71基因工程和细胞工程教学课件

71基因工程和细胞工程基因工程和细胞工程6、黄金时代是在我们的前面，而不在我们的后面。7、心急吃不了热汤圆。8、你可以很有个性，但某些时候请收敛。9、只为成功找方法，不为失败找借口(蹩脚的工人总是说工具不好)。10、只要下定决心克服恐惧，便几乎能克服任何恐惧。因为，请记住，除了在脑海中，恐惧无处藏身。-戴尔卡耐基。(4)目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定导入检测：导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的含目的基因的DNA片段作探针检测。片段作探针检测。个体生物学水平个体生物学水平鉴定：定：转基因生物是否具有抗性或基因生物是否具有抗性或转基因基因产品的功能活性。品的功能活性。(根据目的基因表达出的性状判断根据目的基因表达出的性状判断)。2实验：实验：DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定 三、基因工程的应用三、基因工程的应用目的基因目的基因作用作用受体受体生物生物备注注植物基因植物基因工程工程常用方法：常用方法：农杆菌杆菌转化法；化法；基因基因枪法；法；花粉管花粉管通道法通道法抗抗虫虫转基基因因植植物物抗虫基因、抗虫基因、Bt毒蛋白毒蛋白基因、蛋基因、蛋白白酶酶抑制抑制剂基因、基因、淀粉淀粉酶酶抑抑制制剂基因、基因、植物凝集植物凝集素基因素基因抗虫：抗虫：Bt毒蛋毒蛋白水解成多白水解成多肽与与肠上皮上皮细胞胞结合，形成穿合，形成穿孔，孔，细胞胞肿胀裂解致死；两裂解致死；两种抑制种抑制剂分分别抑制相抑制相应酶酶活活性，影响消化；性，影响消化；植物凝集素植物凝集素为糖蛋白，与糖蛋白，与肠黏膜黏膜结合，影合，影响响营养物养物质的的吸收和利用吸收和利用棉花、棉花、水稻水稻等等抗虫但不抗病毒、抗虫但不抗病毒、细菌、真菌等菌、真菌等培育抗虫作物培育抗虫作物优点：减少点：减少环境境污染、染、降低生降低生产成本成本不同抗虫基因作不同抗虫基因作用机理不同用机理不同Bt毒蛋白基因来毒蛋白基因来自自苏云金芽云金芽孢杆菌杆菌抗病抗病转基因植基因植物物病毒外壳蛋病毒外壳蛋白基因、病白基因、病毒复制毒复制酶酶基基因、几丁因、几丁质酶酶基因、抗基因、抗毒素合成基毒素合成基因因前两种前两种为抗抗病毒作用；病毒作用；后两种后两种为抗抗真菌作用真菌作用烟草烟草(抗病毒抗病毒)、小麦、小麦(抗抗病毒病毒)引起植物生病的引起植物生病的微生物有病毒、微生物有病毒、细菌、真菌三大菌、真菌三大类抗逆抗逆转基因植基因植物物调节细胞胞渗透渗透压基因；基因；抗抗冻蛋白蛋白基因基因(从从鱼体体内内获取取)；抗除草抗除草剂基因基因通通过改改变细胞内渗透胞内渗透压，提高抗，提高抗盐碱抗旱能碱抗旱能力；力；耐寒能力耐寒能力提高；提高；抗除草抗除草剂烟草烟草(抗旱、抗旱、抗抗盐碱碱)、番、番茄茄(抗寒抗寒)、大豆、玉米大豆、玉米(抗除草抗除草剂)抗逆指抵抗不良抗逆指抵抗不良环境的能力，如境的能力，如盐碱、干旱、低碱、干旱、低温、温、涝害等害等转基因基因改良植改良植物的品物的品质含必需氨含必需氨基酸的蛋白基酸的蛋白质编码基因；基因；控制番茄控制番茄果果实成熟的成熟的基因；基因；花青素代花青素代谢有关的基有关的基因因控制合成控制合成的蛋白的蛋白质含含必需氨基酸必需氨基酸多；多；延延迟番茄番茄成熟；成熟；改改变花瓣花瓣的的颜色色玉米、番茄、玉米、番茄、牵牛花等牛花等赖氨酸、亮氨酸氨酸、亮氨酸等都属于必需氨等都属于必需氨基酸基酸动物物细胞胞工程工程方法：方法：显微微注射注射法法受体受体细胞：胞：一般一般用受用受精卵精卵提高提高动物生物生长速度速度生生长激激素基因素基因促促进生生长，提，提高生高生长速度速度鲤鱼不能不能导入生入生长素基因素基因转基因基因动物生物生产药物物(生物反生物反应器或器或乳房生乳房生物反物反应器器)药用蛋用蛋白乳腺白乳腺基因基因微生物微生物蛋白基蛋白基因启因启动子子分泌乳分泌乳汁来生汁来生产相相应的的药品品奶牛奶牛部分人