《微生物知识培训》PPT课件

2022年12月7日星期三 我们所生活的环境中，到处都存在着大量的微生物。在一般空气中，微生物达800-3500个/m3，在土壤中达1-500108个/g，在严重污染的水中可达107个/ml。（饮用水要求细菌总数100个/ml，大肠杆菌3个/ml。经水塔或贮水池贮存后，短期内可繁殖至105-106个/ml。）人的头皮上有140万个/cm2，两手上约有4-40万个，1g指甲污垢有38亿个，1g粪便可达10-1000亿个。可以说微生物是无处不在，无处不有。许多以前被人们认为是极端（高温、高压、强酸、强碱、低温等）甚至是致死的环境，现在已发现生活着各种类型的微生物（称为极端微生物）。事实说明，微生物有特别顽强的生存、繁殖和变异能力来适应环境。分类分类 三型八大类三型八大类：真核细胞型微生物真核细胞型微生物细胞核分化程度高，有核细胞核分化程度高，有核膜和核仁，细胞器完整。如真菌。膜和核仁，细胞器完整。如真菌。原核细胞型微生物原核细胞型微生物细胞核的分化较低，仅有细胞核的分化较低，仅有原始核，无核膜、核仁。细胞器很不完善。原始核，无核膜、核仁。细胞器很不完善。DNA和和RNA同时存在。这类微生物众多，有细菌、放同时存在。这类微生物众多，有细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。非细胞型微生物非细胞型微生物是最小的一类微生物。无典是最小的一类微生物。无典型的细胞结构，只能在活细胞内生长繁殖。核酸型的细胞结构，只能在活细胞内生长繁殖。核酸类型为类型为DNA或或RNA。病毒属之。病毒属之。葡萄球菌微生物形态乳酸杆菌炭疽杆菌炭疽杆菌炭疽杆菌是人类历史上第一个被证实引起疾病的细菌。1877年Robert Koch首次在培养基上培养成功，并说明其可形成内孢子体，注射动物后可导致实验性炭疽，是出现在历史上比较久的一种生物武器，也是战争中常用的一种细菌，曾使无数人丧命。二战时期，日本731部队曾经大量培养炭疽病菌，并用活人标本进行实验。炭疽杆菌是一种很大的格兰氏染色阳性杆菌，可在普通培养基上需氧或厌氧条件下培养。芽孢杆菌蜡样芽孢杆菌 淡水中的螺旋菌 青霉是种真菌，属于子囊菌。有的能产生青霉素，救了无数人的命。产生无性孢子。酵母菌根霉（Rhizopus)是种真菌，属于接合菌。能产生无性孢子菌丝体的直径约12 um黑的是孢子囊 支原体扫描电镜图片支原体支原体（mycoplasma）以前被认为是最小的能独立存活的原核生物，以前也被认为是地球上迄今为止被发现的最小的细胞生物。全世界90%的猪体内寄生着支原体。立克次氏体（rickettsiae），一种微小的寄生的细菌。上图是动物的淋巴细胞，红色的是寄生的立克次氏体。爱滋病病毒SARS病毒是一类新发现的冠状病毒 禽流感病毒微生物的“生物界之最”个体最小 数量最多 分布最广形态最简 变异最易 起源最早胃口最大 抗性最强 发现最晚食谱最广 休眠最长 界级最宽繁殖最快 种类最多微生物五大共性微生物五大共性 体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；分布广，种类多；微生物的特点种类多、分布广微生物在土壤中的数量最多，据统计，一克土壤中含有几千万到几百亿的微生物。每毫克大肠杆菌细胞的表面积比每毫克人细胞的表面积大30万被左右；积极活动的大肠杆菌，每小时能消耗它体重2000倍的乳糖；微生物的食谱非常广泛，凡是动植物能利用的营养，微生物都能利用，大量的动植物不能利用的物质，甚至剧毒的物质，微生物照样可以利用。如大肠杆菌在合适条件下，每小时可以消耗相当于自身重量2000倍的糖，而人体则需要40年之久。个体小、胃口大 微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代，如细菌一般每2030分钟既可分裂一次；生产味精的谷氨酸短杆菌，从摇瓶培养扩大到50吨发酵罐的过程中，在52小时内细胞数目增加了32亿倍；乳酸菌每小时可产生为其体重100010000倍的乳酸；一种产朊假丝酵母合成蛋白质的能力是大豆的100倍，比食用公牛强10000倍；繁殖速、转化快 适应强、异变异 多数细菌能耐0196的低温；在海洋深处的某些硫细菌可在250300的高温条件下正常生长；一些嗜盐细菌甚至能在饱和盐水中正常生活；产芽孢细菌和真菌孢子在干燥条件下能保藏几十年、几百年。由于微生物繁殖快，也可在短时间内产生大量变异的后代。正是由于这个特性，人们才能够按照自己的要求不断改良在生产上应用的微生物，如青霉素生产菌的发酵水平由每毫升20单位上升到近10万单位，利用变异和育种得到如此大幅度的产量提高。营养物质营养物质 PH 一般细菌的生长最适酸碱度(pH)为7.27.6，少数菌需在较酸或较碱的环境中生长繁殖。温度温度 温度是细菌生长的重要因素之一，各种细菌的适宜温度范围相差很大，据此而有嗜热(52)、嗜温及嗜冷菌之分。大多为嗜温菌(1540)，一般细菌的培养采用37。气体气体 专性需氧菌：具有完善的呼吸酶系统，仅能在有氧环境下生长。微需氧菌：在低氧压（5%-6%）生长最好。兼性厌氧菌：兼有有氧呼吸和无氧发酵两种功能，但以有氧时 生长较好。大多数病原菌属于此。专性厌氧菌：缺乏完善的呼吸酶系统（氧化还原电势高的呼吸 酶、分解有毒氧基团的酶），只能在无氧环境中进行发酵。渗透压渗透压 细菌的生长的环境因素细菌的生长的环境因素 粘质沙雷氏菌的菌落特征 沙门氏菌的菌落特征 铜绿假单孢菌的菌落特征铜绿假单孢菌的菌落特征 弗氏志贺氏菌的菌落特征 粘质沙雷氏菌的菌落特征 各种细菌的菌落霉菌霉菌 真菌在微生物世界中可以称得上是个巨人家族，真菌的个头较大，其中的许多成员对我们来说都是很熟悉的。