食品生物技术-第四章-细胞工程ppt课件

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我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物第四章 细胞工程与食品工业第四章 细胞工程与食品工业1 1我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物主要内容n细胞工程的概念、研究范畴细胞工程的概念、研究范畴n植物细胞培养植物细胞培养n动物细胞培养动物细胞培养n细胞融合技术细胞融合技术n在食品工业中的应用在食品工业中的应用主要内容细胞工程的概念、研究范畴2 2我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物第一节、概述第一节、概述 利用利用细细胞生物学和分子生物学技胞生物学和分子生物学技术术,应应用工程学的方法,在用工程学的方法,在细细胞水平上研究改造胞水平上研究改造生物生物遗传遗传特性和生物学特性,从而特性和生物学特性,从而获获得特定得特定的的细细胞、胞、细细胞胞产产品或新生物品种的一品或新生物品种的一门综门综合合性科学技性科学技术术。细胞工程的核心技术:细胞培养与繁殖 目的:获得新性状、新个体、新物质1 细胞工程的概念及研究范畴细胞工程的概念及研究范畴第一节、概述 利用细胞生物学和分子生物学技术,应用工3 3我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物研究范畴研究范畴研究对象:植物细胞、动物细胞、微生物细胞根据改造遗传物质的不同层次可分为:大规模细胞培养细胞融合细胞拆合(核移植、细胞器移植)染色体工程胚胎工程(胚胎培养、胚胎移植)研究范畴研究对象:植物细胞、动物细胞、微生物细胞4 4我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物1、细胞培养细胞培养是指微生物细胞、植物细胞、动物细胞在人工提供的体外条件下进行生长和繁殖。三个层次:单个细胞培养、组织培养、器官培养微生物一般划分到发酵工程植物细胞和原生质体的培养可以用于育种,优良植株的快速生长。动物细胞培养多用于产生有价值的细胞产物,如疫苗。产品检测、疾病治疗。1、细胞培养细胞培养是指微生物细胞、植物细胞、动物细胞在人工5 5我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 1 1)植物)植物细细胞和胞和组织组织培养技培养技术术 1)植物细胞和组织培养技术6 6我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 2 2)动动物物细细胞和胞和组织组织培养技培养技术术 2)动物细胞和组织培养技术 7 7我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 3 3)细细胞融合技胞融合技术术(体(体细细胞胞杂杂交交技技术术)细胞融合是指利用人工和自然的方法将两个或几个不同亲本细胞融合成一个细胞,用于改良或创造新的物种及生产单克隆抗体。四个步骤:细胞标记-融合的细胞进行遗传标记原生质体的制备-酶法破处细胞壁诱导细胞融合-两种或两种以上细胞按一定比例置于高渗溶液,加入诱导剂或物理方法促进融合筛选杂合细胞-利用遗传标记,筛选有双亲遗传特性的的杂合细胞。3)细胞融合技术(体细胞杂交技术)8 8我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物4)细胞拆合细胞拆合是指通过物理或化学的方法将完整细胞的细胞核和细胞质分离开,或将细胞核吸出来,再将同种或异种的细胞核和细胞质重新组合起来,培育成新的细胞或新的生物个体的过程,也包括各种细胞器的分离和重新组合。最早:紫外线、激光破坏细胞核,再用微吸管将其它细胞核注入后期:用微吸管将细胞核吸出,再注入其它去核细胞中,进行融合。4)细胞拆合细胞拆合是指通过物理或化学的方法将完整细胞的细胞9 9我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物4 4)细细胞拆合胞拆合核核移植技移植技术术4)细胞拆合核移植技术1010我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物5 5)染色体工程技)染色体工程技术术染色体工程是按人染色体工程是按人们的需要来添加、削减或替的需要来添加、削减或替换生物生物的染色体从而定向改的染色体从而定向改变遗传特性和特性和选育新品种的一种技育新品种的一种技术。主要分主要分为动物物染色体工程和植物染色体染色体工程和植物染色体工程工程.动物染色体工程主要染色体工程主要采用对细胞进行微操作的方法(如微细胞转移方法等)来达到转移基因的目的.植物细胞工程目前主要是主要是利用传统的杂交回交等方法来达到添加、消除或置换染色体的目的。