实验标准操作规程

浸出物测定标准操作规程1 编制依据：中华人民共和国药典2005年版（一部）2 原理：中药材中的成分可以在水或醇中浸出，进而进行测定。3 适用范围：中药材4 水溶性浸出物测定4.1 检验操作方法 4.1.1 仪器及用具 电子天平1 250300ml的锥形瓶电热恒温干燥箱 蒸发皿2个温度计 水浴锅100ml 100250ml的锥形瓶 100ml移液管 漏斗 干燥器 回流冷凝装置4.1.2 操作方法 4.1.2.1 冷浸法 测定用的供试品须粉碎，使能通过二号筛，并混合均匀。 操作方法：取供试品约4g，称定重量（W0），置250300ml的锥形瓶中。精密加入水100ml，塞紧，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过。精密量取滤液20ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中（蒸发皿重W1），在水浴上蒸干后，于105干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量（W2），除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量（%）。 计算公式：浸出物%=(W2-W1) / W0100%4.1.2.2 热浸法 操作方法：取供试品约2g，称定重量（W3），置100250ml的锥形瓶中。精密加入水50100ml，塞紧，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定重量，用水补足减失重量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中（W2），在水浴上蒸干后，于105干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量(W1)，除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量（%）。 计算公式：浸出物% =（W1-W2）/W3100%5 醇溶性浸出物测定法：照水溶性浸出物测定法测定（热浸法须在水浴上加热）。以各项下规定浓度的乙醇或甲醇代替水为溶剂。水分测定标准操作规程1 编制依据：中华人民共和国药典2005年版（二部）2 原理：供试品在100105干燥5小时，减失重量即为失去水分的重量。3适用范围：本法适用于不含或含少量挥发性成分的药品。4检验操作方法 4.1 第一法(本法适用于不含或少含挥发性成分的药品)4.1.1 仪器及用具 电子天平电热恒温干燥箱称量瓶2个温度计1个 干燥器1个4.1.2 操作方法 4.1.3 取供试品25g两份，平铺于干燥至恒重的2个称量瓶中，厚度不超过5mm，疏松样品不超过10mm，精密称定。4.1.4 将精密称定的盛有供试品的2个称量瓶放入电热恒温干燥箱，打开瓶盖，将瓶盖与称量瓶一一对应放好。在100105干燥5小时后，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量。4.1.5 恒重：再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。4.1.6 根据减失的重量计算供试品中含有水分的百分数。 计算：供试品中含水量% =（w1-w2）/w3100%式中：w1烘前称量瓶+样质量， g ；w2烘后称量瓶+样质量，g ；w3供试品质量，g 4.2 第二法（甲苯法）（本法适用于含挥发成分的药品）4.2.1 仪器装置：如图。A为500ml的短颈圆底烧瓶；B为水分测定管；C为直形冷凝管，外长40cm。使用前，全部仪器应清洁并置烘箱中烘干。4.2.2 仪器及用具电热套电子天平200ml量筒 4.2.3 试剂：甲苯4.2.4 测定法4.2.4.1 取供试品适量（约相当于含水量14ml），精密称定，置A瓶中，加甲苯约200ml必要时加入玻璃珠数粒，将仪器械各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满B管的狭细部分。将A瓶置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2滴。4.2.4.2 待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可加亚蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察）。4.3 检查水量，并计算供试品中的含水量（%） V计算：含量（%）= 100%W式中：V水的毫升数，ml； 水的密度，g/ml； W供试品重量，g。灰分检查标准操作规程1 编制依据：中华人民共和国药典2005年版（一部）2 定义：是指测定药品在一定条件下炽灼所剩无机杂质重量的方法3 检验操作方法 3.1 仪器及用具 架盘药物天平（最大称量为100g，分度值为0.1g）电子天平高温炉电炉电热恒温水浴锅干燥器坩埚2个5ml量筒1个3.2 操作方法 3.2.1 测定用的供试品须粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后，用架盘天平取供试品23g（如须测定酸不溶性灰分，可取供试品35g），置炽灼至恒重的坩埚中，用电子天平称定重量。