部分人对乳糖会乳糖会发生生过敏敏反反应转基因基因动物作物作器官移器官移植的供植的供体体某种某种调节因因子；子；设法法除去抗除去抗原决定原决定基因基因抑制抑制抗原决抗原决定基因定基因的表达；的表达；不能不能合成相合成相应抗原抗原猪猪选择猪的器官做人器官替猪的器官做人器官替代品的原因：代品的原因：其内其内脏构造、大小、血构造、大小、血管分布与人相似；管分布与人相似；体内体内隐藏的致病基因少藏的致病基因少微生物微生物细胞胞工程方工程方法：法：转化法化法受体受体细胞：胞：大大肠杆杆菌菌应用最用最广泛广泛基因基因工程工程药品品控制控制药品合成的相品合成的相应基因，如人的胰基因，如人的胰岛素基因、干素基因、干扰素素基因、乙肝疫苗基基因、乙肝疫苗基因等因等生生产合成合成相相应的的药品，如胰品，如胰岛素、干素、干扰素、乙素、乙肝疫苗等肝疫苗等微生物，微生物，如大如大肠杆杆菌、酵母菌、酵母菌等菌等选择微生微生物作受体物作受体的原因：的原因：繁殖快、繁殖快、单细胞、胞、遗传物物质少少基因基因检测和和基因基因治治疗基因基因检测制作相制作相应探探针，利用，利用DNA分子分子杂交原理，交原理，快速、准确快速、准确检测人人类某种疾病某种疾病临床床应用用阶段段基因基因治治疗把健康的外源基因把健康的外源基因导入有基因缺陷的入有基因缺陷的细胞胞中，可分中，可分为体外基因体外基因治治疗和体内基因治和体内基因治疗两种方法两种方法仅处于于实验阶段，仍有段，仍有许多多问题和和困困难制制约该技技术的开展，所以的开展，所以该技技术并未在并未在临床开展床开展四、蛋白质工程及与基因工程的区别1蛋白质工程的流程项目目蛋白质工程蛋白质工程基因工程基因工程区区别过程程预期蛋白期蛋白质功能功能设计预期的蛋白期的蛋白质结构构推推测氨氨基酸序列基酸序列推推测脱氧核苷脱氧核苷酸序列酸序列合成合成DNA表达表达出蛋白出蛋白质获取目的基因取目的基因构建表达构建表达载体体导入受体入受体细胞胞目的基因的目的基因的检测与与鉴定定实质定向改造或生定向改造或生产人人类所需所需的蛋白的蛋白质定向改造生物的定向改造生物的遗传特性，以特性，以获得得人人类所需的生物所需的生物类型或生物型或生物产品品结果果生生产自然界没有的蛋白自然界没有的蛋白质生生产自然界中已有的蛋白自然界中已有的蛋白质联系系蛋白蛋白质工程是在基因工程的基工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，上，延伸出来的第二代基因工程，因因为对现有蛋白有蛋白质的改造或制造新的蛋白的改造或制造新的蛋白质，必，必须通通过基因修基因修饰或或基因合成基因合成实现2基因工程与蛋白质工程的比较五、细胞工程五、细胞工程知识框架知识框架植物细胞工程植物细胞工程植物组织培养技术植物组织培养技术植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术工程应用工程应用动物细胞工程动物细胞工程动物细胞培养技术动物细胞培养技术核移植技术（克隆）核移植技术（克隆）动物细胞融合技术动物细胞融合技术单克隆抗体制备技术单克隆抗体制备技术1、植物组织培养与动物细胞培养的比较、植物组织培养与动物细胞培养的比较植物植物组织培养培养动物物细胞培养胞培养原理原理细胞全能性胞全能性细胞增殖胞增殖培养基的培养基的物理性物理性质固体固体液体液体(合成培养基合成培养基)培养基培养基的成分的成分水、无机水、无机盐、维生素、蔗糖、氨生素、蔗糖、氨基酸、基酸、植物激素植物激素、琼脂等脂等葡萄糖、氨基酸、葡萄糖、氨基酸、无机无机盐、维生素、生素、动物血清物血清等等结果果新的植株或新的植株或组织新的新的细胞系或胞系或细胞株胞株应用用微型繁殖微型繁殖作物脱毒作物脱毒生生产人工种子人工种子生生产细胞胞产物物转基因植物的基因植物的培育培育蛋白蛋白质生物制品的生生物制品的生产皮肤移植材料的培育皮肤移植材料的培育检测有毒物有毒物质生理、病理、生理、病理、药理学研理学研究究取材取材植物幼嫩的部位植物幼嫩的部位或花或花药等等动物胚胎或出生不久的幼物