5)染色体工程技术染色体工程是按人们的需要来添加、削减或1111我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物6 6)胚胎工程技)胚胎工程技术术胚胎工程技术是一项综合性繁殖生物学技术,主要包括体胚胎移植和分割技术、卵母细胞体外成熟和移植技术、胚胎冷冻保存、克隆动物及临床移植治疗疾病6)胚胎工程技术 胚胎工程技术是一项综合性繁殖生物学技1212我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物7 7)干)干细细胞和胞和组织组织工程工程7)干细胞和组织工程1313我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物8 8)细细胞培养生物反胞培养生物反应应器器8)细胞培养生物反应器1414我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物2 2、植物细胞工程的应用、植物细胞工程的应用2、植物细胞工程的应用1515我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物食品生物技术-第四章-细胞工程ppt课件1616我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物食品生物技术-第四章-细胞工程ppt课件1717我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物食品生物技术-第四章-细胞工程ppt课件1818我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物食品生物技术-第四章-细胞工程ppt课件1919我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 紫杉醇紫杉醇(taxol)(taxol)是从是从红红豆杉属豆杉属(Taxus L.)(Taxus L.)植物中植物中分离出的一个具有独特抗分离出的一个具有独特抗肿肿瘤活性的二瘤活性的二萜类萜类化合物,化合物,现现已已应应用于用于临临床治床治疗疗卵巢卵巢癌和乳腺癌。癌和乳腺癌。紫杉醇(taxol)是从红豆杉属(Taxus L.)2020我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物三、三、动物细胞工程的应用动物细胞工程的应用1.在疫苗生在疫苗生产产上的上的应应用用。将将乙型肝炎表面抗原基因插入哺乳乙型肝炎表面抗原基因插入哺乳动动物物细细胞内胞内进进行高行高效表达,已生效表达,已生产产出乙型肝炎疫苗。出乙型肝炎疫苗。2.生生产单单克隆抗体克隆抗体 单单克隆抗体可以克隆抗体可以检测检测出多种病毒中非常出多种病毒中非常细细微的株微的株间间差异,差异,鉴鉴定定细细菌的种型和菌的种型和亚亚种。种。3.繁育繁育优优良品种良品种。目前,人工受精、胚胎移植等技目前,人工受精、胚胎移植等技术术已广泛已广泛应应用于畜牧用于畜牧业业生生产产。4.在干在干扰扰素生素生产产上的上的应应用用 三、动物细胞工程的应用1.在疫苗生产上的应用。2.生产单2121我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 是指动物、植物和微生物细胞在体外无菌条是指动物、植物和微生物细胞在体外无菌条件下的生长、分裂和繁殖,并在培养过程中不再件下的生长、分裂和繁殖,并在培养过程中不再形成组织的一项技术。形成组织的一项技术。细细胞培养胞培养第二节、植物细胞培养技术第二节、植物细胞培养技术 是指动物、植物和微生物细胞在体外无菌条件下的生长、2222我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物一、一、植物细胞工程的发展植物细胞工程的发展细细胞学胞学说说的的创创立:立:1838183818391839年年间间由德国的由德国的植物学家施莱登(植物学家施莱登(SchleidenSchleiden)和)和动动物学家施旺物学家施旺(SchwannSchwann)所提出)所提出,直到直到18581858年才年才较较完善。完善。理理论论基基础础和探索和探索一、植物细胞工程的发展细胞学说的创立:18381832323我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物19021902年,德国著名植物生理学家年,德国著名植物生理学家Haberlandt,Haberlandt,提出提出细细胞全能性学胞全能性学说说,并,并首首次次进进行高等植物的行高等植物的细细胞培养胞培养实验实验,但,但细细胞胞未能未能发发生生细细胞分裂和增殖。胞分裂和增殖。17561756年,年,MonceanMoncean首先首先发现发现植物在植物在受受伤伤愈合的愈合的组织组织皮皮层层能能产产生芽生芽,因而,因而预预言言这这一一途径可以成途径可以成为为一种繁殖方式一种繁殖方式1902年,德国著名植物生理学家Haberlandt,2424我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物培养技培养技术术建立建立培养技术建立2525我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物植物植物细细胞培养技胞培养技术应术应用用发发展展20世世纪纪40年代:年代:J.Bonner 银银胶菊胶菊组织组织培养生培养生产产橡胶。橡胶。20世世纪纪70年代:植物年代:植物细细胞培养生胞培养生产药产药用成份。用成份。20世世纪纪80年代:年代:400多种植物,多种植物,600多种代多种代谢产谢产物。物。40多种多种植物次生代植物次生代谢产谢产物达到或超物达到或超过过植株植株产产量。量。20世世纪纪90年代:年代:1000多种植物。多种植物。植物细胞培养技术应用发展20世纪40年代:J.Bonne2626我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 1.