杨国东--生物安全

临床实验室生物安全规范要点呼和浩特市第一医院检验科杨国东 保证实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，避免实验室人员、来访人员、社区及环境受到不可接受的损害，符合 相关法规、标准等对实验室保证生物安全责任的要求。一、实验室生物安全 二、国家根据实验室防护水平，将实验室分为以下四级：一级生物安全防护实验室，简称一级生物安全防护实验室，简称BSL1BSL1或或P1P1二级生物安全防护实验室，简称二级生物安全防护实验室，简称BSL2BSL2或或P2P2三级生物安全防护实验室，简称三级生物安全防护实验室，简称BSL3BSL3或或P3P3四级生物安全防护实验室，简称四级生物安全防护实验室，简称BSL4BSL4或或P4P4一级生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。二级生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在对人或环境具有中等潜在危害的微生物危害的微生物。临床诊断、检测检验工作可以在二级实验室中进行。但是，发现高致病性病原微生物的，其病原学的分离鉴定工作应当转移到三级以上的实验室中进行。三、实验室设施和设备要求（一）（一）BSL-1实验室实验室1.实验室门应带锁并有可视窗。实验室门应带锁并有可视窗。2.每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。3.在实验室门口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分在实验室门口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分开设置。开设置。4.实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得铺设地毯。化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得铺设地毯。5.实验台、柜、椅等摆放应合理并且便于清洁，台面应防水，实验台、柜、椅等摆放应合理并且便于清洁，台面应防水，耐腐蚀、耐热、坚固。耐腐蚀、耐热、坚固。6.实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗。实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗。7.实验室内应保证工作照明，避免不必要的反光和强光。实验室内应保证工作照明，避免不必要的反光和强光。8.应有适当的消毒设备。应有适当的消毒设备。9.应配备适用的应急器材，如消防、急救、意外事故处理等器应配备适用的应急器材，如消防、急救、意外事故处理等器材。材。三、实验室设施和设备要求（二）（二）BSL-2实验室实验室1.满足满足BSL-1实验室要求下三区划分。实验室要求下三区划分。2.实验室各分区门应可自动关闭。（由里向外开）实验室各分区门应可自动关闭。（由里向外开）3.在实验室内应使用专门的工作服；应戴乳胶手套。在实验室内应使用专门的工作服；应戴乳胶手套。4.在实验室工作区域外应有存放备用物品的条件。在实验室工作区域外应有存放备用物品的条件。5.在实验室或所在的建筑内应配备高压蒸汽灭菌器或其他适当在实验室或所在的建筑内应配备高压蒸汽灭菌器或其他适当的消毒设备。的消毒设备。6.应在实验室内配备生物安全柜。应在实验室内配备生物安全柜。7.在工作区应设洗眼装置，必要时应设有喷淋装置。在工作区应设洗眼装置，必要时应设有喷淋装置。8.应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。9.有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等设备用电源。生物安全柜、冰箱等设备用电源。四、二级生物安全防护实验室操作要点1.实验室入口须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话，甚至应注明进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序；2.工作人员应具备相关资职，禁止非工作人员进人实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入；3.根据实验室要求制定安全操作规程或生物安全手册，工作人员在进入实验室之前要阅读掌握规范并严格按照规范要求操作；4.进入实验室前要摘除首饰，修剪指甲，以免刺破手套。长发应束在脑后，禁止在实验室内穿露脚趾的鞋。5.在实验室里工作时，要始终穿着实验服，实验室外禁止穿防护服。当有必要保护眼睛和面部以防实验对象喷溅、或紫外线辐射时，必须要配戴护目镜，面罩（带护目镜的面罩）或其它防护用品。6.禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物；7.所有样本、培养物和废弃物均可能有传染性，应以安全方式处理和处置，操作时均应带手套。若工作中已经或可能接触了血液、体液或其他污染材料后，即使戴有手套也应立即洗手，再换一双新手套；8.不得用戴手套的手触摸自己的眼、鼻子或其他暴露的黏膜或皮肤。不得带手套离开实验室或在实验室来回走动。9.以移液器吸取液体，禁止口吸；10.所有的实验步骤都应尽可能使气溶胶或气雾的形成控制在最小程度。任何使形成气溶胶的危险性上升的操作都必须在生物安全柜里进行。有害气溶胶不得直接排放。11.应尽可能安全使用或减少使用利器，包括针头、玻璃、一次性手术刀在内的利器应在使用后立即放在利器盒中。利器盒应在内容物达到三分之二前置换，若48小时内未达到三分之二也必须置换。12.