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安捷伦气相色谱基础培训,质量管理部,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,第一部分GC基础知识,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,1.1 概 述,色谱法是一种分离方法，它利用物质在两相中分配系数的微小差异进行分离。当两相做相对移动时，使被测物质在两相之间进行多次分配，这样原来的微小差异产生了很大的效果，使各组分分离，以达到分离分析及测定一些物理化学常数的目的。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,理解色谱法(Gas Chromatography ) 主要有2点：一是要 有两相，二是要有差异。 两相：固定相和流动相 具体到气相色谱： 固定相就是色谱柱(column)，流动相就是气体或者称为载气(carrier gas )。 差异就是指分配系数的差异。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,色谱过程示意图,兰州制造中心实验室,待分离组分 ，和,载气,A,B,C,D,2020年9月20日星期日,分离的过程示意图,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,1.2 气相色谱法的定义和分类,定义：用气体作为流动相的色谱法称为气相色谱法。 分类：根据固定相的状态不同，气固色谱(GSC) （吸附原理）、 气液色谱(GLC) （分配原理） 气固色谱可用活性炭，硅胶，分子筛，高分子多孔小球等作为固定相，分离的主要对象是一些永久性的气体和低沸点的化合物。吸附-脱附 气液色谱多用固定液涂渍在惰性载体上作为固定相，一般只要高沸点的有机化合物，蒸汽压低（在450以下有1.5KPa-10KPa的蒸汽压）且热稳定性好的有机化合物作为固定液。由于在气液色谱中可供选择的固定液种类很多，容易得到好的选择性，所以气液色谱有广泛的实用价值。 溶解-挥发,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,1.3 气相色谱法的特点,“三高” “一快” “一广” 1.高效能：一般填充柱的理论塔板数可达数千，毛细管柱可达一百多万。 2.高选择性：可以使一些分配系数很接近的以及极为复杂、难以分离的物质，获得满意的分离。 3.高灵敏度：可以检测10111013g物质，适合于痕量分析 4.分析速度快：一个试样的分析可在几分钟到几十分钟内完成。 5.应用广泛：可以分析气体试样，也可分析易挥发或可衍生转化为易挥发的液体和固体。 分析的有机物，约占全部有机物(约300万种)的20%。 6.不足之处：对被分离组分的定性能力较差。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,从载气带着组分进入色谱柱起就用检测器检测流出柱后的气体，并用记录器记录信号随时间变化的曲线，此曲线就叫色谱流出曲线，当待测组分流出色谱柱时，检测器就可检测到其组分的浓度，在流出曲线上表现为峰状，叫色谱峰。 色谱图:试样中各组分经色谱柱分离后,在柱的末端收集各组分,经检测器转换为电信号,用纪录仪将各组分浓度记录下来,得到色谱图。,1.4 色谱图及有关术语,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,如图所示为一色谱流出曲线：,1）基线：在实验条件下，色谱柱后仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线称为基线。基线在稳定的条件下应是一条水平的直线。它的平直与否可反应出实验条件的稳定情况。 2）峰高（h）和峰面积 ：色谱峰顶点与基线的距离叫峰高。色谱峰与峰底基线所围成区域的面积叫峰面积。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,3）保留值 a. 死时间(tM) ：不与固定相作用的物质从进样到出现峰极大值时的时间，它与色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不与固定相作用，因此，其流速与流动相的流速相近。据 tM可求出流动相平均流速 b. 保留时间tr：试样从进样到出现峰极大值时的时间。它包括组份随流动相通过柱子的时间t0和组份在固定相中滞留的时间。 c. 调整保留时间tr ：某组份的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组份在固定相中的滞留时间。即 tr= tr tM 4）色谱峰底宽W ：由色谱峰的两边拐点做切线，与基线交点的距离。 5）半峰高宽度W ：色谱峰高一半处的峰宽。也称为色谱峰半高宽度。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,1.5 气相色谱构成示意图,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,1.6 气相色谱基本流路图,500次更换,进样垫100次更换,一般为1:10,吸咐不被气化的物质,N2尾吹,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,第二部分载气,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,典型的气相色谱,气 源,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,气源与载气种类,兰州制造中心实验室,对载气的要求如下： 1、 惰性（不与样品或固定相反应） 2、 气体扩散小，以提高柱效率 3、 容易得到并易纯化 4、 价格便宜 5、 满足检测器要求 常用载气：N2 H2 He Ar TCD 用氢气、氦气比较好，灵敏度高， FID 用氮气 辅助气：氧气或空气,2020年9月20日星期日,1、气体不纯的不良影响 2、气体的净化方法 3、常用的净化物质的使用与老化,兰州制造中心实验室,1) 样品失真或消失 2) 柱失效 3) 对固定液保留特性的影响 4) 对检测器的影响,气体的净化,2020年9月20日星期日,氧气捕集器,兰州制造中心实验室,微量的氧气会破坏色谱柱，特别是对毛细管柱。