首先,首先,要取材和除菌要取材和除菌。用一定的化学。用一定的化学试剂对试剂对材料材料进进行行严严格的表面清洗、消毒。有格的表面清洗、消毒。有时还时还要借助某些特定的要借助某些特定的酶酶,对对材料材料进进行行预处预处理,以期得到分散生理,以期得到分散生长长的的细细胞。胞。常用的消毒常用的消毒灭灭菌菌剂剂:效果效果较较好的有几种化学好的有几种化学试剂试剂,如,如次次氯氯酸酸钙钙、次、次氯氯酸酸钠钠和和氯氯化汞化汞等。等。二、细胞培养一般步骤二、细胞培养一般步骤 1.首先,要取材和除菌。用一定的化学试剂对材料2727我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 2.其次,根据各其次,根据各类细类细胞的特点,配制胞的特点,配制细细胞培养基,胞培养基,对对培养基培养基进进行行灭灭菌或除菌。采用无菌操作技菌或除菌。采用无菌操作技术术,将,将生物材料生物材料接种于培养基接种于培养基中。中。3.最后,将接种后的培养基放入培养室或培养箱中,最后,将接种后的培养基放入培养室或培养箱中,提供提供各各类细类细胞生胞生长长所需的最佳培养条件所需的最佳培养条件。当。当细细胞达到一定生物胞达到一定生物量量时应时应及及时时收收获获或或传传代。代。2.其次,根据各类细胞的特点,配制细胞培养基2828我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物三三.植物细胞培养基植物细胞培养基植物植物细细胞的培养基胞的培养基:通常包括通常包括无机无机盐盐、碳源、碳源、维维生素、生生素、生长调节长调节素、有机添加素、有机添加剂剂等。等。用于植物用于植物细细胞培养的基胞培养的基础础培养基培养基营营养成分基本上养成分基本上与整个植物的要求一与整个植物的要求一样样,但是用于培养,但是用于培养细细胞、胞、组织组织和和器官的培养基要器官的培养基要满满足各自特殊的要求足各自特殊的要求三.植物细胞培养基植物细胞的培养基:通常包括无机盐、碳源2929我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物培养中的培养中的细细胞胞对对蔗糖和葡萄糖蔗糖和葡萄糖都能利用,都能利用,果糖的利用效果果糖的利用效果较较差。培养基中的蔗糖可迅差。培养基中的蔗糖可迅速分解成葡萄糖和果糖,葡萄糖首先被利用,速分解成葡萄糖和果糖,葡萄糖首先被利用,然后再利用果糖。也可采用其它糖作能源,然后再利用果糖。也可采用其它糖作能源,但效果不佳。但效果不佳。碳源和能源碳源和能源培养中的细胞对蔗糖和葡萄糖都能利用,果糖的利用效果较差。3030我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 培养中的植物培养中的植物细细胞都需要胞都需要硫胺素硫胺素,加入,加入烟烟酸、泛酸、生物素和叶酸酸、泛酸、生物素和叶酸,效果更好。原生,效果更好。原生质质体培养通常需要大多数必需体培养通常需要大多数必需维维生素。生素。维生素维生素 培养中的植物细胞都需要硫胺素,加入烟酸、泛酸、生物3131我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物虽虽然植物然植物细细胞在培养胞在培养过过程中一般都能合成所需的氨基酸,程中一般都能合成所需的氨基酸,但加入但加入L-L-谷氨谷氨酰酰胺胺或其他氨基酸混合物是很有好或其他氨基酸混合物是很有好处处的。此的。此外,外,还还使用使用蛋白蛋白酶酶解解产产物物,如酪蛋白或酪蛋白水解氨基酸。,如酪蛋白或酪蛋白水解氨基酸。其它有机添加其它有机添加剂还剂还有如乳蛋白水解物,酵母提取物等有如乳蛋白水解物,酵母提取物等氨基酸氨基酸虽然植物细胞在培养过程中一般都能合成所需的氨基酸,但加入3232我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物激素分激素分为为两两类类,生生长长素和分裂素素和分裂素。生。生长长素促素促进细进细胞生胞生长长,最有效和最常用的是,最有效和最常用的是吲哚吲哚乙酸和乙酸和萘萘乙酸乙酸;分裂素促分裂素促进细进细胞分裂,常用的是腺胞分裂,常用的是腺嘌嘌呤衍生物。使呤衍生物。使用最多的是用最多的是6-6-苄苄氨基氨基嘌嘌呤和玉米素呤和玉米素,对对芽的芽的诱导诱导具具有重要作用。分裂素和生有重要作用。分裂素和生长长素通常一起使用,来促素通常一起使用,来促进细进细胞的分裂、生胞的分裂、生长长。植物生长激素植物生长激素植物生长激素3333我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物四四.愈伤组织和悬浮细胞培养技术愈伤组织和悬浮细胞培养技术愈愈伤组织伤组织:是指外植体:是指外植体组织组织增生的增生的细细胞胞产产生的一生的一团团不定型不定型的疏散的排列的薄壁的疏散的排列的薄壁细细胞,是分化的,而且胞,是分化的,而且还还未形成未形成组织组织的的结结构。构。外植体:外植体:是指植物是指植物组织组织培养中用来培养中用来进进行离体培养的植物材行离体培养的植物材料。料。四.愈伤组织和悬浮细胞培养技术愈伤组织:是指外植体组织增生的3434我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物愈愈伤组织伤组织的的诱导诱导选择选择适宜的外植体:幼胚、下胚适宜的外植体:幼胚、下胚轴轴、子叶、子叶选择选择适宜的培养基:适宜的培养基:MSMS,B5B5,N6N6较较高激素高激素浓浓度度丰富的有机附加物。丰富的有机附加物。