所有溅出事件、意外事故和明显或潜在的职业暴露，都必须向实验室负责人报告。此类事故的书面材料应存档。13.所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭防漏的容器内储存、运输及消毒灭菌。14.实验室应保持整洁、干净，每天的工作结束后，工作台表面应消毒。当潜在的危险物溅出后要随时消毒。15.每日工作完毕，所有操作台面、离心机、加样枪、试管架必须擦拭、消毒。16.实验人员在操作完有感染性的村料后，离开实验室工作区之前必须进行“七步法”洗手。洗手七七步法使用流动水，使双手充分浸湿，用适量肥皂或皂液，均匀涂抹至整个手掌、手背、手指和指缝，认真揉搓双手，整个揉搓过程15-20秒。具体揉搓步骤为：1 掌心相对，手指并拢，相互搓差；2 手心对手背沿指缝相互搓擦，交换进行；3 掌心相对，沿指缝相互搓擦；4 双手指相扣，互搓；5 一手握另一手大拇指旋转搓擦，交换进行；6 将五个手指尖并拢在另一手掌心旋转搓擦，交换进行；7 螺旋式擦洗手腕，交换进行。五、建立实验室生物安全管理制度实验室安全管理手册实验室安全操作规程实验室生物安全手册培训相关人员熟知危险生物因子气溶胶水、电、火、化学危险品噪声仪器设备辐射六、造成实验室危害的常见因素生物因子指微生物和生物活性物质气溶胶悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系（微粒直径一般为0.001100m）七、七、实实 验验 室室 安安 全全 管管 理理 流流 程程 图图九、标本采集、处理采集运输处理保存销毁尖锐器具安全使用制度除特殊情况外，禁止在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。尽可能应用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽、从注射器取下，禁止用手直接操作。用过的针头必须直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须消毒。标本运输所有样本应以防止污染工作人员、患者或环境的方式运送到实验室。样本应置于被承认的、本质安全、防漏的容器中运输 十、安全操作移液器的安全使用生物安全柜的使用消毒灭菌处理(消毒剂的选择使用、高压灭菌器的使用)离心机的使用化学危险物品的使用 仪器设备的安全操作及维护移液器的安全使用应用移液辅助器，严禁用口吸取。所有移液管应带有棉塞以减少移液器具的污染。不能向含有感染性物质的溶液中吹入气体。感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合。不能将液体从移液管内用力吹出。污染的移液管应完全浸入适当的消毒液中，并在消毒液中浸泡适当时间后再进行处理。盛放废弃移液管的容器应当放在生物安全柜内。为了避免感染性物质从移液管中滴出而扩散，在工作台面应当放置一块吸有消毒液的纸，使用后将其按感染性废弃物处理。生物安全柜的使用生物安全柜是配备高效空气过滤器的设备，并通过调节气流使操作者免受气溶胶危害。实验室根据产品说明书进行安装、使用和维修。实验室应制定生物安全柜的维护规程，以确保安全柜内合适的气流流速，并适时更换滤器。生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板。工作完成后以及每天下班前，应使用70%的酒精对生物安全柜的台面进行擦拭，但切忌用酒精擦拭玻璃挡板。在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行5min。安全柜的放置应远离气流不稳定的地方，通风口的设置应根据产品说明书。在维护、移动和或处理安全柜之前必须对生物安全柜进行消毒。离心机的使用离心管在使用前应检查是否破损。用于离心的离心管应当始终牢固盖紧。离心桶和十字轴应按重量配对，并在装载离心管后正确平衡。空离心桶应当用蒸馏水来平衡。每次使用后，要清除离心桶、转子和离心机腔的污染。使用后应当将离心桶倒置存放使平衡液流干。应当每天检查离心机内转子部位的腔壁是否被污染或弄脏，如污染明显，应重新评估离心操作规范。实验室常用的消毒方法 1.高压蒸汽消毒，121，保持15-20min2.含氯消毒剂（由含氯消毒片配制，每片含有效氯500mg）物体表面消毒液：每升水加入1片消毒片，浓度为500mg/L.地面消毒液：每升水加入2片消毒片，浓度为1000mg/L。生物废弃物消毒液：每升水加入10片消毒片，浓度为5000mg/L。3.75酒精：生物安全柜工作台面和仪器表面消毒4.紫外线消毒：工作台面用可移动紫外线消毒车近距离表面照射消毒。十一、危险材料的运输菌毒株的保存与运输阳性病毒标本的运输处理十二、什么是医疗废物？医疗废物医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。要 点医疗废物应与生活垃圾分开存放医疗废物集中处置包装物要防渗漏、防锐器穿透，明显标识和警示说明医疗废物储存设备定期消毒医疗废物制病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液等高危险废物，在交医疗废物集中处置前应先消毒十三、医疗废弃物的处理流程所有标本置于适合容器，加盖盖紧后运送，切勿污染容器外部。如污染，用消毒液消毒。也可将血样置于有盖的塑料管内，外套塑料袋，封口，连同送检单一并运送；有血液外溢，用消毒液消毒。所有垃圾置于专用污染袋内，送医院集中处理。如有阳性标本，所有废弃物经高压后，在送医院统一处理。污染的非一次性工作衣应先消毒后再洗涤。锐物品应置于锐器盒内，消毒后用合适方法处理。医疗垃圾专用袋利器盒十四、制定应急措施实验室风险评估（实验室所存在风险特性）标本溢洒处理流程职业暴露处理流程化学危险品溢出与暴露应急处理流程 水、电、火灾等的应急处理流程紧急撤离行动计划谢谢！