氧气也会降低ECD检测器的功能。 氧气捕集器 (P/N 3150-0414) 应连接在分子筛干燥器和仪器安装设备的进样口 之间。 管路:使用GC专用铜管, 使用前先用溶剂冲洗，载气吹干。,分子筛干燥器,2020年9月20日星期日,气流调节阀 通常在减压阀输出气体的管线中还要串联稳压阀，用以稳定载气（或燃气）的压力 当用程序升温进行色谱分析时，由于色谱柱柱温不断升高引起色谱柱阻力不断增加，也会使载气流量发生变化。为了在气体阻力发生变化时，也能维持载气流速的稳定，需要使用稳流阀来自动控制载气的稳定流速。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,第三部分进样系统及技术,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,阀进样,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,气体进样,液体进样阀,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,取样状态 进样状态,样品上方取样进样法（顶空分析）,顶空的概念,1. 样品放置在一个恒温箱中（或炉中），从而可以达温度平衡。 2. 利用一个气密型的进样器或其它合适的手段取出样品上方的相同的顶空气体。 3. 再使用一般的GC仪器来分析样品的顶空气体。,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,顶空相关问题,适于分析这样的挥发物：,- 不纯样品。 - 固体样品。 含有某些不做分析的高沸点组 分样品。 - 含水量较高的样品。,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,应用,柱：HP-1 (Cross-Linked Methyl Silicone),30 m x 0.53 mm x 2.65,(HP Part No. 19095Z-123),载气：Helium, 5.2 psi,炉温：40 C,进样口：1cc, 不分流,检测器：FID,柱：HP-1 (Cross-Linked Methyl Silicone),30 m x 0.53 mm x 2.65,(HP Part No. 19095Z-123),载气： Helium, 5.2 psi,炉温： 60 C,进样口： 1 cc, 分流比 5:1,检测器： FID,水中氯化烃,顶空分析,水中芳烃,顶空分析,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,药品中溶剂残留: USP 467,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,2,4,6,8,10,1,2,3,4,5,1 二氯甲烷(25 ppm),2 氯仿(12 ppm),3 苯(25 ppm),4 三氯乙烯 (25 ppm),5 二噁环 (25 ppm),进样垫固定螺母,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,进样垫,石墨垫,柱,载气,玻璃填充物,齿形螺母,衬管,填充柱进样口示意图,毛细管柱进样口,分流方式是特为毛细管柱GC设计的样品引入方式,可与熔融石英，玻璃，金属柱相接,脉冲不分流 允许更大进样量,分流方式用于,含量较高组分分析,不分流方式用于,痕量组分分析,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,分流/不分流流路系统,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,不分流流路示意图,进样过程中分流放空阀关闭（没有分流出口流量） 在进样后的某指定时间，分流阀打开，将剩下的蒸汽清除出进样口。,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,2、 操作条件的选择 1) 汽化室温度的选择 2) 进样垫的材料与处理 3) 进样量,进样口操作 1、 进样口常见问题,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,注意事项,进样口温度过低，将导致高分子量化合物气化不完全，并且不能有效转移到色谱柱中。(样品气化不完全 ) 进样口温度过高，导致热稳定性差的化合物分解。 (样品分解) 样品从进样针注入时，不同组分的气化程度不同，高沸点组分残留量比例高。 一般情况下进样速度必须很快，因为当进样时间太长时，试样原始宽度将变大，色谱峰半峰宽随之变宽，有时甚至使峰变形。一般地，进样时间应在1s以内。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,第四部分色谱柱,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,气相色谱柱有多种类型。从不同的角度出发，可按色谱柱的材料、形状、柱内径的大小和长度、固定液的化学性能等进行分类。