培养基中有培养基中有较较高含量的无机氮源高含量的无机氮源较较低的蔗糖低的蔗糖浓浓度度适当适当缩缩短短继继代培养的代培养的间间隔隔时间时间有利于疏松易碎愈有利于疏松易碎愈伤组伤组织织的形成。的形成。愈伤组织的诱导选择适宜的外植体:幼胚、下胚轴、子叶3535我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物要求:松散性好、增殖快、再生能力要求:松散性好、增殖快、再生能力强强。其外。其外观观一般是色一般是色泽泽呈呈鲜艳鲜艳的乳白或淡黄色,呈的乳白或淡黄色,呈细细小小颗颗粒状,疏松易碎粒状,疏松易碎适宜悬浮培养适宜悬浮培养适宜再生植株适宜再生植株要求:松散性好、增殖快、再生能力强。其外观一般是色泽呈鲜艳的3636我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物食品生物技术-第四章-细胞工程ppt课件3737我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物高表达高表达细细胞系的胞系的筛选筛选建立建立一是一是悬悬浮培养物分散性好,外浮培养物分散性好,外观观疏松、色疏松、色泽鲜艳泽鲜艳二是均一性好二是均一性好三是生三是生长长速度快、次生代速度快、次生代谢产谢产物合成能力物合成能力强强高表达细胞系的筛选建立一是悬浮培养物分散性好,外观疏松、色泽3838我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物五五.单细胞培养技术单细胞培养技术机械法机械法将叶肉将叶肉组织组织研碎,研碎,经过滤经过滤和离心,收集和和离心,收集和净净化化细细胞。胞。优优点:不受点:不受酶酶的的伤伤害,有利于害,有利于细细胞生理和生化研究。胞生理和生化研究。缺点:手工操作缺点:手工操作难难度大,度大,获获得完整的得完整的细细胞数量少。胞数量少。1 1、单细单细胞分离方法胞分离方法五.单细胞培养技术机械法将叶肉组织研碎,经过滤和离心,收3939我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物酶酶法法利用利用果胶果胶酶酶、纤维纤维素素酶酶处处理植物叶片或其他外植物体,理植物叶片或其他外植物体,使使细细胞分离。胞分离。加渗透加渗透压压保保护剂护剂如如甘露醇甘露醇以防以防酶酶对细对细胞的胞的损伤损伤。加加硫酸葡聚糖硫酸葡聚糖钾盐钾盐可提高游离可提高游离细细胞的胞的产产量。量。酶法利用果胶酶、纤维素酶处理植物叶片或其他外植物体,使细4040我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物化学法化学法 利用利用化学利用利用化学药剂药剂使使细细胞分离的方法。胞分离的方法。草酸草酸钙钙处处理胡理胡萝萝卜卜悬悬浮浮细细胞培养物胞培养物时时,可,可获获得分散得分散细细胞。胞。秋水仙碱、秋水仙碱、2,4D或或LH。化学法 利用利用化学药剂使细胞分离的方法。4141我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物看看护护培养培养2 2、单细单细胞培养方法胞培养方法用一用一块块活活跃跃生生长长的愈的愈伤伤组织组织来促来促进进培养培养细细胞持胞持续续分裂和增殖的方法。分裂和增殖的方法。优优点:点:简简便易行,效果好。便易行,效果好。缺点:缺点:不能在不能在显显微微镜镜下追踪下追踪细细胞胞分裂、生分裂、生长过长过程。程。看护培养2、单细胞培养方法用一块活跃生长的愈伤组织来促进培4242我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物平板培养平板培养 将将悬悬浮浮单细单细胞与融化胞与融化的的琼琼脂培养基均匀混合脂培养基均匀混合后平后平铺铺一薄一薄层层在培养皿在培养皿底上的培养法。底上的培养法。平板培养 将悬浮单细胞与融化的琼脂培养基均匀混合后平铺4343我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物平板培养植板率平板培养植板率优优点:点:单细单细胞在培养基中分布均匀,便于在胞在培养基中分布均匀,便于在显镜显镜下下对细对细胞胞进进行定点行定点观观察。察。筛选筛选效率高、效率高、筛选筛选量大、操作量大、操作简简便。便。缺点:缺点:通气状况不好,排泄物通气状况不好,排泄物质质易易积积累造成累造成 毒害或影响毒害或影响组织组织吸收。吸收。平板培养植板率优点:4444我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 在人工制造的无菌小在人工制造的无菌小室中,将一滴室中,将一滴悬悬浮浮细细胞胞液培养在少量培养基上,液培养在少量培养基上,使其分裂增殖成使其分裂增殖成细细胞胞团团的方法。的方法。微室培养微室培养 在人工制造的无菌小室中,将一滴悬浮细胞液培养在少量培4545我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物优优点:点:可可对对培养培养细细胞胞连续进连续进行行显显微微观观察,了解一个察,了解一个细细胞的生胞的生长长、分裂、分化等、分裂、分化等过过程。程。缺点:缺点:培养基少,培养基少,营营养和水分养和水分难难以保持,以保持,pH变动变动幅度大,培幅度大,培养养细细胞胞仅仅能短期分裂。能短期分裂。优点:4646我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物六六.