例如，在潮湿的天气里，常常发现粮食、衣服、皮鞋上长了霉，我们做酱、酱油、豆腐乳用的曲霉和毛霉等霉菌；发面、酿酒用的酵母菌等都是真菌，就连人们爱吃的蘑菇、木耳等蕈子，也都是真菌大家族的成员。真菌是微生物中的一大类群，属于真核微生物，与人类关系非常密切。真菌是抗生素（如青霉素、头孢霉素）、有机酸等多种发酵工业的基础，在自然界中则扮演着各种复杂有机物分解者的角色。然而有些真菌是病原菌，引起人类和动植物病害，有些真菌产生毒素，使人、畜中毒，严重者引起癌症。如黄曲霉产生的黄曲霉毒素毒害肝脏，易引发肝癌。各种曲霉的菌落 各种病原真菌的菌落 青霉的菌落 青霉的菌落 酵母菌 提起酵母菌这个名称，也许有人不太熟悉，但实际上人们几乎天天都在享受着酵母菌的好处。因为我们每天吃的面包和馒头就是有酵母菌的参与制成的；我们喝的啤酒，也离不开酵母菌的贡献，酵母菌是人类实践中应用比较早的一类微生物，我国古代劳动人民就利用酵母菌酿酒；酵母菌的细胞里含有丰富的蛋白质和维生素，所以也可以做成高级营养品添加到食品中，或用作饲养动物的高级饲料。酵母菌在自然界中分布很广，尤其喜欢在偏酸性且含糖较多的环境中生长，例如，在水果、蔬菜、花蜜的表面和在果园土壤中最为常见。酵母菌的菌落 大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似，但比细菌菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，容易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落多为乳白色，少数为红色，个别为黑色。各种酵母菌的菌落 啤酒酵母的菌落 红酵母的菌落 微生物的营养微生物的营养u水u碳源u氮源u无机盐u生长因子 水：水是各种生物细胞必需的。水是良好的溶剂，微生物的新陈代谢过程中的一切生化反应都离不开水的作用。碳源：碳源是合成菌体成分的原料，也是微生物获取能量的主要来源。整体上看来，微生物可以利用的碳源范围极广，从大类上说，可以分为有机碳源和无机碳源两大类，凡必须利用有机碳源的微生物就是异养微生物，凡能利用无机碳源的微生物就是自养微生物。糖类是最广泛利用的碳源。氮源氮源主要是供给合成菌体结构的原料，很少作为能源利用。与碳源相似，微生物作为一个整体来说，能利用的碳源种类十分广泛。某些微生物（如固氮菌）能利用空气中分子态的氮或利用无机氮化物如铵盐、硝酸盐合成有机氮化物。多数致病菌则必须供给蛋白胨、氨基酸等有机氮化物才能生长。无机盐类：无机盐主要可为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素。微生物需要的无机盐类很多，主要有P、S、K、Na、Ca、Mg、Fe等，其主要功能为构成菌体成分；调节渗透压；作为某些酶的成分，并能激活酶的活性等。生长因子：有些微生物虽然供给它适合的碳源氮源和无机盐类，仍不能生长，还要供给一定量的所谓“生长因子”。其种类很多，主要是B族维生素的化合物等。生长因子可以从酵母浸出液、血液或血清中获得。(.延迟期，.对数期，.稳定期，.衰亡期)细菌生长的典型曲线 微生物在空气中的分布 空气本身缺乏微生物生活所必需的营养物，日光对微生物也具有很强的杀菌作用，另外空气一般是干燥的，因此空气不是微生物生活的良好环境。空气中的微生物主要来源于带有微生物菌体及孢子的灰尘，这类微生物大多数是腐生性的，还来源于人和动物，它们大多数是通过呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，悬浮在大气中。空气中微生物的分布随环境条件及微生物的抵抗力不同而呈现不同的分布规律。空气中存在较多的、存活时间较长的是各种真菌、放线菌的孢子及细菌芽胞。空气中微生物的数目决定于尘埃的总量。空气中的微生物的数量随人的密度、活动程度(尘土被搅动的情况)以及温度、湿度、风力等因素而异。空气中因缺乏营养物，微生物在其中不能繁殖与久留，只有抵抗力较强的微生物如芽胞杆菌、八叠球菌、葡萄球菌以及真菌(如青霉菌、曲霉菌、毛霉菌等)存活时间较长。空气携带细菌主要有2种方式；一是细菌可附着在尘土上(细微颗粒)，长时间浮游在空气中；其二，细菌在人咳嗽、喷嚏、唱歌、讲话、呼吸时通过口腔、鼻腔部喷出的飞沫(大多数飞沫为48m)可长时间浮游在空气中，飞沫的水分蒸发后便成飞沫核，直径缩至l2m，附着的微生物随气流悬浮不定。空气中微生物是药品生产中引起污染的重要来源之一。因此必须做好空气的清洁卫生和消毒管理工作。正常人体常见的微生物正常人体常见的微生物在人的皮肤和与外界相通的粘膜腔道中，都有微生物的生长繁殖。这些存在于人体各部位的微生物，它们与宿主长期保持着共生与互生的关系，通常称它们为正常菌群或正常人体常居菌。在正常情况下，正常菌群的存在对人体是有益的。如大肠中大肠杆菌，可以合成核黄素、B12，、维生素K及多种氨基酸等人体不可缺少的营养物质，还能干扰和抵抗其它病原微生物对宿主的侵入。但某些正常菌群，在人体抗力下降，或当一 些微生物异位侵入某些组织时，都可以引起人体疾病，这些细菌通常称条件致病菌。现将人体各部位存在的主要菌群分述如下。