河南省家畜人工授精站点建设规范.ppt

河南省家畜人工授精站点建设规范 为了规范家畜人工授精站点的建 设，促进人工授精技术的应用， 进一步提高家畜养殖技术水平， 根据开展家畜人工授精工作的基 本需求，结合我省改良站点的建 设实际，特制定本规范。 1.设施与布局 1.1人工授精站点的设立要符合当 地畜禽良种繁育体系建设规划要 求，落实改良站点建设批准制度。 1.2 人工授精站点应设在村头或 集镇旁边，相对远离人（畜）群 集中的地区，满足必要的疫病防 治和隔离条件要求。 1.3 人工授精站点应具有基本的 水电设施，设准备室、输精室、 系骝场等，并与工作人员生活场 所分设。 1.4 人工授精操作准备室面积应 不少于 10 .要求屋顶吊顶或水泥 抹平，砖铺地面或水泥地坪，墙 壁水泥抹平外涂白色涂料；操作 台面积不少于 1.5 ，台面有垫层 利于清洗消毒；有自来水冲洗设 施。 1.5 检查输精工作应在输精室或 输精棚内进行。本室应与准备室 相连，面积 30 以上，光线充足； 地面为防滑的水泥地面，稍有坡 度并且设有粪尿沟；内设 4柱形 保定栏。室内设置有水龙头和洗 手池。 1.6 输精室（棚）外应设有系骝 场供适配母畜栓系。系骝场内可 根据情况设置若干个栓系桩。 1.7 开展鲜精人工授精，应由县 站或乡中心站饲养种公畜统一供 精。饲养种公畜的站点，应设独 立的种畜饲养舍，位于输精室 （棚）和系骝场的主风向上方， 并保持一定的距离。 1. 8 在输精室下风向适当距离应 设置粪便堆积发酵池。 2仪器设备 2.1 10升以上容量的液氮罐 1-2个； 精液恒温保存箱 1个。 2.2 150-600放大倍数的光学显微 镜 1台，并具有光源和加温设施。 2.3 灭菌消毒器、水浴锅、天平、 量筒、量杯、烧杯等玻璃器皿， 器械柜、紫外线灯等。 2.4 集精杯、各类输精器械、开 膣器等用具和药品试剂，根据不 同畜种的人工授精操作规程要求 配置。 2.5 配备档案柜或电脑等档案记 录保存设施，可保存三年以上记 录。 2.6 配备必要的防疫、消毒和劳 动保护设施。 2.7 单纯从事冻精或鲜精人工授 精站点的设施设置可根据实际需 要酌减。 3人员及制度 3.1 严禁患有人畜共患病（如结 核病、布病等）的人员从事家畜 人工授精工作。 3.2 技术人员必须经过县级以上 业务部门人工授精技术专门培训， 熟练掌握不同畜种的人工授精技 术操作规程及相关知识，经考试 鉴定合格并取得 人工授精员资 格证 后方可上岗。 3.3 技术人员要熟悉服务辖区内 适配母畜数量、分布；接受县主 管部门指导，掌握当地各主要畜 种的品种改良区域规划，按照推 荐的畜禽杂交模式进行改良；要 经常对输精效果及后代生长发育 情况进行统计分析。 3.4 站点的规章制度齐全，并且 要放大上墙。人工授精技术操作 规程要放大上墙。 3.5 保持准备室、输精室和系骝 场的干净整洁；器械、用具及时 清洗消毒并摆放整齐；所有非一 次性人工授精器械用于一头家畜 后都必须认真清洗和消毒后方可 继续使用；粪便及时清理，定期 对站点进行全面的环境消毒。 3.6 应悬挂不同畜种、不同品种 的种畜图片；本站所提供的种畜 的品种、档案号和级别要公开。 4种畜及档案管理 4.1 采用冷冻精液输精，精液必 须来自有农业部验收合格的种公 畜站，种畜等级要在特一级以上。 4.2 饲养种畜开展鲜精人工授精 的，种公畜必须来自种畜禽场， 经鉴定达到特一级；并要求每季 度进行一次检疫。 