仪器分析实验教案

实验一 水样pH值的测定一、目的要求1. 了解电位法测定水样pH值的原理和方法。2. 认识和了解各种型号酸度计。 3. 学会使用pHS-25型酸度计。 二、测定原理 将指示电极(玻璃电极)与参比电极插入被测溶液组成原电池 (-)Ag|AgC1，HCl(0.1mo1L-1)|玻璃膜 |H+(xmo1L-1)KCl(饱和)|Hg2Cl2,Hg(+) 玻璃电极 试液 盐桥 甘汞电极 在一定条件下，测得电池的电动势就是pH的直线函数 EK十0.059pH(25)由测得的电动势就能算出被测溶液的pH值。但因上式中的K值是由内外参比电极电位及难于计算的不对称电位和液接电位所决定的常数，实际不易求得，因此在实际工作中，用酸度计测定溶液的pH值(直接用pH刻度)时，首先必须用已知pH值的标淮溶液来校正酸度计(也叫“定位”)。校正时应选用与被测溶液的pH值接近的标准缓冲涪液，以减少在测量过程个可能由于液接电位、不对称电位及温度等变化而引起的误差。一支电极应该用两种不同pH值的缓冲溶液校正。在用一种pH值的缓冲溶液定位后，测第二种缓冲溶液的pH佰时，误差应在0.05pH单位之内。粗略测量中用一种pH值缓冲溶液校正即可，但必须保证电极斜率在允许误差范围内。经过校正后的酸度计就可以直接测量水或其它溶液的pH值。用离子活度计测量溶液的pH值，其原理仍然是依据能斯特方程，测量电池在标准缓冲溶液中的电动势为： EsK十s pHs同样，在样品溶液中电池电动势为： ExK十s pHx上述两式相减得到： pHxpHs十Ex-Es/s = pHs + E/s在离子计上仪器的示值按照Es分度，而且仪器有电极斜率s的调节路线。当用标准缓冲溶液对仪器进行校正后，样品溶液的pHx即可从仪器示值上直接读出。注意：1. 指针式与数字式酸度计的差异。2. 高、中、低档酸度计之间的差异。3. 旋钮式、钟表式、齿轮式温度补偿器的使用方法。4. 紧固式、弹球式、自锁式电极插口的使用注意事项。5. 复合电极与单电极的差异。将复合电极接口变换成单电极接口需要电极转换接头附件来完成。三、试剂与仪器1pH4.00标准缓冲溶液(20) 2pH6.88标准缓冲溶液(20) 3. pH9.22标准缓冲溶液(20) 4pHS-25型酸度计，23l型玻璃电极，232型甘汞电极.5. pHS-3E型、pHS-3C型型酸度计。 6100 mL烧杯四只。标准缓冲液通常能稳定贮放二个月，温度不同，其相应标准值也不同。温度0510152025303540500.050molL-1 KHC8H4O44.0033.9993.9983.9994.0034.0084.0154.0244.0354.0600.025molL-1 KH2PO4-Na2HPO46.9846.9516.9236.9006.8816.8646.8536.8446.8386.8330.010molL-1 Na2B4O710H2O9.4649.3959.3329.2769.2259.1829.1399.1029.0689.011四、测定步骤1. 按照所使用仪器的操作方法进行操作。2. 预热仪器达到稳定。3. 测量标准缓冲溶液温度，确定该温度下的pHs值，将仪器的温度补偿旋钮调节到该温度上。4. 将电极和烧杯用水冲洗干净后，用标准缓冲溶液荡洗l2次电极用滤纸吸干)。5. 将电极浸入标准缓冲溶液内，待达到稳定读数后，调节定位旋钮使仪器示值为pHs值。6. 将电极取出，用水样将电极和烧杯冲洗多次。7. 测量水样温度，将仪器的温度补偿旋钮调节至该温度。 8. 将冲洗过的电极置于水样中，待读数稳定后，从标尺或数字显示器上读出水样的pHx值。9. 测定完毕后，将电极（甘汞电极套上电极帽）和烧杯冲洗干净妥善保存。10. 为了检验仪器示值的准确性，可以在测定样品溶液之前对仪器的示值准确性进行测定。即用其中某一标准pH溶液对仪器进行定位，测定另一已知pH标准溶液，按下式计算测量误差示值测量误差 11. 如果仪器带有斜率旋钮，可以通过斜率旋钮进行校正。五、实验的注意事项 1. 邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液、磷酸盐缓冲溶液和硼酸钠缓冲溶液的pH值随温度不同稍有差异（如上表）。 2. 用蒸馏水或去离子水冲洗电极时，应当用滤纸吸去玻璃膜上的水分而不是擦拭电极。3. 由于玻璃电极内阻很高，使用电磁搅拌可能引起电磁干扰，搅拌引起的涡流可能使液接电位波动，因此用玻璃电极测量pH值时一般不使用电磁搅拌。正确的操作是将电极浸入溶液后，用手摇动一下测量杯或开启搅拌使电极与溶液充分接触，然后停止搅拌进行测量。4. 玻璃电极球泡很薄，小心打碎。 5. 不同仪器型号的测量精度。思 考 题 1. 电位法测定水的pH值的原理是什么? 2. 酸度计为什么要用已知pH值的标准缓冲溶液校正?校正时应注意什么?3. 标准缓冲溶液的pH值受那些因素的影响？如何保证其pH值恒定不变? 4. 玻璃电极在使用前应如何处理?为什么？玻璃电极、甘汞电极在使用时应注意什么?5. 安装电极时，应注意哪些问题?实验二 用氟离子选择性电极测定水中微量F-离子 标准曲线法一、目的要求1. 学习氟离子选择性电极测定微量F-离子的原理和测定方法。2. 学习标准曲线法定量分析。3. 学习离子计及酸度计测定溶液电位的使用方法。