提高植物细胞次级代谢产物含量的方法提高植物细胞次级代谢产物含量的方法加入前体物或加入前体物或诱导诱导物物前体物:前体物:次生代次生代谢谢合成途径中的某一中合成途径中的某一中间间化合物或化合物或是合成的起始物。是合成的起始物。诱导诱导物:物:一一类类能引起植物能引起植物细细胞代胞代谢谢强强度度变变化或代化或代谢谢途径改途径改变变的物的物质质。六.提高植物细胞次级代谢产物含量的方法加入前体物或诱导物 前4747我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物植物植物细细胞大胞大规规模培养在食品工模培养在食品工业业中的中的应应用用(1 1)利用植物)利用植物细细胞工程生胞工程生产产香料香料(2 2)生)生产产食品添加食品添加剂剂(3 3)生)生产产天然食品天然食品 七、植物细胞大规模培养七、植物细胞大规模培养植物细胞大规模培养在食品工业中的应用(1)利用植物细胞工程生4848我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物植物植物细细胞大胞大规规模培养的特点模培养的特点植物植物细细胞胞对对剪切力敏感。剪切力敏感。植物植物细细胞培养通常形成胞培养通常形成细细胞胞团团。植物植物细细胞生胞生长长速度慢,操作周期速度慢,操作周期长长 多泡沫。多泡沫。植物植物细细胞在高胞在高浓浓度培养度培养时为时为假塑性流体。假塑性流体。植物植物细细胞的需氧量要比微生物要低的多。胞的需氧量要比微生物要低的多。大多数植物大多数植物细细胞培养需要光照。胞培养需要光照。植物细胞大规模培养的特点植物细胞对剪切力敏感。4949我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物1.1.植物细胞悬浮细胞培养植物细胞悬浮细胞培养悬悬浮浮细细胞培养技胞培养技术术悬悬浮培养浮培养优势优势把离体的植物把离体的植物细细胞胞悬悬浮在液体培养基中浮在液体培养基中进进行增殖培养行增殖培养1 1)培养)培养细细胞与培养基胞与培养基质质接触面大,接触面大,传质传质效果好。效果好。2 2)可)可带带走有害的代走有害的代谢产谢产物,避免了有害物,避免了有害产产物局部物局部浓浓度度过过高高的的问题问题。3 3)能充分保)能充分保证证氧的供氧的供给给。1.植物细胞悬浮细胞培养悬浮细胞培养技术悬浮培养优势把离体的5050我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物2.2.植物细胞固定化培养植物细胞固定化培养 植物植物细细胞固定化是将植物胞固定化是将植物细细胞包裹于一些多糖胞包裹于一些多糖或多聚化合物上或多聚化合物上进进行培养,并生行培养,并生产产有用代有用代谢谢物的物的技技术术。固定化培养技固定化培养技术术2.植物细胞固定化培养 植物细胞固定化是将植物细胞包5151我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物(1)有利于次生物)有利于次生物质质的合成、的合成、积积累;累;(2)减弱剪切力减弱剪切力损伤损伤;(3)有利于)有利于连续连续培养和培养和产产物的收集;物的收集;固定化培养固定化培养优势优势(1)有利于次生物质的合成、积累;固定化培养优势5252我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物1 1)悬悬浮培养生物反浮培养生物反应应器器 植物植物细细胞大胞大规规模培养的初期(模培养的初期(20世世纪纪70年代),年代),主要采用微生物培养用的机械主要采用微生物培养用的机械搅搅拌反拌反应应器。器。1972年,年,Kato首先用机械首先用机械搅搅拌反拌反应应器培养烟草器培养烟草细细胞胞以以获获取烟碱。取烟碱。Fujita利用利用这这种反种反应应器生器生产产紫草宁。紫草宁。3.植物细胞培养生物反应器植物细胞培养生物反应器机械机械搅搅拌反拌反应应器器1)悬浮培养生物反应器 植5353我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物机械机械搅搅拌植物拌植物细细胞反胞反应应器器机械搅拌植物细胞反应器5454我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 机械机械搅搅拌反拌反应应器的器的优优点及存在的点及存在的问题问题 优优点:机械点:机械搅搅拌生物反拌生物反应应器最大的器最大的优优点就是点就是获获得得高的溶高的溶氧系数氧系数(KLa 100h-1),植物,植物细细胞培养一般只需要胞培养一般只需要KLa在在5-20 h-1之之间间就就够够了;再是反了;再是反应应器的器的温度、温度、pH值值、溶氧及、溶氧及营营养养物物质质的的浓浓度度较较易控制易控制。存在的存在的问题问题:主要:主要问题问题是是剪切力剪切力问题问题;对对只需只需较较低低kLa的植物的植物细细胞培养,促胞培养,促进进氧氧传递传递的机械的机械搅搅拌,每拌,每单单位体位体积积消消耗的功率比气体耗的功率比气体搅搅拌要大拌要大;机械;机械搅搅拌需拌需搅搅拌拌轴轴,由此又,由此又带带来了来了无菌密封无菌密封问题问题。机械搅拌反应器的优点及存在的问题 优点:机械搅拌5555我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物非机械非机械搅搅拌反拌反应应器器 通常通常为为气体气体搅搅拌反拌反应应器,是一种利用通入的空气器,是一种利用通入的空气作通气和作通气和搅搅拌的生物反拌的生物反应应器,主要有器,主要有鼓泡式反鼓泡式反应应器器和和气升式反气升式反应应器器,气升式反,气升式反应应器又可分器又可分为为外循外循环环和内循和内循环环式。