3.2.2 用电炉缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化。3.2.3 插上电源使高温炉逐渐升温至500600。打开高温炉，用坩埚钳夹住坩埚在炉口预热3分钟，然后轻轻放入炉内，关上炉门。使完全灰化并至炽灼至恒重。3.2.4 根据残渣重量，计算供试品中含总灰分的含量（%）。3.2.5 如供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热水或10%硝酸铵溶液2ml，使残渣湿润，然后置水浴上蒸干，残渣照前法炽灼，至坩埚内容物完全灰化。3.3 计算公式灰分%=（m2-m0）/（m1-m0） 式中： m0坩埚质量，g ； m1（坩埚+药）质量，g ； m2炽灼恒重后（坩埚+药）质量，g 。显微鉴别标准操作规程中药材、中药成品1 检验依据：中华人民共和国药典2005年版（一部）2 定义：通常是借助显微镜，应用植物细胞、组织学和矿物晶体光学等知识鉴别中药材或中成药的一种方法，3 检验操作方法(临时制片法)3.1 仪器和用具3.1.1 仪器生物光学显微镜显微描绘器滑走切片机或徒手圆筒生物切片器镜台测微尺离心机3.1.2 用具放大镜、刀片、解剖刀、镊子（包括粗镊及眼科弯镊与直镊）、剪（眼科剪与手术剪）、解剖针。载玻片、盖玻片吸湿器（即玻璃干燥器改装蒸馏水加微量苯酚，潮气润湿药材样品用）培养皿或小烧杯（放切片用，切片后的处理均可在其中进行）、酒精灯、铁三角架、石棉网、滴瓶、试管、试管架、滴管、玻璃棒（粗与细）、乳钵、量筒毛笔（从刀上刷取切片用）铅笔（HB、4H、6H绘图用）带盖搪瓷盘（装切片标本用）纱布、吸水纸（滤纸）、火柴等。3.2 试液3.2.1 水合氯醛试液：取水合氯醛50g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。此液为透化剂，可使干缩的细胞壁膨胀而透明，并能溶解淀粉粒、树脂、蛋白质及挥发油等。3.2.2 甘油醋酸试液（斯氏液）：取甘油、冰醋酸与水各等份，混合即得。此液专用于观察淀粉形态，可使淀粉不膨胀变形，便于测量其大小。3.2.3 甘油-乙醇溶液：取甘油1份，50%乙醇1份，混合即得。此液为封藏液，用于保存植物材料及临时切片，有软化组织的作用。3.2.4 苏丹试液 取苏丹0.01g，加90%乙醇5ml溶解后，加甘油5ml，摇匀即得。本液应置棕色玻璃瓶内保存，在2个月内应用。此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。3.2.5 钌红试液：取10%醋酸钠溶液12ml，加钌红适量使呈酒红色即得。本液应临用新制。此液可使粘液染成红色。3.2.6 间苯三酚试液：取间苯三酚1g，加90%乙醇100ml使溶解，滤过即得。应置棕色玻璃瓶内，在暗处保存。此液与浓盐酸合用，可使木化细胞壁染成红色或紫红色。3.2.7 碘试液：取碘化钾0.5g，溶于少量水中，加碘1g，使溶解，加水至100ml即得。应用时能常再加水稀释成淡棕色或淡黄色。本液应置棕色瓶内保存。此液用于检查淀粉，染成蓝色或紫色；蛋白质或糊粉粒呈黄色。3.2.8 硝铬酸试液：取硝酸10ml，加入100ml水中，混匀。另取铬酸10g，加水100ml使溶解。用时将二液等量混合，即得。此液为常用的“植物组织解离液”。检品的解离浸泡时间，按材料的质地不同而异。3.2.9 -萘酚试液：取15%的-萘酚乙醇溶液10.5ml，缓缓加入硫酸6.5ml，混匀后再另加乙醇40.5ml及水4ml，混匀即得。此液用于检查菊糖，染成紫红色，并很快溶解。3.2.10 硝酸汞试液（米隆氏试液）：取汞4.5g，加发烟硝酸3ml，俟作用完毕，加等量水稀释即得。本液应置棕色玻璃塞瓶内，在暗处保存。此液用于检查糊粉粒，染成砖红色。3.2.11 氯化锌碘试液：取碘化钾8g，加水8.5ml使溶解，再加无水氯化锌2.5g使溶解，加碘适量至饱和，即得。本液应置棕色玻璃塞瓶内。此液用于检查木质化与纤维素细胞壁，前者显黄棕色，后者显蓝色或紫色。3.3 显微标本的制作3.3.1 切片制作标本片（横切或纵切）3.3.1.1 药材的预处理：先将药材表面泥沙刷洗干净，将应观察的部位，切成适当大小的块或段，一般以宽1cm、长3cm为宜，切面削平整。质地软硬适中的药材可直接进行切片；质地坚硬的则须先使其软化后再切片。软化方法可放在吸湿器（即玻璃干燥器底部盛蒸馏水并滴数滴苯酚防霉，上部瓷板上置药材样品吸湿）中闷润，或在水中浸软或煮软。有些根、根茎、茎及木材类，质地虽坚实，可将削平的切面浸水中片刻，表面润湿时取出，直接切片也能切成完整的薄片。过于柔软的材料，可将其浸入70%95%乙醇中，约20分钟后可变硬些，即可进行切片。对于细小、柔软而薄的药材，如种子或叶片，不便直接手持切片，种子类可放在软木塞或橡皮片中（一侧切一窄缝，将种子嵌入其中），叶类药材可用质地松软的通草或向日葵的茎髓作平持物进行切片。