二、基本原理氟离子选择性电极的敏感膜为LaF3单晶膜(掺有微量EuF2利于导电)，电极管内放入NaF+NaCl混合溶液作为内参比液，以Ag-AgCl作内参比电极。当将氟电极浸入含F-离子溶液中时，在其敏感膜内外两侧产生膜电位m.m = K - 0.059 lgF- *(25)以氟电极作指示电极，SCE为参比电极，浸入试液组成工作电池Hg,Hg2Cl2|KCl(饱和)F-试液|LaF3|NaCl,NaF(均为0.1molL-1)|AgCl,AgE = K- 0.059lgF-(25) 在测量时加入以HAc，NaAc，柠檬酸钠和大量NaCl配制成的总离子强度调节缓冲液(TISAB)，由于加入了高离子强度的溶液(本实验所用的TISAB液其离子强度I12)，可以在测量过程中维持离子强度恒定，因此工作电池电动势与F-离于浓度的对数成线性关系。 本实验采用标准曲线法测定F-离子浓度，即配制成不同浓度的F-*离子标准溶液，测定工作电池的电动势，并在同样条件下测得试液的Ex，由E-pF（或E-lgcF-）曲线查得未知试液中的F-离子浓度。如果用E-cF-曲线，必须用半对数座标纸。当试液组成较为复杂时，则应采用标推加入法或Gran作图法测定之。 氟电极的适用酸度范围为pH=56，测定浓度在10010-6molL-1范围内m与lgc F-呈线性响应，电极的检测下限在10-6molL-1左右（随着电极的不断老化，检测下限会不断升高）。 氟离子选择性电极是比较成熟的离子选择性电极之一，其应用范围比较广泛。本实验所介绍的测定方法，完全适用于人指甲中F-离子的测定(指甲需先经适当的预处理)，为诊断氟中毒程度提供科学依据；采取适当措施，用标准曲线法可以直接测定雪和雨水中的痕量F-离子，磷肥厂的废渣，经HCl分解，即可用来快速、简便地测定其F-离子含量；用标准加入法不需预处理即可直接测定尿中的无机氟及河水中的F-离子，通过预处理，则可测定尿和血中的总氟含量；大米、玉米、小麦粒经磨碎、干燥、并经HClO4浸取后，不加TISAB，即可用标准加入法测定其中的微量氟；本法还可测定儿童食品中的微量氟，因此，是食品分析的国标方法。三、仪器1任意型号离子计或酸度计2氟离子选择性电极3饱和甘汞电极4电磁搅拌器5容量瓶 1000mL，塑料瓶1000mL 6个6吸量管 10mL 8支7. 塑料烧杯 50mL 8支四、试剂 10.100molL-1 F-离子标准溶液 准确称取120干燥2h并经冷却的优级纯NaF 4.20g于小烧杯中，用水溶解后，转移至1000mL容量瓶中配成水溶液，然后转入洗净、干燥的塑料瓶中。2总离子强度调节缓冲液(TISAB) 于1000mL烧杯中加入500mL水和57mL冰乙酸，58gNaCl，12g柠檬酸钠(Na3C6H5O72H2O)，搅拌至溶解。将烧杯置于冷水中，在pH计的监测下，缓慢滴加6molL-1NaOH溶液，至溶液的pH5.05.5,冷却至室温，转入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。转入洗净、干燥的容量瓶中。 3F-离子试液（自来水），浓度约在10-410-5molL-1。五、实验步骤 1按离子计或酸度计操作步骤，调试时各按下mV按健。 摘去甘汞电极的橡皮帽，并检查内电极是否浸入饱和KCl溶液中，如未浸入，应补充饱和KCl溶液。安装电极，清洗氟电极空白电位值至300mV以上。氟电极空白电位值受制备工艺、内参比液中F-离子浓度、水质纯度、电极老化程度、离子计型号等因素的影响，因此，视情况清洗到空白电位值最大即可。2. 准确吸取0.100molL-1 F-离子标准液1000mL，置于100mL容量瓶中，加入TISAB液10.0mL，用水稀释至刻度,摇匀，得pF=2.00溶液。3吸取pF=200溶液1000mL，置于100mL容量瓶中，加入TISAB 9.0mL，用水稀释至刻度，摇匀，得pF=3.00溶液。 仿照上述步骤，配制pF=4.00，pF5.00和pF=6.00的溶液。 4将配制的标准溶液系列由低浓度到高浓度逐个转入塑料小烧杯中，并放入氟电极和饱和甘汞电极及搅拌子，开动搅拌器，调节至适当的搅拌速度，搅拌3min，至指针无明显移动时，读取各溶液的mV值，读数时注意使眼睛、指针和刻度三者在一直线上。 5吸取F-离子试液10.00mL，于50mL容量瓶中，加入10.0mL TISAB液，用水稀释至刻度，摇匀。按标准溶液的测定步骤，将电极重新清洗到最大空白电位值后，测定其试液的电位值。六、数据及处理1实验数据pF值1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 试液E/mV2. 以电位值为纵坐标，pF值为横坐标，绘制E -pF标准曲线。3在标准曲线上找出与Ex值相应的pF值，带入有关计算公式求得原始试液中氟离子的含量，以mgL-1表示。或将数据输入微机，以Excel一元线性回归方程求出F-离子含量。思 考 题1. 本实验测定的是F-离子的活度，还是浓度?为什么?2. 测定F-离子时，加入的TISAB由那些成分组成？各起什么作用?3. 测定F-离子时，为什么要控制酸度，pH值过高或过低有何影响74. 测定标准溶液系列时，为什么按从稀到浓的顺序进行? 5. 为什么要反复清洗空白电位值？实验三 用氯离子选择姓电极测定微量氯离子 标准加入法和Gran作图法一、目的要求1. 