微生物在人体中的分布部 位 主主 要要 微微 生生 物物 的的 种种 类类口腔 白色葡萄球菌、绿色链球菌、类白喉杆菌、梭形杆菌、螺旋体、真菌 胃 一般无菌肠大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、粪链球菌、产气荚膜杆菌、破伤风杆菌、真菌、腺病毒等鼻咽腔 葡萄球菌、绿色链球菌、类白喉杆菌、卡答儿球菌、绿浓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、副大肠杆菌、变形杆菌、腺病毒尿道 （男）前尿道：白色葡萄球菌、类白喉杆菌 （女）无菌或少数革兰阳性球菌皮 肤 葡萄球菌 白色葡萄球菌、类白喉杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、真菌阴 道 乳酸杆菌、白色念珠菌、类白喉杆菌、大肠杆菌外耳道 葡萄球菌、类白喉杆菌、绿浓杆菌、非病原性抗酸菌眼结膜 白色葡萄球菌、类白喉杆菌、结膜干燥杆菌等正常人体微生物的分布部位Disinfection杀死物体上杀死物体上病原微生物病原微生物的方法的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物或非病原微生物消毒：消毒：杀灭物体上杀灭物体上所有微生物所有微生物的方法。的方法。灭菌：灭菌：Sterilization不存在活菌的意思。不存在活菌的意思。无菌：无菌：Asepsis防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。防腐：防腐：Antisepsis消毒与灭菌消毒与灭菌概 述 消毒：采用物理或化学的方法，清除或杀灭外环境(传播媒介)中的病原微生物或其它有害微生物。外环境系指无生命的物体及其表面，为叙述的方便，人体体表皮肤的消毒除菌也放入此例。对消毒意义的理解，有2点需要注意，其一是不必清除杀灭所有微生物，主要是针对病原微生物；其二消毒是相对的，不是绝对的，只要将微生物减少到无害化的程度。消毒剂：用于杀灭微生物的化学药物。如乙醇、新洁尔灭等。灭菌：用物理和化学的方法杀灭一切活的微生物(包括病原微生物和非病原微生物，繁殖型或芽胞型微生物)，其概念是绝对的。然而，由于种种原因及遵照概率函数，一些微生物总是以有限的机会得以生存，因此灭菌的要求只是把微生物的存活概率减少到最低限度。据此，工业化生产的灭菌，允许将灭菌概率标准规定为10-6，即在100万个试验对象中，可有1个以下的有菌生长，就可认为该批产品是无菌的。灭菌剂：能杀灭一切微生物的药物。如过氧乙酸、甲醛等。根据上述定义，消毒与灭菌是两个不同的概念，消毒处理不一定能达到灭菌的程度，而灭菌则一定能达到消毒之目的。灭菌是最彻底的消毒。无菌：是指物体或任一介质中没有活的微生物的存在，即无论用何种方法，检不出活的微生物。无菌操作：指在操作中，采用或控制一定条件，尽量避免产品污染微生物的一种操作方法程序。为此目的，所用的一切物品、环境，均应事先灭菌，操作也应在无菌操作室中进行。无菌观念：指在无菌操作时，避免污染任何微生物。“无菌”从定义上来说是一个绝对的概念，但遗憾的是，在科学和技术高度发展的今天，药品的绝对无菌即做不到，也无法加以证实。然而，无菌制剂的安全性要求人们设定无菌的相对标准。FDA、欧洲制药工业界曾将百万分之一微生物污染率作为灭菌产品“无菌”的相对标准，它和蒸汽灭菌后产品中微生物存活的概率为10-6（即产品的无菌保证值为6），系同一标准的不同表示法。这一标准于1980起收录于USP 中，如今已为世界各国普遍接受和采用。药品生产过程中的消毒与灭菌，与一般微生物学上有所不同。微生物学上的消毒与灭菌，只要求杀灭和清除一切微生物，使其不成为传染源。而药品生产过程中的消毒与灭菌，因灭菌后直接用于人体，故除要灭菌外，尚需要考虑：1、微生物的污染数量，如大量污染，即使灭菌，其尸体、毒素仍然对人造成危害。2、所选方法对其内在质量有无影响。3、所用方法灭菌后有无残留毒性，对于关键性的医疗用品，要求更应严格。如环氧乙烷用于PVC一次性输液器灭菌，效果虽好，但它可引起人类畸变和癌症，而PVC又是目前已知的塑料中吸附环氧乙烷最强的一种。据何复光等报道，在环氧乙烷浓度为600mgl，温度55，湿度60%，作用4 h，据气象色潜仪分析，PVC输液器的环氧乙烷残留量达1895ppm。放于室温自然消散120 h残留量还达28ppm。对此，国外对于消毒灭菌后残留量进行了严格的控制，如美国职业安全卫生局(OSHA)将原规定工人接触环氧乙烷的剂量从50ppm降到lppm，从而限制了环氧乙烷的使用。消毒与灭菌的方法，按其性质可分为物理法和化学法两类。物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 利用物理因素作用于微生物，将之杀灭或清除，称为物理消毒法。常用的物理法有：机械消毒法、热力消毒法、光消毒法、电消毒法、声消 毒法及辐射消毒法。此方法不是真正的杀灭微生物，而只是达到机械排除。如刷、冲洗、擦拭、吸附、过滤等。上班前进入洁净室的洗手，也属机械消毒法。由于反复冲洗、擦刷，使细菌机械地被排除。有人证明用8min流水冲洗可除菌80%，15min可除菌99.0%。过滤除菌是用物理阻留的方法除去微生物。如用砂滤法制备生活饮用水，厂房空气净化设施以及戴口罩等，都是利用过滤除菌的有效方法。目前，滤膜器孔径最小可达0.01m，能制取优质的注射用水可将空气处理到100l中只有1颗0.3m尘粒的超净水平。一、机械消毒法 在所有消毒与灭菌的方法中，热力是一种应用最早，效果最可靠使用最广泛的方法。热杀灭微生物的机理是损伤微生物的细胞壁，细胞膜、破坏微生物的蛋白质(凝固或变性)从而导致其死亡。热力消毒与灭菌的方法分为两类：干热和湿热。二、热力消毒法 A)干热消毒与灭菌 1灼烧：灼烧是直接用火焰灭菌。如微生物实验室接种针、接种环、涂菌捧等不怕热的金属器材的灭菌。