皂角刺中黄酮提取及抗氧化性研究答辩

2021-4-27 皂角刺中黄酮提取及其抗氧化性研究 2021-4-27 二 、 皂 角 刺 概 述 一 、 引 言 三 、 实 验 中 所 用 到 的 仪 器 四 、 皂 角 刺 中 黄 酮 的 测 定 六 、 结 论 五 、 皂 角 刺 中 黄 酮 的 抗 氧 化 性 研 究目 录 七 、 致 谢 2021-4-27 一 、 引 言皂 角 刺 中 是 一 种 传 统 的 中 药 ， 在 临 床 上 有 着 大量 的 应 用 。 它 含 有 大 量 的 黄 酮 ， 黄 酮 是 一 种很 强 的 抗 氧 化 剂 ， 可 有 效 清 除 体 内 的 氧 自 由基 ， 这 种 阻 止 氧 化 的 能 力 是 维 生 素 E的 十 倍以 上 ， 这 种 抗 氧 化 作 用 可 以 阻 止 细 胞 的 退 化、 衰 老 ， 也 可 阻 止 癌 症 的 发 生 。 因 此 本 文 将对 皂 角 刺 中 黄 酮 的 含 量 进 行 了 测 定 ， 并 对 其氧 化 性 进 行 研 究 ， 以 期 对 皂 角 刺 药 理 作 用 的开 发 提 供 提 供 有 用 的 资 料 。 2021-4-27 二 、 皂 角 刺 概 述皂 角 刺（ Chinese honeylocust spine ） ，又 称 皂 角 针 ， 为 豆 科 落 叶 乔 木 植物 皂 荚 树 的 棘 刺 。 分 布 较 广 。 2021-4-27 皂 角 刺 概 述 皂 角 刺 化 学 成分皂 荚 皂 甙黄 酮氨 基 酸棕 榈 酸 硬 酯 酸油 酸酚 类多 元 醇 6抗 菌 、 抗 炎作 用 31 542 药 理作 用 6降 血 脂 等 治 疗 乳 腺 增生 等 疾 病抗 肿 瘤 作 用免 疫 调 节与 抗 过 敏作 用皂 角 刺 药 理 作 用 抗 凝 血 作 用 2021-4-27 三 、 主 要 仪 器 电子天平 HCR-3018高 速 离 心 机恒 温 水 浴 锅 2021-4-27 三 、 主 要 仪 器超 波 清 洗 器 循 环 水 真 空 泵DJZ型 粉 碎 机 2021-4-27 四、皂角刺中黄酮测定芦丁标准曲线绘制 10皂 角 刺 中 黄 酮 测 定 实 验 流 程称 取 2.00g皂 角 刺（ 加 入 20mL60%乙醇 ） 超 声 30min 抽 滤 定 容过 夜 离 心 取上 清 液加 入 药品 定 容 测 定 移 取 1ml40 2021-4-27 皂角刺中黄酮测定数据样 品 吸 光 度 A 提 取 率 % 提 取 率平 均 值 %皂 角 刺 1 0.024 7.83 8.70皂 角 刺 2 0.024 7.83皂 角 刺 3 0.032 10.45 2021-4-27 五、皂角刺中黄酮抗氧化性研究1、 脂 质 体 系 中 抗 氧 化 能 力 测 定2、 Fe3+还 原 能 力 测 定3、 OH清 除 能 力 测 定4、 DPPH 清 除 能 力 2021-4-27 1、 脂 质 体 系 中 抗 氧 化 能 力 测 定 （ 抑 制 率 ）实验步骤 混匀 避 光 37 水 浴 1h加 入 TCA-TBA-HCl混 合 液避 光 沸 水 煮 15min迅 速冷 却离 心 取 上 清 液在 532nm处 测 定 吸 光 度 As以 1mL蒸 馏 水 为 空 白 测 定 吸 光 度 Ac 2021-4-27 1、 脂 质 体 系 中 抗 氧 化 能 力 测 定 （ 抑 制 率 ）黄 酮 浓 度 吸 光 度 As 吸 光 度 Ac 抑 制 率 %142.4 0.367 0.703 47.80284.8 0.355 49.50427.2 0.316 55.05596.6 0.285 59.46712.0 0.250 66.44测定数据以及抑制率 抑 制 率 %=(Ac-As/As) 100 2021-4-27 1、 脂 质 体 系 中 抗 氧 化 能 力 测 定 （ 抑 制 率 ）以 黄 酮 浓 度 /（ ug/mL） 为 横 轴 ， 抑 制 率 为 纵 轴 作 的 曲线 如 下 图随 着 黄 酮 浓 度 的 增 加 脂 质 体 系 中 抗 氧 化 能 力 （ 抑制 率 ） 也 增 加 。 