《药物的鉴别》课件

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药物的鉴别试验药物的鉴别试验(Identification test of drug)第二章第二章#p 药物的鉴别试验药物的鉴别试验p 药物的杂质检查药物的杂质检查p 药物定量分析与分析方法验证药物定量分析与分析方法验证药品检验工作的基本规律药品检验工作的基本规律#p 概述概述p 鉴别试验的项目鉴别试验的项目p 鉴别试验的方法鉴别试验的方法p 鉴别试验的条件鉴别试验的条件药物的鉴别试验药物的鉴别试验#p 定义定义根据药物的分子结构、理化性质,采用根据药物的分子结构、理化性质,采用 物理、化学或生物学的方法来判断药物的物理、化学或生物学的方法来判断药物的真伪真伪。p 目的目的判断药物的判断药物的真伪真伪,是药品质量检验工作,是药品质量检验工作 中的首项任务。中的首项任务。p 药典收载的鉴别试验药典收载的鉴别试验均为用来均为用来证实证实贮藏的药贮藏的药 物是否为其所物是否为其所标示的药物标示的药物p 鉴别试验方法应有专属性,一般有鉴别试验方法应有专属性,一般有2 23条。条。一、鉴别试验的定义与目的一、鉴别试验的定义与目的#ChP(2010)凡例中对药物鉴别的定义为:凡例中对药物鉴别的定义为:“鉴别项下规定的试验方法鉴别项下规定的试验方法”,仅反映该药品某些,仅反映该药品某些物理、化学或生物学等性质的特征,不完全代表物理、化学或生物学等性质的特征,不完全代表对该药品化学结构的确证对该药品化学结构的确证”。#第二节第二节 鉴别试验的项目鉴别试验的项目 鉴别鉴别性状(description)鉴别(identification)原料药制剂制剂#l 性状性状 (Description)定义:定义:反映药物特有的物理性质,如外观、反映药物特有的物理性质,如外观、溶解度和物理常数等。溶解度和物理常数等。外外 观观溶解度溶解度物理常数物理常数#外观:外观:指药品的外表感观和色泽,包括药物的指药品的外表感观和色泽,包括药物的 聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。示例示例1 1:ChP2010ChP2010中盐酸氯丙嗪的性状描述:本品为白色或中盐酸氯丙嗪的性状描述:本品为白色或乳白色结晶性粉末;有微臭,味极苦;有引湿性;遇光渐乳白色结晶性粉末;有微臭,味极苦;有引湿性;遇光渐变色;水溶液显酸性反应。变色;水溶液显酸性反应。#溶解度:溶解度:一定程度上反映了一定程度上反映了药品的纯度药品的纯度。可供。可供 精制或制备溶液时参考。药品在精制或制备溶液时参考。药品在不同溶剂不同溶剂中的中的 溶解性能用溶解性能用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微极易溶解、易溶、溶解、略溶、微 溶、极微溶解、几乎不溶或不溶溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述。来描述。例例 磺胺嘧啶磺胺嘧啶“在乙醇或丙酮中微溶,在水中几乎不溶;在乙醇或丙酮中微溶,在水中几乎不溶;在氢氧化钠试液中易溶,在稀盐酸中溶解在氢氧化钠试液中易溶,在稀盐酸中溶解”。#中国药典中国药典#物理常数:物理常数:用于药品鉴别,反映其纯杂程度用于药品鉴别,反映其纯杂程度。ChP2010药典收载的物理常数包括:相对密度、药典收载的物理常数包括:相对密度、馏程、馏程、熔点熔点、凝点、凝点、比旋度比旋度、折光率、黏度、折光率、黏度、吸收系数吸收系数、碘值、皂化值、酸值。、碘值、皂化值、酸值。