在没有其它办法灭菌的情况下，对于器械亦可用灼烧法灭菌。灼烧法来菌温度很高，效果可靠，但对器械有破坏性。2干烤：干烤灭菌是在烤箱中进行。适用于高温下不损坏、不变质物品的灭菌。例如玻璃制品：平板、试管、吸管，注射器等均可用此法灭菌，一般在180下，干烤l2h。(使用烤箱灭菌时，应注意下列事项：(1)玻璃器皿应完全洗净，以免吸附物高温时炭化，洗净后完全干燥，再放入烤箱内。(2)物品包装不宜过大，放置物品不宜超过烤箱高度的三分之二。物品间应留有空隙，以利于热空气对流。(3)灭菌过程中不得中途打开烤箱放入新物品，以免突然冷却致使物品爆裂。(4)在高温下易损坏的物品，如纸、棉织品、塑料制品、橡胶制品不可放入干烤箱内灭菌。(5)灭菌时间应从烤箱内温度达到所需温度时算起。3红外线照射：也是干热灭菌的一种方法。其波长是O.771000m的电磁波，有良好的热效应，尤其是在110m波长段。红外线的热能直接由放射的电磁波产生，不需经空气传导，加热速度快。但热效应只能在照到的表面产生，不能使一个物体的左右前后均匀加热。高强度远红外线可产生200高温，故可用于医疗器械的灭菌，60年代前曾受重视，但因后来塑料高分子产品增多，使这种灭菌方法未能广泛使用。(B)湿热消毒与灭菌 1煮沸法：煮沸法消毒是使用最早的消毒方法之一。由于其方法简单、方便、经济、实用效果好，故今仍是一种常用的消毒方法。煮沸消毒的能力较强，一般在水沸腾后再煮515min，即可达到消毒目的。l00几乎能立即杀灭细菌繁殖体、真菌、立克次氏体、螺旋体和病毒等。芽胞型菌则抗煮沸能力较强，一般要1h以上，甚至高达8 h之多。如能在煮沸时加入增效剂，可以增强煮沸消毒效果，如在煮沸针尖时，加入l2%碳酸钠，煮沸5min即可达到灭菌要求，同时还要防止其生锈，保持它的锋利。零配件(如瓶塞穿孔器、接头、护套)的清洗处理中，加0.5%盐酸或氢氧化钠液煮沸亦起到增效的作用。2高压蒸汽灭菌：目前常用下排气式高压灭菌器，使用方法等介绍如下：手提式高压灭菌器：是实验室、卫生医疗单位常用的小型灭菌器。由铝合金材料制造，为单层圆筒，内有一铝质的盛物捅，直径28cm，深28cm，容积约181，全重18kg，使用压力14kgcm2。主要部件有；压力表1个，指示高压锅内压力。排气阀1个，下接排气软管，伸至盛物桶下部，用以排除冷空气。安全阀1个，当高压锅内压力超过1.4kgcm2时，可自动开启排气。使用方法：在高压锅内放入约4cm深的清水，将消毒物品放入盛物桶内，装物不宜太多，且应使物品间留有空隙，盖上锅盖，注意将排气软管插入盛物桶壁上的方管内，拧紧螺丝。当加热到表压为510磅英寸2*时，打开排气阀。放冷空气，至有蒸气排出，即关闭排气l倒，待上升至所需压力，调节热源，维持到预定时间。结束后排气至0，打开盖子，取出物品。消毒液体时，最好慢慢冷却，以免减压过快液体外溢或瓶破裂。高压灭随应注意以下各点：(1)必须将灭菌器内冷空气抽尽或排尽，空气的排尽程度与温度的关系极为密切(表22)。高压灭菌器内压力和冷空气排放与温度的关系 表表 压压排出不同程度冷空气时高压锅内温度（排出不同程度冷空气时高压锅内温度（）磅磅/英寸英寸2kg/cm2全排出全排出排出排出2/3排出排出1/3未排出未排出100.7011510910090151.05121115109100(2)合理计算时间。其时间的计算，应从灭菌器内达到温度要求时算起，至完成灭菌为止。一般下排气式高压灭菌器为12115min或11530min。(3)包装与容器不宜过大，过紧，也不宜将物品放于铝饭盒内。(4)合理布放物品。不宜过多，一般为85%，且物品间留有空隙。(5)注意安全操作，每次灭菌前应检查灭菌器是否处于良好的工作状态，尤其是安全阀是否良好，盖是否关紧。加热宜均匀，灭菌后减压不可过猛。压力表退回“O”处才可打开盖。6)为监测灭菌教果，可采用留点温度计或嗜热脂肪芽胞菌生物指示菌片。热力灭菌法热力灭菌法 高温杀灭細菌焚烧-最彻底的灭菌方法烧灼-直接用火焰灭菌方法干烤-加热160-180 2小时干热灭菌法干热灭菌法湿热灭菌与干热灭菌的比较湿热灭菌与干热灭菌的比较湿热灭菌法湿热灭菌法加压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法 121 2030分钟煮沸消毒法水煮100 5分钟(繁殖体)2小时(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法间歇蒸汽灭菌法水蒸汽100 1530分钟(繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 较低的温度（61 30分钟）杀灭致病菌同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好原因原因1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固湿热中细菌菌体蛋白较易凝固2、湿热的穿透力比干热大湿热的穿透力比干热大3、湿热的蒸汽有潜热湿热的蒸汽有潜热 杀菌原理与作用 紫外线可分为长波段、中波段和短波段3组。以短波段2500265.0nm的杀菌力最强。一般多以2537nm作为紫外线杀菌波长的代表。紫外线照射能量较低，不足以引起原子的电离，仅产生激发作用，使电子处于高能状态而不脱开。当微生物被照射，此作用可引起细胞内成分，特别是核酸、原浆蛋白与酶的化学变化，从而使之死亡。各种微生物对紫外线的耐受力不同，真菌孢子对紫外线的耐受力最强，芽胞菌次之，细菌繁殖体最差。但也有例外，如橙黄八叠球菌的耐受力反比枯草杆菌芽胞高。