式。我国的刘大我国的刘大陆陆、查丽查丽杭等杭等发发明了明了“气升内气升内错错流式流式”植物植物细细胞培养反胞培养反应应器用于培养紫草,紫草宁含量达到器用于培养紫草,紫草宁含量达到了干了干细细胞重的胞重的10%,是天然植株的,是天然植株的2-8倍。倍。非机械搅拌反应器 通常为气体搅拌反应器,是一种利5656我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物食品生物技术-第四章-细胞工程ppt课件5757我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物气体气体搅搅拌反拌反应应器的器的优优点及存在的点及存在的问题问题 优优点:点:剪切力小剪切力小,对对植物植物细细胞胞损伤损伤小;因没有小;因没有搅搅拌拌轴轴而更而更易保持无菌易保持无菌;操作操作费费用低用低。不足:因气体不足:因气体搅搅拌拌强强度低,度低,高密度培养高密度培养时时混合不混合不够够均均匀匀。靠大量的通气。靠大量的通气输输入入动动量和能量,以保量和能量,以保证证反反应应器内培器内培养液的良好养液的良好传质传质、传热传热。但。但过过量的通气易排除培养液中量的通气易排除培养液中的二氧化碳和乙的二氧化碳和乙烯烯,对对于于细细胞生胞生长长有阻碍作用。再是有阻碍作用。再是过过高的溶氧高的溶氧对对植物植物细细胞合成次胞合成次级级代代谢产谢产物不利物不利。气体搅拌反应器的优点及存在的问题 优点:剪切力小,5858我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物2)2)固定化固定化细细胞生物反胞生物反应应器器固定化固定化细细胞:将一定生理功能的生物体用物理或化学方胞:将一定生理功能的生物体用物理或化学方法使其与适当法使其与适当载载体相体相结结合,作合,作为为固体催化固体催化剂剂利用。利用。2)固定化细胞生物反应器固定化细胞:将一定生理功能的生5959我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物优优点:点:单单位体位体积细积细胞多,受剪切力小。胞多,受剪切力小。缺点:由于其混合效果低,缺点:由于其混合效果低,对对必要的氧必要的氧传递传递,pH值值、温度控制和气体、温度控制和气体产产物物(如如C02)的排除造的排除造成了困成了困难难。再者支持物。再者支持物颗颗粒破碎易堵塞填充床。粒破碎易堵塞填充床。填充床反填充床反应应器器Jones 在填充床反在填充床反应应器中器中进进行了固定化胡行了固定化胡萝萝卜的培卜的培养,养,Kargi 采用采用这这种反种反应应器培养器培养长长春花春花优点:单位体积细胞多,受剪切力小。填充床反应器Jones 在6060我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物流化床反流化床反应应器器优优点:良好的点:良好的传质传质特性。特性。缺点:剪切力和缺点:剪切力和颗颗粒碰撞会粒碰撞会损损坏固定化坏固定化细细胞,胞,同同时时,流体,流体动动力学的复力学的复杂杂性使之性使之难难以放大。以放大。典型的流化床反典型的流化床反应应器是利用液体或气体的流器是利用液体或气体的流动动使支持物使支持物颗颗粒粒处处于于悬悬浮状浮状态态。Hamilton 用之培养胡用之培养胡萝萝卜卜细细胞,研究了胞,研究了转转化化酶酶活性。活性。流化床反应器优点:良好的传质特性。典型的流化床反应器是利用液6161我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物膜反膜反应应器器优优点:可以重复使用。另外,流体易控制,易放大,点:可以重复使用。另外,流体易控制,易放大,而且能提供更均匀的而且能提供更均匀的环环境条件。膜具有境条件。膜具有选择选择性,有利于性,有利于产产品分离。品分离。缺点是构建膜反缺点是构建膜反应应器的成本器的成本较较高。高。膜反应器优点:可以重复使用。另外,流体易控制,易放大,而6262我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物第三节、动物细胞培养技术第三节、动物细胞培养技术第三节、动物细胞培养技术6363我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物 1919世世纪纪3030年代,年代,Muller,Schwann,Muller,Schwann,VirchowVirchow等相等相继继在肺在肺结结核、天花、水痘、麻疹核、天花、水痘、麻疹等病理等病理组织组织中中观观察到察到多核多核细细胞胞现现象。象。1849 1849年年LobingLobing在骨髓中也在骨髓中也发现发现了多核了多核现现象象的存在,的存在,18551855年年18581858年,科学家年,科学家们们在肺在肺组织组织和各种正常和各种正常组织组织及及发发尖和坏死部位都尖和坏死部位都发现发现了多了多核核细细胞。胞。1 1融合现象的发现融合现象的发现一、一、动物物细胞工程的发展动物物细胞工程的发展 19世纪30年代,Muller,Schwann,V6464我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物18591859年,年,A.BarliA.Barli在研究黏虫的生活史在研究黏虫的生活史时发时发现现,某些黏虫存在着由,某些黏虫存在着由单单个核个核细细胞融合形成多胞融合形成多核的原生核的原生质团质团的情况。