药材在处预处理时应注意不能影响要观察的显微鉴别特征。如要观察菊糖、粘液等在软化、切片、装片等过程中，此法不可与水接触，以免溶解消失；观察挥发油、树脂等则不可与高浓度乙醇或其它有机溶媒接触。3.3.1.2 徒手切片：在检验工作中，此法最常用，操作简便，迅速，制成的切片保持其细胞内含物的固有形态，便于进行各种显微化学反应观察。切片：右手持刀片，左手拇指和食指夹持药材，中指托着药材的底部，使药材略高出食、拇二指，肘关节应固定，使材料的切面保持水平，刀口向内并使刀刃自左前方向右后方切削，即可切得薄片。操作时，材料的切面和刀刃须经常加水或50%乙醇保持湿润，防止切片粘在刀片上。切好的切片用毛笔蘸水轻轻从刀片上推入盛有水或50%乙醇的培养皿中。徒手圆筒生物切片器切片：将药材用通草或软木夹持，固定于切片器持物筒中；具有一定硬度的材料（如木本植物的茎干等）可直接固定于持物筒中；左手持切片器，拇指与小指持底盘的边缘，食指端顶动中柱上的固定螺帽，可便材料无级上升，每动一格材料上升约10um,顶动螺帽时，同时将底盘向反方向略转动，使切片器整体方赂不变，以保持材料的切片方向固定；历手持切片刀，刀柄靠于拇指与食指根部，食品店指与中指轻压于刀片的上面，刀片平贴于切片器圆台上，由左上方至右下方迅速滑动，切下的切片用毛笔沾水取下置盛水的培养皿中。装片：选取薄而平整的切片置载玻片上，根据所要观察的内容要求，滴加适宜的试液12滴，盖好盖玻片，即可在显微镜下观察。如加水合氯醛试液透化，将薄片移载玻片上，滴加12滴水合氯醛试液，在酒精灯上微微加热，至边缘起小泡即停止加热，继续补充试液再加热，以不烧干为度直至透化完全为止；加热温度不能过高，以防水合氯醛试液沸腾，使组织内带入气泡；加热时应将载玻片不断移动，不宜对准一处烧，以免受热不匀而炸裂；透化后放冷，加甘油乙醇试液12滴后加封盖片，贴上标签。冬日室温较低时，透化后不待放冷即滴加甘油乙醇液，以防水合氯醛结晶析出而防碍观察。水合氯醛试液有洁净透明作用，并能使已收缩的细胞膨胀，能清楚观察组织构造，可溶解淀粉粒、蛋白质、叶绿体、树脂、挥发油等，对草酸钙结晶无作用，为观察草酸钙结晶的良好试剂，如需观察菊糖等一睦多糖物质则加水合氯醛试液不加热。3.3.1.3 滑走切片机切片：此法不需要较高的技切，只要了解掌握操作方法，短时间内即可学会并切出较薄的切片，适用于切质地坚实、形状较大的药材，柔软的材料经冷冻处理亦可切得较薄的切片。材料制备：经软化处理的材料，检查软化是否合适，可用刀片切割材料，若较容易切下薄片，则表示软化适宜。柔软的材料可直接用胡萝卜或土豆、软木作夹持物。新鲜材料则直接浸入石蜡中，使材料外面包上一层石蜡。切片机调试及材料安装：切片前，先安置好切片机使稳固，进行调试检查。将切片刀夹持在夹器上夹紧，调整刀的角度（约015）；调整厚度调节器到所需厚度。把制备好的材料用两块软醋酸乙酯闪住或直接放在切片机的材料固定器上夹紧夹正，使材料露出软木块或固定器上端约0.5cm，调整好材料高度，使刀刃靠近材料的切面，使材料切面与刀刃平行并略高于刀刃约0.51mm。切片：用历手握夹刀器柄。往操作者方向迅整拉动，便切下切片，且附着于刀的表面上，用毛笔蘸水把切片放于盛水的培养皿中。将刀推回朱处，转动厚度推进器，用毛笔直蘸水润湿材料切面及刀刃，再拉切片刀，往返推拉，可得到许多厚度均匀完整的切片。若切片不成功，应检查切片刀是否太钝，则应磨刀或换锋锐的切片刀，若切得太薄而破碎，则逐渐增加厚度至能切得完整的薄片为度。注意：夹持在材料固定器上的材料切面接近于固定器上端时，必须注意防止切片刀刃碰撞固定器而损毁切片刀。装片：为防止切片弯卷，可选取理想的切片，用两张载玻片夹往，浸于水中放置4小时使材料压平，放入95%乙醇中固定，甘油装片观察。3.3.2 粉末制片：主要用于粉末状的药材及药材粉末制成的成方制剂观察。 3.3.2.1 粉末制备：药材要先干燥，磨或锉成细粉，装瓶，贴上标签。粉末制备时，注意取样的代表性，应注意各部位的全面性，例如：根要切取根头、根中段及根尾等部位，必须全部磨成粉，不得丢弃渣头。并需通过4号筛，混合均匀。干燥时，一般温度不能超过60，避免经常受温，使淀粉糊化，难以观察其完整者。3.3.2.2 制片法：用解剖针挑取粉末少许，置载玻片的中央偏右的位置，加适宜的试液1滴，用针搅匀（如为酸或咸时应用细玻棒代替针），待液体渗入粉末时，用左手食指怀拇指夹持盖玻片的边缘，使其左侧与药液层左侧接触，再用右手持小镊子或解剖针托住盖玻片的右侧，轻轻下放，则液体逐渐扩延充满盖玻片下方。如液体未充满盖玻片，应从空隙相对边缘滴加液体，以防产生气泡；若液体过多，用滤纸片吸去溢出的液体，最后在载玻片的左端贴上检品的标签或书写上标记。3.3.2.3 中药成方制剂的鉴别：按剂型不同，分别将样品处理后，按粉末制片法装片观察。散剂、胶囊剂，可直接取出粉末装片或透化装片。片剂，可取23片研细后，取粉末适量装片或透化装片。水丸剂，可取数丸置乳钵中（若系包衣水丸，可刮除包衣）研细，取粉末适量装片，或取粉末适量置小容器内，加水合氯醛液透化（加适量甘油以防水合氯醛结晶析出），搅匀，用吸管吸取混悬液装片。蜜丸剂，样品可用两种方法处理用解剖刀沿蜜丸正中切开，从切面由外至内刮取少许样品，置载玻片中央偏右，滴加适宜的试液，用玻璃棒搅匀。