三、紫外线消毒 因紫外线是一种低能量的电磁辐射，故穿透力极差，空气中的湿度、尘粒对其均有影响；在液体中，亦随深度增加而降低。各种杂质(盐、有机物等)均可影响紫外线作用，它不能透过固体物质。普通玻璃中有氧化铁，可阻挡紫外线。因此，它无法透过2mm厚的窗玻璃。但能透过石英，糊窗纸可透过2040；聚氯乙烯薄膜，开始时可透过30%，但6 h后，由于薄脱变质，透过率可以降至3以下。消毒应用 1空气消毒 紫外线的空气消毒，主要是利用局部空气先行照射消毒，然后随着空气的对流而使全室空气得到消毒。为获得最大的反射章，充分发挥紫外线的作用，紫外线灯上需装反光性强的铝制反光罩。(1)固定式照射：将紫外灯固定于天花板上，略高于人的头顶，向下照射；或固定于墙壁上，侧向照射。每分神照射产生的效果相当于换气13次。每换气1次约可清除原菌数的632%。因紫外线对人体有害，此类适于无人在的情况。若消毒必须在室内有人情况下进行，则可用向上照射法，即将灯固定于天花板或墙壁上，离地2.5m左右，灯管下按装金属反光罩，使光线反射到天花扳上。一般为防止损害人的健康，每立方米的功率不超过IW。在1015m2的房间按装30w紫外线灯管1支。照射时，每次40120min，间隔lh。用这样的方法，可减少空气中微生物5070%，甚至达90以上。(2)移动式照射：用4支30W紫外线灯管装于0.3m的铝制圆筒内，在一端装以28 m3min流量的风扇即制成了移动式紫外线空气消毒设备。这种装置依靠风扇，使空气流经紫外线通道而将之消毒。可用于生活用房及缓冲间等消毒灭菌。在体积较小的房间，lh照射可相当于换气27次。2对水的消毒 紫外线消毒清水，装置的设计应使灯管不浸于水中。常用的直流式消毒装置呈管道状，紫外线灯管固定于液面上l cm左右处。水由一端进人，一端流出，流过的水层不宜太厚，一般不超过2 cm。使用注意要点 l灯管表面应经常用酒精棉球轻轻擦拭，除去表面的灰尘与污垢，以减少对紫外线穿透的影响。2紫外线内眼看不见，灯管放射出的蓝紫色光线并不代表紫外线强度。有条件的可用紫外线强度仪测定其强度，无条件者可逐月记录使用时间。紫外线灯的平均寿命(每3h开启1次)可达2500h以上。3消毒时，室内应保持清洁、干燥。空气中不应有灰尘或水雾，如空气中含尘粒800900粒m3，则降低灭菌效率2030%；湿度4565%，紫外线照射3h，空气中细菌减少8090，若相对湿度增到8090时，则降低灭菌效率3040%，一般相对湿度不宜超过4060%；。4不透紫外线的表面，只有直接照射才能达到消毒目的，因此要按时翻动，以及室内不能放置过多不必要的物品。5紫外线对人体有一定的危害，直接照射(1m远)12min，可使皮肤产生红斑，对眼睛直射30s可产生刺激症状，剂量再增大引起紫外线眼炎。因此，应避免直接照射或眼睛直视。6 温度对紫外线有一定影响，一般1535，若室温一40，紫外线即失去作用。紫外线的灭菌效能与投射角度也有关系，在等距离内，每相差30。，则照射强度下降很多。如90.直射强度为48mWcm2；倾斜30.时强度减至2.7 mWcm2；若再倾斜30。，则强度减少到0.56mWcm2。微波是指频率在303000MHz之间的电磁波。水可强烈地吸收微波，使其极性分子转动，分子间的磨擦而生热，且升温迅速，靠热力而灭菌。在数十秒至几分钟之内可达100150，并全部杀死液体中的微生物，适于水溶性注射液的灭菌。另外，固体药材饮片及固体制剂（丸剂、散剂、胶囊粉等）也含少量水分，微波能穿透到固体内部，由表至里被均匀加热，而起干燥、灭菌的作用。多用于口服液体制剂的灭菌，有望用于注射液的灭菌。但可能对某些药品的PH值、含量、颜色有影响。四微波灭菌法 臭氧是以无声放电法产生的。在一对交流电极之间隔以介电体，当空气或氧气通过高压电极(60008000V)时，在具有足够动能的放电电子中，使氧分子电离，一 部分氧分子被聚合为臭氧。臭氧有很强的杀菌力，高效、广谱。有的医用高分予器材厂采用臭氧发生器进行了净化车间的空气消毒，效果甚为满意。五、电消毒法 (一)概况 1957年，美国强生(Johnson)公司的一个分公司(Ethicon)首先应用辐照技术进行了手术缝合线的消毒。1958年。丹麦建立丁第一个钴60辐射消毒装置。由于采用该方法消毒灭菌比热力消毒、环氧乙烷法具更优越的地方，即灭菌彻底、不污染环境、无残留毒性、能耗低、更适用于热敏怕湿材料的灭菌等优点，因此，发展非常迅速。六、辐射消毒法 辐射消毒法使用评价 优点：(1)消毒效果可靠；(2)不引起温度升高，是一种“冷处理”灭菌；(3)节约能源；(4)不破坏包装，可长期保存；(5)穿透力强，适用于封装灭菌；(6)无残留毒性；(7)处理过程干燥，无消毒剂的沾污；(8)可连续灭菌；(9)无环境污染。缺点：(1)一次性投资大；(2)必须有经过专门训练的技术人员管理。化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法 一、气体灭菌法 此法系指用化学思剂的气体或蒸汽对物品进行的灭菌。常用者为环氧乙烷、甲醛、过氧乙酸、丙二醇、乳酸、戊二醛等。(一)环氧乙烷 在室温、常压下是无色气体，具醚样臭，可闻出的气味阈值为700ppm，沸点为108，当温度低于10.8时，气体液化呈无色透明液体，能溶于水。环氧乙烷具较强的扩散和穿透能力，作用快，对细菌芽胞、真菌和病毒等各种微生物均有杀灭作用，属于广谱灭菌剂。1灭菌机理 环氧乙烷属烷化剂，它能与微生物的蛋白质、DNA等发生非特异性的烷基化作用，对菌体细菌的代谢产生不可逆性破坏。2应用范围 可用于对热敏感的塑料制品、橡胶制品、皮革制品、聚乙烯等包装的某些药品、工作衣敷料等。