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或物的器官或组织条件条件均需无菌操作，需适宜的温度、均需无菌操作，需适宜的温度、pH、O2等等条件条件细细胞工程胞工程胞工程胞工程植物体植物体植物体植物体细细胞胞胞胞杂杂交交交交动动物物物物细细胞融合胞融合胞融合胞融合实质实质内容内容内容内容改改改改变遗传变遗传物物物物质质、产产生新的性状，生新的性状，生新的性状，生新的性状，获获得得得得细细胞胞胞胞产产品品品品(使后代具有双使后代具有双使后代具有双使后代具有双亲亲的特性的特性的特性的特性)理理理理论论基基基基础础植物植物植物植物细细胞全能性胞全能性胞全能性胞全能性细细胞增殖胞增殖胞增殖胞增殖细细胞融胞融胞融胞融合原理合原理合原理合原理细细胞膜的流胞膜的流胞膜的流胞膜的流动动性性性性细细胞膜的流胞膜的流胞膜的流胞膜的流动动性性性性细细胞融胞融胞融胞融合方法合方法合方法合方法用用用用纤维纤维素素素素酶酶酶酶、果、果、果、果胶胶胶胶酶酶酶酶去除去除去除去除细细胞壁胞壁胞壁胞壁后，后，后，后，诱导诱导原生原生原生原生质质体融合体融合体融合体融合用胰蛋白用胰蛋白用胰蛋白用胰蛋白酶酶酶酶或胶或胶或胶或胶原蛋白原蛋白原蛋白原蛋白酶酶酶酶使使使使细细胞胞胞胞分散后，分散后，分散后，分散后，诱导细诱导细胞融合胞融合胞融合胞融合2、植物体、植物体细胞胞杂交与交与动物物细胞融合比胞融合比较结结果果果果获获取取取取“杂杂种植株种植株种植株种植株”克服克服克服克服远缘杂远缘杂交不交不交不交不亲亲和的和的和的和的障碍障碍障碍障碍获获得得得得“杂杂种种种种细细胞胞胞胞”，以生，以生，以生，以生产细产细胞胞胞胞产产品品品品用途用途用途用途克服克服克服克服远缘杂远缘杂交不交不交不交不亲亲和的和的和的和的障碍，障碍，障碍，障碍，扩扩展展展展杂杂交交交交亲亲本范本范本范本范围围，培育新品种，培育新品种，培育新品种，培育新品种制制制制备单备单克隆抗体、克隆抗体、克隆抗体、克隆抗体、病毒疫苗、干病毒疫苗、干病毒疫苗、干病毒疫苗、干扰扰素等素等素等素等3 3、动物体细胞核移植、动物体细胞核移植、动物体细胞核移植、动物体细胞核移植4、单克隆抗体、单克隆抗体（1）制备过程）制备过程（2）单克隆杂交瘤细胞的特点：能产生单一抗体，）单克隆杂交瘤细胞的特点：能产生单一抗体，且无限增殖且无限增殖（3）单抗特点：化学性质单一、特异性强、灵敏度）单抗特点：化学性质单一、特异性强、灵敏度高、可大量生产。高、可大量生产。（4）应用的技术：动物细胞融合，动物细胞培养）应用的技术：动物细胞融合，动物细胞培养（4）应用：）应用：(1)作为诊断试剂。作为诊断试剂。(2)(2)用于治疗疾病和运载药物，如生物导弹。用于治疗疾病和运载药物，如生物导弹。用于治疗疾病和运载药物，如生物导弹。用于治疗疾病和运载药物，如生物导弹。热点考向探究基因工程的工具、步骤及应用(2010年高考江苏卷年高考江苏卷)下表中下表中列出了几种限制列出了几种限制酶酶识别序列及其序列及其切割位点，切割位点，图1、图2中箭中箭头表示表示相关限制相关限制酶酶的的酶酶切位点。切位点。请回答回答下列下列问题：(1)一个图一个图1所示的质粒分子经所示的质粒分子经Sma切割前后，分别含有切割前后，分别含有_个游离的个游离的磷酸基团。磷酸基团。(2)若对图中质粒进行改造，插入的若对图中质粒进行改造，插入的Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越酶切位点越多，质粒的热稳定性越_。(3)用图中的质粒和外源用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用构建重组质粒，不能使用Sma切割，原因是切割，原因是_。(4)与只使用与只使用EcoR相比较，使用相比较，使用BamH和和Hind两种限制酶同时处理质粒、两种限制酶同时处理质粒、外源外源DNA的优点在于可以防止的优点在于可以防止_。(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_酶。酶。