#熔点定义定义-固体固体液体的温度液体的温度-熔融同时分解的温度熔融同时分解的温度-初融初融-全熔的一段温度全熔的一段温度ChP收载的方法收载的方法-第一法:测定易粉碎的固体药品第一法:测定易粉碎的固体药品-第二法:测定不易粉碎的固体药品第二法:测定不易粉碎的固体药品-第三法:测定凡士林或其他类似物第三法:测定凡士林或其他类似物要求报告初熔和终熔要求报告初熔和终熔例例 溴化新斯的明项下所述:溴化新斯的明项下所述:“本品的本品的熔点熔点为为171176,熔融时同时分解熔融时同时分解”。#比旋度比旋度 tD 是手性药物特性及其纯度的主要指标是手性药物特性及其纯度的主要指标 在一定波长(在一定波长(589.3nm)与温度()与温度(20)下,偏)下,偏振光透过长振光透过长1dm,含旋光性物质,含旋光性物质1g/1mL的溶液时的溶液时测得的旋光度测得的旋光度,称为比旋度。,称为比旋度。=tDCL指百分浓度注意溶剂、注意溶剂、浓度对比浓度对比旋度的影旋度的影响响例例 维生素维生素C的的比旋度比旋度测定:测定:“取本品,精密称定,加水取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释使成每溶解并定量稀释使成每1ml中约含中约含0.10g的溶液,依法测的溶液,依法测定,比旋度为定,比旋度为+20.5至至+21.5”。#吸收系数吸收系数 在给定的波长、在给定的波长、溶剂溶剂和温度等条件下,吸光物质和温度等条件下,吸光物质 在单位浓度(在单位浓度(C)、单位液层厚度()、单位液层厚度(L)时的吸收)时的吸收 度,称为吸收系数(度,称为吸收系数(和和)A=-lgT=ECLE1%1cm=A/(CL)C=1%(g/ml),L=1cm 这两种物理常数可用以区别药品、检这两种物理常数可用以区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。查纯度或测定制剂的含量。#l 鉴别试验鉴别试验 一般鉴一般鉴别试验别试验专属鉴专属鉴别试验别试验#依依 据据:某一类药物的化学结构或理化性质的特征,某一类药物的化学结构或理化性质的特征,通过化学反应来鉴别药物的真伪。通过化学反应来鉴别药物的真伪。General identification testGeneral identification testl 一般鉴别试验一般鉴别试验 无机药物无机药物阴离子和阳离子的特殊反应;阴离子和阳离子的特殊反应;有机药物有机药物典型的官能团反应。典型的官能团反应。#无机金属盐无机金属盐 取铂丝,取铂丝,盐酸湿润,盐酸湿润,蘸取供试品,蘸取供试品,在无色火焰中燃在无色火焰中燃烧火焰显各离子的烧火焰显各离子的特特征色征色钠离子钠离子钾离子钾离子钙离子钙离子1.钠盐、钾盐、钙盐的钠盐、钾盐、钙盐的焰色焰色反应反应#2.铵盐铵盐原理:原理:遇红色石遇红色石蕊试纸显蕊试纸显蓝色蓝色 无机酸根无机酸根氯化物:氯化物:硫酸盐:硫酸盐:#典型的官能团反应典型的官能团反应 有机氟化物有机氟化物有机氟有机氟氧瓶燃烧氧瓶燃烧无机氟离子无机氟离子茜素氟蓝茜素氟蓝硝酸亚铈硝酸亚铈pH4.3pH4.3蓝紫色络合物蓝紫色络合物O2OOOOC H2NCH2COOHCH2COOHCeFF+OOHOC H2NCH2COOHCH COOH+Ce3+pH4.3H茜素氟蓝茜素氟蓝蓝紫色络合物蓝紫色络合物(地塞米松、依诺沙星、氧氟沙星、醋酸曲安奈德、醋酸氟轻松、(地塞米松、依诺沙星、氧氟沙星、醋酸曲安奈德、醋酸氟轻松、醋酸氟轻可的松)醋酸氟轻可的松)#有机酸盐有机酸盐1.1.水杨酸盐水杨酸盐水杨酸水杨酸+FeCl3中性条件中性条件弱酸性条件弱酸性条件红色配位化合物红色配位化合物紫色配位化合物紫色配位化合物水杨酸盐水杨酸盐稀盐酸稀盐酸白色沉淀白色沉淀醋酸铵醋酸铵沉淀溶解沉淀溶解方法一:方法一:方法二:方法二:#2.2.