3注意事项 (1)环氧乙烷具可燃可爆性，当与空气混合，空气含量达3%(VV)时即可爆炸。故应用时需用情性气体如二氧化碳或氟利昂等稀释，如配成环氧乙烷10%，加二氧化碳90%；环氧乙烷1012%，氟利昂8890%等多种规格的混合气。(2)环氧乙烷对塑料、橡胶、纸板等穿透力强，亲和力也强。故灭菌完毕后需通空气或采用排除毒性气体装置，将被某些材料吸收的环氧乙烷降到最低浓度。一些材料吸收环氧乙烷的情况列于表23。二、表面消毒 大多数的化学消毒剂，仅能杀灭微生物的繁殖体，而不能杀灭芽胞，故一般用于表面消毒，即在控制的环境中减少细菌，维持无菌状态。选择的消毒剂必须是抗菌谱广的或有针对性的。(一)理想的化学消毒剂应县备的性质 使用情况下的高效；有效浓度低；作用速度快；性质稳定；无腐蚀性，低毒；易溶于水；可在低温下使用；不易受外界理化因素影响；无色、无味、无臭；无残留毒性；使用无危险性；价廉。二)常用的消毒剂 1醇类：醇类消毒作用较快，性质稳定，无腐蚀性，无毒性，能去污，起清洁作用，价廉易得。目前使用最为普遍的是乙醇。它属中效消毒剂，可杀死各种微生物，但不能杀灭细菌芽胞。杀菌机理是使菌体蛋白质变性。使用浓度75%。常用于皮肤及手的消毒。采取常用浓度，仅l0s就能杀灭绿脓杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌、伤寒杆菌等。2.表面活性剂：带阳电荷的季胺盐类化合物能被牢固地吸附于带有负电荷的细菌表面，破坏细菌质膜，使菌体成分漏出。这类化合物列细菌繁殖体有广谱杀灭作用，且作用快而强，毒性亦较小，属于低效消毒剂(可杀灭细菌繁殖体、真菌和亲脂病毒。但不能杀灭芽胞、结核杆菌和亲水病毒)。属于此类的药物有新洁尔灭(常用浓度0 l0.2%)、杜灭芬(O.01O.02%)、洗必泰(O.10.2%)。使用时应注意；配制消毒液时不宜用硬水，最好用蒸馏水。高浓度在低温时易发生浑浊或析出，宜置于温水(约40)中使其混匀溶解澄清，再配制所需浓度。新洁尔灭等虽属低效消毒剂，但在医疗用品生产环境中，鉴于此类药物杀菌浓度低，价廉(与乙醇相比)，作为综合消毒措施中的补充，减少生产环境细菌数量，还是有实用价值的。此类消毒剂常用于手、皮肤及操作台面等消毒。3含氯类 消毒剂溶于水中能产生次氯酸者称含氯消毒剂。这类消毒剂属中效消毒剂，常用于水的消毒。一般认为含氯类消毒剂杀菌机理是通过次氯酸的形成，由次氯酸分解形成新生态氧以及由消毒剂中含有氯的直接作用。因次氯酸不仅较与细胞壁作用，且因其分子小，不带电荷；易于侵入细胞内与菌体蛋白质或酶发生氧化作用，而使微生物死亡。目前，我国常用者有漂白粉、次氯酸钙、二氯异氰尿酸钠、氯胺T等。(1)漂白粉：主要成分为次氯酸钙(含32-36%)，还含氯化钙(29%、氧化钙(1 0-18%、氢氧化钙(15%)及水(10%)。为白色颗粒粉末状，有氧臭，能溶于水，溶液呈混浊状，有大量沉渣。稳定性差，可在空气中逐渐吸收水与二氧化碳而分解，若保存不当，遇月光，热、潮湿等，分解反应加快。一般含有效氯量2532%，常以25计算用量。若有效氯低于15则不能使用。对物品有腐蚀与漂白作用。(2)次氯酸钙(漂白粉精)：白色粉末，有氯臭，易溶于水，有少量沉渣。含杂质少，较稳定，不易受潮分解。含有效氯8085%(一般按80%计算用量)。对物品有比较强的腐蚀与漂白作用。溶液呈碱性。其pH随浓度增加而升高。(3)二氯异氰尿酸钠：别名优氯净。为白色晶粉，有浓厚的氯气味，含有效氯60645%。性稳定，易溶于水，溶解度为25%(25)。溶液呈弱酸性。溶于水中产生次氯酸，其水解常数为110-4级，较氯胺T为高。水溶液稳定性较差，在紫外线作用下有效氯丧失加速。影响含氯类消毒剂的因素：药液浓度愈高，杀菌效果愈好；pH值愈高，杀菌效果愈差；温度增高，可加强杀菌作用；有机物存在可消耗氯，影响其杀菌作用；水质硬度由ppm 增至400ppm，对杀菌作用影响不大。毒性：次氯酸盐释放出的氯，可引起流泪、咳嗽，并剌激皮肤和粘膜，严重者可使人产生氯气急性中毒，表现为躁动，恶心、呕吐、呼吸困难、甚至窒息死亡。干粉和溶液溅入眼内可导致灼伤。使用时务必注意。类别类别作用机制作用机制常用种类常用种类用途用途酚类酚类蛋白变性，蛋白变性，细胞膜损伤细胞膜损伤石炭酸石炭酸地面、器具表面、地面、器具表面、皮肤消毒皮肤消毒醇类醇类蛋白变性蛋白变性乙醇乙醇皮肤、体温计消毒皮肤、体温计消毒氧化剂氧化剂氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀高锰酸钾高锰酸钾皮肤、尿道、蔬菜、皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒水果消毒重金属盐重金属盐氧化、蛋白酶变性氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞红汞、硫柳汞皮肤、粘膜皮肤、粘膜、小创伤消毒、小创伤消毒氧化剂氧化剂氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀过氧乙酸、过氧乙酸、碘酒碘酒塑料、玻璃器材、塑料、玻璃器材、皮肤消毒皮肤消毒表面活表面活性剂性剂蛋白变性，蛋白变性，细胞膜损伤细胞膜损伤新洁而灭新洁而灭手术洗手、浸泡手术洗手、浸泡手术器械手术器械常用消毒剂的种类和用途常用消毒剂的种类和用途 70%75%乙醇水溶液；0.5%洗必泰溶于70%乙醇，再加入2%甘油，用于皮肤、器具等消毒；异丙醇 75%水溶液，用于皮肤、器具等消毒；甲醛 37%40%甲醛液89ml，再加入45g高锰酸钾，每m3熏蒸量，密闭1224h，刺激性强；戊二醛 2%水溶液，用于空气、器具等消毒。