(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_。(7)为了从为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_的培养基中培养，以的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。完成目的基因表达的初步检测。【解析】【解析】环状环状DNA分子中磷酸全部参与形成磷酸二酯键，被分子中磷酸全部参与形成磷酸二酯键，被Sma限制酶限制酶切开后相当于一个正常的切开后相当于一个正常的DNA分子，每个分子，每个DNA分子单链各含有一个游离的分子单链各含有一个游离的磷酸基团；磷酸基团；AT碱基对有两个氢键，而碱基对有两个氢键，而GC碱基对有三个氢键，碱基对有三个氢键，GC碱碱基对含量越多，热稳定性越高；从图中读出：基对含量越多，热稳定性越高；从图中读出：Sma限制酶破坏目的基因和限制酶破坏目的基因和标记基因；用标记基因；用BamH和和Hind两种不同的限制酶处理，形成不同的黏性末两种不同的限制酶处理，形成不同的黏性末端，能有效防止只用一种限制酶形成的相同的黏性末端的质粒或目的基因端，能有效防止只用一种限制酶形成的相同的黏性末端的质粒或目的基因相互连接、环状化；将质粒与目的基因相互连接、环状化；将质粒与目的基因“缝合缝合”应用应用DNA连接酶进行处理；连接酶进行处理；标记基因的作用在于鉴别和筛选含有目的基因的细胞；大肠杆菌突变体丧标记基因的作用在于鉴别和筛选含有目的基因的细胞；大肠杆菌突变体丧失吸收蔗糖的能力，不能在只有蔗糖为碳源的选择培养基上存活，所以可失吸收蔗糖的能力，不能在只有蔗糖为碳源的选择培养基上存活，所以可以用该种选择培养基对导入的蔗糖转运蛋白基因是否表达进行初步检测。以用该种选择培养基对导入的蔗糖转运蛋白基因是否表达进行初步检测。【答案】【答案】(1)0、2(2)高高(3)Sma会破坏质粒的抗性基因、外源会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中中的目的基因的目的基因(4)质粒和含目的基因的外源质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化片段自身环化(5)DNA连连接接(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞鉴别和筛选含有目的基因的细胞(7)蔗糖为唯一含碳营养物质蔗糖为唯一含碳营养物质基因工程与细胞工程(2010年高考福建理综年高考福建理综)红细胞生成素红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素成素(rhEPO)，其简要生产流程如右图。，其简要生产流程如右图。请回答：请回答：(1)图中图中所指的是所指的是_技术。技术。(2)图中图中所指的物质是所指的物质是_，所指的物质是所指的物质是_。(3)培养重组培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换_。(4)检测检测rhEPO的体外活性需用抗的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的体。分泌该单克隆抗体的_细胞，可由细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。合而成。【解析】【解析】基因工程中获得大量目的基因的技术为基因工程中获得大量目的基因的技术为PCR技术。技术。cDNA是以是以mRNA为模板通过反转录获得的。本基因工程目的基为模板通过反转录获得的。本基因工程目的基因的表达产物为红细胞生成素，即因的表达产物为红细胞生成素，即EPO。由于天然。由于天然EPO来源极为来源极为有限，一般情况下，基因工程产生的是重组人红细胞生成素有限，一般情况下，基因工程产生的是重组人红细胞生成素(rhEPO)。培养重组。