酒石酸盐酒石酸盐供试品溶液(中性)供试品溶液(中性)+氨制硝酸银氨制硝酸银水浴加热水浴加热银镜银镜#芳香第一胺类芳香第一胺类供试品供试品 (50mg)1ml稀稀HCl 0.1mol/L亚硝酸钠亚硝酸钠滴加碱性滴加碱性-萘酚萘酚橙黄色到橙黄色到猩红色沉淀猩红色沉淀(对乙酰氨基酚、盐酸普鲁卡因、艾司唑仑、硝西泮、奥沙西(对乙酰氨基酚、盐酸普鲁卡因、艾司唑仑、硝西泮、奥沙西泮、磺胺嘧啶)泮、磺胺嘧啶)方法:方法:#此类生物碱中具有莨菪酸结构,有此类生物碱中具有莨菪酸结构,有VitaliVitali反应,显紫色反应,显紫色托烷生物碱类托烷生物碱类(硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱)(硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱)托烷类托烷类水解水解莨菪酸莨菪酸发烟硝酸发烟硝酸三硝基衍生物三硝基衍生物KOHKOH醇溶液醇溶液醌型(紫色)醌型(紫色)#依依 据据:每一种每一种药物化学结构的差异及其所引起的药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同,选用特有的灵敏的定性物理化学特性的不同,选用特有的灵敏的定性反应,来鉴别药物的真伪。反应,来鉴别药物的真伪。Specific identification testSpecific identification testl 专属鉴别试验专属鉴别试验例:巴比妥类药物例:巴比妥类药物 甾体激素类药物甾体激素类药物#区别:区别:一般鉴别试验:鉴别不同类别的药物一般鉴别试验:鉴别不同类别的药物 专属鉴别试验:区别同类药物或具有相同专属鉴别试验:区别同类药物或具有相同 化学结构部分的各个药物单体。化学结构部分的各个药物单体。如:母核相同,如:母核相同,取代基不同取代基不同一般鉴别试验一般鉴别试验某一类药物某一类药物专属鉴别实验专属鉴别实验此类药物中的某一此类药物中的某一种药物种药物#鉴鉴鉴鉴 别别别别 方方方方 法法法法化学鉴别法化学鉴别法化学鉴别法化学鉴别法光谱鉴别法光谱鉴别法光谱鉴别法光谱鉴别法生物学法生物学法 HPLC、GC鉴别法鉴别法 薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法 指纹图谱鉴别法指纹图谱鉴别法 呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 色谱鉴别法色谱鉴别法 气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法 测定生成物的熔点测定生成物的熔点荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 第三节第三节 鉴别方法鉴别方法#化学鉴别法化学鉴别法要求:要求:反应迅速、现象明显、明确的反应原理反应迅速、现象明显、明确的反应原理包括:包括:呈色反应鉴别法、沉淀生成反应鉴别法、呈色反应鉴别法、沉淀生成反应鉴别法、荧光反应鉴别法、气体生成反应鉴别法、荧光反应鉴别法、气体生成反应鉴别法、使试剂褪色的鉴别法、测定生成物的熔点使试剂褪色的鉴别法、测定生成物的熔点#1.呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 指供试品溶液中加入适当的指供试品溶液中加入适当的 试剂溶液,在一定条件下进行反应,生成易试剂溶液,在一定条件下进行反应,生成易 于观测的有色产物。于观测的有色产物。三氯化铁三氯化铁酚羟基(紫色)酚羟基(紫色)重氮化重氮化-偶合偶合芳伯胺基(橙红)芳伯胺基(橙红)茜素氟蓝法茜素氟蓝法有机氟化物(蓝紫色)有机氟化物(蓝紫色)双缩脲双缩脲氨基醇结构(蓝紫色)氨基醇结构(蓝紫色)VitaliVitali反应反应托烷生物碱类(深紫色)托烷生物碱类(深紫色)四氮唑四氮唑肾上腺皮质激素类(红色或蓝色)肾上腺皮质激素类(红色或蓝色)茚三酮茚三酮类似氨基酸结构(蓝紫色)类似氨基酸结构(蓝紫色)#2.2.沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 指供试品溶液中加入指供试品溶液中加入 适当的试剂溶液,在一定条件下进行反应,生适当的试剂溶液,在一定条件下进行反应,生 成不同颜色的沉淀。成不同颜色的沉淀。硝酸银硝酸银丙二酰脲类、氯化物、维丙二酰脲类、氯化物、维C 银镜反应银镜反应异烟肼异烟肼 氧化亚铜氧化亚铜葡萄糖葡萄糖 铜盐铜盐磺胺类磺胺类 三氯化铁三氯化铁苯甲酸盐苯甲酸盐 重金属离子重金属离子利多卡因利多卡因 生物碱沉淀剂生物碱沉淀剂氮杂环类氮杂环类#常用的荧光发射形式:常用的荧光发射形式:(1 1)在适当溶剂中药物本身可在可见光下发射荧光)在适当溶剂中药物本身可在可见光下发射荧光 如:如:硫酸奎宁硫酸奎宁在在稀硫酸稀硫酸溶液中显溶液中显蓝色荧光蓝色荧光(2 2)药物与适当试剂反应后发射出荧光)药物与适当试剂反应后发射出荧光 如如:药物和溴反应后,于可见光下发射出荧光;药物和溴反应后,于可见光下发射出荧光;氯普噻吨氯普噻吨加加硝酸硝酸后用水稀释,在紫外灯下显后用水稀释,在紫外灯下显 绿色荧光绿色荧光。3.3.荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法#4.4.气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法 强碱处理强碱处理氨气(氨气(胺类、酰脲类、酰胺类)胺类、酰脲类、酰胺类)强酸处理强酸处理硫化氢气体硫化氢气体(含硫药物)(含硫药物)直火加热直火加热碘蒸气碘蒸气(含碘药物)(含碘药物)硫酸水解,加乙醇硫酸水解,加乙醇醋酸乙酯香味醋酸乙酯香味(含醋(含醋 酸酯和乙酰胺类)酸酯和乙酰胺类)l 其他反应:其他反应:使试剂褪色使试剂褪色如维如维C C的靛酚反应;司可巴的靛酚反应;司可巴 比妥钠与溴、碘试液的反应比妥钠与溴、碘试液的反应 测定生成物熔点测定生成物熔点操作繁、费时,应用少操作繁、费时,应用少#光谱鉴别法光谱鉴别法1.紫外鉴别法(紫外鉴别法(UV)max,min-A-吸收系数吸收系数 A 1/A 2 化学处理后测定产物的光谱特性化学处理后测定产物的光谱特性#例例 地蒽酚的鉴别试验:地蒽酚的鉴别试验:取含量测定项下的溶液扫描取含量测定项下的溶液扫描240400nm范围,范围,在在257、289与与356nm的波长处有最大吸收。的波长处有最大吸收。规定:规定:A257/A289应为应为1.061.10 A356/A289应为应为0.900.94对于一个药物对于一个药物多个吸收峰多个吸收峰的峰值相差较大时,采用单一的峰值相差较大时,采用单一浓度浓度不易观察到全部不易观察到全部吸收峰,可采用两种浓度的供试液吸收峰,可采用两种浓度的供试液分别测定分别测定其最大吸收波长其最大吸收波长#特点:特点:专属性强,应用广(固体、液体、气体)专属性强,应用广(固体、液体、气体)用途:用途:原料药原料药 同类药(其他方法不易区分的同类药(其他方法不易区分的)磺胺类、甾体激素类、半合成抗生素磺胺类、甾体激素类、半合成抗生素2.2.红外光谱法(红外光谱法(IRIR)测定方法:测定方法:标准图谱对照法(标准图谱对照法(ChPChP,20102010)对照品比较法(对照品比较法(USP,32USP,32)#中国药典试样制备方法中国药典试样制备方法 用于固体用于固体(溴化钾)压片法、糊法(溴化钾)压片法、糊法 用于液体用于液体膜法、溶液法膜法、溶液法测定前应录制聚苯乙烯薄膜光谱图,并与标准图谱对照,测定前应录制聚苯乙烯薄膜光谱图,并与标准图谱对照,以检查仪器性能以检查仪器性能#注意问题:注意问题:规定样品前处理方法规定样品前处理方法 当未规定药用晶型时,可采用对照品,并用适当溶剂并行当未规定药用晶型时,可采用对照品,并用适当溶剂并行重结晶重结晶 