广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒，毒性较轻；新洁尔灭（苯扎溴铵）0.1%水溶液，用于皮肤、粘膜、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效，抗菌谱较窄；杜灭芬（消毒宁）0.05%0.1%水溶液，用于皮肤、器具等消毒；过氧乙酸 a、0.2%0.5%水溶液；b、新配0.5%水溶液；c、1g/m3；用于器具等消毒，抗菌谱广，可用于皮肤消毒杀灭某些病毒；熏蒸，但性质不稳定。乳酸 a、0.331mol/L；b、11.5ml/m3熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸 喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用；熏蒸，密闭12h以上。麝香草酚 5%麝香草酚溶于50%乙醇，喷洒墙面、地面，杀霉菌。影响消毒剂作用的因素消毒剂消毒剂细菌细菌 环境环境种类种类浓度浓度作用时间作用时间菌龄菌龄种类种类有机物有机物温度温度酸碱度酸碱度选择适当的消毒剂低毒低毒价廉价廉低破坏低破坏易贮藏易贮藏方便方便有效有效GMP与微生物 在药品生产中，由于受到各种要素（制药厂房环境的空气、制药用水、操作人员、物料、设备等）的影响，都可能导致药品的微生物污染。因此，GMP对各种要素都提出了防止污染的基本要求。中国药典微生物限度检查法规定的检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数和控制菌检查。推行GMP目的：消灭污染、混药、差错 污染的定义：当一个产品存在有不需要 的物质时，它即受到污染。污染的形式：尘粒污染、微生物污染尘粒污染 尘粒污染：是指产品因混入不属于它的那些尘粒而变得不纯净。尘埃、污物、棉绒、纤维以及我们的头发都是尘粒污染的潜在原因。临床资料表明：如药品被72m的尘粒污染了，尤其是静脉注射用药，可以导致热原反应、肺动脉炎、微血栓或异物肉芽肿等，严重的会致人死命。微生物污染 微生物污染是指因微生物产生、附着而给特定的环境带来的不良影响。如果细菌得到了必要的养料、一定量的水份和合适的温度，它们就能迅速繁殖，它们繁殖的速度快得惊人。通常一个细菌在仅仅24小时后可产生出281兆(百万)个的细菌。传播污染的五大媒介 空气 水 表面 人 物料不同环境中微生物量环境土壤水空气人体皮肤地板微生物量104-101010-10410-1051-10410-103单位：个/g传播污染的四大媒介空气 空气：空气并不是产生污染的介质，但它是污染的危险携带者。充满微生物的尘埃和水滴就是通过空气作为侵袭我们产品的媒介而成为重要的污染源的。当我们谈话、咳嗽和打喷嚏时，被污了的水滴正是不断地从我们的呼吸道中放入我们的工作场所。尘埃微粒正是通过空气流不间断地在我们整个药厂范围循环运行着。空气中存在的尘埃微粒是含有微生物(细菌等)的。因此，空气是侵袭我们产品的污染物的主要媒介。这就是为什么要尽量保持空气洁净是极为重要的。在药品生产中，减少空气中微生物数量的方法有多种，常用的有以下3种方法：空气洁净技术采用的过滤方法 过滤是最常用的方法。过滤介质种类很多，例如：纤维素、玻璃棉或人造纤维等。空气净化装置可用于整个房间如无菌操作室，也可只限于操作区域局部如超净工作台。化学消毒方法 采用消毒剂作用于室内空气和物体表面。紫外线照射方法 采用紫外线对室内空气进行照射。传播污染的四大媒介水 水：从理论上来讲，微生物在纯水中是不能生长的。但是，所有的各类水，不管怎样仔细地蒸溜或过滤，总会含有一定量的可溶性有机物和盐类。正是这些可溶性的物质可被微生物利用作为它们生长的养料源泉。在生产过程中，水是应用最广泛的原料之一。这就是为什么我们药厂的卫生规程不仅必须仔细地控制用于生产过程的水，而且要控制好如何正确地用水来清洗我们的设备。常用的对水消毒的方法，与空气消毒的方法一样，也是化学消毒剂、过滤与紫外线照射3种。化学消毒剂方法 对水的消毒以化学消毒剂方法较常用，效果也最好。常使用次氯酸钠或通氯气。在使用中，应注意到水系统中不能留有消毒不到的“死角”。膜过滤法 适用于水系统的连续循环处理。紫外线照射法 在水系统中应用紫外线照射消毒，适用于需要特殊处理的水（如光学透明度要求高），一般在末端之前。这种方法因处理过的水无臭无味，而优于化学消毒剂方法；因不产生微生物移居滤器的现象，而优于膜滤器。在水系统中，这3种方法综合应用，设计安装在适当的位置。传播污染的四大媒介表面 表面包括：天花板、墙壁、地面、设备、容器、工具或桌子；由于空气中的湿度，所有表面都包上一层含水的薄膜。这层薄膜由于静电吸引而饱含尘埃微粒，有很多时候，表面还覆盖一层油状物质，此层油膜易受到尘粒污染。表面因尘埃微粒和微生物由空气传播的回降而受到污染。一个表面看起来很干净，而实际上已经被千百万个微生物所污染，除非已经做了正确的消毒灭菌。制药企业生产车间的厂房，库房及实验室都必须清洁整齐。建筑物表面不透水，光滑平整、无裂缝、接口严密、无颗粒物脱落，并能耐受清洗和消毒。设备、管道应易于拆卸、结构简单，便于清洁消毒。特别是药品生产过程中使用的容器，包括内包装容器，都应进行清洗和消毒。传播污染的四大媒介人 人是最常见的传染源。事实上，人们常说，人是药厂中最不清洁的成份，最大的污染源。为什么呢?一个原因，人体是一个永不休止的污染媒介。