4.3 使用过的种畜的档案必须长 期保存；所有在本站配种的受配 母畜都必须认真登记，资料长期 保存。 4.4 配种效果要及时统计处理， 计算人工授精准胎率；回访农户， 调查不同杂交模式杂交后代的生 长发育情况，并进行统计分析。 河南省猪人工授精技术操作规程 猪人工授精技术是养猪生产中经 济有效的技术措施之一，是进行 科学养猪、实现养猪生产现代化 的重要手段。其最大的优点是减 少猪群中所需公猪的总数，提高 优秀公猪的配种效能，减少疾病 的传播，提高猪场的繁殖性能。 由于猪的人工授精工作环节多， 每一环节的操作都会影响到最后 的受胎效果。因此，在总结过去 鞴娉獭罚 敌幸当曜 NY-T 636-2002），特制定本规程。 1、良种公猪 经种猪测定站或县以上畜牧行政 主管部门审定及检疫符合良种公 猪标准，发给合格证的，方可作 为种公猪使用。 2、器械清洗和消毒 2.1洗涤：玻璃器皿使用后 ,用自 来水浸泡。洗涤时 ,现在加有洗 涤剂的温热溶液中进行刷试 ,再 用清洁水冲洗干净 ,最后用蒸馏 水逐个冲洗。直至器皿光亮 ,无 水滴附着为止 2.2器械消毒：玻璃类，金属类， 纱布，毛巾用恒温干燥箱干热灭 菌（ 120 ， 15 30分钟）；玻 璃类，金属类最好先煮沸后干燥； 纱布最好先煮沸后干燥：输精胶 管采用煮沸消毒或开水消毒或蒸 气消毒灭菌；水温计采用酒精棉 球消毒；稀释液采用隔水煮沸 10-15分钟或直接煮沸消毒 ;消毒 过的器械使用前用稀释液冲洗一 遍。 2.3操作室卫生：窗明台净，操 作台和地板需每天擦拭，操作人 员要穿白色工作服，做到无尘， 无蝇，无菌。严禁吸烟。器械不 得和兽医器械，药品互相串用和 混放。 3、稀释液配制 3.1稀释液配方组成 配方：葡萄糖 g 二水柠檬 酸钠 0.3g 乙二胺四乙酸二钠 0.1g 蒸馏水 100ml 青霉素 万单位 双氢链霉素 1000ug/ml 用于常温保存。 配方 2：葡萄糖 g 二水柠檬酸 钠 0. g 蒸馏水 100ml 青、链 霉素适量。用于常温保存。 配方：葡萄糖 二水柠檬 酸钠 0. g 蒸馏水 100ml 新鲜 卵黄 l 青、链霉素适量。 用于常温保存或普通低温保存。 配方：基础液：葡萄糖 二水柠檬酸钠 0.3g EDTA0.1g 蒸馏水 100ml； 稀释液为基础液 95ml加入新鲜卵 黄 5 l，加青、链霉素各 10万单 位。用于常温保存或普通低温保 存。 配方 5：葡萄糖 5g，二水柠檬酸 钠 0.3g， EDTA0.1g 蒸馏水 100ml 卵黄 7ml 青链霉素各 10万单位。 用于常温保存或低温保存（ 7- 13 ）。 配方 6：稀释粉和蒸馏水直接按 比例配制而成。按稀释粉说明书 使用。 3.2配制方法：用天平和量筒分 别称量药物和水，溶解，消毒， 降温至 左右时加入青链霉 素，用灭菌纱布层或二层绸子 或定性快速滤纸过滤，备用。如 用卵黄则再加入卵黄，充分混合 即可。做到现用现配制。 3.3稀释液配好应及时贴上标签， 标明品名、配制日期和时间、经 手人等。工作结束时经常用棉球 消毒冲洗天平盘 4、采精准备 4.1 采精台的制作：用一个直径 为 20厘米，长 120厘米的园木， 两端削成弧形，安装四条腿，在 木头上面铺一层稻草或旧棉胎等 有弹性的软物，外面包一层软胶 皮或猪皮 (亦可用铁支焊接为半 园，四条腿能活动的采精台 )。 组装后采精台后高 60厘米，前高 50厘米。 4.2配置精液稀释液：配置好所 需量的稀释液，置于在水浴锅中 预热至 35 。 