2021-4-27 2、 Fe3+还 原 能 力 测 定实验步骤 1mL样 品 +2.0mL PBS缓 冲 液 + 2.0mL铁 氰 化 钾摇 匀50 水 浴20min 迅 速 冷 却加 入 2mLTCA混 匀 3000r/min离 心 10min取 2mL上 清 液 +0.4mLFeCl3+2.0mL蒸 馏 水以 蒸 馏 水 调 零 以 Vc代 替 样 品 作 为 阳 性 对 照 在 700nm测 定 吸 光 度 2021-4-27 2、 Fe3+还 原 能 力 测 定Fe3+还 原 能 力 测 定 表 格 .doc以 黄 酮 浓 度 /（ ug/mL） 为 横 轴 ， 样 品 吸 光 度 为 纵 轴 作 的 曲 线 如 下 图随 着 皂 角 刺 黄 酮 浓 度 的 升 高 样 品 吸 光 度 逐 渐 增 大 ，即 Fe 3+还 原 能 力 随 着 黄 酮 浓 度 的 增 加 越 来 越 强 2021-4-27 3、 OH清 除 能 力 测 定实验步骤 硫 酸 亚 铁 铵 、 水 杨 酸 -乙 醇 溶 液和 样 品 各 1mL+0.03mLH202摇 匀 37 水 浴 30min510nm测 定 吸 光 度 Ax以 蒸 馏 水 代 替 样 品 作 空 白 对 照 测 吸 光 度 A0 以 Vc作 为 阳 性 对 照样 品 本 底 吸 光 度 用 蒸 馏 水 代 替 双 氧 水 测 定吸 光 度 Ax0 每 个 浓 度 平 行 测 定 3次 2021-4-27 3、 OH清 除 能 力 测 定 OH清 除 能 力 测 定 表 格 .doc以 黄 酮 浓 度 /（ ug/mL） 为 横 轴 ， 清 除 率 %为 纵 轴 作 的 曲 线 如 下 图随 着 黄 酮 浓 度 的 增 加 ， 皂 角 刺 的 OH清 除 能 力 越 来 越 弱 。 2021-4-27 4、 DPPH 清 除 能 力黄 酮 浓 度（ ug/mL） Ae Ai Aj DPPH清 除率 %142.4 0.616 0.142 0.060 86.69284.8 0.139 0.070 88.80427.2 0.134 0.080 91.23596.6 0.130 0.090 93.51712.0 0.125 0.100 95.94DPPH清除能力数据及计算 DPPH清 除 率 =（ 1-（ A i-Aj/Ae） ） 100 2021-4-27 DPPH 清 除 能 力以 黄 酮 浓 度 /（ ug/mL） 为 横 轴 ， DPPH清 除 率 %为 纵 轴 作 的曲 线 如 下 图随 着 黄 酮 浓 度 的 增 加 ， 皂 角 刺 的 DPPH的 清 除 率 越 来 越 强 。 2021-4-27 六、结论根 据 芦 丁 标 准 曲 线 A=0.0379C+0.0003稀 释 倍 数 为 25，黄 酮 含 量 为 3.48mg/mL；算 出 皂 角 刺 黄 酮 提 取 率 为 8.70%。1、 皂 角 刺 中 黄 酮 的 提 取 2021-4-27 六 、 结 论1） 随 着 黄 酮 浓 度 的 增 加 脂 质 体 系 中 抗氧 化 能 力 （ 抑 制 率 ） 也 增 加2） 随 着 皂 角 刺 黄 酮 浓 度 的 升 高 样 品 吸光 度 逐 渐 增 大 ， 即 Fe3+还 原 能 力 随 着黄 酮 浓 度 的 增 加 越 来 越 强 ；3） 随 着 黄 酮 浓 度 的 增 加 ， 皂 角 刺 的 OH清 除 能 力 越 来 越 弱4） 随 着 黄 酮 浓 度 的 增 加 ， 皂 角 刺 的DPPH的 清 除 率 越 来 越 强 。2、 皂 角 刺 黄 酮 抗 氧 化 性 研 究 2021-4-27 七、致谢