色谱柱使用的材料通常有玻璃、石英玻璃、不锈钢和聚四氟乙烯等，根据所使用的材质分别称之为玻璃柱、石英玻璃柱、不锈钢柱和聚四氟乙烯管柱等。在毛细管色谱中目前普遍使用的是玻璃和石英玻璃柱，后者应用范围最广。对于填充柱色谱, 大多数情况下使用不锈钢柱，其形状有U型的和螺旋型的，使用U型柱时柱效较高。按照色谱柱内径的大小和长度，又可分为填充柱和毛细管柱。前者的内径在24mm，长度为110m左右；后者内径在0.20.5mm，长度一般在25100m。在满足分离度的情况下，为提高分离速度，现在也有人使用高柱效、薄液膜的10m短柱。,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,根据固定液的化学性能，色谱柱可分为非极性、极性与手性色谱分离柱等。固定液的种类繁多，极性各不相同。色谱柱对混合样品的分离能力，往往取决于固定液的极性。常用的固定液有烃类、聚硅氧烷类、醇类、醚类、酯类以及腈和腈醚类等。新近发展的手性色谱柱使用的是手性固定液，主要有手性氨基酸衍生物、手性金属配合物、冠醚、杯芳烃和环糊精衍生物等。其中以环糊精及其衍生物为色谱固定液的手性色谱柱，用于分离各种对映体十分有效，是近年来发展极为迅速且应用前景相当广阔的一种手性色谱柱。 在进行气相色谱分析时，色谱柱的选择是至关重要的。不仅要考虑被测组分的性质，实验条件例如柱温、柱压的高低，还应注意和检测器的性能相匹配。有关内容我们将在以后章节中加以详细讨论。,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,“极性”一词常用来描述或评价固定液的性质。气相色谱中的所谓极性，是指含有不同功能团的固定液与分析物质的功能团和亚甲基之间相互作用的程度。如果一种固定液保留某种化合物的能力大于另一类，则认为这种固定液对于前一类化合物有较高的选择性。人们最初用来描述和区别固定液分离特性的方法是罗胥耐德(Rohrschneider)于1959年提出的相对极性方法。他首先规定固定液,-氧二丙腈的相对极性为100，角鲨烷为零， 选用正丁烯与正丁烷或环已烷与苯作为物质对，然后分别测定物质对在氧二丙腈、角鲨烷以及被测固定液柱上的相对调整保留值并取对数。 对于罗氏所建议的方法，有些人仍认为不够完善。1970年麦克雷诺(McReynolds)对这一方法提出改进方案。他采用丁醇、 2-戊酮和硝基丙烷分别取代罗氏所用的乙醇、甲乙酮和硝基甲烷，实验温度改为120。为了与罗氏常数相区别，相应的麦氏常数用X，Y，Z，U，S表示。,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,许多色谱手册都列有这两种常数，但罗氏常数现在人们已经不太常用，使用比较广泛的是麦氏常数。 固定相的评价是一个比较复杂的问题。不论是罗氏常数还是麦氏常数，许多人认为都还有不少缺点。为了寻求比较完美的表征方法，近年来Abraham等人提出了一种“溶剂化参数模型”（solvation parameter model）。这一模型将溶质分子从气相溶解到固定相的过程分为三个阶段：(1)在固定相中形成一定大小的空穴。这一过程要打破溶剂-溶剂分子间的“键”，是一个吸收能量的过程。溶质分子越大，需要打破的溶剂-溶剂分子间的“键”越多，吸收的能量也越多。如果仅考虑这一阶段，溶质分子越大，其保留值越小；(2)孔穴周围的溶剂分子重新排列。这一过程虽然与熵及焓有关，但对Gibbs自由能的贡献不大；(3)溶质进入孔穴。这一过程产生溶质和溶剂之间的各种作用力。所有作用力都会导致释放能量，有利于溶质的溶解。,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,色谱柱,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,填充柱,毛细管柱,色谱柱分类,色谱柱类型,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,填充柱,开管柱（毛细管柱）,常规型,小球填 充柱,多孔层小 球填充柱 ,常规填充柱 及微填充柱,多孔层 开管柱,壁涂 开管柱,长度 (meters),内径 (mm),流量 (ml/min),压力梯度 (psi),样品负荷量,.5-10,2-4,10-60,10-90,100 ng/ 峰,5-100,.530,4-30,1-20,5-100,.3-.75,1-30,1-40,100 ng/ 峰,5-100,.1-.25,0.3-1.0,5-90,50 ng/ 峰,PACKED,SERIES 530,WCOT (wide),WCOT (narrow),气固色谱 (GSC),吸附型,填充柱,吸附填充 (GSC),多孔具有大的表面积,毛细管柱-,P,orous,L,ayer,O,pen,T,ubular (PLOT),2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,气液色谱 (GLC),2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,分配型,填充柱,毛细管柱,Wall Coated OpenTubular (WCOT),液体相,固体支撑物,非常多的孔具有极大的表面积,液体相,气液色谱(GLC),2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,通过样品在固定相中不同的溶解度来实现分离,根据极性的不同分离组分,通常情况下,“ 相似相溶,或,同极性互相作用,例如：醇类是极性化合物,聚乙二醇(Carbowax)是极性化合物,3、分离度R：,柱将两个峰彼此分开的能力。,1、柱效：,柱生成尖锐峰的能力。,2、选择性：,柱将两个具有相似的化学和/或物理性质的 物质进行选择性分离的能力。