学习标准加入法的基本原理和测定技术，2. 学习Gran作图法的基本原理和数据处理方法。二、基本属理氯离子选择性电极是由AgCl和Ag2S的粉末混合物压制成的敏感薄膜，固定在电极管的一端，用焊锡或导电胶封接于敏感膜内侧的银箔上，装配成无内参比溶液的全固态型电极。 当将氯离子选择性电极浸入含C1-离子溶液中，它可将溶液中的氯离子活度Cl-转换成相应的膜电位m：测定Cl-离子时，不能使用通常的饱和甘汞电极作参比电极，因为电极内的Cl-离子将通过陶瓷芯或玻璃砂芯等多孔物质向试浓中扩散，而干扰分析测定，为避免这一影响，应在饱和甘汞电极上连接可卸的非KC1盐桥套管，内盛适当的液接液体(本实验采用KNO3溶液)，即构成双盐桥饱和甘汞电极，作为参比电极。 以氯离子选择性电极、双盐桥饱和甘汞电极和试液组成工作电池：其电动势 即在一定条件下，工作电池的电动势E与溶液中Cl-离子活度的对数值成线性关系。K与温度、参比电极电位以及膜的特性等有关，在实验中K为一常数。 分析工作中常需测定离子的浓度，根据，在实验中加入离子强度调节缓冲液(ISAB)，使溶液的离子强度保持恒定，从而使活度系数为一常数，则工作电池电动势E可写作：即与的对数值成线性关系。 氯离子选择电极宜在pH=27的酸度范围内使用，浓度在l10-4molL-1范围内，电极呈线性电位响应。根据上述关系式，通过标准曲线法，测定微量C1-离子含量，操作简便，数据处理也很简单，是较常用的一种定量方法。但是标准曲线法的适用范围有其局限性，在分析测定较复杂体系(实际试样)而配制标准溶液系列时，应考虑到试样基体和其它共存组分及其含量所引起的离子强度变化等情况，以便标准溶液与实际试液的成分尽量保持一致，显然，这种情况下使用标准曲线法实验操作将变得复杂，有时甚至不可能，而采用标准加入法和Gran作图法则是克服这一困难的有效途径。标准加入法是先测量电极在未知试液中的电位值E1，然后加入小体积欲测组分的标准溶液，要求加入的标准溶液浓度约为试样中欲测组分的100倍，所以加入的体积Vs可以很小，一般约为试液体积Vx的1，混合均匀后再测量电极在混合液中的电位E2，根据两次测量值的增量E，按下式计算欲测组分的浓度。式中，Gran作图法与上述标准加入法相类似只是多次加入欲测组分的标推溶液，测量电位值E，并计算每次加入标准溶液后的值，然后以其为纵座标，以Vs为横座标作图，延长各实验点的联线，得出与横座标轴的交点Vs。由下式计算预测组分的浓度： Gran作图法中的计算较繁，若采用特制的半反对数座标纸，可将实验数据直接标在图纸上，不需要计算，即可求得Vs值。 Gran图所示的座标纸是以取100mL试液进行测定和假设电极响应的斜率s为58mV(对一价离子)为根据而设计的，横座标每一大格表示加入1ml标准溶液，纵座标每一大格表示电位变化值(E)为5mV。当电极响应斜率s不是58mV时，可以用图左方的E校正图，将测得的与实际的s值联线，并且延长与的座标相交，然后以交点的数值作图。为了校正由于标准溶液的加入而引起的稀释效应，纵轴上同一位置的分度值间距从左向右逐渐增大（即向上倾斜）。在Gran图的实际应用中，可以按100mL的0.5倍，1.5倍，2.0倍适当扩大或缩小，本实验采用0.5倍进行测定。 由于Gran作图法是通过多次测量电位值进行求其欲测组分浓度的，提高了测定准确度，尤其是对于含量较低的试样，加入标准溶液后，欲测组分浓度增加，于是在较高浓度进行电位测量，电极易于达到平衡，测得的电位较稳定，因而实验的重现性也较好。标准加入法和Gran作图法都是在有其它组分共存情况下进行测量的，因此实际上减免了共存组分的影响，所以这两种方法都适合于成分不明或组成复杂试样的测定。 氯离子选择性电极使用方便，是应用较广的一种离子选择性电极，在化学工业、食品工业以及环境科学等许多领域都有实际应用。三、仪器 1任意型号酸度计或离子计 2氯离子选择性电极 3双液接（双盐桥）饱和甘汞电极 4电磁搅拌器 5滴定管 50mL 6吸量管 0.5mL，1mL，5mL，10 mL 7. 大肚移液管50 mL 8. 容量瓶100 mL 9. 烧杯150 mL四、试剂 1离子强度调节缓冲液(ISAB) 称取42.5g NaNO3（M=84.9947）于烧杯中，加水溶解后，加浓HNO3调节至pH=34，以pH试纸试验确定，稀释至1000mL，配成0.5mo1L-1 NaNO3溶液。也可以配成0.1 molL-1 KNO3（M=101.107）溶液(称量10 g) 来使用。 20.05molL-1NaCl标准溶液 取优级纯NaCl于高温炉中在500600灼烧半小时，放置于干燥器中冷却，准确称取NaCl（M=58.44）2.9222g于小烧杯中，用水溶解后，转移至1000mL容量瓶中配成水溶液。 3. 1.00 molL-1NaCl标准溶液 称取上述灼烧并放置冷却后的NaCl 14.61g于小烧杯中，用水溶解后，转移至250mL容量瓶中配成水溶液。4待测试液 自来水五、实验步骤 1按酸度计或离子计操作步骤所述，调试仪器，按下mV按键。 摘去饱和甘汞电极的橡皮帽，并检查内电极是否浸入饱和KCl溶液中，如未浸入，应补充饱和KCl溶液。安装电极，并用滤纸吸去电极上的水滴。