据此,他的情况。据此,他认为认为多核多核细细胞胞是由是由单单个个细细胞彼此融合而形成的胞彼此融合而形成的。1859年,A.Barli在研究黏虫的生活史时发现,某些黏6565我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物2.2.动物组织细胞培养技术的建立动物组织细胞培养技术的建立19071907年,年,R.HarrisonR.Harrison将将蛙的胚神蛙的胚神经经管区的管区的一片一片组织组织移植到蛙的淋巴液凝移植到蛙的淋巴液凝块块中,中,这这片片组组织织存活了若干星期存活了若干星期,而且,而且还还长长出了出了轴轴突突(神神经经纤维纤维)细细胞。胞。Carrel(1911)Carrel(1911)发现发现了了鸡鸡胚浸出液胚浸出液对对于某些于某些细细胞的生胞的生长长具有很具有很强强的促的促进进效效应应,把,把无菌技无菌技术术引到了引到了组织组织培养技培养技术术中中。2.动物组织细胞培养技术的建立 1907年,R.Harr6666我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物19141914年,年,ThomsonThomson创创立了立了器官培养法器官培养法,以,以后被后被StrangewaysStrangeways和和FellFell所所发发展。展。19401940年,年,EarleEarle建立了建立了小鼠的小鼠的结缔组织细结缔组织细胞系胞系L L系。系。19511951年,年,GayGay建立了第一个建立了第一个人人体体细细胞系胞系.1914年,Thomson创立了器官培养法,以后被Stran6767我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物3.3.细胞融合技术的建立和杂交瘤技术的诞生细胞融合技术的建立和杂交瘤技术的诞生19581958年年,Okada,Okada发现发现紫外紫外灭灭活的活的仙台病毒仙台病毒可引起艾氏腹水瘤可引起艾氏腹水瘤细细胞彼此融合。胞彼此融合。Harris(1965)Harris(1965)诱导诱导不同的不同的动动物体物体细细胞融合胞融合获获得成功得成功。Lifflefield(1964)Lifflefield(1964)根据根据亲亲本本细细胞的胞的酶酶缺陷型,利用缺陷型,利用选择选择性性培养基培养基筛选筛选异型融合异型融合细细胞胞,并能不断地,并能不断地增殖增殖。19751975年,免疫学家年,免疫学家KohlerKohler和和MilsteinMilstein利用小鼠脾利用小鼠脾细细胞与小胞与小鼠骨髓瘤鼠骨髓瘤细细胞融合,胞融合,选择选择到能分泌到能分泌单单一抗体的一抗体的杂杂种种细细胞胞。3.细胞融合技术的建立和杂交瘤技术的诞生 1958年,O6868我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物4.4.动物克隆技术的建立动物克隆技术的建立18911891,HeapeHeape等人首次等人首次报报道了家道了家兔胚胎移植兔胚胎移植成功的成功的结结果。果。2020世世纪纪3030年代以后,先后在羊、猪、牛等年代以后,先后在羊、猪、牛等动动物的胚胎移植上物的胚胎移植上获获得成功。得成功。19621962年,英国学者年,英国学者GrudonGrudon把非洲把非洲爪蟾小爪蟾小肠肠上皮上皮细细胞的核胞的核注入注入同种或异种非洲爪蟾未受精卵同种或异种非洲爪蟾未受精卵(经经紫外紫外线线照射照射杀杀死卵死卵细细胞核胞核)中,中,约约有有1 1的重的重组组卵卵发发育成育成为为成熟蛙成熟蛙。19971997年年2 2月,英国科学家月,英国科学家WilmutWilmut等等报报道了世界第一只道了世界第一只克隆羊克隆羊的的诞诞生。生。4.动物克隆技术的建立 1891,Heape等人首次报道了6969我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物1.1.过程过程二、动物细胞培养二、动物细胞培养1.过程二、动物细胞培养7070我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物2.2.几个概念:几个概念:动动物物细细胞培养就是胞培养就是从从动动物机体中取出相关的物机体中取出相关的组织组织,将它分散成将它分散成单单个个细细胞胞,然后然后,放在适宜的培养放在适宜的培养基中基中,让这让这些些细细胞生胞生长长和和增殖增殖,并并维维持持结结构和功能构和功能的一的一门门技技术术。动动物物细细胞培养胞培养2.几个概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组7171我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物将将动动物物组织组织消化后的初次培养称消化后的初次培养称为为原代原代培养培养。原代培养和原代培养和传传代培养代培养用胰蛋白用胰蛋白酶酶将出将出现现接触抑制的接触抑制的贴贴壁壁细细胞胞从培养瓶壁上脱离下来,制成从培养瓶壁上脱离下来,制成细细胞胞悬悬液,液,分装到多个培养瓶中分装到多个培养瓶中继续继续培养,培养,这这个个过过程程叫叫传传代培养代培养。将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。