已规定药用晶型的,则应采用相应药用晶型的对照品依法比对已规定药用晶型的,则应采用相应药用晶型的对照品依法比对l 多晶问题多晶问题l 制剂的红外鉴别制剂的红外鉴别 品种正文中规定预处理方法品种正文中规定预处理方法 辅料无干扰,与原料药的标准图比对辅料无干扰,与原料药的标准图比对 如辅料干扰不能完全消除,在指纹区可规定如辅料干扰不能完全消除,在指纹区可规定35个待测成分个待测成分 的特征吸收峰(的特征吸收峰(cm-1),其误差应小于),其误差应小于0.5%#4.4.原子吸收法原子吸收法 利用利用原子蒸汽原子蒸汽可以吸收由该元素作为空心可以吸收由该元素作为空心阴极灯阴极灯发出的特征谱线,供试液溶液在特征谱发出的特征谱线,供试液溶液在特征谱线处的线处的最大吸收最大吸收和和特征谱线强度特征谱线强度减弱程度进行减弱程度进行定性、定量分析。定性、定量分析。#5.5.核磁共振法(核磁共振法(NMRNMR)测定供试品指定基团上质子峰的化学位移测定供试品指定基团上质子峰的化学位移和偶合常数进行药物的鉴别和偶合常数进行药物的鉴别#l 亚硝酸戊酯的亚硝酸戊酯的NMR法鉴别(法鉴别(USP法)法)亚硝酸戊酯(亚硝酸戊酯(Amyl Nitrite)是)是3-甲基甲基-1-丁醇和丁醇和2-甲基甲基-1 -丁醇的亚硝酸酯的混合物丁醇的亚硝酸酯的混合物约为约为1ppm处应显示甲基质子的双重峰;处应显示甲基质子的双重峰;约为约为4.8ppm处应显示亚硝基处应显示亚硝基位的亚甲基质子的多重峰位的亚甲基质子的多重峰#6.6.质谱法(质谱法(MSMS)在高真空状态下将被测物质离子化在高真空状态下将被测物质离子化,按质子的按质子的 质荷比质荷比(m/zm/z)大小分离进行定性和定量分析大小分离进行定性和定量分析#7.X7.X射线粉末衍射法(波长为射线粉末衍射法(波长为0.010.011nm1nm)结晶物质结晶物质的鉴别的鉴别 比较比较 供试品供试品 已知物质的已知物质的X射线粉末衍射图射线粉末衍射图 依据:依据:各衍射线的衍射角(各衍射线的衍射角(2)相对强度相对强度 面间距面间距#氨苄西林四种固体的典型粉末氨苄西林四种固体的典型粉末x-x-射线衍射图谱射线衍射图谱#色谱鉴别法(色谱鉴别法(TLC,HPLC,GC)适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别,具有分离、具有分离、分析同时进行的特点分析同时进行的特点.薄层扫描法薄层扫描法(TLC)对照品比较法,对照品比较法,供试品斑点供试品斑点与对照品的与对照品的Rf值及斑点的颜色应一致值及斑点的颜色应一致.高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)供试品和对照品色谱供试品和对照品色谱峰保留时间一致峰保留时间一致.气相色谱法气相色谱法(GC)同同HPLC要求要求#薄层色谱法(薄层色谱法(TLC)#同浓度对照品在同一块薄层板比较同浓度对照品在同一块薄层板比较 供试品与对照品等体积混合在同一块薄层供试品与对照品等体积混合在同一块薄层 板比较板比较 供试品与和其化学结构相似对照品比较供试品与和其化学结构相似对照品比较 将将下两溶液等体积混合点样、比较下两溶液等体积混合点样、比较 薄层色谱法(薄层色谱法(TLCTLC)#高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)供试品和对照品供试品和对照品色谱峰保留时间一致色谱峰保留时间一致.