2空白溶液的测定 由滴定管准确放出去离子水45.00mL，置于100mL烧杯中，加入ISAB液5.00mL（总体积为50 mL），插入氯离子选择性电极和双盐桥饱和甘汞电极，放入搅拌子，开动搅拌器，调节至适当的搅拌速度，待电位稳定后，读取电位值。用刻度吸管向烧杯中加入0.05 molL-1NaCl标推溶液0.5mL，待电位稳定后，读取电位位。然后每加0.5mL标准溶液，测量一次电位值，连续测量56次。3. 待测溶液的测定 由滴定管准确放出试样45.00mL，以下按步骤2操作，连续测量56次。 4. 一次标准加入法 准确吸取试样45.00mL，加入ISAB液5.00mL，插入氯离子选择性电极和饱和甘汞电极，放入搅拌子，开动搅拌器，调节至适当的搅拌速度，待电位稳定后，读取电位值。5. 于上述烧杯中加入1.00 molL-1NaCl标准溶液0.50mL，待电位稳定后，读取电位值。六、数据及处理 1. 将测量数据填入下表Vx45.00mL，Cs0.050molL-1标准溶液加入量Vs/mL0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0去离子水电位E/mV水样电位E/mV 2. 将实验数据直接标在Gran图上，从图上查出Vs值并计算结果。3. 根据加入标准溶液前和0.50 mL 1.00 molL-1NaCl标准溶液后的两次电位测量值，用下列公式计算原始试液中C1-的质量浓度，以mgL-1表示。 4. 采用标准加入法公式计算，并和Gran图法计算结果进行比较，结果以mgL-1表示。思 考 题1. 本实验为什么要使用干燥的烧杯？3. 试比较标准曲线法，标准加入法和Gran作图法的优缺点。4. 本实验选择甘汞电极作为参比电极对测定结果有何影响？应该采用什么样的参比电极较合适？为什么？注意事项:如果被测溶液中C1-离子的含量偏低，将会使曲线的下限发生弯曲，此时应采用加入标准溶液较多的上限数值连线。实验四 电位滴定法测定水中氯离子的含量 一、目的要求 1. 巩固电位滴定法的理论知识。 2. 了解沉淀滴定过程中溶液电位变化与离子浓度变化的关系。 3. 了解电位滴定法测定废水中氯离子的原理和方法。 4. 学会用电位滴定法测定废水中氯化物的含量。 二、测定原理 用电位滴定法测定水中C1-时，用双液接甘汞电极作参比电极(最好用玻璃电极作参比电极，因为在滴定过程中溶液的pH值基本上保持不变，更没有干扰离子的存在)，银电极作指示电极，用AgNO3溶液滴定。在滴定过程中用ZD-2型自动电位滴定计测量两个电极间电动势的变化，当C1-含量高时用EV曲线法，含量低时用一次微分曲线法确定滴定终点。当C1-、Br-、I-共存时，可以利用它们的溶度积不同连续滴定，形成三个突跃（KspAgCl=1.810-10、KspAgBr=5.210-13、 KspAgI=8.310-17）。 在测定C1-时，水中含少量的I-、Br-、高铁氰化物，会使结果偏高。Fe3+的含量若超过C1-的含量，也有影响。 Cr3+、Fe3+、PO43-没有干扰。严重污染的水样， 般需要预处理，如污染较小，加入HNO3就可破坏一些污染物。三、试剂与仪器 10.01 mo1L-1 AgNO3标准溶液 溶解1.6991 g AgNO3于蒸馏水中，并稀释到1000mL。必要时可以用NaCl标准溶液标定AgNO3。26mo1L-1 HNO3 KNO3或 Ba(NO3)2固体 3ZD-2型自动电位滴定计。4银电极、甘汞电极（代）。6. 搅拌磁子 50 mL移液管 100 mL烧杯 四、操作步骤 移取50.00mL水样于100mL的烧杯内。滴加3滴浓HNO3酸化，然后加入约2克的硝酸钾作为离子强度调节剂，必要时可加水稀释。把搅拌棒和电极都浸入水样内，开始搅拌，待硝酸钾溶解完后，按照仪器使用方法作必要调整，把选择开关调到适当位置以测量两个电极间的电动势。先预作一遍，找出滴定突跃的大致范围，然后另取一份样品进行细作，并记录每加入一定体积后所对应的电位值。绘出E-V滴定曲线,找出终点电位值和对应的终点体积计算含量。并对仪器设置终点电位值进行第三次自动滴定。 五、结果计算 最终换算成mgL-1表示。 思 考 题 1. 玻璃电极是H+浓度的指示电极，为什么可以在这里用作参比电极?2. 试液滴定前为什么要用HNO3酸化?实验五 邻二氮菲分光光废法测定微量铁的条件试验 一、目的要求 1. 通过本实验学习确定实验条件的方法。 2. 学习721型和722型或其他型号分光光度计的使用方法。 二、基本原理 在可见光分光光度测定中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质含量。因此，显色反应的完全程度和吸光度的物理测量条件都影响到测定结果的准确性。 显色反应的完全程度取决于介质的酸度、显色剂的用量、反应的温度和时间等因素。在建立分析方法时，需要通过实验确定最佳反应条件。为此，可改变其中一个因素(例如介质的pH值)，暂时固定其它因素，显色后测定相应溶液的吸光度，通过吸光度pH曲线确定显色反应的适宜酸度范围。其它几个影响因素的适宜值，也可按这一方式分别确定。