肾癌的DC免疫治疗进展.ppt

肾癌的DC免疫治疗进展 夏 远 博2011.01.06 Contents前 言1 DC的 作 用2 DC与 肾 癌 的 预 后 及 DC疫 苗 种 类3 前 景 展 望4 前言早 期 临 床 表 现 ： 早 期 临床 表 现 具 有 隐 蔽 性 、 多变 性 和 非 特 异 性治 疗 ： 可 通 过 根 治 性 肾 切 除 术 达 到 理 想 的 治 疗效 果 肾 癌 亦 称 肾 细 胞 癌 (RCC)，是 最 常 见 的 肾 脏 实 质 性 恶 性 肿 瘤晚 期 临 床 表 现 ： 临 床 上出 现 典 型 的 三 联 征 (血 尿、 疼 痛 、 肿 块 )时 往 往 已有 广 泛 进 展 ， 一 般 认 为是 肾 癌 晚 期 的 标 志 。治 疗 ： 目 前 尚 无 有 效 的治 疗 手 段 l 肾 癌 对 放 疗 、 化 疗 均 不 敏 感 。 但 肾 癌 是 一 种 免 疫 原 性 很 强 的 肿瘤 ， 对 晚 期 肾 癌 的 治 疗 ， 免 疫 治 疗 有 其 独 特 优 势 ， 尤 其 是 DC在免 疫 治 疗 中 的 基 础 地 位 确 立 以 来 ， 肾 癌 的 免 疫 治 疗 取 得 了 很 大的 进 展 ， 各 种 形 式 的 DC瘤 苗 已 在 肾 癌 的 免 疫 治 疗 中 开 始 尝 试 ，其 疗 效 显 著 且 副 作 用 小 ， 显 示 了 明 显 的 优 势 。 DC的作用 DC与 肾 癌 的 预 后v肾 癌 的 预 后 是 肿 瘤 的 生 物 学 特 性 和 机 体 的 免 疫 状 态 等 多 因素 的 综 合 效 应 ， DC是 重 要 的 抗 原 提 呈 细 胞 ， 有 潜 在 的 能 力去 引 发 身 体 中 的 免 疫 反 应 。v研 究 表 明 人 体 肿 瘤 微 环 境 中 DC的 数 量 、 功 能 与 肿 瘤 的 预 后呈 正 相 关 。 肿 瘤 组 织 中 DC浸 润 数 量 越 多 ， 其 疾 病 预 后 越 好 。同 时 ， 浸 润 DC的 数 量 越 多 ， RCC淋 巴 结 转 移 的 可 能 性 越 小 。 肾 癌 微 环 境 ： DC PK RCC ？ 因而DC用于肾癌免疫治疗具有极大的临床意义。方 法目 的抑制 治 疗 肾 癌 的 DC疫 苗 种 类肿 瘤 裂 解 物 或 肿 瘤 粗 体 抗 原 致 敏 DC肾 癌 抗 原 负 载 DC肾 癌 细 胞 与 DC融 合肾 癌 mRNA转 染 DC细 胞 因 子 基 因 修 饰 DC或 肿 瘤 细 胞 肿瘤裂解物或粗体抗原致敏DC肿瘤细胞超生波紫外线反复冻融研磨过滤肿瘤细胞悬液DC DC 宿 主 抗 肿 瘤 T细 胞 反 应 需 一 系 列 的 抗 原 决 定 簇 ， 而 不 仅 是 某 一 个 抗 原 ， 给 予全 细 胞 抗 原 可 能 是 最 简 单 有 效 的 方 法 。 因 其 不 需 要 鉴 定 特 异 性 抗 原 ， 且 多 个抗 原 的 存 在 可 减 少 因 抗 原 阴 性 引 起 肿 瘤 免 疫 逃 避 的 可 能 性 。 v Gitlitz等 从 14例 RCC病 人 的 外 周 血 CD14+前 体 细 胞 获 取 DC， 并 在 含 GM-CSF、 IL-4和 10 自 体 血 清 的 培 养 液 中 培 养 ， 添 加 经 3次 反 复 冻 融 得 到 的自 身 肿 瘤 裂 解 产 物 制 备 疫 苗 ， 治 疗 12例 病 人 ， 结 果 显 示 疫 苗 有 很 好 的 耐受 。v Wang等 用 负 载 自 体 肿 瘤 细 胞 裂 解 物 的 DC疫 苗 联 合 CIK治 疗 10例 晚 期 肾 癌患 者 ， 在 4例 有 可 评 价 病 灶 的 患 者 中 1例 部 分 缓 解 (PR)， 2例 疾 病 稳 定(SD)， 1例 进 展 (PD)。 