高二生物PCR技术

高二生物高二生物PCRPCR技术技术温故知新1组成DNA分子的基本单位是什么?这些基本单位是如何连接成DNA分子的?DNA分子结构有什么特点？脱脱氧氧核核苷苷酸酸脱氧核苷脱氧核苷磷酸磷酸脱氧脱氧核糖核糖含氮含氮碱基碱基嘌呤嘌呤嘧啶嘧啶腺嘌呤（腺嘌呤（A A）鸟嘌呤（鸟嘌呤（G G）胞嘧啶（胞嘧啶（C C）胸腺嘧啶（胸腺嘧啶（T T）12345碱基碱基OHOOPOHOOHOOPOHO碱基碱基OHOHOOPOHO碱基碱基OOHOOPOHOOH碱基碱基碱基碱基碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖磷酸基团磷酸基团磷酸基团磷酸基团碱基碱基碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖碱基碱基碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖脱氧核糖53脱氧核苷酸链结构简图脱氧核苷酸链结构简图磷酸二酯键磷酸二酯键5533DNADNA分子的复制需要哪些条件？分子的复制需要哪些条件？DNADNA分子的复制过程是怎样的？分子的复制过程是怎样的？温故知新2DNA母链：提供复制的模板解旋酶：打开DNA双链4种脱氧核苷酸：合成子链的原料DNA聚合酶：催化合成DNA子链ATP：为复制过程提供能量引物：使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸DNADNA复制的条件复制的条件一、PCR原理：PCR（多聚酶链式反应）技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。DNA母链：提供复制的模板解旋酶：打开DNA双链4种脱氧核苷酸：合成子链的原料DNA聚合酶：催化合成DNA子链ATP：为复制过程提供能量引物：使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸PCRPCR反应的条件反应的条件8010080100耐热的耐热的DNADNA聚合酶聚合酶缓冲溶液：缓冲溶液：维持反应的维持反应的pHpH值不变值不变二、二、PCRPCR反应的过程反应的过程1 1、变性：、变性：温度上升到温度上升到9090以上以上时时,双链双链DNADNA解聚解聚成为单链。成为单链。2 2、复性（退火）：、复性（退火）：温度下降到温度下降到5050左右左右,引引物与模板物与模板DNADNA单链单链的互补序列配对的互补序列配对结合结合。3 3、延伸：、延伸：温度上升到温度上升到7272左右左右,溶液中溶液中的的4 4种脱氧核苷酸在种脱氧核苷酸在Taq Taq DNADNA聚合酶聚合酶的的作用下作用下,根据碱基互补配对的原则根据碱基互补配对的原则合成合成新的新的DNADNA链链。