,优,差,优,差,分离指标,4、柱效，选择因子和分离度之间的关系。,选择因子：,分离度,分离度,柱效,柱效,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,毛 细 管 柱 色 谱 条 件 的 选 择,1、 柱 效,2、 液 膜 厚 度（d ）,f,3、 柱 内 径,4、 载 气 线 速 及 载 气 种 类,5、 柱 温 的 选 择,6、 进 样 量 及 进 样 技 术,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,柱 选 择,常用的柱选择方法：,首先试用手边现有的柱子,向同事请教,从文献中查到相近应用的方法,如不是太清楚，先使用一个非极性柱如 HP-1或 HP-5,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,固定相选择的基本原则： 相似相溶原理，选用非极性的固定相分析非极性化合物 如果化合物可以用不同极性的固定相分析，选用极性最小 的固定相。 非极性固定相的使用寿命长于极性固定相。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,根据极性来选择适合的固定相，从来选择适当的色谱柱。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,气相色谱毛细管柱常用固定相,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,固 定 液 的 选 用 气 相 色 谱 固 定 相,Same,Same,100% Methyl,Silicone Gum,100% Methyl,Silicone Gum,99% Methyl,1% Vinyl Gum,100% Methyl,Silicone Fluid,100% Methyl,Silicone Fluid,100% Methyl,Silicone Fluid,5% Phenyl,Carborane,Methyl Silicone,50% Phenyl,Methyl Silicone,75% Phenyl,Methyl Silicone,Same,50%,3,3,3-Trifluropropyl,25% 2-Cyanoethyl,25% Cyanopropyl,Polyethylene Glycol,Polyethylene Glycol,(Modified with,Teraphthalic Acid),50% Cyanopropyl,Phenyl Silicone,Free fatty acid phase,Polyethylene Glycol,Diethylene Glycol,Succinate,1,2,3-Trie (2-Cyano-,ethoxy) propane,Same,Same,Same,Squalane,Apiazon L,SE-30,OV-1,UCW-982,DC-200,OV-101,SP-2100,SE-52 (or SE-54),Dexall 300,OV-17,OV-25,Polyphenyl Ether,(5 ring),QF-1,OV-210,XE-60,OV-225,Carbowax 20M,Carbowax 20M,TPA,Silar 5CP,FFAP,50%,3,3,3-Trifluropropyl,Carbowax 1500,DEQS,Silar 10C,EGS,100% Cyanopropyl,Silicone,Ethylene Glycol,Succinate,TCEP,Sebaconitrile,Bis-(2-Methoxyethyl),Adipate,Bis-(2-Cyanoethyl),Formalmide,OV-1,SE-30,OV-101, SP2100,DC-200, SP2100,OV-101, DC-200,OV-73,PS-300,SP-2250, DC-710,SP-2401,OV-202,QF-210,OV-225, AN-600,E-60, AN-600,SP-2300, CS-5,SP-1000, OV-351,SP-2340, CS-10,SP-2401,OV-202,QF-1,20/100,50/300,50/300,100/350,0/300,0/250,0/350,0/350,50/300,50/450,0/375,0/350,0/200,0/250,0/250,0/265,60/225,60/250,0/250,50/250,40/200,20/200,0/125,0/125,0/75,20/100,0/275,0/250,100/200,0,32,15,16,16,16,16,17,32,47,119,178,176,144,204,228,322,321,319,340,347,499,593,690,Information not available,Information not available,148,523,537,0,22,53,55,55,57,57,57,72,80,158,204,227,233,381,536,538,537,495,580,607,751,857,991,238,757,787,0,15,44,44,45,45,45,45,65,103,162,208,224,355,340,338,358,367,446,397,418,593,752,853,358,659,643,0,32,64,65,66,66,67,67,148,243,305,306,483,493,492,572,573,637,602,626,840,1028,1110,458,942,942,0,42,41,42,42,43,43,43,98,96,202,280,283,305,367,386,510,520,531,627,589,850,915,1000,310,801,889,0,143,217,222,224,227,229,229,257,474,884,1175,1216,1500,1785,1813,2308,2318,2428,2548,2587,3543,4145,4644,1520,3682,3759,A,B,C,D,E,McReynolds