原代培养和传代培养7272我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物细细胞系和胞系和细细胞株胞株初次培养的初次培养的细细胞胞经经第一次第一次传传代成功后,即称之代成功后,即称之为为细细胞系胞系。从一个从一个经过经过生物学生物学鉴鉴定的定的细细胞系用胞系用单细单细胞分胞分离培养或通离培养或通过筛选过筛选方法,方法,由由单细单细胞增殖形成的胞增殖形成的细细胞群胞群,称,称细细胞株胞株。细胞系和细胞株从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养7373我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物有限有限细细胞系和无限胞系和无限细细胞系胞系大多数大多数细细胞系在胞系在有限的代数内增殖有限的代数内增殖,当超,当超过过有限世有限世代后,它代后,它们们可能有两种情况,一是衰老死亡,二是可能有两种情况,一是衰老死亡,二是发发育成无限育成无限细细胞系或称胞系或称连续细连续细胞系胞系。有限有限细细胞系胞系转换转换成永久成永久细细胞系的胞系的过过度期称度期称为转换为转换期,期,其其转换过转换过程在程在动动物物细细胞培养中称胞培养中称为为体外体外转转化化。有限细胞系和无限细胞系大多数细胞系在有限的代数内增殖,当超7474我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物接触抑制接触抑制密度抑制密度抑制3.动物细胞培养生长的特点动物细胞培养生长的特点贴贴附生附生长长接触抑制密度抑制3.动物细胞培养生长的特点贴附生长7575我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物贴贴附生附生长长 粘附型粘附型细细胞胞:附着在某一固相支持物表面才能生附着在某一固相支持物表面才能生长长的的细细胞。胞。悬悬浮型浮型细细胞胞:不必附着于固相支持物表面,而在不必附着于固相支持物表面,而在悬悬浮状浮状态态下即可生下即可生长长的的细细胞。胞。绝绝大多数有机体大多数有机体细细胞属粘附型胞属粘附型细细胞,只有少数胞,只有少数细细胞胞类类型型如某些如某些肿肿瘤瘤细细胞和白胞和白细细胞胞可在可在悬悬浮状浮状态态下生下生长长。贴附生长 粘附型细胞:附着在某一固相支持物表面才能生长7676我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物细细胞接触抑制胞接触抑制 细细胞在胞在贴贴壁生壁生长过长过程中,程中,细细胞胞间间相互接触,相互接触,细细胞分裂和胞分裂和生生长长停止的停止的现现象。象。细胞接触抑制 细胞在贴壁生长过程中,细胞间相互接触,细7777我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物密度抑制密度抑制细细胞培养胞培养过过程中,程中,细细胞密度增大,培养液中胞密度增大,培养液中营营养成分养成分减少,代减少,代谢产谢产物增多,物增多,细细胞因胞因营营养的枯竭和代养的枯竭和代谢谢物的影响物的影响而而导导致的致的细细胞分裂和生胞分裂和生长长停止停止。细细胞在体内、外的粘附方式存在差异胞在体内、外的粘附方式存在差异体内:粘附是全方位,外形具有复体内:粘附是全方位,外形具有复杂杂的立体特征的立体特征体外:多数情况,体外:多数情况,细细胞只有一个附着平面,外形一般与体胞只有一个附着平面,外形一般与体内内时时明明显显不同不同密度抑制细胞培养过程中,细胞密度增大,培养液中营养成分减7878我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物上皮上皮细细胞型胞型成成纤维细纤维细胞型胞型游走游走细细胞型胞型多型性多型性细细胞型胞型4、培养动物细胞形态、培养动物细胞形态上皮细胞型4、培养动物细胞形态7979我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物类类似体内的上皮似体内的上皮细细胞,胞,扁平,不扁平,不规则规则多角形,多角形,中有中有圆圆形核形核。彼此。彼此紧紧密相密相连连成成铺铺石状薄石状薄层层;生;生长时长时呈呈膜状移膜状移动动;很少脱离;很少脱离细细胞群而胞群而单单个活个活动动上皮上皮细细胞型胞型类似体内的上皮细胞,扁平,不规则多角形,中有圆形核。彼此紧8080我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物胞体胞体梭形或不梭形或不规则规则三角形三角形;胞;胞质质向外伸出向外伸出2 23 3个个长长短不等的短不等的细细胞突起胞突起;中有;中有卵卵圆圆形核形核。排列成放射。排列成放射状,漩状,漩涡涡状,不状,不连连成片。成片。成成纤维细纤维细胞型胞型胞体梭形或不规则三角形;胞质向外伸出23个长短不等的细胞8181我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物游走游走细细胞型胞型外形不外形不规则规则且不断且不断变变化化,细细胞内容易出胞内容易出现现暗暗的的吞噬性吞噬性颗颗粒粒。生。生长长位位置不固定,分散,呈活置不固定,分散,呈活跃跃的的游走和的的游走和变变形运形运动动。游走细胞型外形不规则且不断变化,细胞内容易出现暗的吞噬性颗8282我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到
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