肾癌抗原负载DCv肾 癌 的 TSA、 TAA目 前 知 之 不 多 ， 仍 在 不 断 探 索 中 。 G250是一 种 广 泛 表 达 于 RCC的 肿 瘤 相 关 抗 原 。细胞裂解物致敏DC 抗原蛋白致敏DCVS 特 异 性 强 ， 更 有 效 地 诱 导 DC 副 作 用 小 ， 避 免 自 身 免 疫 疾 病 产 生 操 作 方 便 ， 不 需 获 取 肿 瘤 组 织 即 可 治 疗 ， 利 于 临 床 推 广 应 用 v Tso等 用 G250与 GM-CSF进 行 融 合 形 成 G250-GM-CSF融 合 蛋 白 (FP)， FP经棒 状 病 毒 表 达 体 系 表 达 、 分 离 纯 化 后 加 入 培 养 体 系 中 ， 同 时 加 入 IL-4等 细 胞 因 子 ， 培 养 出 带 有 RCC相 关 抗 原 的 成 熟 DC疫 苗 ， 这 种 DC高 表 达CD83等 成 熟 表 面 分 子 ， 产 生 强 大 的 CTL效 应 ， 研 究 提 示 这 种 FP将 在 制备 肾 癌 DC疫 苗 中 发 挥 重 要 作 用 。v 但 肾 癌 TAA或 TSA目 前 难 以 鉴 定 、 证 实 ， 所 以 限 制 了 其 广 泛 使 用 。 肾 癌 细 胞 与 DC融 合v肿 瘤 细 胞 和 DC可 通 过 聚 乙 二 醇 或 电 融 合 技 术 实 现 融 合 。 这种 杂 合 体 既 表 达 了 全 部 肿 瘤 细 胞 抗 原 ， 又 有 DC的 抗 原 呈 递功 能 和 T细 胞 激 活 功 能 。v研 究 表 明 ， 成 熟 DC比 未 成 熟 DC融 合 后 具 有 更 强 的 抗 肿 瘤CTL反 应 和 抵 御 肿 瘤 再 攻 击 能 力 。 v Alexander等 采 用 电 融 合 术 将 同 种 异 体 的 DC与 RCC病 人 自 身 的 癌 细 胞 融合 成 DC疫 苗 ， 用 皮 下 接 种 法 治 疗 17例 转 移 性 RCC病 人 ， 随 访 6个 月 后 ，疗 效 显 著 ， 其 中 4例 肿 瘤 完 全 消 退 ， 2例 肿 瘤 缩 小 50 以 上 ， 除 个 别 有低 热 外 ， 无 明 显 不 良 反 应 。v Marten等 用 健 康 人 PBMC来 源 DC与 肾 癌 细 胞 融 合 ， 经 皮 内 注 射 治 疗 12例进 展 期 肾 癌 患 者 ， 结 果 4例 病 情 稳 定 ， 大 部 分 患 者 外 周 血 淋 巴 细 胞 对肾 癌 细 胞 的 细 胞 毒 性 增 强 ， 无 明 显 不 良 反 应 。 这 表 明 DC融 合 疫 苗 治 疗 肾 癌 是 安 全 有 效 的 。 肾 癌 mRNA转 染 DCv 从 大 量 肿 瘤 标 本 中 提 纯 肿 瘤 细 胞 mRNA， 或 通 过 PCR技 术 从 有 限 的 肿 瘤组 织 中 扩 增 足 够 数 量 的 mRNA， 以 肿 瘤 mRNA冲 击 DC， 接 种 体 内 后 可 产 生明 显 的 抗 肿 瘤 反 应 。肾 癌 组 织mRNAPCR技 术 肿 瘤 特 异性 mRNA差 异 筛 选 肿 瘤 抗 原基 因 修 饰的 DC疫苗 基 因 导入 DC vGarderet等 通 过 体 外 实 验 证 明 ， 提 取 肾 癌 组 织 mRNA转 染 的DC能 够 明 显 诱 导 肿 瘤 特 异 性 T细 胞 免 疫 应 答 ； 同 种 异 体 肿瘤 组 织 mRNA转 染 同 样 也 可 引 起 这 种 免 疫 应 答 ， 这 说 明 了 在RCC患 者 中 有 共 同 的 肿 瘤 抗 原 存 在 ， 而 正 常 人 mRNA则 不 能 ，提 示 这 种 免 疫 治 疗 方 法 是 相 对 安 全 的 。 细 胞 因 子 基 因 修 饰 DCv DC的 成 熟 、 分 化 及 对 抗 原 的 呈 递 有 赖 于 其 周 围 的 微 环 境 ， 其 中 细胞 因 子 对 这 种 微 环 境 可 产 生 重 要 的 影 响 。 