按上述粉末制片法制片，或透化装片。将样品切碎放入容器，加水搅洗涤，然后置离心管中离心沉淀，如此反复以除尽蜂蜜后，取沉淀或透化后装片。含挥发性成分的制剂，取其粉末进行微量升华装片。3.3.2.4 粉末制片的注意事项粉末加液体搅拌及加盖玻片时容易产生气泡。如用水或甘油装片时，可先加少量乙醇使其润湿，可避免或减少气泡的形成，或反复将盖玻片沿一侧轻抬，亦可使多数气泡逸出。搅拌时产生的气泡可随时用针将其移出。装片用的液体如易挥发，应装片后立即观察。用水装片也较易蒸发而干涸，通常滴加少许甘油可延长保存时间。需用水合氯醛试液透化时，应注意掌握操作方法。装片后用手执其一端，保持水平置小火焰上约12cm处加热，并缓缓左右移动使之微沸，见气泡免同时离开火焰，待气泡停止逸出再放在小火上，并随时补充蒸发的试液，如此反复操作，直至粉末呈透明装为止，放凉后滴加甘油镜检。粉末药材制片时，每片邓用量宜少不宜多，为使观察全面可多做些制片。如取量多，显微特征单一轮廓不清，反而费用时，不易得出准确强论。中成药制剂的粉末检查，因在多味药材粉末中寻找某一味药的某一显微特征，有时较难查见，可以取粉末量多些，置试管或小烧杯中，加入水合氯醛试液，加热透化。透化好后再用吸管吸出，滴在载玻片上，加盖玻片，即可观察。3.3.3 表面标本片：主要用于叶类、花类（萼片、花瓣）、果实、草质茎及鳞茎等药材的表面特征如毛茸、气孔、表皮细胞等的观察。质地菲薄的药材可以整体装片；较厚的药材则须撕下表皮然后装片。3.3.3.1 整体装片：适用于较薄的叶片、萼片和花瓣、剪取欲观察部位约4mm2的两小片，一反一正放在载玻片上，加水合氯醛试液，加热透化至透明为止，盖好玻片即得。3.3.3.2 表面撕离装片：凡较厚的或新鲜药材，用上法不能使之透或不便于整体装片。将软化了的或新鲜材料固定住，然后用镊子夹住要剥取撕离的部分，小心的撕离，或用解剖刀轻轻割（刮）去不需要的各层组织，只保留表皮层（上层或下层），将欲观察的表破表面观朝上，置载玻片上，加透化剂透化后，放冷，加稀甘油1滴，盖上玻片，贴品名签，即得。3.3.4 解离组织片：适用于厚壁组织或输导组织等的单个细胞的显微观察。将样品切成段（长约5mm，粗约2mm）或片（厚约1mm），对于木类或茎类木质部，最好切成纵长的小段。然后根据细胞壁的性质，按照下列方法之一进行处理：如样品坚硬，木化组织罗多或集成较大群束，可用硝铬酸法或氯酸钾法；对于薄壁组织占大部分或分散存在的样品，可用氢氧化钾法。3.3.4.1 氢氧化钾法：置样品于试管中，加5%氢氧化钾溶液25ml，加热至用玻璃棒挤压，能离散为止，倾去碱液，加水洗涤后，取出少量置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油装置观察。3.3.4.2 硝铬酸法：置样品于小烧杯中，加20%硝酸与20% 铬酸的等量混合液适量，使之浸没样品，放置约3060分钟，坚硬的样品需时要长些，也可在水浴上微温，至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去酸液，用水洗涤后，取出少量置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油装置观察。3.3.4.3 氯酸钾法：置样品于试管中，加硝酸溶液（12ml）及氯酸钾少量，缓缓加热，待产生的气泡渐少时，再及时加入氯酸钾少量以维持气泡稳定地发生，至用玻璃棒挤压能离散为止。倾去酸液，用水洗涤后，撕开，封藏。3.3.4.4 注意事项：用氯酸钾法制片时，每次加入的氯酸钾不可过多，加热温度不宜过高，否则突沸腾容易使液体逸出管外。加热时间长短因样品的硬度和木化程度而异，通常约需515分钟。操作过程中产生的氯气有毒，应注意通风。用硝铬酸法解离也可在载玻片上进行。即取一块厚度适当的切片，置载玻片上，滴加硝铬酸试液使之浸没，放置约20分钟后，轻轻压下或移动盖玻片使之分离其余操作同前，此法解离的细胞，可以看清其分离的组织部位。3.3.5 花粉粒与孢子制片：取花粉、花药（或小的花）或孢子囊群（干燥样品浸于冰醋酸中软化），用玻璃棒捣碎，纱布过滤，滤液置离心管中，离心，取沉淀加新鲜配制的醋酐与硫酸（9：1）的混合液13ml，置水浴上加热23分钟，离心，取沉淀，用水洗涤2次，加50%甘油与1% 苯酚34滴，用品红甘油胶封藏观察。也可直接用水合氯醛试液装片，具体操作同粉末标本片。3.3.6 磨片：凡需观察断面，以一般切片无法制作的标本，如坚硬的动物类药材珍珠、石决明、动物骨骼、矿物药等可采用磨片法制片。片的厚度一般为2050m。磨片方法有手工磨制与机器磨制。 3.3.6.1 手工磨制：选取合适的材料，一般以12mm为度，先置粗磨石（或磨砂玻璃板）上，加适量水，用食指、中指夹材料，在磨石上往返研磨,待两面磨均匀，厚度约数百m后，改用软木塞压在上面，再在细磨石上加水磨，磨至透明时（2050m），用水冲洗，再用95%乙醇处理，封藏。3.3.6.2 机器磨制：地质矿产部门有专门人员机构与设备制作。3.4 显微测量显微鉴定时应用测量方法以测定细胞及细胞内含物等的大小，应用最多的则是长度测定。