本实验以邻二氮菲为显色剂，找出测定微量铁的适宜显色条件，反应式如下：橙红色三、仪器 1722型和72l型分光光度计 2容量瓶 50mL 3吸量管 1mL，2mL，5mL，10mL 四、试剂1铁盐标准溶液 10gmL-1（配制方法见实验教材）20.15邻二氮菲(又称邻菲啰琳)水溶液 310盐酸羟胺水溶液41molL-1 NaAc溶液(pH=46) 50.2molL-1 NaOH溶液 61molL-1 HCl溶液 7广泛pH试纸和不同范围的精密pH试纸五、实验步骤1显色反应时间的影响及有色溶液的稳定性 取2只50mL容量瓶，分别加入0，5.00mL铁标液，分别加入10盐酸羟胺1mL，摇匀，稍停，再加入NaAc溶液5mL，邻二氮菲溶液2mL，记下稀释至刻度后的时刻(0min)，立即以不含Fe2+离子，但其余试剂用量完全相同的试剂空白作参比，在波长508nm处测定溶液吸光度。然后依次测量放置0、1、3、5、10、30、60、90、120和150min时溶液的吸光度，每次都取原容量瓶中的溶液测定。测量结果填入下表。放置时间/min013510306090120150吸光度A 2酸度影响于8只50mL容量瓶中，然后按下表分别配制溶液再分别用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，用1cm比色皿，并以蒸馏水作参比，在波长508nm处测定各溶液的吸光度。并先用广泛pH试纸粗略测定所配制各溶液的pH值，再用精密pH试纸准确测定各溶液的pH值。容量瓶编号No12345678铁标准溶液10gmL-15.005.005.005.005.005.005.005.0010盐酸羟胺111111111molL-1 HCl1.01.01.01.01.01.01.01.00.2molL-1 NaOH04.06.08.010.012.014.016.00.15邻二氮菲22222222pHA 3显色剂用量的影响同理，按下表配制不同显色剂用量的溶液，用蒸馏水分别稀释至刻度，摇匀，放置10min，以蒸馏水为参比溶液，在波长508nm处测量各溶液的吸光度。容量瓶编号No12345678铁标准溶液5.005.005.005.005.005.005.005.0010盐酸羟胺111111111molL-1 NaAc555555550.15邻二氮菲00.10.20.51.02.03.04.0A六、数据及处理 1根据上列三组数据分别绘制： (1) ApH曲线(吸光度为纵坐标)； (2) AVR用量曲线(吸光度为纵坐标)； (3) At曲线(吸光度为纵坐标)。 2从上列三条曲线上确定显色反应适宜的pH值范围、显色剂用量范围和适宜的显色时间范围。思 考 题 1根据什么原则从吸光度pH曲线确定显色的适宜pH值范围？如果选择不当，其后果怎样？2. 在从吸光度-反应时间曲线选定适宜的显色时间范围时，主要应考虑什么问题？如果时间选择过短或过长对测定有何影响?3. 显色剂用量的选择原则是什么？实验六 邻二氮菲分光光度法测定微量铁（选作）一、试验目的 1. 学习722型和721型或其他型号分光光度计的使用方法， 2. 学习绘制吸收光谱曲线的方法。 3. 掌握利用标准曲线进行微量成分分光光度测定的基本方法和有关计算。 二、基本原理 邻二氮菲 (简写作Phen)，在pH值为29的溶液中，Fe2+离子与邻二氮菲发生下列显色反应： Fe2+十3Phen = Fe(Phen)32+生成的橙红色络合物非常稳定，1gK稳=21.3(20)，其溶液在508nm处有最大吸收峰，摩尔吸光系数K5101.1104Lcm-1mol-1，利用上述反应可以测定微量铁。 显色反应的适宜pH值范围很宽(29)，酸度过高(pH2)反应进行较慢；若酸度过低，Fe2+离子将水解，通常在pH值约为5的NaAc缓冲介质中测定。邻二氮菲与F2+离子反应的选择性很高，相当于含铁量5倍的Co2+、Cu2+离子，20倍量的Cr3+，Mn2+，PO43-，V()离子，甚至40倍量的A13+，Ca2+，Mg2+，SiO32-，Sn2+和Zn2+离子都不干扰测定。本实验以盐酸羟胺为还原剂，也可使用抗坏血酸将Fe3+还原为Fe2+。4Fe3+ +2NH2OH 4Fe2+ + 4H+ +H2O 利用分光光度法进行定量测定时，一般是选择与被测物质 (或经显色反应后产生的新物质)最大吸收峰相应单色光的波长为测量吸光度的波长。显然，该波长下的摩尔吸光系数最大，测定的灵敏度也最高。为了找出物质的最大吸收蜂所在的波长，需测绘有关物质在不同波长单色光照射下的吸光度曲线，即吸收曲线(或称吸收光谱)。 通常采用标准曲线法进行定量测定，即先配制一系列不同浓度的标准溶液，在选定的反应条件下使被测物质显色，测得相应的吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线(或称工作曲线)。另取试液经适当处理后，在与上述相同的条件下显色，由测得的吸光度从标准曲线上求得被测物质的含量。 由于邻二氮菲与Fe2+离子的反应选择性高，显色反应所生成的有色络合物的稳定性好，重现性也好，因此在我国的国家标准 (GB)中，测定钢铁、锡、铅焊料、铅锭等冶金产品和工业硫酸、工业碳酸钠、氧化铝等化工产品中的铁含量，都采用邻二氮菲显色的分光光度法。 