4.3精液质检设备的准备：调节 好质检用的显微镜，开启显微镜 载物台上恒温板以及预热精子密 度测定仪。精液分装器件的准备： 准备好精液分装器、精液瓶或袋 等。 5、采精 5.1 采精应在室内进行。采精室 应清洁无尘，安静无干扰，地面 平坦不滑。 5.2 采精员穿戴洁净工作衣帽， 长胶鞋， 胶手套，胶手套应先 用 75酒精消毒、凉干， 30分钟 后使用。 5.3采精前，将公猪赶进采精预 备室后，剪去公猪包皮周围长毛， 用温开水清洗包皮周围并抹干， 有条件时带上消毒手套；途手采 精手需先洗净，消毒后用蒸馏水 冲洗。 5.4 采精方法，主要用手采法。 采精时，采精员站于采精台的右 (左 )后侧，当公猪爬上采精台后， 采精员随即蹲下，待公猪阴茎伸 出时，用手握紧其阴茎龟头，特 别是要抓住螺旋部分，压力不宜 太大，以控制其龟头不能转动或 回缩为限，并带有松紧节奏，以 刺激射精。当公猪充分兴奋，龟 头频频弹弹动时，表示将要射精。 公猪开始射精时多为精清，不宜 匆杂 (左 )手持集精杯， 放在稍离开阴茎龟头处将射出的 精液收集于集精杯内。当射完第 一次精后，刺激公猪射第二次， 继续接收。射完精后，待公猪退 下采精台时， 采精员应顺势用 左 (右 )手将阴茎送入包皮中 (集 精杯位置应高于包皮部，可防止 包皮部液体流入集精杯内。 )不 得粗暴推下或抽打公猪。 5.5 采精频率：成年猪：隔日 采精，紧张时有时一天一次也可； 青年猪（岁）和老年猪（岁 以上）：每三天采一次。 6、精液检查 6.1 精液量、色泽、 气味、 PH值。 公猪的射精量，一般为 100 300 毫升，正常精液的色泽为乳白色 或灰白色，略有腥味，精液 PH值 为 6 8 7.2。 6.2 精子浓度 6.2.1 精子浓度是指每毫升精液 中含有精子数的多少。是确定稀 释倍数的重要标准。 6.2.2测定方法： 检查精子浓度用血球计数器计算。 其方法是用白血球吸管吸取精液 至刻度 0 5处，再吸取 3氯化 钠溶液至刻度 101处，捏住吸管 的两端充分振荡后，将吸管前部 的滤体吹弃 2 3滴，然后滴一小 滴于计算玻板上盖玻片边缘，使 其自行渗入计算室内，待液体稳 定后，在 400-600倍的显微镜下 计数。观察计数时应数五个有代 表性的中方格 (计 80个小方格 )内 的精子数，对头部压在方格四边 线上的精子，只能计算两条边上 的。每次要做 2 3 遍，求其平 均值。最后将精子总数乘以 10000，就得每立方毫米精液中 所含精子数，再将此数乘以 1000， 便得每毫升精液的精子数。 6.3 精子活力 6.3.1 精子活力是指呈直线运动 的精子所占百分率，在显微镜下 观 察，一般按 0.1 1.0的十级 评分法估计，鲜精活力要求不低 于 0.7，检查活力时要求载玻片 和盖玻片都应 37 预热。 6.4 精子畸形率的检查 畸形率是指异常精子的百分率， 一般要求畸形率不超过 15%.要求 每头公猪每两周检查一次精子畸 形率。 检查方法：将精液做成抹片，自 然凉干，浸入 95酒精， 3分钟 后，取出用清水冲洗阴干，然后 用美兰或兰墨水染色 3分钟，用 清水冲洗阴干，在 400 600倍的 显微镜下检查。 7、精液稀释 7.1 精液采集后应尽快稀释， 原精贮存不超过 30分钟。 7.2 未经品质检查或检查不合格 （活力 0.7以下）的精液不能稀 释。 