常用的量具是目镜测微尺与载物台测微尺。3.4.1 目镜测微尺，又称目镜量尺或目微尺。它是放在目镜内的一种标尺，是一个直径1820mm的圆形玻璃片，中央刻有精确待距离的平行线刻度，常为50或者100条。目镜测微尺是用以直接测量物体用的，但其刻度所代表的长度是根据显微镜放大倍数不同而改变，故使用前必须用载物台测微尺来标化。3.4.2 载物台测微尺，又称镜台测微尺或台微尺。它是一种特制的载皮片，中央粘有一小圆形玻片、上刻有将1mm（或2mm）精确等分为100（或200）小格的细线，每一小格长为 10m，它是用以标化目镜测微尺的。3.4.3 目镜测微尺的标化，以确定使用同一显微镜及特定倍数的物镜、目镜和镜筒长度时，目镜测微尺上每一格所代表的实际长度。标化方法：将载物台测微尺置于显微镜镜台上，按常规对光调焦，并移动测微尺物象于视野中央；从镜筒中取下目镜，旋下接目镜的目镜盖，将目镜测微尺放入目镜筒中部的光栏上（应正面向上），旋上目镜盖后返置镜筒上。此时在视野中，除镜台测微尺的象外，还同时可观察到目镜测微尺的分度小格，移动镜台测微尺和旋转目镜，使两种量尺的刻度平行。左边的“0”刻度重合，寻找第二条重合刻度。记录两刻度的读数，并根据比值计算出目镜测微尺每小格在该物镜条件下所相当的长度（m）。例如：接目镜头为10，接物镜头为40时，目镜测微尺每17小格相当于载物台量尺4小格，则目镜测微尺每1小格的长度为4010um172.35m。3.4.4 测定细胞及细胞内含物的方法将载物台测微尺取下，换以装有待测的标本载片。对光，调焦，移动载片，使需测量的目的物置于目镜量尺范围内，调清物象，计数出目的物占测微尺的小格数，乘以目镜尺每1小格的长度值即得。计算公式： 待测物体长度（m）镜台微尺与目镜微尺重合时所具的长度所测物体占有目镜测微尺的格数目镜测微尺与镜台测微尺重合时所占的格式例如：测得淀粉粒长径为20小格，每小格长2.35m，202.3547m。3.4.5 注意事项3 4.5.1 测量通常是在高倍镜下进行，因目镜量尺的每一小格的长度值较小，结果较为准备。3.4.5.2 每次测量记下数据，并分析数据最小量值、最大量值和多见值（m）。3.4.5.3 目镜测微尺所代表的长度值随不同目镜与物镜配合而异因此在实验前，应将专用的目镜测微尺，在所用显微镜不同倍数的目镜与物镜组合后，进行测量其长度值，全部测定后记载于实验记录本或将数值表贴在显微镜子座上，备用。3.4.5.4 测量时，如大小与规定有差异时，允许有少量略高于或低于规定的数值。3.5 显微鉴别法注意事项3.5.1 粉碎用具用完后，必须处理干净，干燥后才能使用于另一种药材。3.5.2 所用盖玻片和载玻片应绝对干净。溶解标准操作规程1 仪器及用具架盘药物天平（最大称量100g，分度值0.1g）玻璃棒1支容量瓶1个烧杯1个滴管1个2 操作方法2.1 取出架盘天平，放在水平桌面上，在左右两盘上放两张等大小的称量纸，调节天平平衡。2.2 在干净的右盘上放相应的砝码，并调节游码共a（g）。2.3 然后取出A试剂瓶，打开瓶盖，倒扣在桌面上。用药勺逐量添加A试剂到天平左盘上至天平平衡。盖好A试剂瓶盖，并放回原位置。2.4 小心取下左盘的称量纸及药，轻轻倒入小烧杯中，打开溶剂B瓶盖，倒扣在桌面上，拿起试剂瓶（注意把有标签的一侧朝向手心），加溶剂少许使A溶解。盖好A试剂瓶盖，并放回原位置。2.5 用玻璃棒转移至b（ml）的容量瓶中。转移时，将玻璃棒伸入容量瓶中，使其下端靠住瓶颈内壁，上端不要碰瓶口，烧杯嘴紧靠玻璃棒，使溶液沿玻璃棒和内壁流入。2.6 溶液全部转移后，将玻璃棒稍向上提起，同时使烧杯直立，将玻璃棒放回烧杯。2.7 用洗瓶中的纯化水吹洗玻璃棒和烧杯内壁，将洗涤液也转移至容量瓶中。2.8 如此反复洗涤多次（至少3次）。2.9 完成定量转移后，加水至容量瓶容积的3/4左右时，将容量瓶摇动几周（勿倒转），使溶液初步混匀。2.10 然后把容量瓶平放在桌上，慢慢加水到接近标线1cm左右，等1-2min，使粘附在瓶颈内壁的溶液流下。2.11 用细长滴管伸入瓶颈接近液面处，眼睛平视标线，加水至弯液面下缘最低点与标线相切。2.12 立即塞上干的瓶塞，将容量瓶倒转，使气泡上升到顶。2.13 将瓶正立后，再次倒立振荡，如此反复10-20次，使溶液混合均匀。2.14 最后放正容量瓶，打开瓶塞，使其周围的溶液流下，重新塞好塞子，再倒立振荡1-2次，使溶液全部充分混匀。2.15 然后将溶液移入试剂瓶，贴好标签，备用。精密称取标准操作规程1 仪器及用具架盘药物天平（最大称量100g，分度值0.1g）电子天平手套小刷子2 操作方法2.1 用架盘天平粗称所需称量的样品。2.2 戴上手套，检查电子天平的天平盘上是否清洁，若有异物，用软毛刷轻轻扫净。2.3 插上电子天平的电源，打开开关，预热半个小时。2.4 然后轻轻打开右侧玻璃门，把粗称样品及称量纸放在天平盘中央。2.5 当显示器上的读数稳定后，读数并记录数据。2.6 然后轻轻打开玻璃门，小心取下称量纸及样品，把样品小心的倒入容器中（注意不要弹称量纸）。2.7 同法称量称量纸，记录纸重。3 归零，拔下电子天平1插头。