三、仪器 1722型、72l型分光光度计 2容量瓶 50mL 3吸量管 1mL，2mL，5mL，10mL四、试剂 1铁标准溶液10gmL-1 20.15邻二氮菲水溶液 310盐酸羧胺水溶液41molL-1 NaAc溶液五、实验步骤 1测量Fe2+-Phen吸收曲线 用吸量管吸取10gmL-1的铁标准液5.00mL于一只50mL容量瓶中，另一只不加铁标准液，然后分别加入1mL盐酸羟胺溶液，摇匀，再加入5mL NaAc缓冲溶液和2mL邻二氮菲溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀以1cm比色皿，试剂空白溶液(即上述不加标准铁的溶液)为参比溶液，在分光光度计上，在450550nm波长区间测定溶液的吸光度随波长的变化。在510nm附近须每隔2nm测量一次。 2绘制标准曲线 用吸量管分别吸取10gmL-1的铁标准溶液0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL于6只50mL容量瓶中，依次各加入1mL盐酸羟胺、5mL NaAc缓冲溶液、2mL邻二氮菲溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置10min，用1cm比色皿，以不加铁的试剂空白溶液为参比溶液，在实验步骤1所得到的最大吸收波长下，分别测量各溶液的吸光度。 3试样中微量铁的测定 准确称取试样0.40.5g(如铁含量较高，则适当减少称样量)于小烧杯中，加少量蒸馏水润湿，盖上表面皿，小心滴加3molL-1 HCl溶液至试样溶解，转移试样至50mL容量瓶中，用少量蒸馏水淋洗烧杯，一并转移至容量瓶中。然后依次加入1mL盐酸羟胺、5mL NaAc缓冲溶液、2mL邻二氮菲溶液，以蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min以试剂空白溶液作参比溶波，用1cm比色皿，在实验步骤1所得到的最大吸收波长下，测量吸光度。 六、数据及处理 1将测量结果填入下表(1) 吸收曲线波长/nm450 460 470 480 490 500 502 504 506 508 510 512 514 516 518 520 530 540 550吸光度A(2)标准曲线V铁标 /mL0.002.004.006.008.0010.00V 铁样m 铁/mg吸光度A(3) 试样编号，试样的称量记录， 2绘图及计算 (1) 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制Fe-Phen吸收曲线，并求出最大吸收峰的波长max。一般选用max作为分光光度法的测量波长。 (2) 以显色后的50mL溶液中的含铁量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制测定铁的标准曲线。 (3) 根据试样的吸光度，计算试样中铁的含量（mgL-1）。思 考 题 1邻二氮菲分光光度法测铁的原理是什么?用该法测出的铁含量是否为试祥中亚铁的含量？ 2吸收曲线与标准曲线各有何实用意义？3测绘Fe2+-phen吸收曲线时，在510nm附近，测量间隔为什么要密一些？ 3本实验所用的参比溶液为什么选用试剂空白，而不用蒸馏水？4试拟出以邻二氮菲分光光度法分别测定试样中微量Fe2+、Fe3+离子含量的分析方法。实验七 利用紫外吸收光谱检查物质的纯度 一、目的要求 1. 学习利用紫外吸收光谱检查物质纯度的原理和方法， 2. 熟练紫外-可见分光光度计的操作。 二、基本原理由于物质的紫外吸收光谱是物质分子中生色团和助色团的贡献，也是物质整个分子的特征表现。例如具有电子的共扼双键化合物、芳香烃化合物等，在紫外光谱区都有强烈吸收，其摩尔吸光系数可达104105数量级，这与饱和烃化合物有明显的不同。利用这一特性，可以很方便地检查纯饱和烃化合物中是否含有共轭双键、芳香烃等化合物杂质。如果乙醇中含有微量苯，会在波长230270nm处出现苯吸收带，而纯乙醇在该波长范围内不出现苯的吸收带。因此可利用物质的紫外吸收光谱的不同，检查物质的纯度。紫外吸收光谱可以定量分析、推断有机化合物的分子结构和检查物质纯度。 图1 曲线1.纯乙醇紫外光谱 图2 蒽醌(曲线1)和邻苯二甲酸酐 曲线2.苯在乙醇中的紫外光谱 (曲线2)在甲醇中的紫外吸收光谱从图1的曲线1和曲线2可以看出由于乙醇中含有微量苯，故在波长230270nm处出现B吸收带而纯乙醇在该波长范围内不出现苯的B吸收带。因此可利用物质的紫外吸收光谱的不同，检查物质的纯度。如图2所示的蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外吸收光谱，由于在蒽醌分子结构中的双键共轭体系大于邻苯二甲酸酐，因此，蒽醌的吸收带红移比邻苯二甲酸酐大，且吸收带形状及其最大吸收波长各不相同，由此得到鉴定。三、仪器 752、752C、UV-2000、UV7504、2800UV/VIS、或其他型紫外可见分光光度计 四、试剂1苯、无水乙醇 分析纯2苯的正庚烷溶液和苯的乙醇溶液 取二只50mL容量瓶各注入10L苯，然后分别用正庚烷和乙醇稀释至刻度，摇匀。 五、实验条件1. 波长范围 220280nm2. 石英比色皿 1cm 六、实验步骤 1根据实验条件，将各仪器按操作步骤进行调节，若仪器状态正常，即可测定各实验的紫外吸收光谱，如果测得紫外吸收光谱的吸收峰为平头蜂或太小，可适当改变试液浓度。 2使用分光光度计测定时，因仪器无自动波长扫描及记录装置；因此应先测定各试液在不同波长下的吸光度，然后绘制吸光度对波长的曲线，即得紫外吸收光谱。