α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测

a淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的教案教学目标:实验内容动作技能认知领域观察固定化a 淀粉酶 学会固定化 酶的基本步骤 检验水洗液 中是否还有为 固定的酶观察淀粉 遇碘反应 的变化，和 淀粉经酶 反应后遇碘的变化淀粉水解作用检测 掌握如何装 柱 控制层析柱中的液体流速 检验反应后 的流出液 层析柱 液体的流速 糊精的显色反应情感领悟思考实验报告 固定过 程中，搅拌 石英砂应 注意什么 如何检 验倒掉的 上清液是 否还有酶。为什么要 控制流速 为6滴每分 钟按照试验要 求填写通过实验培养 学生的思考能 力，以及养成 做事认真，细 心的习惯教学内容分析：试验的基本原理：淀粉遇碘变蓝，糊精遇碘变红；a淀粉酶可以将淀粉水解成糊精； 石英砂可以作为物理吸附剂固定化。淀粉酶。实验的基本步骤：1、配置可溶性淀粉溶液。取35mg可溶性淀粉溶于50ml沸水。（可溶性淀粉先用冷水调成糊状，再加入沸水中。这样溶解才会形成澄清的溶液）将配置好的淀粉溶液放置在60C（酶的最适温度50r 75C，使后期淀粉酶经过时能达到酶的最高催化活性）的水浴锅（水浴锅中添加去离 子水）中备用。2、a-淀粉酶的固定化。在50ml烧杯中将5mg a -淀粉酶溶于4ml蒸馏水中。（注意：由于酶不纯，可能有些不 溶物。）再加入5g石英砂，不时搅拌（搅拌切忌太用力），固定15min。（使酶能吸附到 石英砂表面）3、检验未吸附的游离淀粉酶。小心倒掉上清液后（未吸附的游离淀粉酶应该在上清液中），用1015ml的蒸馏水小心 清洗石英砂23次，每次取其上清液0.5ml于试管中，同时滴加淀粉溶液充分混匀。再 加入1滴KI-I2溶液，若溶液变为蓝色，说明上清液中已无游离a -淀粉酶，如果溶液 为红色，继续用蒸馏水清洗，直至淀粉溶液变为蓝色为止。（检验未吸附的游离淀粉酶 是否洗涤干净，每次蒸馏水洗涤都可以使未吸附的游离淀粉酶溶于上清液，而游离淀粉 酶可以与加入的淀粉溶液反应，产生的糊精遇碘变红。单纯的淀粉溶液与碘反应会变蓝 色。于是不断清洗，直至检验不存在了。）4、先把滤布（可以考虑滤纸片，使石英砂不从注射器中漏出）放于固定化酶柱中，再 装入有。-淀粉酶的石英砂约4ml，装柱过程中可在装有石英砂的烧杯中加入少量蒸馏 水（便于石英砂流入层析柱），同时适当打开层析柱的调节装置（使多余的液体流出）。5、把灌注了固定化酶的层析柱放在支架上，用滴管加淀粉溶液，使淀粉溶液约以 0.3ml/min（6滴/min）的流速过柱，在流出12ml反应液后（让塑料管中的水流出）， 转动关闭层析柱的调节装置，放置5min。（充分的反应时间，使后面检测效果明显。）6、打开调节装置，以0.3ml/min（6滴/min）的流速过柱，流出12ml反应液后（让塑 料管中的溶液流出），用两支试管分别接收0.5ml流出液，其中一支加入蒸馏水稀释1 倍，按以下表格在试管中加入相应试剂，观察结果。样品0.5ml 水0.5ml淀粉溶液0.5ml流出液1滴KI-顷液参考结果对照+碘色样品1+蓝色样品2+红色样品3+ （稀释1倍）+浅红色7、固定后的a -淀粉酶可以重复利用，实验后用10倍柱体积的蒸馏水洗涤固定化酶柱， 然后放置在4P冰箱中保存。教学重点：掌握a淀粉酶的固定化技术利用固定后的a淀粉酶进行淀粉的水解实验教学难点： 淀粉酶固定化的过程中，应该如何让学生在操作的同时，理解什么是固定化 实验中相关步骤的中注意事项的理解教学设计： 课前准备：在进行实验前，应先将实验所需的仪器给每个小组都准备好，由于淀粉的 溶解和保存较为简单，但实验耗时较长，所以第一步可以先为学生准备好配好的淀粉溶液。 同时，可将实验步骤适当调整，为了实验时能更好的发散学生思维，可以将实验的第六步做 一些适当调整，即调整为打开调节装置，以0.3ml/min （6滴/min）的流速过柱，流出12ml 反应液后（让塑料管中的溶液流出），用支管接取0.5ml溶液，下面，请自己设计实验对照， 证明淀粉是否发生了水解，并生成了糊精。而第7步，由于条件有限，可以省去。 板书设计：将实验所需的基本原理可以用背景资料的形式写在黑板最左边，接着是实 验材料：a -淀粉酶淀粉溶液、层析柱、石英砂、KII2溶液 然后将实验的基本流程写 出即配置一固定一洗一装柱一洗柱一淀粉溶液过柱一检测。画一个层析柱的装置图。同 时在右面书写实验注意事项包括：搅拌石英砂是不宜用力过大或时间过长；滴管流速保持为 6滴/min;显色时只加一滴KII2溶液。最后是实验作业，内容包括：固定化酶的方法还有 哪些、固定化酶和游离酶相比有哪些优缺点、本次实验的收获 课堂讲解：先简单的介绍一下实验的各种材料和器材，然后介绍一下实验原理，接着介绍实验实验的具体步骤，并对实验步骤相关该注意环节给予提示和设置一些思考，让学生 自己设计如何证明淀粉发生了水解。在实验完成后，进行实验总结并对同学们在实验过程中 遇到的问题给予解答。最后，布置实验作业。教学程序教师行为学生行为设计思路提前准备实验器材及药品将实验的相关用品准 备齐全，配发给每个 小组，并提前做一些 与课堂教学 有关的准 备，可以节 省课堂时间