培养重组CHO细胞时，为了提供适宜的培养条件，需细胞时，为了提供适宜的培养条件，需要不断更换培养液，以防止有害代谢产物的积累对细胞自身造成要不断更换培养液，以防止有害代谢产物的积累对细胞自身造成的危害。单克隆抗体是通过培养杂交瘤细胞获得的。的危害。单克隆抗体是通过培养杂交瘤细胞获得的。【答案】【答案】(1)PCR(2)mRNArhEPO(3)培养液培养液(4)杂交瘤杂交瘤5(2010年高考天津卷年高考天津卷)下下图是培育表达人乳是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反蛋白的乳腺生物反应器的技器的技术路路线。图中中tetR表示四表示四环素抗性基因，素抗性基因，ampR表示氨表示氨苄青霉素抗性基因，青霉素抗性基因，BamH、Hind、Sma直直线所示所示为三种限三种限制制酶酶的的酶酶切位点。切位点。据图回答据图回答(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_限制酶同时酶限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含要在含_的培养基上进行。的培养基上进行。(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_(填字母代号填字母代号)。A启动子启动子BtetRC复制原点复制原点DampR(3)过程过程可采用的操作方法是可采用的操作方法是_(填字母代号填字母代号)。A农杆菌转化农杆菌转化B大肠杆菌转化大肠杆菌转化C显微注射显微注射D细胞整合细胞整合(4)过程过程采用的生物技术是采用的生物技术是_。(5)对早期胚胎进行切割，经过程对早期胚胎进行切割，经过程可获得多个新个体。这利用可获得多个新个体。这利用了细胞的了细胞的_性。性。(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_(填字母代填字母代号号)技术。技术。A核酸分子杂交核酸分子杂交B基因序列分析基因序列分析C抗原抗原抗体杂交抗体杂交DPCR解析：解析：(1)基因表达载体的构建过程中，将目的基因导入受体细胞之基因表达载体的构建过程中，将目的基因导入受体细胞之前，要用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体。从图中可前，要用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体。从图中可以看出，在目的基因和载体中都有以看出，在目的基因和载体中都有Hind和和BamH限制酶的切割限制酶的切割位点，因此要用位点，因此要用Hind和和BamH限制酶同时切割载体和人乳铁蛋限制酶同时切割载体和人乳铁蛋白基因；载体切割后四环素抗性基因被破坏，因此筛选时要在含氨白基因；载体切割后四环素抗性基因被破坏，因此筛选时要在含氨苄青霉素的培养基上进行。苄青霉素的培养基上进行。(2)启动子是一段有特殊序列的启动子是一段有特殊序列的DNA片片段，位于目的基因的首段，它是段，位于目的基因的首段，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，在聚合酶识别和结合的部位，在启动子存在时才能驱动基因转录出启动子存在时才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白，最终获得所需要的蛋白质。质。(3)将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，将目将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射技术。的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射技术。(4)过程过程是将早是将早期胚胎移入受体母牛体内，用到的技术是胚胎移植技术。期胚胎移入受体母牛体内，用到的技术是胚胎移植技术。