当您每天来药厂上班时，您也许随身将几百万细菌带入工厂。人体不同部位所带细菌数量人体不同部位所带细菌数量部 位细菌数量手部前额头皮腋窝鼻腔分泌物唾液粪便1001000/cm21000100000/cm2约100万/cm2约1000万/g约1000万/g约10亿/g710亿/g人员的发菌量 洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时的发菌量为10300个/(min人)，躯体一般活动时的发菌量为1501000个(min人)，快步行走时的发菌量为9002500个(min人)；穿平常衣服时发菌量为330062000个(min人)；有口罩发菌量：无口罩发菌量为(1:7)(1:14)；咳嗽一次的发菌量为70700个，喷嚏一次的发菌量为400060000个。人员污染的途径和方式 人的头发和皮肤 水滴 衣着 化妆品和珠宝手饰 生产过程中人们所引起的混杂和误差人的头发和皮肤 每分钟从人类皮肤中要散发出约10,000个微生物?如果说，一小粒糖的空间中能装载4亿个微生物，那么，您想想看，在一股头发中可以容纳多少微生物呢?我们的手，也拥有大量的微生物。此外，在人们正常的日常活动中都接触大量微生物。水滴 呼吸和咳嗽将产生出大量水滴，这种水滴既含有尘粒污染也含有微生物污染。口腔是对污染最为敏感的地区。一次咳嗽或喷嚏将把干百万个微生物引入工作环境内。衣着 从可洗涤的纺织物中，可能散发出棉绒和淀粉粒。而从羊毛、开士米和其它松软的针纺织物中也可能散落出纤维和磨损下的微粒。污染也可能通过我们的鞋子进入工作场所。化妆品和珠宝手饰 发胶、气雾除臭剂、眼脸膏、香粉等，为微生物污染提供了极好的源泉。耳环、戒指、项链、手链能传播微生物污染。如果，一小片珠宝碎片落入一批产品中，则可能引起严重的尘粒污染。生产过程中人们所引起的混杂和误差 由人引起的污染也可能来自于生产过程中出现的混杂和误差。例如，当员工没有按照SOP进行工作时，车间的污染程度增加。让产品容器不加盖地存放，将导致产品污染。物料系指原料、辅料和包装材料等。原辅料可能将大量的微生物带入到药物制剂中。因此，选用符合标准的原辅料，将有利于控制药品和环境的污染水平。来源于动物的原料药或辅料（如明胶），有可能被动物病原体所污染；来源于植物的原料药或辅料（如淀粉）则可能被多种细菌、霉菌、酵母菌所污染。传播污染的四大媒介物料 原辅料的处理方法因药物类型而异，许多原辅料需进行消毒或灭菌处理。植物药材可用晾晒、烘烤方法使之充分干燥，以减少微生物繁殖。原辅料在储藏过程中必须注意环境条件。包装材料，特别是内包装材料，一方面包装药品，另一方面防止外界微生物进入药中。若处理不当，在药品储藏和运输过程中，极易引起污染，造成严重后果。总之，包装材料应考虑不同需要加以清洁或消毒处理进行合理封装。原则是尽量减少微生物数量，预防发生污染。药品的生产、储存、使用的全过程，都有因微生物污染而导致药物变质的因素。而药物变质，一般需要很高的微生物污染程度。也就是说，微生物面广、量大的繁殖才出现显著的易被觉察的损坏现象。微生物污染导致药物变质的因素 1.1.了解污染源了解污染源 对药品生产全过程可能造成污染的来源，进行深入的了解研究，从而设计一个完好的生产工艺，制定规章制度和标准操作规程，从各个环节采取消毒和卫生措施来防止微生物污染，使产品达到所要求的卫生学质量，包括稳定性及各种微生物参数。2.2.进行微生物监测进行微生物监测 在药品生产过程中，应按GMP要求不断进行各项微生物卫生学监测。例如：对洁净室空气中的浮游菌、沉降菌的监测；对无菌设备清洁灭菌的验证；对非无菌药品进行细菌和活菌数测定和病原菌的限制性检查等。防止微生物污染的原则药品生产人员卫生注意事项 新进人员的健康检查新进人员的健康检查：药品生产企业在招收新职工时，一定要对新职工进行全面的健康检查，要确保新进厂的职工不患有急性或慢性传染病。另外还要根据新进职工安排的具体岗位性质再确定其它具体检查的项目。建立生产人员健康档案：建立生产人员健康档案：药品生产企业应对职工建立个人健康档案，以便于检查、了解、追踪个人健康好坏的状况 培养药品生产人员良好的个人卫生习惯培养药品生产人员良好的个人卫生习惯 洁净区生产人员要求洁净区生产人员要求如何培养良好的个人卫生习惯 勤洗手、勤剪指甲 定期洗澡、勤理发 勤换衣服、勤洗工作服 在生产区内做到三个严禁：禁止吃东西、禁止吸烟、禁止大声喧哗人员卫生净化要求1.鞋的净化：可使用一种地垫，它具有粘性表面，能杀灭细菌并经抗静电剂的处理，可除去人员脚上的尘粒。2.工作服的净化：工作服的使用，可沉积吸附大量微生物和不清洁物，衣服本身也会散发纤维屑，故应经常清洁、灭菌。3.手的净化：手是交叉污染的媒介，要教育生产人员警惕对产品的污染。用消毒皂和流水洗。洁净区生产人员要求 4.头罩：头罩必须把全部毛发遮住。5.口罩：常用的口罩由46层纱布制成。带口罩一定要遮住口、鼻；不能带潮湿的口罩；使用不能超过4h；不可正反两面使用。纱布阻留细菌的效率（洗涤15次）口罩结构 阻菌率（）2 层 74 3 层 79 4 层 88 5 层 97 洁净区工作人员要尽可能少而精，只有工作需要时才能进入；操作人员在洁净区动作尽量要缓慢，避免剧烈运动，以减少人的发尘量；洁净区的门应关紧，避免不必要的移动，以保持洁净区的风速、风量、风型和风压；如果是无菌区的话，操作人员的自我约束就更多，要严格按无菌操作规程执行。日常工作 生产前开启紫外灯灭菌；生产结束后岗位人员的工作：彻底清洁生产现场和设备表面；生产结束后灭菌人员的工作：用消毒剂擦拭顶（包括高效送风口）、墙壁、地面等，并开启紫外灯；定期进行消毒；谢谢大家！