7.3 稀释液与精液要求等温稀释， 两者温差不超过 1 ， 7.4 稀释时，将稀释液沿盛精液 的杯（瓶）壁缓慢加入到精液中， 然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅 拌，使之混合均匀。如作高倍稀 释时，应先作低倍稀释（ 1： 1- 2），待半分钟后再将余下的稀 释液沿壁缓缓加入。 7.5 稀释倍数的确定：对活力 0.7的精液一般按照每个输精 剂量（ 80-100ml）含 40亿个总精 子来确定稀释。 8、精液的分装、贮存、运输 8.1 分装：精液稀释后，取样 检查活力，合格者才能分装。分 装时，用量筒按剂量量取精液倒 入容器，一般每头份 80-100毫 升。分装完后，即将容器密封， 贴上标签。在瓶或袋上标明公猪 品种、耳号、生产日期、保存有 效期、稀释液名称和生产单位等。 8.2 贮存 : 精液分装后，避光 贮存， 8.2.1常温保存法：保存温度： ，可保存于保温箱， 保温瓶；气温适合可放于室内。 8.2.2低温保存法：保存温度： ，可保存于井水中等， 所用稀释液应加有抗休克剂卵黄。 无论何种保存法，应尽快用完。 8.3 运输 : 精液运输应置于保 温较好的装置内，控制温度于 或 。精子 运输过程中避免强烈震动。 9、输精 9.1输精前的准备： 9.1.1输精场所应保持安静清洁， 输精器械必须严格消毒。 9.1.2从 17 恒温箱中取出精液， 轻轻摇匀，用显微镜检查活力， 精液活力 0.6，方可使用。 9.1.3用温开水洗净母猪外阴并 抹干，保存的精液则利用人体体 温或放入 水中升温至 以上， 以下。 9.2 输精时机 :一般是发情后 小时，老龄母猪适当 提前，可当天下午输精，中年母 猪：发情后第二天输精，初产母 猪适当退后，发情后第三天输精。 两次输精间隔小时， 每个情期输精次。 9.3输精标准：输精量 8 100，活力 0.6（下限），密 度：一般按每个输精剂量（ 80- 100ml）含 40亿个总精子。 9.4 输精方法：输精方法有注 射法和自然法两种。输精时，用 玻璃注射器吸取精液，再将它连 接胶管 (自然法直接将精液容器 连接胶管 )，然后把输精胶管从 母猪阴户徐徐插进去，插到不能 再插为止，动作要轻，输精员用 左 (右 )脚踏在母猪腰背部，左手 拉住尾巴，右手持注射器，按压 注射器柄，精液便流人子宫。注 射时，最好将输精管左右轻微旋 转，用右手食指按摸阴核，增加 母猪快感，刺激阴道和子宫的收 缩，避免精液外流。当输精瓶 （管、袋）内精液排空后，放低 输精瓶（管、袋）约 15秒，观察 精液是否回流到输精瓶，若有倒 流，再将其输入。输完精后，把 输精管向前或左右轻轻转动 2分 钟，然后轻轻拉出输精管。 10、猪人工授精站要求。应符合 附录 A的要求。 11、猪人工授精各项指标计 算方法。应按附录 B的规定计 算。 附录 A猪人工授精站的要求（见 河南省家畜人工授精站点建设 规范 ）。 附录 B 猪人工授精各项指标计算 方法。 B 1 情期受胎率。指一年内 (或配种期内 )，输精母猪情期总 数中，实际受胎母猪数所占的百 分率。即： 情期受胎率 = X 100 B 2 情期无返情率。指母 猪输精后超过 30天以上，不再发 情的母猪所占的百分率。即： 情期受胎率 = X 100 B.3 总受胎率。指一年内 （或配种期内）输精母猪总头数 中，受胎母猪所占的百分率。