内标法时内标法时,药物峰保留时药物峰保留时间与内标峰保留时间比值一致间与内标峰保留时间比值一致气相色谱法气相色谱法 (GC(GC)同同HPLCHPLC要求要求 高效液相色谱法(高效液相色谱法(HPLC)HPLC)#GC和和HPLC鉴别法鉴别法#特点:特点:利用微生物或实验动物进行鉴别利用微生物或实验动物进行鉴别 用途:用途:抗生素、生化药物抗生素、生化药物 生物学法生物学法#指纹图谱与特征图谱鉴别法指纹图谱与特征图谱鉴别法 中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后,中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后,采用一定的分析手段,得到的能够标示其化学特征的色采用一定的分析手段,得到的能够标示其化学特征的色 谱图或光谱图。谱图或光谱图。主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。建立中药指纹图谱能较为全面地反映优良性和稳定性。建立中药指纹图谱能较为全面地反映 中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量,进而对药品中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量,进而对药品 质量进行整体描述和评价。质量进行整体描述和评价。#方法:方法:HPLC、TLCS、GC指纹图谱建立的原则:指纹图谱建立的原则:1.1.系统性:指纹图谱中反映的化学成分应包括中药有效系统性:指纹图谱中反映的化学成分应包括中药有效部位所含大部分成分部位所含大部分成分2.2.特征性:指纹图谱中反映的化学信息(如特征性:指纹图谱中反映的化学信息(如t t)应具有)应具有较强的选择性较强的选择性3.3.稳定性:所建立的指纹图谱在规定的方法,条件下的稳定性:所建立的指纹图谱在规定的方法,条件下的耐用程度耐用程度#特征图谱特征图谱 主要指有效成分的特征峰谱图主要指有效成分的特征峰谱图山楂叶提取物山楂叶提取物#(一)溶液的浓度(一)溶液的浓度(一)溶液的浓度(一)溶液的浓度 (二)溶液的温度(二)溶液的温度(二)溶液的温度(二)溶液的温度 (三)溶液的酸碱度(三)溶液的酸碱度(三)溶液的酸碱度(三)溶液的酸碱度 (四)试验时间(四)试验时间(四)试验时间(四)试验时间 (五)鉴别方法的验证(五)鉴别方法的验证(五)鉴别方法的验证(五)鉴别方法的验证鉴别试验条件#(五)鉴别方法的验证(五)鉴别方法的验证 专属性专属性 指其他成分(其他药物成分、杂质、降解产物、指其他成分(其他药物成分、杂质、降解产物、辅料等)存在的情况下,采用的鉴别方法能否正确地鉴别辅料等)存在的情况下,采用的鉴别方法能否正确地鉴别 出被测物质的特性。出被测物质的特性。耐用性耐用性 指被测定条件发生小的变动时,测定结果收到指被测定条件发生小的变动时,测定结果收到 的影响程度。的影响程度。#例例1:鉴别是(:鉴别是()。)。A.判断药物的纯度判断药物的纯度 B.判断已知药物的真伪判断已知药物的真伪C.判断药物的均一性判断药物的均一性D.判断药物的有效性判断药物的有效性E.确证未知药物确证未知药物#例例2:药物的性状项下包括(:药物的性状项下包括()。)。A.外观外观B.臭臭C.溶解性溶解性D.味味E.剂型剂型#例例3:用于官能团鉴别(:用于官能团鉴别(B )。)。A.紫外线分光光度法紫外线分光光度法B.红外线分光光度法红外线分光光度法C.直接电位法直接电位法D.X-衍射光谱衍射光谱E.荧光光谱荧光光谱#例例5:TCL 法鉴别药物(法鉴别药物(D)。)。A.比较供试品与对照品的死时间比较供试品与对照品的死时间B.比较供试品与对照品的保留时间的比值比较供试品与对照品的保留时间的比值C.比较供试品与对照品的斑点大小比较供试品与对照品的斑点大小D.比较供试品与对照品的比移值比较供试品与对照品的比移值E.比较供试品与对照品的斑点颜色比较供试品与对照品的斑点颜色
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