Constants,Temp Limit,Min/Max C,Equivalent,Phases,Description,Trade names,Increasing Polarity,(A) Benzene, (B) n-Butanol, (C) 2-Pentanone, (D) Nitropropane, (E) Pyridine,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,液 相 选 择,5% 苯甲基硅氧烷,11,13,14,1. C,2. 4- 氯酚,3. 癸胺,4. C,5. 甲基癸酯,6. C,7. 苊,8. 1- 十二烷醇,9. C,15,50% 苯甲基硅氧烷,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,保留时间与填充量,o,B. 20% 液相在50 C下分析,C. 10% 液相在50 C下分析,o,A. 30% 液相在50 C下分析,D. 5% 液相在50 C下分析,o,o,E. 1% 液相在50 C下分析,o,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,内径,内径选择的基本原则： 0.10mm口径柱适用于快速气相色谱分析。 0.25mm口径柱具有较高的柱效，用于标准的 GC/MS应用和分流/不分流分析。 0.32mm口径柱中等柱效，多用于不分流进样。 0.53mm口径柱，可以替代填充柱，适合于痕量分析。 增加色谱柱的内径，可以增加分离的样品量，但由于纵向扩散路径的增加，会使柱效降低。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,内径对分离度的影响,较小的内径可以获得更好的分离度，或者在更短的时间内获得同样的分离度,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,膜厚,膜厚选择的基本原则： 增加膜厚可以提高分离度和加强保留，厚些的液膜可以有效降低过载拖尾峰和其他化合物的共流出。 如果样品的浓度范围很宽，就需要更厚的液膜，反之，如果目标组分的分离足够，并且没有共流出的问题，就可以使用比较薄的液膜，对于挥发性有机物来说，厚液膜更为合适。 液膜厚度的改变将直接影响化合物的流出温度。膜越厚，保留越强，流出温度相应也越高。 标准膜厚(0.250.5m)：最广泛的应用，对于流出达到300的大多数样品分析效果良好。 薄液膜(0.10.2m)：适合石化分析，甘油三酯等高沸点的物质。 厚液膜(15m)：适合于流出温度在100200之间的低沸点化合物,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,膜厚对分离度的影响,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,长度,长度选择的基本原则： 色谱柱越长，柱效越高。 选择可以满足分离度要求的最短的柱子。 如果即使是最长规格的色谱柱依然无法满足分离度的要求，请考虑更换固定相或膜厚。 分离度和柱长的平方根成正比，两倍的柱长只能增加40的分离度。 标准柱(2530m)：标准柱长，满足大部分应用。 短柱(515m)：通常用于10个组份以下简单样品的快速分析。 长柱(50m以上)：复杂样品分析。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,柱长对分析时间的影响,恒温分析 ：保留时间由柱长决定，柱长加倍分析时间也加倍。 程升分析： 保留时间主要取决于柱温，分离度的提升和恒温分析类似，但分析时间只是略有增加。 由于分离度正比于柱长的平方根，所以增加柱长对分离是有利的。但增加柱长会使各组分的保留时间增加，延长分析时间。因此，在满足一定分离度的条件下，应尽可能使用较短的柱子。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,载 气 及 流 速 的 选 择,1、 载 气 种 类,2、 载 气 流 速,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,HETP = A +,B,+ C,HETP,C RESISTANCE TO MASS TRANSFER,A EDDY DIFFUSION,MOLECULAR,DIFFUSION,B,opt,m,m,m,m,柱效与载气线速度,柱效受载气线速度和流量控制。,曲线最低点是最小板高（或最大每米塔板数）的位置。 因此柱效也最好。,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,柱 温 的 选 择,1、 对 柱 效 的 影 响,2、 对 分 离 度 的 影 响,3、 对 保 留 时 间 的 影 响,4、 与 样 品 性 质 的 关 系,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,柱温对保留时间的影响,保留时间与炉温,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,Isothermal,Temperature Programmed,恒温色谱法和程序升温色谱法,主要特点,1、恒温色谱法,2、程序升温色谱法,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,程序升温运行特点,当组分和较宽的沸程（100度）时使用。