六、结果计算结果计算Ca (mg/L)=13.95A665 6.88A649 Cb (mg/L)=24.96A649 7.32A665 叶叶绿素素总浓度度(mg/L)=Ca +Cb 叶叶绿素的比素的比值=Ca Cb叶绿叶绿素的素的含量(mg/g)七、分析讨论七、分析讨论1、结合叶绿素的比值和叶绿素的含量进行分结合叶绿素的比值和叶绿素的含量进行分析讨论。析讨论。2、叶绿素在蓝光区也有吸收峰，为何不用蓝、叶绿素在蓝光区也有吸收峰，为何不用蓝光波长进行比色测定？光波长进行比色测定？