外周血细胞形态检验

外周血细胞形态检验 赣州市妇幼保健院 丁克文 外周血细胞检验程序 涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告方式 外周血红细胞异常形态检验 大小、形态、染色与结构异常；点彩红细胞 外周血白细胞异常形态检验 中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞 血小板形态与寄生虫检验 血小板大小、形态、数量变化；寄生虫 讲 授 内 容 外周血细胞检验程序 血涂片的制备 器材 清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片 。 操作 在玻片近一端 1/3处，加一滴血液，握住另一张边缘 光滑的推片，以 3045角使血滴沿推片迅速散开， 快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。 注意事项 血膜呈舌状，头、体、尾分明 空气中晃动，尽快干燥； 37 恒温箱中促干 涂片的厚薄、长度与血滴大小（ 1020l）与血片质量 1h内染色或在 1h内甲醇固定 正确清洁玻片 抗凝血或毛细血管血涂片； EDTA能阻止 PLT聚集 抗凝血液 4h内涂片 血涂片染色 原理 瑞氏（ Wright）染色法（经典染色法） 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理 吸附作用。 试剂 瑞氏染液 瑞氏染料 0.1 g 甲醇 （ AR） 60ml pH6.8磷酸盐缓冲液（ pH6.46.8） 磷酸二氢钾（ KH2PO4） 0.3g 磷酸氢二钠（ Na2HPO4） 0.2g 加少量蒸馏水溶解，再加至 1000ml。 操作 加瑞氏染液数滴，固定血膜约 1min。 滴加约等量的缓冲液与染液混合， 室温下染色 510min。 用流水冲去染液 ,待干燥后镜检。 注意事项 PH对细胞染色有影响。 未干透的血膜不能染色。 染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。 不能先倒掉染液，用流水冲去。 血膜上有染料颗粒沉积，可加少许甲醇。 先在低倍镜下浏览全片，了解染色好坏和 细胞分布情况，观察有无异常细胞。 选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在 油镜下计数 100个白细胞，按其形态特征 进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。 血 涂 片 镜 检 注意事项 分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈 城垛状迂回移动，计数使不能重复和遗漏。 白细胞数明显减少的血片，应检查多张血片。 分类见有核红细胞，不计入 100个白细胞内，以分类 100个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告，并 注明所属阶段。 除慢淋外，破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞 总数的 2%。若破碎细胞仍能明确鉴别，如破碎的 嗜酸性粒细胞，应包括在分类计数中。在结果报 告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。 分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染 色及分布情况，注意有无寄生虫和其他异常所见。 白细胞形态变化较大，遇有疑问应请示上级主管或 主任进行核实，以减少错误。 异常红细胞形态检查 大小异常 正常红细胞大小较为一致，直径 69um 在各种贫血时，红细胞可出现大、小不 一。直径 10um为大红细胞， 15um为 巨红细胞，常见于巨幼贫、肝脏疾病等， 直径 6um为小红细胞，多见于缺铁性贫 血等 。 直径相差 1倍以上为大小不均 右图：大红细胞（上） 小红细胞（下） (中央苍白区扩大） 形 态 异 常 RBC直径通常 2.6 um， 呈小圆形，细胞中 心区蛋白含量较正常多。见 于遗传性球形红细胞增多症 （ 25%以上） 、自身免疫性 溶贫和异常 Hb病（ HBS、 HBC病等）。 球形红细胞 红细胞呈椭圆形，横短，长大，有时 呈畸形。正常人可见到， 15%。 见于以下疾病 : 1、遗传性椭圆性 RBC增多症，高 于 2550%才有诊断价值。 2、 大细胞性贫血时可达 25%。 3、 其他各类贫血有不同程度的 增多 。 椭圆形红细胞 比正常红细胞扁薄，中心有少许血 红蛋白，部分可与周围的血红蛋 白连接，边缘部染色较中央深， 故呈靶状。主要见于以下疾病 : 1、 珠蛋白生成障碍性贫血 2、 严重缺铁性贫血 3、 一些血红蛋白病 （血红蛋白 C、 D、 E、 S病） 4、 肝病、脾切除后及阻塞性黄疸等。 靶形红细胞 细胞狭长似镰刀，也 可呈麦粒状或冬青叶 样，主要见于遗传性 镰形红细胞增多症 镰形红细胞 红细胞淡染区呈裂口状 狭孔，正常 5%。常见于感染（特别是急性化 脓性感染）、急性中毒、急性失血及急性溶血等。如晚幼粒、中 幼粒等细胞增多为极度左移，多见于类白血病反应或白血病。 具体表现为： 伴白细胞总数增高的核左移称再生性移，常见于急 性化脓性感染，如大叶性肺炎等。 白细胞总数不增加或减低的核左移称退行性左移， 常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、感 染中毒性休克的败血症等。 中性粒细胞核 出现 4、 5叶 （正 常时多为 3叶，占 5070%）或 更多，其百分数 3%。这是造 血功能衰退或造血物质缺乏的 表现。常见于巨幼细胞性贫血 和使用抗代谢药物后。此外， 在疾病进行期突然出现核象右 移，提示预后不良。 核右移 毒性变化 严重感染、恶性肿瘤、各种重 金属或药物中毒、大面积烧伤 等，中性粒细胞可出现形态变 化。具体表现为： 细胞大小不均：为骨髓内幼 稚粒细胞发生不规则的分裂增 殖所致。 中毒颗粒：细胞质中部分或 全部颗粒变粗，着色深，颗粒 的分布及大小等，可能为中性 颗粒成熟过程中发生变性所致 可在细胞质或核中出现， 常为多个，被认为是 细胞脂肪变性后未能 着色所致。 空 泡 细胞质内出现嗜碱性 多呈斑块、梨形或云 雾状，可能为核浆发 育不平衡所致，为细 胞严重毒性变的表现 杜勒小体 胞核有各种形态的芽状突 出，临床意义尚不明确， 可能与中毒、癌转移、严 重的放射损伤等有关。 核棘突 退行性变 表现为胞体肿大，结构模 糊，边缘不清。胞核可呈 固缩、肿胀、破碎、溶解 等变化，退行性变是细胞 衰老死亡的表现。 淋巴细胞的异常变化 异形淋巴细胞：细胞大小为 1025l，形态各异，呈圆 形，卵圆形或不规则形。细胞核形各异，呈圆形、卵 圆形、凹陷形、折叠形、裂隙形或分叶形，核染色质 可为细致、中度致密或粗颗粒；副染色质无或少量， 核仁无或偶见，大小和染色性各异。细胞质中等至大 量；染灰色、淡蓝色或深蓝色；可见细胞边缘染色深， 核周淡染；浆细胞样淋巴细胞常有核周淡染区和核窝； 有时可见细小嗜天青颗粒；偶见空泡。 异形淋巴细胞可见于各种病毒感染，如传染性单核 细胞增多症时最为常见。此外，可见于疟疾、过 敏性疾病、淋巴结炎等。 按形态学特征分为 型： I型 ： 空泡型或浆细胞型 II型 ： 不规则型或单核细胞型 III型 ： 幼稚型 欢迎批评指正 谢 谢！