,减少分析时间,可产生尖锐峰,产生更好的定量准确性，特别是对于后流出的组分,增加柱流失，产生上漂的基线,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,汽化温度和检测温度,1、汽化温度（使样品汽化，一般比柱温高几十度）,2、检测温度（通常比柱温高至少20度以上）,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,为什么必须进行色谱柱老化？ 新色谱柱含有溶剂和高沸点物质，所以基线不稳 ，出现鬼峰和噪声；旧柱长时间未用，也存在同样问题。一般采用升温老化，即从室温程序升温到最高温度，并在高温段保持数小时。 新柱老化时，最好不要连接检测器。 每天都要进行老化吗？ 视仪器基线情况，确定是否需要老化以及老化时间。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,第五部分检测器,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,检测器：是将流出色谱柱的被测组分的浓度转变为 电信号的装置，是色谱仪的眼睛。 通常由检测元件、放大器、数模转换器三部分组成. 被色谱柱分离后的组分依次进入检测器，按其浓度或质量随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图； 常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器、电子捕获检测器、火焰光度检测器、氮磷检测器。,检测器定义,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,检测器分类,根据检测器的响应原理，可将其分为浓度型和质量型检测器。 浓度型：检测的是载气中组分浓度的瞬间变化，即响应值与浓度成正比。 如TCD、ECD。 质量型：检测的是载气中组分进入检测器中速度变化，即响应值与单位时间 进入检测器的质量成正比。如FID、FPD。 根据应用范围，分为通用型检测器和选择型检测器 通用型：对所有物质有响应，如TCD、FID。 选择型：对特定物质有高灵敏响应，如ECD、FPD、NPD。 根据工作过程，分为破坏型检测器和非破坏型检测器 破坏型：检测过程中样品遭到破坏，不能回收。如FID、FPD 。 非破坏型：检测过程中样品不遭到破坏，可以回收。如TCD、ECD 。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,常用检测器,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,热导检测器（TCD）thermal conductivity detector,基本原理:每种物质都有导热能力，而且导热的能力大小不同，通过一个热敏电阻来测定与热敏电阻接触的气体组成变化情况。这种检测方式虽然不是最灵敏的，但是对所有样品都有响应，是通用型的检测器。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,1. 热导检测器的结构 池体（一般用不锈钢制成） 热敏元件：电阻率高、电阻温度系数大、且价廉易加工的钨丝制成。 参考臂：仅允许纯载气通过，通常连接在进样装置之前。 测量臂：需要携带被分离组分的载气流过，则连接在紧靠近分离柱出口处。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,平衡电桥，下图。 不同的气体有不同的热导系数。,钨丝通电，加热与散热达到平衡后，两臂电阻值： R参=R测 ; R1=R2 则： R参R2=R测R1 无电压信号输出； 记录仪走直线（基线）。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,进样后， 载气携带试样组分流过测量臂而这时参考臂流过的仍是纯载气，使测量臂的温度改变，引起电阻的变化，测量臂和参考臂的电阻值不等，产生电阻差，R参R测 则： R参R2R测R1,这时电桥失去平衡，a、b两端存在着电位差，有电压信号输出。信号与组分浓度相关。记录仪记录下组分浓度随时间变化的峰状图形。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,影响热导检测器灵敏度的因素,热丝阻值 热丝阻值越大，其灵敏度越高。 桥流 桥流越大，灵敏度越高。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,TCD的响应特性,通用型检测器 灵敏度较低，适合于大于几十ppm组分测定 对卤化物、重金属酯响应较小 浓度型检测器 非破坏型检测器,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,又称氢焰离子化检测器。主要用于可在H2-Air火焰中燃烧的有机化合物(如烃类物质)的检测。 原理：含碳有机物在H2-Air火焰中燃烧产生碎片离子，在电场作用下形成离子流，根据离子流产生的电信号强度，检测被色谱柱分离的组分。,火焰离子化检测器（FID） flame ionization detector, FID,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,结构：主要为离子室，内有石英喷嘴、发射极（极化极，此图中为火焰顶端）和收集极,(1) 在发射极和收集极之间加有一定的直流电压（100300V）构成一个外加电场。 (2) 氢焰检测器要用到三种气体： N2 ：载气携带试样组分； H2 ：为燃气； 空气：助燃气。 