为 此 改 变 DC所 处 肿 瘤 微环 境 中 相 关 细 胞 因 子 的 浓 度 ， 无 疑 是 提 高 DC抗 原 呈 递 和 抗 肿 瘤 效应 的 又 一 途 径 。DC mDC活化更强的CTL效应CD40LCD40 促 进 如 果 联 合 肿 瘤 抗 原 基 因 及 细 胞 因 子 基 因 一 起 导 入 DC，则 效 果 可 能 会 比 单 独 用 肿 瘤 抗 原 基 因 或 细 胞 因 子 基 因修 饰 DC更 好 。 Nishiyama的 一 项 体 外 实 验 研 究 发 现 ， 应 用 IL-12与 肿 瘤 抗 原 共 同 刺 激 DC， 其 诱 导 的 CTL活 性 明 显 增 强 。 前 景 展 望 v目 前 ， 转 移 性 RCC在 很 大 程 度 上 仍 属 于 难 治 性 恶 性 肿 瘤 。但 长 期 的 随 访 的 数 据 分 析 显 示 ， 一 部 分 患 者 已 经 从 免 疫 治疗 中 获 益 。v随 着 分 子 生 物 学 、 免 疫 学 、 基 因 工 程 学 的 飞 速 发 展 ， 采 用肿 瘤 mRNA刺 激 DC及 多 途 径 基 因 转 染 的 DC， 能 提 供 更 多 更 有效 的 可 供 识 别 的 抗 原 表 位 ， 并 可 克 服 HLA限 制 ， 是 最 具 发展 前 景 的 DC疫 苗 制 备 方 法 。 v选 择 合 适 的 剂 量 、 筛 选 更 有 效 的 RCC抗 原 、 摸 索 赋 予 DC抗原 的 最 佳 方 式 等 问 题 将 是 今 后 DC免 疫 治 疗 研 究 的 热 点 。相 信 随 着 DC疫 苗 技 术 的 成 熟 ， 以 DC为 基 础 的 RCC免 疫 治 疗将 显 示 出 美 好 的 应 用 前 景 。 参 考 文 献 1罗 道 升 .树 突 状 细 胞 疫 苗 在 肾 癌 免 疫 治 疗 中 的 前 景 J.国 外 医 学 泌 尿 系 统 分 册 , 2004,24(1). 2唐 亮 .树 突 状 细 胞 疫 苗 在 晚 期 肾 细 胞 癌 治 疗 中 的 研 究 进 展 J.国 际 泌 尿 系 统 杂 志 ,2007,27(5) . 3刘 世 会 .树 突 状 细 胞 为 基 础 的 肾 癌 免 疫 治 疗 进 展 J.重 庆 医 科 大 学 学 报 ,2007,32(7). 4胡 志 .树 突 状 细 胞 融 合 瘤 苗 的 制 备 及 其 在 肿 瘤 免 疫 治 疗 中 的 应 用 J. 国 际 肿 瘤 学 杂 志 2007,34(8). 5孔 令 波 .树 突 状 细 胞 与 肾 细 胞 癌 免 疫 治 疗 进 展 J.国 际 泌 尿 系 统 杂 志 ,2006,26(3). 6Wang H ，Zhou FJ，Wang QJ，etalEfficacy of Autologous Renal Tumor Cell Lysate-loaded Dendrite Cell Vaccine in Combination with Cytokine-induced Killer Cells on Advanced Renal Cell Carcinoma：a Report of Ten CasesChinese Journal of Cancer，2006，25(5) 致 谢v感 谢 武 总 在 试 用 期 间 的 亲 切 关 怀 ！v感 谢 李 玉 成 主 管 、 高 天 龙 老 师 在 技 术 、 物 资 工 作 上的 热 情 指 导 和 帮 助 ！v感 谢 每 一 位 培 训 指 导 过 我 的 导 师 及 站 内 同 事 在 培 训期 间 的 热 心 帮 助 ！ v今 后 会 更 加 努 力 做 好 本 职 工 作 ， 与 柯 莱 逊 共 奋 进 ！