(5)胚胎分胚胎分割是利用机械方法将早期胚胎等分，经移植后获得同卵双胎或多胎割是利用机械方法将早期胚胎等分，经移植后获得同卵双胎或多胎的技术，可以看做动物无性繁殖或克隆的方法，利用了细胞的全能的技术，可以看做动物无性繁殖或克隆的方法，利用了细胞的全能性。性。(6)检测目的基因是否翻译成蛋白质，需要用相应的抗体进行抗检测目的基因是否翻译成蛋白质，需要用相应的抗体进行抗原抗体杂交，其他三项技术检测的对象都是核酸。原抗体杂交，其他三项技术检测的对象都是核酸。答案：答案：(1)Hind和和BamH氨苄青霉素氨苄青霉素(2)A(3)C(4)胚胎胚胎移植技术移植技术(5)全能全能(6)C6(2009年宁夏高考改编年宁夏高考改编)回答下列有关动物细胞培养的问题：回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此。此时，瓶壁上形成的细胞层数是时，瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现现_的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细胞的黏细胞，该种细胞的黏着性着性_，细胞膜表面蛋白质，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白糖蛋白)的量的量_。(3)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。期的细胞用显微镜进行观察。(4)在细胞培养过程中，通常在在细胞培养过程中，通常在_条件下保存细胞。因为条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中在这种条件下，细胞中_的活性降低，细胞的活性降低，细胞_的的速率降低。速率降低。(5)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。进行攻击。解析：解析：(1)动物细胞培养过程中具有贴壁生长和接触抑制的特点，若要传动物细胞培养过程中具有贴壁生长和接触抑制的特点，若要传代培养应先用胰蛋白酶处理，使其从瓶壁上分离下来。代培养应先用胰蛋白酶处理，使其从瓶壁上分离下来。(2)在传代培养过程中，随着传代次数的增多，绝大多数细胞停止分裂，在传代培养过程中，随着传代次数的增多，绝大多数细胞停止分裂，进而出现衰老甚至死亡，极少数细胞遗传物质发生改变，克服细胞寿命进而出现衰老甚至死亡，极少数细胞遗传物质发生改变，克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这种细胞黏着性降低，细胞膜表面的糖蛋白的自然极限，获得不死性，这种细胞黏着性降低，细胞膜表面的糖蛋白减少。减少。(3)若要观察染色体的数目，最好选择细胞分裂中期的细胞，因为分裂中若要观察染色体的数目，最好选择细胞分裂中期的细胞，因为分裂中期染色体螺旋程度最高，形态固定，数目清晰。期染色体螺旋程度最高，形态固定，数目清晰。(4)低温可以抑制酶的活性，从而降低细胞的新陈代谢速率。低温可以抑制酶的活性，从而降低细胞的新陈代谢速率。(5)皮肤移植后发生排斥反应，是因为机体把移植的皮肤组织当作抗原进皮肤移植后发生排斥反应，是因为机体把移植的皮肤组织当作抗原进行攻击。行攻击。答案：答案：(1)相互接触接触抑制单层相互接触接触抑制单层(或一层或一层)胰蛋白酶胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡不死性降低减少衰老甚至死亡不死性降低减少(3)中中(4)冷冻冷冻(或超低温、液氮或超低温、液氮)酶新陈代谢酶新陈代谢(5)抗原抗原END16、业余生活要有意义，不要越轨。华盛顿17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。罗素贝克18、最大的挑战和突破在于用人，而用人最大的突破在于信任人。马云19、自己活着，就是为了使别人过得更美好。雷锋20、要掌握书，莫被书掌握；要为生而读，莫为读而生。布尔沃