测定时要求先间隔10nm测量一次吸光度，在峰值吸收附近。间隔逐步改为5nm、2nm、lnm、0.5nm等，以便较准确测绘紫外吸收光谱。 七、数据及处理 1记录实验条件 2通过紫外吸收光谱的对比，说明检查纯度的可行性。思 考 题1. 如何利用紫外吸收光谱进行物质的纯度检查？2. 在紫外光谱区饱和烷烃为什么没有吸收蜂？3. 为什么紫外吸收光谱可用于物质的纯度检查？实验八 原子吸收分光光度法测定自来水中钙、镁的含量 标准曲线法一、目的要求1. 学习原子吸收分光光度法的基本原理；2. 了解原子吸收分光光度计的基本结构及其使用方法，3. 掌握应用标准曲线法测定自来水中钙、镁的含量。二、基本原理标准曲线法是原子吸收分光光度分析中一种常用的定量方法常用于未知试液中共存的基体成分较为简单的情况如果溶液中共存基体成分比较复杂则应在标准溶液中加入相同类型和浓度的基体成分，以消除或减少基体效应带来的干扰，必要时须采用标准加入法而不用标准曲线法。标准曲线法的标准曲线有时会发生弯曲现象。造成标准曲线弯曲原因有：(1) 当标准溶液浓度超过标准曲线的线性范围时，待测元素基态原子相互之间或与其它元素基态原子之间的碰撞几率增大，使吸收线半宽度变大，中心波长偏移，吸收选择性变差，致使标准曲线向浓度座标轴弯曲 (向下)。(2) 因火焰中共存大量其它易电离的元素，由这些元素原子的电离所产生的大量电子，将抑制待测元素基态原子的电离效应，使测得的吸光度增大使标 准曲线向吸光度座标轴方向弯曲 (向上)。 (3) 空心阴极灯中存在杂质成分产生的辐射不能被待测元素基态原子所吸收，以及杂散光存在等因素，形成背景辐射，在检测器上同时被检测，使标准曲线向浓度座标轴方向弯曲(向下)。 (4) 由于操作条件选择不当，如灯电流过大，将引起吸光度降低，也使标准曲线向浓度座标轴方向弯曲。 总之，要获得线性好的标准曲线，必须选择适当的实验条件，并严格实行。三、仪器1原子吸收分光光度计 3200型(上海分析仪器厂)或其它型号2. 钙、镁空心阴极灯3无油空气压缩机或空气钢瓶4. 乙炔钢瓶5通风设备6. 容量瓶、移液管四、试剂1金属镁或碳酸镁 均为优级纯2无水碳酸钙 优级纯3浓盐酸 优级纯，稀盐酸溶液1molL-14纯水 去离子水或重蒸馏水5 标准溶液配制 首先配成1000gmL-1储备液，然后钙稀释成100gmL-1，镁稀释成50gmL-1使用液（参看实验教材）五、实验条件(以3200型原子吸收分光光度计为例，若使用其它型号，实验条件应根据具体仪器而定)指标钙镁1.吸收线波长/ nm2.空心阴极灯电流I/ mA3.狭缝宽度d/ mm4.燃烧器高度h/ mm5.乙炔流量Q/ Lmin-16.空气流量Q/ Lmin-1422.7100.2（2挡）6.00.54.5285.2100.08（1挡）4.00.54.5六、实验步骤 1. 配制标准溶液系列 (1) 钙标准溶液系列 准确吸取2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL上述钙标准使用液（100gmL-1），分别置于5只50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀备用。该标准溶液系列钙的浓度分别为4.00、8.00、12.00、16.00、20.00gmL-1。(2) 镁标准溶液系列 准确吸取1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL上述镁标准使用液，分别置于5只50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀备用。该标准溶液系列镁的浓度分别为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0gmL-1。2配制自来水样溶液 准确吸取适量(视未知钙、镁的浓度而定)自来水置于50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 3根据实验条件，将原子吸收分光光度计按仪器操作步骤进行调节，待仪器电路和气路系统达到稳定，记录仪基线平直时，即可进样。测定各标难溶液系列溶液的吸光度。 4在相同的实验条件下，分别测定自来水样溶液中钙、镁的吸光度。 七、数据及处理 1记录实验条件(1) 仪器型号(2) 吸收线波长(nm) (3) 空心阴极灯电流(mA) (4) 狭缝宽度(mm) (5) 燃烧器高度(mm) (6) 乙炔流量 （Lmin-1) (7) 空气流量(Lmin-1) (8) 燃助比 乙炔:空气 = 2列表记录测量钙、镁标准溶液系列溶液的吸光度(A)，然后以吸光度为纵座标，标准溶液系列浓度为横座标绘制标准曲线。 3测量自来水样溶液的吸光度(A)，然后在上述标准曲线上查得水样中钙、镁的浓度(gmL-1)。若经稀释需乘上相应倍数求得原始自来水中钙、镁含量。 或将数据输入微机，以一元线性回归计算程序，计算钙、镁的含量。思 考 题1简述原子吸收分光光度分析的基本原理。2. 原子吸收分光光度分析为何要用待测元素的空心阴极灯作光源？能否用氘灯或钨灯代替？为什么？3. 如何选择最佳的实验条件？实验九 气相色谱定性分析 纯物质对照法1一、目的要求1. 了解气相色谱仪的基本结构、工作原理与操作方法2. 