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第一章浮游植物的采集、计数与定量方法,浮游植物(Phytoplankon)又称浮游藻类,是水中悬浮生活的若干种藻类的总称。 浮游植物及其生产力是水生态系统的重要成员与重要功能之一,是鱼类天然饵料的重要组成部分。由于浮游植物对环境的变化十分敏感,故在环境监测中,也有重要作用。 我国淡水养殖的主要对象是鲢、鳙鱼类,它们的天然饵料常以浮游植物为主。我们知道,不同类型的水体或同一水体的不同季节,藻类的组成是不相同的,各种藻类的相对量在不断地变化。这种变化是有一定的趋势的,这以后要专题介绍。就鲢鳙而言,藻类又有易消化种类和不易消化种类之分,一般说来,硅藻门、金藻门、甲藻门中种类易于消化,而蓝藻门、绿藻门、裸藻门中的多数种类难于消化。因此,在鱼类生长季节,研究水中藻类组成和现存量(Standing crop),可为养殖鱼类的合理投放提供重要的科学依据。同时为水生态研究及利用提供了有用的资料。 浮游植物的现存量,指的是某一瞬间单位水体中所存在的浮游植物的量。这个量有两种表示方法,用数目单位表示成为密度,一般用万个升为单位,五、六十年代用之;用重量单位(mg/L)表示的现存量称为生物量(Biomass)。70年代以来被广泛使用。,在以往的调查中,人们往往只注重浮游植物的种类或数量,对其生物量则重视不够。其原因在于:1、浮游植物生物量测算繁琐;2、对生物量与数量之间的本质差别认识不足。由于不同水体,不同种类的藻类在个体上有很大差异,仅仅用数量就很难评价不同水体饵料生物的丰欠。这就要求,浮游植物的定量工作,必须以测算生物量为目标。 不同的调查方法,有时会得出不同的结果。关于浮游生物的采集、计数与定量方法采用下列方法。,一、采样: 1 采水器:各种采水器均可,一般浅水(10m)湖泊可用玻璃瓶采水器,深水 湖泊或水库必须用颠倒采水器。北原式采水器或有机玻璃采水器。 2采样点的选择及采样层次的确定 选择采样点的原则是,采样点在平面上的分布要有代表性。一般要求湖心、库心、江心必须采样,有条件时采样点可适当多设一些,如大的湖湾、库湾、河流的上、中、下游水体的沿岸带、浅水区等也要设点采集。 凡水深不超过2米者,可于采样点水下0.5m处采水,水深210米以内,应距底0.5米处另采一个样,水深超过10米时。应于中层增采一个水样。一般来说池塘、水库、湖泊、河流的样点及采水层次可总结如下:,池塘:样点可设在距岸边1m处。水深小于2m时采一中层水样。若水深大于2m时,最好采上、中、下层水样。 亚表层:水下20cm左右。 中 层:水体中间部分。 下 层:离底20cm左右。 水库及河流:样点可设在上、中、下游。 上游:设十个点(亚表层或中层) 中游:水在23米深时设一个点,采2个样(上中层和中下层) 下游:设23个样点。中心点3个样(上、中、下层),两测点各一个样(中层) 湖泊:中心区设一点。进水口和出水口也应设点。,3采样量及采样次数 每一个采样点应采水1000ml。若系一般性调查,可将各层采的水等量混合,取1000ml混合水样固定;或者分层采水,分别计数后取平均值。分层采水可以了解每一采样点各层水中浮游植物的数量和种类。 采得水样后立即加入1015ml鲁哥氏液(Lugols solution)固定,鲁哥氏液即将6克碘化钾溶于20ml水中,待其完全溶解后,加入4克碘充分摇动,待碘全部溶解后定容到100ml即配成鲁哥氏液。泥沙多时沉淀后再取水样。 采样次数可多可少。有条件时还可逐月采样一次,一般情况可下及采样一次,最低限度应在春季、夏季末、秋初各采样一次。,二、沉淀浓缩: 上述水样,摇匀后倒入1000ml圆柱形沉淀器中沉淀24小时,沉淀器可用1000ml的瓶子代替。用虹吸管小心抽出上面不含藻类的“清液”。剩下3050ml沉淀物转入50ml的定量瓶中;再用上述虹吸出来的“清液”少许冲洗三次沉淀器,冲洗液转入定量瓶中。凡以碘液固定的水样固定的水样,瓶塞要拧紧。还要加入24的甲醛固定液(福尔马林),即每100ml样品需另加4ml福尔马林,以利于长期保存。浓缩时切不可搅动底部,万一动了应重新静止沉淀,为不是漂浮水面的某些微小生物等进入虹吸管内,管口应始终低于水面,虹吸时流速流量不可过大,吸至澄清液13时,应控制流速,使其成滴缓慢留下为宜。 