白酒中甲醇的快速检测

白酒中甲醇的快速检测1范围本方法规定了白酒中甲醇的快速检测方法。本方法第一法适用于白酒（酒精度1868% vol）中甲醇的快速检测，第二法适用于白酒（酒 精度3468% vol）中甲醇的快速检测。第一法变色酸法2原理样品中的甲醇在磷酸溶液中，被高锰酸钾氧化为甲醛，用偏重亚硫酸钠除去过量的高锰酸钾。 甲醛在硫酸条件下与变色酸反应生成蓝紫色化合物。通过与甲醇对照液比较，对样品中甲醇含量 进行定性判定。3试剂和材料方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB /T 6682规定的三级水。3.1试剂3.1.1 高锰酸钾（KMnO4）。3.1.2 磷酸（H3PO4）。3.1.3偏重亚硫酸钠（Na2S2O5）。3.1.4 硫酸（H2SO4）。3.1.5 变色酸钠（C HNaO S -2HO）o10 62 8 223.1.6 乙醇（C2H6O）。3.1.7 5%乙醇（体积分数）：吸取乙醇5 mL，置于100 mL容量瓶，加水稀释至刻度。3.1.8高锰酸钾-磷酸溶液（30 g/L）：称取3.0 g高锰酸钾，溶于100 mL磷酸-水（15+85）溶液。3.1.9偏重亚硫酸钠溶液（100 g/L）：称取10.0 g偏重亚硫酸钠，溶于100 mL水中。3.1.10变色酸显色剂：称取0.1 g变色酸钠溶于25 mL水中，加入75 mL硫酸。3.2参考物质甲醇参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度99%。表1甲醇中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量甲醇Methanol67-56-1CH3OH32.043.3标准溶液的配制甲醇标准溶液（1 g/L）：称取0.1 g （精确至0.001 g）甲醇标准品于100 mL容量瓶中，用 5%乙醇（3.1.7）稀释至刻度，混匀。3.4材料甲醇快速检测试剂盒：适用基质为白酒（酒精度1868% vol），需在阴凉、干燥、避光条 件下保存。4仪器和设备4.1电子天平：感量0.001 go4.2 量筒：50 mL, 100 mL。4.3 移液器：1 mL, 5 mLo4.4酒精计：分度值为1% volo4.5涡旋振荡器。4.6水浴锅。4.7环境温度：1030C。5分析步骤5.1待测液制备5.1.1酒精度的测定：取洁净、干燥的100 mL量筒，注入100 mL样品，静置数分钟，待酒中气泡 消失后，放入洁净、擦干的酒精计，轻轻按一下，不应接触量筒，平衡约5 min，水平观测，读 取与弯月面相切处的刻度示值。5.1.2样品稀释：根据酒精计示值吸取对应体积的样品（参见表2），置于10 mL比色管中，补水 至 10 mL。表2不同酒精度样品吸取体积表酒精计示值（% vol）样品吸取体积（mL）补水体积（mL）18 222.57.523 272.08.028 321.78.333 361.58.537 411.38.742 451.28.846 531.09.054 600.99.161 680.89.25.1.3显色：吸取稀释后的样品溶液（5.1.2） 1.0 mL,置于10 mL比色管中，加入高锰酸钾-磷酸 溶液0.5 mL，混匀，密塞，静置15 min。加入0.3 mL/偏重亚硫酸钠溶液，混匀，使试液完全褪色。 沿比色管壁缓慢加A5mL变色酸显色剂，密塞，混匀，置于70C水浴中，显色20 min后取出，迅 速冷却至室温，即得待测液。每批测试应吸取1mL 5%乙醇（3.1.7）同5.1.3“加入高锰酸钾-磷酸 溶液0.5 mL”起操作，随行全试剂空白试验。5.2甲醇对照液制备根据待测样品的分类（粮谷类或其他类），吸取对应体积（参见表3）的甲醇标准溶液（3.3）， 置于10 mL比色管中，补5%乙醇至10 mL，混匀。吸取上述溶液1.0 mL，置于10 mL比色管中， 同5.1.3“加入高锰酸钾-磷酸溶液0.5 mL”起操作，制得甲醇对照液。表3标准溶液对应吸取体积表待测样品分类标准溶液吸取体积（mL）粮谷类0.3其他类1.05.3判读将待测液（5.1）与甲醇对照液（5.2）进行目视比色，10 min内判读结果。应进行平行试验， 且两次判读结果应一致。6结果判定要求观察待测液颜色，与甲醇对照液比较判读样品中甲醇的含量。颜色深于对照液者为阳性，浅 于对照液者为阴性。为尽量避免出现假阴性结果，判读时遵循就高不就低的原则。7性能指标7.1 检测限：0.2 g/L。7.2灵敏度：95%07.3特异性：85%o7.4假阴性率：5%o7.5假阳性率：15%o注：性能指标计算方法见附录A。8其他本方法所述试剂及操作步骤等是为给方法使用者提供方便，在使用本方法时不作限定。方法 使用者在使用替代试剂或操作步骤前，须对其进行考察，应满足本方法规定的各项性能指标。本方法的参比方法为GB 5009.266食品安全国家标准 食品中甲醇的测定。本方法中采用的高锰酸钾-磷酸溶液（3.1.8）、变色酸显色剂（3.1.10）久置后会发生变化， 建议方法使用者考察稳定性或临用新配。采用本方法，酒精度为非整数的样品，为避免出现假阴性结果，建议参照表2吸取酒精度整 数部分体积。