薄层色谱法标准操作规程1 编制依据：中华人民共和国药典2005年版（一部、二部）2 定义；系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料板或铝基片上，成一均匀薄层，待点样、展开后，与适宜的对照药物按同法所得的色谱图对比，并可用薄层扫描仪进行扫描，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。4 检验操作方法 3.1 仪器及用具3.1.1 玻璃板：规格5cm20cm、10cm20cm、20cm20cm 要求光滑、平整、洗净后不附水珠，晾干。3.1.2 固定相或载体：硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF2543.1.3 涂布器具：应能使吸附剂或载体在玻璃板上涂布成一层符合厚度要求的均匀薄层。3.1.4 微量进样器3.1.5 展开室：应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱层析缸，并有严密的盖子，除另有规定外，底部应能平整光滑，应便于观察。3.2 操作方法 3.2.1 薄层板的制备：除另有规定外，将一份吸附剂和3份水在研钵中向同一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度0.250.5mm）取下涂好薄层的玻璃板，置水平台上于室温下晾干，后在110烘30分钟，即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度（可通过透射光和反射光检视）3.2.2 点样：除另有规定外，用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边2.0cm，样点直径24mm,点间距离1.52.0cm，点样时勿损伤薄层表面。如需定量，则对照品点2个点、供试品点4个点。3.2.3 展开：层析缸如需先用展开剂饱和，可在缸中加入足够量的展开剂，并在壁上贴二条与缸一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封缸顶的盖，使系统平衡或按品种项下规定操作。将点好样品的薄层板放入层析缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.51.0cm（勿将样点浸入展开剂中）密封缸盖，待展开至规定距离（一般为1015cm），取出薄层板，晾干，按各品种项下的规定检测。3.2.4 含量测定 需用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出，或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量时，则可用薄层扫描法。杂质检查标准操作规程1 编制依据：中华人民共和国药典2005年版（一部）2 药材中混存的杂质系指下列各类物质：2.1 来源与规定相同，但其性状或部位与规定不符；2.2 来源与规定不同的物质；2.3 无机杂质，如砂石、泥块、尘土等。3 检查方法3.1 仪器及用具放大镜一定规格的筛子镊子架盘天平3.2 操作方法3.2.1 取规定量的供试品，摊开，用肉眼或放大镜（510倍）观察，将杂质拣出；如其中有可以筛分的杂质，则通过适当的筛，将杂质分出。3.2.2 将各类杂质分别称量，计算其在供试品中的含量（%）。4 注意事项4.1 药材中混存的杂质如与正品相似，难以从外观鉴别时，可称取适量，进行显微、化学或物理鉴别试验，证明其为杂质后，计入杂质重量中。4.2 个体大的药材，必要时可破开，检查有无虫蛀、霉烂或变质情况。4.3 杂质检查所用的供试品量，除另有规定外，按药材取样法称取。恒重标准操作规程1 仪器及用具电热恒温干燥箱电子天平称量瓶2个干燥器1个2 操作方法2.1 取2个干净的称量瓶，放在电热恒温干燥箱内，打开电源，调节温度至105，至温度稳定后开始计时。2.2 在规定的小时后打开干燥箱门，取出称量瓶放在干燥器中，30分钟后，用电子天平精密称定，记录数据。2.3 再把称量瓶放在干燥箱内在105下烘1小时，然后取出放在干燥器中冷却30分钟后，再用电子天平称定，记录数据。2.4 如此反复，直至两次称量结果差小于等于0.3mg为止。玻璃器皿清洗标准操作规程1清洁剂及使用范围1.1 常用清洁剂：肥皂、肥皂液、洗衣粉、去污粉、洗液、有机溶剂等。1.2 肥皂、肥皂液、洗衣粉、去污粉用于可以用刷子直接刷洗的仪器，如烧杯、锥形瓶、试剂瓶等。1.3 洗液多用于不便于用刷子刷洗的仪器，如滴定管、移液管、容量瓶、比色管、垂熔玻璃漏斗等；也用于长久不用的玻璃仪器，如刷子刷不掉的污垢。1.4 有机溶剂可洗有油腻的仪器。2 洗液的配制方法及使用范围2.1 重铬酸钾洗液：取50g磨细的重铬酸钾或重铬酸钠置于100ml热水中，加热使其完全溶解，放冷，将浓硫酸缓缓边搅拌边加入，逐渐析出重铬酸钾红色沉淀，再继续加即溶解，加入硫酸大约为875900ml。2.2 碱性乙醇溶液：将6g氢氧化钠溶于6ml的水中，再加50ml95%乙醇配成，贮于胶塞玻璃瓶中备用。可用于洗涤油脂、焦油、树脂沾污的仪器。2.3 碱性高锰酸钾洗液：4g高锰酸钾溶于水中，加入10g氢氧化钾用水稀释至于1000ml而成。