学习利用保留值进行色谱对照的定性方法二、基本原理 各种物质在一定的色谱条件(一定的固定相与操作条件等)下有各自确定的保留值，因此保留值可作为一种定性指标。对于较简单的多组分混合物，若其中所有待测组分均为已知，它们的色谱峰均能分开，则可将各个色谱峰的保留值与各相应的标准样品在同一条件下所得的保留值进行对照比较，就能确定各色谱蜂所代表的物质，这就是纯物质对照法定性的原理。该法是气相色谱分析中最常用的一种定性方法。以保留值作为定性指标，虽然简便，但由于保留值的测定，受色谱操作条件的影响较大，而相对保留值，仅与所用的固定相和温度有关，不受其它色谱操作条件的影响，因而更适合用于色谱定性分析。相对保留值，定义为：还应注意，有些物质在相同的色谱条件下，往往具有相近的甚至相同的保留值，因此在进行具有相近保留值物质的色谱定性分析时，要求使用高柱效的色谱柱，以提高分离效率，并且采用双柱法(即分别在两根具有不同极性的色谱柱上测定保留值)。在没有已知标准样品可作对照的情况下，可借助于保留指数 (Kovts指数)文献值进行定性分析。对于组分复杂的混合物，采用更为有效的方法，即与其它鉴定能力强的仪器联用，如气相色谱/质谱、气相色谱/红外吸收光谱联用等手段进行定性分析。 本实验以甲苯作为标准物质，利用保留值和相对保留值进行苯、乙苯和1,2,3-三甲苯的定性分析。三、仪器 1气相色谱仪 7890型 2氮气或氢气钢瓶 3色谱柱 2mm2m OV-101 或SE-30不锈钢柱 4微量进样器 1L、5L和100L注射器 四、试剂苯、甲苯、乙苯、邻二甲苯、对二甲苯、间二甲苯 （或正己烷、正庚烷、正辛烷=1:1:1）五、实验条件1. 色谱柱2mm2m（i.d）OV-101或SE-30 不锈钢柱2. 流动相 氢气 流量为 35mLmin-13. 柱温 80 4. 气化温度 1505. 检测器 TCD 检测温度1006. 桥电流 80mA7. 进样量 0.5L六、实验步骤 1在四只10mL容量瓶中，按1:100(V/V)比例分别配制:苯:甲苯;甲苯:乙苯; 甲苯:邻二甲苯;甲苯:对二甲苯;甲苯:间二甲笨;甲苯:1,2,3-三甲苯溶液，摇匀备用。2根据实验条件，将色谱仪按仪器操作步骤调节至可进样状态，待仪器上的电路和气路系统达到平衡，记录仪上基线平直时，即可进样。3分别吸取以上各种混合液0.5L，依次进样，并在色谱工作站上，于进样信号附近标明混合液组分名称。重复进样三次。4为测定死时间，在相同的实验条件下，取100L空气进样，记录色谱图，并重复进样三次。5. 试验完毕，用乙醚或无水乙醇抽洗微量注射器数次，并按仪器操作步骤中的有关细节关闭仪器。 七、数据及处理 1记录实验条件 2测量各色谱图中各组分的保留时间，空气保留时间(死时间)。并计算各组分的调整保留时间、相对保留时间(以甲苯作标准物质)和各组分在该柱上的n有效和H有效，并把数据列于表中(以min作单位)。 思 考 题 1为什么可以利用色谱峰的保留值进行色谱定性分析？ 2在测绘空气的色谱图时，若不严格控制相同实验条件，会发生什么后果? 3利用ri,s进行色谱定性时，对实验条件是否可以不必严格控制，为什么？4. 用同一根色谱柱，分离不同组分时，其塔板数是否一样，为什么？实验十 气相色谱定性分析 纯物质对照法2一、目的要求1. 学习利用保留值和相对保留值进行色谱对照的定性方法2. 熟悉色谱仪器操作二、基本原理 各种物质在一定的色谱条件(一定的固定相与操作条件等)下有各自确定的保留值，因此保留值可作为一种定性指标。对于较简单的多组分混合物，若其中所有待测组分均为已知且它们的色谱峰均能分开，则可将各个色谱峰的保留值与各相应的标准样品在同一条件下所得的保留值进行对照比较，就能确定各色谱蜂所代表的物质，这就是纯物质对照法定性的原理。该法是气相色谱分析中最常用的一种定性方法。以保留值作为定性指标，虽然简便，但由于保留值的测定受载气流速等色谱操作条件的影响较大，可靠性较差；若采用仅与所用的固定相种类和柱温有关而不受其它色谱操作条件影响的相对保留值作为指标，则更适合用于色谱定性分析。相对保留值定义为：式中、分别为死时间、被测组分i及标准物质s的调整保留时间；、为被测组分i及标准物质s的保留时间。还应注意，有些物质在相同的色谱条件下，往往具有相近的甚至相同的保留值，因此在进行具有相近保留值物质的色谱定性分析时，要求使用高柱效的色谱柱，以提高分离效率，并且采用双柱法(即分别在两根具有不同极性的色谱柱上测定保留值)。在没有已知标准样品可作对照的情况下，可借助于保留指数 (Kovts指数)文献值进行定性分析。对于组分复杂的混合物，则应采用更为有效的方法，即与其它鉴定能力强的仪器联用，如气相色谱-质谱、气相色谱-红外吸收光谱联用等手段进行定性分析。 本实验以正庚烷作为标准物质，利用保留值和相对保留值进行丁酮、环己烷、甲苯和乙酸正丁酯的定性分析。三、仪器1气相色谱仪 7890型 2氢气钢瓶 3色谱柱 2mm2m OV-101或SE-30 不锈钢柱 4微量进样器 5L和50L注射器 四、试剂丁酮、环己烷、甲苯、乙酸正丁酯 正庚烷均为分析纯五、实验条件1. 色谱柱2mm2m（i.d）OV-101或SE-30 不锈钢柱2. 流动相 氢气 流量为 35mLmin-13. 柱温 70 4. 气化温度 1505. 检测器 TCD 检测温度100