采水时,每瓶样品必须贴上标签,标签上药剂在采集的时间、地点、采水体积等,其他详细内容应另行做好记录,以备查对,避免错误。 浓缩的体积视浮游植物的多少而定。也可根据水的肥瘦确定浓缩体积。如下面的浓缩体积与水透明度(体现水的肥瘦)之间关系大致如下,仅供参考。 瘦中肥 透明度 1m50cm30cm 老水 特老水 30cm 20cm 浓缩的标准是以每个视野里有十几个藻类为宜。,1000ml 30 ml 50 ml 100 ml,不浓缩稀释,三、计数方法 将浓缩沉淀后水样充分摇匀后,立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml样品,注入0.1ml计数框内(计数框的表面积最好是20202),小心盖上盖玻片(22222),在盖盖玻片时,要求计数框内没有气泡,样品不溢出计数框。然后在1440或1640倍显微镜下计数。即在400600倍显微镜下计数。每瓶标本计数两片取其平均值,每片大约计算50100个视野,但视野数可按浮游植物的多少而酌情增减,如平均每个视野不超过12个时,要数200个视野以上,如果平均每个视野有56个时要数100个视野,如果平均每个视野有十几个时数50个视野就可以了。同一样品的两片计算结果和平均数之差如不大于其均数的15,其均数视为有效结果,否则还必须测第三篇,直至三片平均数与相近两数之差不超过均数的15为止,这两个相近值的平均数,即可视为计算结果。 在计数过程中,常碰到某些个体一部分在视野中,另一部分在视野外,这时可规定出在视野上半圈者计数,出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞表示,对不宜用细胞数表示的群体或丝状体,可求出其平均细胞数。 计算时优势种类尽可能鉴别到属,注意不要把浮游植物当作杂质而漏计。 计数时可按下列格式记录,然后再进行整理计算。 视野数 种 类 第一片 第二片 正 小球藻 正正 正正 正 衣 藻 正 正 正正 小环藻 正 正,四、数量与生物量的计算: 1一升水中的浮游植物的数量(N)可用下列公式计算: 式中:Cs 计数框体积(2),一般为4002。 Fs 每个视野的面积(2),R2,视野半径r可用台微尺测出(一定倍数下)。 Fn 计数过的视野数。 V 一升水样经沉淀浓缩后的体积(ml) U 计数框的体积(ml)为0.1ml。 Pn 计数出的浮游植物个数。 如果计数框、显微镜固定不变,Fn、V、U也固定不变,公式中的( )可视为常数,此常数用K表示,则上述公式可简化为:N=KPn。 Pn代表某种藻类的个数,计算结果N只表示一升水中这种藻类的数量;Pn若代表各种藻类的总数,计算结果N则表示一升水中浮游植物的总数。前者若求浮游植物数量将各计算结果相加即可。,2生物量一般按体积来换算。这是因为浮游植物个体积小,直接称重较困难,且其细胞比重多接近于1。可用形态相近似的几何体积公式计算细胞体积。细胞体积的毫升数相当于细胞重量的克数。这样体积值(m-3)可直接换算为重量值(109m-3)可直接换算为重量值(109m-31毫克鲜藻重)。 下列体积公式,可供计算生物量时参考: 圆锥体:V=1/3R2h 圆柱体:V=R2h 球 体:V=4/3R3 椭圆体:V4/3ab2(a为长轴半径,b为短轴半径) 圆台体:V1/3H( + ) 长方体与正方体abh或a3 硅藻细胞的计算通式:V壳面面积带面平均高度 不规则性藻类可分可为几个部分计算。,每种藻类至少随机测量20个以上,求出这种藻类个体重的平均值,一般都制成附表供查找。此平均值乘上一升税种该种藻类的数量,即得到一升水中这种藻类的生物量(mg/L)。 由于同一种类的细胞大小可能有较大的差别,同一属内的差别就更大了,因此必须实测每次水样中主要种类(即优势种)的细胞大小并计算平均重量,其他种类可以参考附表计算。 藻类的生物量可直接作为初级生产力的一种指标,根据几次定期测算的现存量之差亦可估计出生产量。 定量结果应列出总生物量、各门生物量、优势种属。在条件许可时还可以用较简单的测定叶绿素法,来对照或代替生物量。但叶绿素法不能反映种类组成情况。,
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