此液用于清洗油污或其它有机物质。2.4 草酸洗液：510g草酸溶于100ml水中，加入少量浓硫酸。此溶液用于洗涤高锰酸钾洗后产生的二氧化锰。2.5 碘碘化钾洗液：1g碘和2g碘化钾溶于水中，用水稀释至100ml而成。用于洗涤硝酸银黑褐色残留污物。2.6 有机溶剂：苯、乙醚、丙酮、二氯乙烷、氯仿、乙醇等可洗去油污或溶于该溶剂的有机物质，使用时注意安全，注意溶剂的毒性和可燃性。3 洗涤方法及要求3.1 一般的玻璃仪器先用自来水冲洗，然后用洗衣粉、洗洁精等擦洗，再用自来水清洗，最后用水冲洗三次。3.2 精密或难刷的仪器（滴定管、容量瓶、移液管、垂熔玻璃漏斗等）先用自来水冲洗，沥干，用洗液浸泡后，再用自来水冲洗，最后用水冲洗。3.3 一个洗净的玻璃仪器应不沾油腻，不挂水珠，否则应重洗，直至达到要求为止。4 注意事项4.1 清洁液有很强的腐蚀性，使用时需小心。4.2 被煤油、矿物油、蜡等污染的器皿，不宜用清洁液，可用石灰乳或稀碱液洗去。4.3 被钡所污染的器皿，也不能用清洁液洗，因为生成的硫酸钡很难从器皿壁上除去。4.4 碱性高锰酸钾洗液碱性较强，洗涤时间不宜过长。移液管使用标准操作规程1 用途：移液管是用来准确移取一定体积溶液的容器。2 移液管的准备2.1 移取溶液前，先吹尽管尖残留的水，再用滤纸将管尖外壁的水擦去。2.2 然后用欲移取的溶液涮洗3次，以确保所移取操作溶液浓度不变。3 移取操作 3.1 移取待吸溶液时，将移液管管尖插入液面下12cm。当管内液面借助吸耳球的吸力而慢慢上升时，管尖应随着容器中液面的下降而下降。3.2 当管内液面升高到刻度以上时，移去吸耳球，迅速用右手食指堵住管口，将管上提，离开液面，用滤纸拭干管下端外部。3.3 将管尖靠盛废液瓶的内壁，保持管身垂直。稍松右手食指，用右手拇指及中指轻轻捻动管身，使液面稳定而缓缓的下降，直到弯液面的最低点与刻度线上边缘相切，视线与刻度线上边缘在同一水平面上，立即停止捻动并用食指按紧管口，保持容器内壁与移液管口端接触，以除去吸附于移液管口端的液滴。3.4 取出移液管，立即插入盛接溶液的器皿中，仍使管尖接触器皿内壁，使容器倾斜而管直立，松开食指，让管内溶液自由的顺容器壁流下。3.5 移液管放液应使溶液弯液面到达流液口处静止。为保证液体完全流出，将移液管从接受容器移走之前，无规定一定等待时间的情况下，应遵守近似3s的等待时间。在规定等待时间的情况下，移液管从容器中移开前应遵守等待时间的规定。4注意事项4.1 注意勿使溶液回流，以免稀释及沾污溶液。4.2 移液时在整个排放和等待过程中，流液口尖端和容器内壁接触保持不动。容量瓶使用标准操作规程1 用途：容量瓶主要是用来配制准确浓度的溶液2 容量瓶的准备：使用容量瓶之前，先检查2.1 容量瓶容积是否与所要求的一致2.2 若配制见光易分解物质的溶液，应选择棕色容量瓶2.3 检查磨口塞或塑料塞是否漏水2.3.1 检漏方法2.3.1.1 加纯化水至标线附近，塞紧瓶塞。用食指按住塞子，将瓶倒立2min，用干滤纸片沿瓶口缝隙处检查看有无水渗出。2.3.1.2 如果不漏水，将瓶直立，旋转瓶塞180，塞紧，再倒立2min，如果仍不漏水则可使用。2.3.2 检验合格的容量瓶应洗涤干净。洗净的容量瓶内壁应均匀润湿，不挂水珠，否则必须重洗。3 容量瓶的操作3.1 由固体物质配制溶液时，准确称取一定量的固体物质，置于小烧杯中，加水或其它溶剂使其全部溶解。3.2 定量转移入容量瓶中，转移时，将玻璃棒伸入容量瓶中，使其下端靠住瓶颈内壁，上端不要碰瓶口，烧杯嘴紧靠玻璃棒，使溶液沿玻璃棒和内壁流入。3.3 溶液全部转移后，将玻璃棒稍向上提起，同时使烧杯直立，将玻璃棒放回烧杯。3.4 用洗瓶纯化水吹洗玻璃棒和烧杯内壁，将洗涤液也转移至容量瓶中。3.5 如此反复洗涤多次（至少3次）3.6 完成定量转移后，加水至容量瓶容积的3/4左右时，将容量瓶摇动几周（勿倒转），使溶液初步混匀。3.7 然后把容量瓶平放在桌上，慢慢加水到接近标线1cm左右，等12min，使粘附在瓶颈内壁的溶液流下。3.8 用细长滴管伸入瓶颈接近液面处，眼睛平视标线，加水至弯液面下缘最低点与标线相切。3.9 立即塞上干的瓶塞，将容量瓶倒转，使气泡上升到顶。3.10 将瓶正立后，再次倒立振荡，如此反复1020次，使溶液混合均匀。3.11 最后放正容量瓶，打开瓶塞，使其周围的溶液流下，重新塞好塞子，再倒立振荡12次，使溶液全部充分混匀。4 注意事项4.1 注意不能用手掌握住瓶身；热溶液应冷至室温后才能注入容量瓶中，否则可能造成体积误差。4.2 容量瓶不能久贮溶液，尤其是碱性溶液，会侵蚀玻璃使瓶塞粘住，无法打开。配制好的溶液如需保存，应转移到试剂瓶中。4.3 容量瓶用毕，应用水冲洗干净。如长期不用，将磨口处洗净擦干，垫上纸片。4.4 容量瓶也不能加热，更不能在烘箱中烘烤。如洗净后急于使用，可用乙醇等有机溶剂荡洗后晾干，或用电吹风的冷风吹干。滴定管使用标准操作规程1 用途：滴定管是为了放出不确定量液体的容量仪器。2酸式滴定管2.1 准备2.1.1 将酸式滴定管装满纯化水，把它垂直夹在滴定管架上，放置5 分钟。2.1.2 观察管尖处是否有水滴滴下，活塞缝隙处是否有水渗出。