即： 总受胎率 X 100 B.4 每窝平均产仔数 平均窝产仔数 X 100 B.5 人工授精普及率 人工授精普及率 X 100 猪人工授精技术 种公猪饲养管理要点 二、加强饲养管理 种公猪应生活在清洁、干燥、 空气新鲜、舒适的环境条件下， 另外还要做好如下工作： 1、公猪的圈舍要适当大一些， 最好带有运动场，阳光充足，空 气流通，地面要坚实、干燥。 2、建立良好的生活制度。 饲喂、采精或配种、运动、刷试 等各项工作都应在大体固定的时 间内进行，利用条件反射让公猪 养成规律性的生活制度，便于管 理作。 3、加强种公猪运动，这样 可促进食欲，增强体质，避免过 肥过，提高性欲和精液品质，同 时也可减少肢蹄病发生。每天应 坚持让公猪运动，除在运动场运 动外，还应进行驱赶运动。夏天 可在早上或傍晚天气凉爽时进行， 冬天可在中午进行。定期检查公 猪精液质量。实行人工授精的公 觳 1 2次，特别是后备公猪，开 始使用前和刚使用时，都要检查 其精液 2 3次，精液质量差的公 猪决不能配种。 4、做好防寒降暑工作。种 公猪适宜的温度为 18 20度。冬 季猪舍要防寒保温，以减少 饲料 的消耗和疾病发生。夏季高温时 要防暑降温，高温对种公猪的影 响尤为重要，轻者食欲下降、性 欲降低，重者精液品质下降。种 公猪在长期处于高温下，其精液 品质受到严重影响，表现为精子 活力下降、总数和活精数下降， 畸形精子数增加。 5、定期对种公猪进行体内 和体外驱工作，可按每 33公斤体 重 1毫升肌肉注射伊维苗素，每 年两次。 6、预防烈性传染和种猪繁 殖性疾病的发生，做好常规疫苗 的免疫接种工作。 三、及时调教 1、公猪一般在六月龄开始 调教，调教配种时，配种栏的地 面要平坦，不能太粗糙和太滑， 配种栏面积不能太小，避免公猪 在配种时造成外伤。 2、后备公猪在进行调教时， 应先择发情稳定的母猪，母猪与 调教的公猪体型不能相差太远。 后备公猪第一次爬胯时，若方向 不对应耐心调教，辅助小公猪将 阴茎插入母猪阴道并完成射精。 3、公猪在年幼注射疫苗和 进行一些必要的治疗时要小心， 不能给公猪造成太大刺激，以免 饲养员给公猪治疗时公猪产生畏 惧感。 4、公猪在参加调教配种前 进行一些预防繁殖障碍性疾病的 免疫接种，乙脑疫苗应于调教前 一个月注射并确保免疫质量。 四、合理利用 公猪应合理利用，不能过于 频繁。配种或采精过多，虽不影 响精子活力，但能降低精子的密 度和代谢能，从而影响受精率。 刚开始使用的后备公猪，每周使 用一次， 1 2岁的小公猪每天配 种不应超过 1次，连续 2 3天后 应休息 2天， 2岁以上的成年公猪， 每天不应超过 2次，两次间隔时 间不应少于 6小时，每周最少休 息 2天，否则会缩短公猪的使用 年限。公猪每次配种时间较长， 一般 5 15分 钟 ，交配时应保持 周围环境清静，不受任何干扰， 使公猪射精完全。公猪长期不配 种会造成精液品质下降，性欲减 退，因而 对长时间不需使用的公 猪也应定期进行采精，以保持其 性欲和精液品质。 五、合理更换 种公猪年淘汰率约 30% 45%，一 般使用 1 3年。种公猪淘汰原则： a精液品质差 ;b性欲低，配种能 力差； c与配母猪分娩率及产仔 数低； d患肢蹄病； e对人有攻击 行为。 发情初期：母牛兴奋不安，追爬 其他母牛，但拒绝爬跨；外阴号 肿胀，粘液透明，不呈牵丝状， 粘性强。 发情盛期：母牛温顺，接受爬 跨，外阴号肿胀。粘液透明，量 多，呈牵丝状，粘性强。 发情末期：母牛拒绝爬跨，外 阴号肿胀消退，粘液半透明、粘 稠，粘性差，牵丝较短。 （ 2）直肠检查法： 发情母 牛子宫颈稍大、较软，子宫角体 积增大，子宫收缩反应明显。 发情初期：卵泡直径 0.5厘米左 右，触诊时为一软化点。 发情盛期：卵泡增大到 1 1.5厘 米，呈圆形，明显突出于卵巢表 面，波动明显。 二、最适输精时间 输精时间一般因母牛的年龄、 品种、胎次、营养水平的不同而 有所差异，一般母牛发情期中输 精最佳时间是发情开始后 12小时 到发情终止或排卵前的 12小时内。 发情母牛一个情期输精两次的， 其间隔时间为 8 12小时。 （ 1）输精器械的清洗消毒 各种器械用后先用肥皂水或 2的小苏打水洗刷除污，再用 温开水冲洗干净。 玻璃、金属器械、胶球 (用纱 布包好 )和布类用蒸汽灭菌三十 分钟或干热灭菌。金属和玻璃器 械也可用 75的酒精擦拭和吸注 消毒，并在酒精火焰上烘干。 （ 2）冻精的运输和储存 1、冻精要贮存在装有足够液 氮的生物贮存容器中，定期添加 液氮。容器内的冻精不得暴露在 液氮面外。 2、 在运输液氮、冻精时， 应使用生物运输容器。用车辆运 输时，除利用原保护套外，应另 加木箱或其它保护装置加以固定。 3、从容器内取冻精时，只能 将提筒置于容器颈下部，用长柄 镊夹取冻精。如 10秒钟内尚未取 放完毕，应将提筒放回液氮中浸 泡一下再继续提取。 4、贮存的冻精需向另一容器转 移时，冻精最好浸泡在液氮中进 行。冻精在空气中暴露的时间不 得超过 5秒。 5、严防不同品种、个体公畜的 冷冻精液混杂，难以辨识。 （ 1）母牛的输精操作 冻精的准备。冻精应来自于取得 农业部颁发的 种畜禽生产经营 许可证 的冻精生产站。 发情母牛的每次输精量为细 管冻精一支，冻精解冻后的精子 活力不低于 0.3。用 38土 2 温水 直接浸泡 30秒钟解冻细管冻精。 将解冻的细管剪去顶部封口后插 入卡输枪，套上塑料外套管备用。 （ 2）输精母牛的准备 将输精母牛固定在保定架内， 用细绳拴好尾巴拉向一侧固定。 输精人员将手指甲剪短、磨光， 戴上长臂手套。对输精母牛肛门 及外阴进行消毒后擦干。 输精方法：输精人员将一只手伸 入母牛直肠内，寻找并握住子宫 颈的外口端，手臂往下按压使阴 门裂开，另一只手把准备好的卡 输枪自阴门向斜上方插入 5 10 厘米 (避开尿道口 )，再改为平插， 把卡输枪送到子宫颈外口，然后 两手互相配合，使卡输枪缓缓越 过子宫颈管中的皱壁轮，将精液 注入子宫颈内。最后轻轻地拉出 输精器。输精母牛须做好记录， 各项记录必须按时，准确，并定 期进行统计分析 （ 3）母牛的妊娠检查 外部观察法 母牛配种后二、三个情期仍 未出现发情者，可初步认为妊娠。 母牛妊娠三个月后，性情变得温 顺，食欲增加，被毛出现光泽。 妊娠五、六个月后，腹围增大， 右侧腹壁突出，可在腹壁触到或 看到胎动。 直肠检查法 母牛妊娠一个月，两侧子宫角不 对称，角间沟清楚。孕角较空角 稍大变粗、柔软，有液体波动感， 弯曲度变小。孕侧卵巢较大，有 黄体突出于表面。子宫中动脉如 麦秆粗。 母牛妊娠二个月，孕角比空角粗 约两倍。角间沟平坦。孕角薄软， 波动明显。孕侧卵巢较大，有黄 体。孕侧子宫中动脉增粗一倍。 母牛妊娠三个月，孕角大如耍儿 头，波动感明显，空角比平时增 粗一倍，子宫开始沉入腹腔，角 间沟已摸不清楚。孕侧子宫中动 脉增粗 2至 3倍，有时可摸到特异 博动。 五、讨论和小结 为了提高受胎率，必须掌 握影响受胎率的因素。决定受胎 率的主要因素有：种公牛精液品 质，母牛发情排卵机能，人工授 精技术操作质量，输精时间等。