当目视不能判定颜色深浅时，可采用分光光度计测定待测液与甲醇对照液570 nm处的吸光 度进行比较判定。第二法乙酰丙酮法9原理样品中的甲醇在磷酸溶液中，被高锰酸钾氧化为甲醛，用草酸除去过量的高锰酸钾。甲醛在 过量铵盐条件下与乙酰丙酮反应生成黄色化合物。通过与甲醇对照液比较，对样品中甲醇含量进 行定性判定。10试剂和材料方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB /T 6682规定的三级水。10.1试剂10.1.1高锰酸钾-磷酸溶液：同3.1.8。10.1.2草酸：无水草酸（H C O）或含2分子结晶水的草酸（H C O-2HG）o 222 2 4210.1.3 乙酰丙酮（C5H8G2）o10.1.4 乙酸铵（C2H7G2N）o10.1.5 冰乙酸（C2H4G2）o10.1.6 50%乙醇（体积分数）：量取乙醇（3.1.6） 50 mL，置于100 mL容量瓶，加水稀释至刻度。10.1.7草酸溶液（50 g/L）：称取5.0 g无水草酸或7.0 g含2分子结晶水的草酸，溶于100 mL 水。10.1.8乙酰丙酮溶液:称取乙酸铵25.0 g，加水70 mL使溶解，加冰乙酸3 mL及乙酰丙酮0.25 mL， 加水稀释至100 mL，用力摇匀。临用现配。10.2参考物质同3.2。10.3标准溶液配制甲醇标准溶液（1 g/L）：称取0.1 g （精确至0.001g ）甲醇标准物质于100 mL容量瓶中，用 50%乙醇（10.1.6）稀释至刻度，混匀。10.4材料甲醇快速检测试剂盒：适用基质为白酒(酒精度3468% vol)，需在阴凉、干燥、避光条 件下保存。11仪器和设备同4。12分析步骤12.1待测液制备12.1.1酒精度的测定：同5.1.1。12.1.2显色：根据酒精计示值吸取对应体积的样品，置于10 mL比色管中，补乙醇和水至2.0 mL (参见表4)。加入高锰酸钾磷酸溶液1.0 mL,混匀，密塞，静置30 min。加入草酸溶液1.0 mL,混匀，密塞，置沸水浴中使其褪色，取出冷却至室温。加入乙酰丙酮溶液2.0 mL，混匀，密塞， 置沸水浴中，显色30 min后取出，迅速冷却至室温，即得待测液。每批测试应吸取2mL 50%乙醇(10.1.6)同12.1.2“加入高锰酸钾-磷酸溶液1.0 mL”起操作，随行全试剂空白试验。表4不同酒精度样品吸取体积表酒精计示值(% vol)样品吸取体积(mL)补乙醇体积(mL)补水体积(mL)34 351.50.50.036 401.30.50.241 441.20.50.345 521.00.50.553 580.90.50.659 650.80.50.766 680.70.50.812.2甲醇对照液制备根据待测样品的分类，吸取对应体积(参见表5)的甲醇标准溶液(10.3)，补50%乙醇至 2.0 mL，混匀后同12.12加入高锰酸钾-磷酸溶液1.0 mL”起操作，制得甲醇对照液。表5对应标准溶液吸取体积表待测样品分类标准溶液吸取体积(mL)粮谷类0.3其他类1.012.3判读将待测液与对照液进行目视比色，10 min内判读结果。应进行平行试验，且两次测定结果应 一致。同6。14性能指标14.1 检测限：0.3 g/L。14.2 灵敏度：95%014.3 特异性：85%o14.4假阴性率：5%o14.5假阳性率：15%o注：性能指标计算方法见附录A。15其他本方法所述试剂及操作步骤等是为给方法使用者提供方便，在使用本方法时不作限定。方法 使用者在使用替代试剂或操作步骤前，须对其进行考察，应满足本方法规定的各项性能指标。本方法的参比方法为GB 5009.266食品安全国家标准 食品中甲醇的测定。采用本方法，酒精度为非整数的样品，为避免出现假阴性结果，建议参照表4吸取酒精度整 数部分体积。当目视不能判定颜色深浅时，可采用分光光度计测定待测液与甲醇对照液415 nm处的吸光 度进行比较判定。附录A快速检测方法性能指标计算表样品情况a检测结果b总数阳性阴性阳性N11N12N1.=N11+N12阴性N21N22N2.=N21+N22总数N.1=N11+N21N.2=N12+N22N=N1.+N2或N.1+N.2显著性差异（2）2=（ N12-N21 -1）2/（N12+N21），自由度（df）=1灵敏度（p+，%）p+=N11/N1.特异性（P-，%）p-=N22/N2.假阴性率（pf-，%）pf-=N12/N1.=100-灵敏度假阳性率（pf+，%）pf+=N21/N2,=100-特异性相对准确度，c(N11+N22)/(N1.+N2.)注：a由参比方法检验得到的结果或者样品中实际的公议值结果；b由待确认方法检验得到的结果。灵敏度的计算使用确认后的结果。N：任何特定单元的结果数，第一个下标指行，第二个下标指列。例如：N11表示第一行， 第一列，N1.表示所有的第一行，N.2表示所有的第二列；N12表示第一行，第二列。c为方法的检测结果相对准确性的结果，与一致性分析和浓度检测趋势情况综合评价。本方法负责起草单位：四川省食品药品检验检测院验证单位：陕西省食品药品监督检验研究院、湖北省食品质量安全监督检验研究院、南昌市食品药品检验所主要起草人：余晓琴、刘美、姚欢、李澍才、陈小泉、杜钢