2.1.3 若不漏，将活塞旋转180，静置5分钟，再观察一次，无漏水现象即可使用。2.2 检查发现漏液的滴定管，必须重新装配，直至不漏，滴定管才能使用。2.2.1 取下活塞，用滤纸将活塞及塞座擦干净。2.2.2 用手指蘸少量凡士林，在活塞两端沿圆周各涂极薄的一层，把活塞径直插入塞座内，向同一方向转动活塞（不要来回转），直到从外面观察时，凡士林均匀透明为止。 2.3 检漏合格的滴定管，需用纯化水洗涤3-4次。2.4 滴定管中加入溶液2.4.1 首先将试剂瓶中的溶液摇匀，使凝结在瓶内壁上的液珠混入溶液。2.4.2 溶液应小心的直接倒入滴定管中，不得用其它容器（如烧杯、漏斗等）转移溶液。2.4.3 在加满溶液之前，应先用少量此种溶液洗滴定管数次，以除去滴定管内残留的水分，确保溶液的浓度不变。2.4.4 倒入溶液时，关闭活塞，用左手大拇指和食指与中指持滴定管上端无刻度处，稍微倾斜，右手拿住细口瓶往滴定管中倒入溶液，让溶液沿滴定管内壁缓缓流下。2.4.5 洗涤：用溶液洗滴定管时，要注意务必使溶液洗遍全管，并使溶液与管壁接触1-2分钟，每次都要冲洗滴定管出口管尖，并尽量放尽残留溶液。然后关好酸管活塞，倒入溶液至“0”刻度以上为止。2.4.6 排尽气泡后，加入溶液使之在“0”刻度以上，再调节液面在0.00刻度处，备用。如液面不在0.00ml时，则要记下初读数。2.5 酸式滴定管的操作：用左手控制活塞，无名指和小指向手心弯曲，轻轻抵住出口管，拇指在前，食指和中指在后，手指略微弯曲，轻轻向内扣住活塞，手心空握。3 碱式滴定管3.1 准备：将碱式滴定管装满纯化水直立5min，若管尖处无水滴滴下即可使用。3.2 检查发现漏液的碱式滴定管，必须重新装配，直至不漏，滴定管才能使用。3.2.1 玻璃珠太小，溶液易漏出，并且玻璃珠易于滑动；3.2.2 若太大，则放出溶液时手指会很吃力，极不方便。3.3 检漏合格的滴定管，需用纯化水洗涤34次。3.4 滴定管中加入溶液3.4.1 操作同向酸式滴定管加入溶液的方法。3.4.2 洗涤：应注意玻璃珠下方的洗涤。用溶液洗完后，将其装满溶液垂直的夹在滴定管架上，左手拇指和食指放在稍高于玻璃珠所在的位置，并使橡皮管向上弯曲，出口管斜向上，往一旁轻轻捏橡皮管，使溶液从管口喷出，再一边捏橡皮管，以便将其放直，这样可排除出口管的气泡，并使溶液充满出口管。3.4.3 排尽气泡后，加入溶液使之在“0”刻度以上，再调节液面在0.00刻度处，备用。如液面不在0.00ml时，则要记下初读数。 3.5 碱式滴定管的操作：左边拇指在前，食指在后，捏住橡皮管中玻璃珠所在位置稍上的地方，向右方挤橡皮管，使其与玻璃珠之间形成一条缝隙，从而放出溶液。4 要能熟练控制滴定管中溶液流速的技术4.1 使溶液逐渐流出4.2 只放出一滴溶液4.3 使液滴悬而未落（当在瓶上靠下来时即为半滴）5 滴定操作5.1 滴定通常在锥形瓶中进行，锥形瓶下垫一白瓷板做背景，右手拇指、食指和中指捏住瓶颈，瓶底离瓷板约2-3cm。调节滴定管高度，使其下端伸入瓶口约1cm。5.2 右手按前述方法操作滴定管，右手运用腕力摇动锥形瓶，使其向同一方向作圆周运动，边滴加溶液边摇动锥形瓶。5.3 在整个滴定过程中，左手一直不能离开活塞任溶液自流。5.4 摇动锥形瓶时，要注意勿使溶液溅出，勿使瓶口碰滴定管口，也不要使瓶底碰白瓷板，不要前后振动。5.5 一般在滴定开始时，无可见的变化，滴定速度可稍快，一般为10ml/min，即3-4滴/s。5.6 滴定到一定时候，滴落点周围出现暂时性的颜色变化。在离滴定终点较远时，颜色变化立即消逝。5.7 临近终点时，变色甚至可以暂时扩散到全部溶液，不过在摇动1-2次后变色完全消逝。5.8 此时，应改为滴1滴，摇几下。等到必须摇2-3次后，颜色变化才完全消逝时，表示离终点已经很近。5.9 微微转动活塞使溶液悬在出口管嘴上形成半滴，但未落下，用锥形瓶内壁将其沾下。5.10 然后将瓶倾斜把附于壁上的溶液洗入瓶中，再摇匀溶液。5.11 如此反复直到刚刚出现达到终点时出现的颜色而又不再消逝为止。一般30s内不再变色即到达滴定终点。5.12 滴定完毕，弃去滴定管内剩余的溶液，不得倒回原瓶。5.13 用自来水、纯化水冲洗滴定管，并装入纯化水至刻度以上，用一小玻璃管套在管口上，保存备用。6 滴定管读数6.1 滴定开始前和滴定终了都要读取数值6.1.1 读数时可将滴定管夹在滴定管夹上，也可以从管夹上取下，用右手拇指和食指捏住滴定管上部无刻度处，使管自然下垂，两种方法都应使滴定管保持垂直。6.1.2 在滴定管中无色或浅色溶液的弯液面下缘比较清晰，易于读数。读数时，使弯液面的最低点与分度线上边缘的水平面相切，视线与分度线上边缘在同一水平面上，以防止视差。6.1.3 颜色太深的溶液，如高锰酸钾、碘化物溶液等，弯液面很难看清楚，可读取液面两侧的最高点，此时视线应与该点成水平。7 注意事项7.1 初读数与终读数应采用同一读数方法7.2 刚刚添加完溶液或刚刚滴定完毕，不要立即调整零点或读数，而应等0.5-1分钟，以使附着的溶液流下来，使读数准确可靠。读数须准确至0.01ml。7.3 读取初读数前，若滴定管尖悬挂液滴时，应该用锥形瓶内壁将液滴沾去。在读取终读数前，如果出口管尖悬有溶液，此次读数不能取用。