邻苯三酚比色法测定土壤多酚氧化酶活性

试剂配制（1）1%邻苯三酚溶液（2）乙醚。（3）0. 5N盐酸。（4）重铭酸钾标准溶液o. 75g重铭酸钾溶于1升0.5NHCl（相当于50mI醚中含5mg紫色没食子素）。（5）pH4. 5柠檬酸磷酸缓冲液。标收曲线绘制：取重铭酸钾标准溶液，用o. 5N HCI稀释成各种不同浓度。定容后，在分光光度计上于430nm处比色测定。以 光密度位为纵坐标，以浓度为横坐标绘制标准曲线2。投作步骤 取1g 土样（过o. 25mm筛），置于50ml三角瓶中，然后注入 10ml 1%邻苯三酚溶液，将瓶内含物摇荡后放在30度恒温掐小培养2h。取出后 加4mlpH 4. 5柠檬酸磷酸缓冲液，再加35ml乙醚，用力摇荡数次，萃取 30min。最后，将含溶解的紫色没食子素的着色乙醚相进行比色。比色时用波长 为430nm的滤光片。为防止因乙醚引起的误差，每比色一次用元水乙醇洗涤比 色液槽一次。为了消除土壤中原有的醚溶性有机物质而引起的误差及校正 没食于酚的纯度，需设无基质的土壤和无土壤的基质作对照。在无基质的土壤的对照中，用水代替基质进行培养。3. 活性表示 紫色没食子索的量，根据用重铭酸钾绘制的标准曲线查知。多酚氧化的活性，以2h后1g 土壤中紫色没食子素的毫克 数表示。我不知道找个“紫色没食子素”是什么意思？是不是要找个试剂啊？我问了几 个老师，他们都没有听说过这个试剂。我的有的药品冯老师本来说他那有，可是 我做的时候去找了，缺了几个，王老师说想办法买了，已经给李老师说了，买了 后做，这几天榆林大风降温，那个移栽没有办法进行，上面红颜色的我不知道怎 么做了，萃取不知道是萃取什么，看不太懂，还有测那个中性磷酸酶时的酚溶液 是苯酚加水就可以了么？我这几天在图书馆查了很多资料，可是都没有啥结果（ 配制方法：在大烧杯中加入80mL去离子水，再加入300g苯酚，在水 浴中加热搅拌、混合 至苯酚完全溶解。将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗内，轻轻振荡混合，使其成为乳状液。静止710小时，乳状液变成两层透明溶液，下层为被水饱和的酚溶液，放 出下层，贮存于棕色瓶中备用。）回复：没食子素就是邻苯三酚。紫色没食子素就是多酚氧化酶催化氯化没食子素生成的 东西。乙醚萃取的时候会分层，之前不是加邻苯三酚了嘛，乙醚相中萃取出的多酚物质 被邻苯三酚着色了生成紫色没食子素。萃取出来的成分就是你在430nm处测定 的物质啊！