使用时需要调整三者的比例关系，检测器灵敏度达到最佳。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,A区：预热区 B层：点燃火焰 C层：热裂解区：温度最高 D层：反应区,工作过程： 来自色谱柱的有机物与H2-Air混合并燃烧，产生电子和离子碎片，这些带电粒子在火焰和收集极间的电场作用下（几百伏）形成电流，经放大后测量电流信号。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,具体描述如下： 氢气由喷嘴加入，与空气混合点火燃烧，形成氢火焰。极化极和收集极通过高阻、基流补偿和50350V的直流电源组成检测电路，测量氢火焰中所产生的微电流。该检测电路在收集极和极化极间形成一高压静电场。H2+O2燃烧能产生2100高温，使被测有机组分电离。载气(N2)本身不会被电离，只有载气中的有机杂质和流失的固定液会在氢火焰中被电离成正、负离子和电子。在电场作用下，正离子移向收集极(正极)。负离子和电子移向极化极(负极)。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,形成的微电流经高电阻，在其两端产生电压降，经微电流放大器放大后从输出衰减器中取出信号，在记录仪中记录下来即为基流，或称本底电流、背景电流。只要载气流速、柱温等条件不变，基流亦不变。无样品时两极间离子很少，基流不变;当载气+组分进入火焰时，在氢火焰作用下电离生成许多正、负离子和电子，使电路中形成的微电流显著增大。即组分的信号，离子流经高阻放大、记录即得色谱峰。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,注意事项 （一） 注意安全 防氢气泄漏，切勿让氢气泄漏入柱恒温箱中，以防爆炸。注意以下几点即可： 在未接色谱柱和柱试漏前，切勿通氢气；卸色谱柱前，先检查一下，氢气是否关好；如果是双柱双检测器我谱仪，只有一个FID检测器工作时，务必要将另一个不用的FID用闷头螺丝堵死；防烫伤，因为FID外壳很烫。 。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,（二） 保持FID正常性能 1正常点火 点火时，FID检测器温度务必在120以上。点火困难时，适当增大氢气流速，减小空气流速，点着后再调回原来的比例。检测器要高于柱温 2050，防水冷凝。 2定期清洗喷嘴 注意线性范围与以下条件有关：一般用N2作载气，载气要净化，除有机物；气体流量比等。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,第六部分数据分析,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,6.1 定量方法(一),6.1.1面积归一法 各组分浓度以面积百分比表示，该结果可以确认大概的浓度，但有误差。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,面积归一法,不需标样 组分的灵敏度相近 得到大致浓度.(不能用于精确定量),兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,6.2 定量方法(二),外标法 仪器分析中应用最广泛的方法之一，是比较法的一种。与内标法相比，外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。 外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。其误差来源主要是进样误差， 因此，分析前一定要做面积重复性(即进样重复性)实验。 内标法 色谱分析中一种比较准确的定量方法，尤其在没有标准物对照时，此方法更显其优越性。内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和被测组分的峰面积（或峰高）及相对校正因子。 在样品中添加内标物，通过组分与内标峰的面积比，对组分进行定量。 该方法减小了进样误差对定量结果的影响。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,外标法,需要标样 目标组分被检测到，就可定量(无需各组分都检出) 进样量的误差直接影响定量结果 测定条件要一致,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,内标法,需要内标物。 目标组分和内标物被检测到，就可定量。 可减小进样量的误差对结果的影响。定量结果最为准确 内标物必须准确添加入所有未知样品中。,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,内标物的选择,内标物峰与试样中所有成分的峰完全分离。 内标物峰与目标成分峰保留时间不应差太远。 内标物具有与分析目标成分类似的化学性质。 理化性质与待测物相近 色谱响应与待测物相近 与待测物有良好的分离，但不能相距太远 与待测物的峰面积比为0.7-1.3最好，因此要根据待测物的浓度确定内标物的添加量,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,第七部分6890N工作站介绍安捷伦气相色谱6890N软件操作规程.pdf,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,第八部分6890N维护保养安捷伦气相色谱维护讲义.pdf更换喷嘴.wmv维护收集器.wmv,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,谢谢大家！,兰州制造中心实验室,2020年9月20日星期日,