食品细菌污染与腐败变质

食品细菌污染与腐败变质食品细菌污染与腐败变质Bacterial contamination Bacterial contamination and food spoilageand food spoilageoutlineoutline 食品的细菌污染食品的细菌污染 常见的食品细菌常见的食品细菌 细菌污染食品的途径细菌污染食品的途径 食品细菌污染的危害食品细菌污染的危害 食品细菌污染的检验食品细菌污染的检验 食品腐败变质食品腐败变质 腐败变质的原因腐败变质的原因 腐败变质的过程腐败变质的过程 影响腐败变质的因素影响腐败变质的因素 腐败变质的危害腐败变质的危害 食品腐败变质的鉴定食品腐败变质的鉴定 腐败变质的预防腐败变质的预防食品的细菌污染食品的细菌污染致 病 性 细 菌（ 食 源 性 疾 病 ）非 致 病 性 细 菌（ 腐 败 变 质 ）食 品 细 菌 污 染 常见的食品细菌常见的食品细菌 假单胞菌属：革兰氏阴性无芽胞杆菌，假单胞菌属：革兰氏阴性无芽胞杆菌，需氧，嗜冷，需氧，嗜冷，PH 5.0PH 5.0下生长下生长 ，是典型，是典型的腐败细菌，在肉、鱼等动物食品及的腐败细菌，在肉、鱼等动物食品及蔬菜中均易生长繁殖。蔬菜中均易生长繁殖。 微球菌属和葡萄球菌属：革兰氏阳性微球菌属和葡萄球菌属：革兰氏阳性菌，嗜中温，营养要求较低。在动物菌，嗜中温，营养要求较低。在动物性食品上多见，有的能使食品变色。性食品上多见，有的能使食品变色。 芽胞杆菌属与芽胞梭菌属：分布较广芽胞杆菌属与芽胞梭菌属：分布较广泛，尤其多见于肉和鱼。嗜中温菌者泛，尤其多见于肉和鱼。嗜中温菌者为多，是罐头食品中常见的腐败菌。为多，是罐头食品中常见的腐败菌。 肠杆菌科各属：除志贺氏菌属及沙门肠杆菌科各属：除志贺氏菌属及沙门氏菌属外，皆为常见的腐败菌。革兰氏菌属外，皆为常见的腐败菌。革兰氏阴性，需氧及兼性厌氧，嗜中温杆氏阴性，需氧及兼性厌氧，嗜中温杆菌。多见于水产品等动物性食品中。菌。多见于水产品等动物性食品中。 弧菌属与黄杆菌属：均为革兰氏阴性兼弧菌属与黄杆菌属：均为革兰氏阴性兼性厌氧菌。主要来自海水或淡水，在低性厌氧菌。主要来自海水或淡水，在低温和温和5%5%食盐中均可生长，故在鱼类等水食盐中均可生长，故在鱼类等水产食品中多见。产食品中多见。 嗜盐杆菌属与嗜盐球菌属：革兰氏阴性嗜盐杆菌属与嗜盐球菌属：革兰氏阴性需氧菌、嗜盐，在需氧菌、嗜盐，在12%12%食盐甚至更高浓食盐甚至更高浓度的食盐中均可生长。多见于咸鱼。度的食盐中均可生长。多见于咸鱼。 乳杆菌属：革兰氏阳性杆菌，厌氧或微乳杆菌属：革兰氏阳性杆菌，厌氧或微需氧，在乳品中多见。需氧，在乳品中多见。 食品贮存、运输、销售过程中的污染：食品贮存、运输、销售过程中的污染：食品从加工出厂到销售时，因为贮存食品从加工出厂到销售时，因为贮存条件、运输过程都有可能造成细菌污条件、运输过程都有可能造成细菌污染，尤其是包装破损的食品。染，尤其是包装破损的食品。 食品消费过程中的污染：生食、熟食食品消费过程中的污染：生食、熟食不分，烹调用具不卫生等造成的交叉不分，烹调用具不卫生等造成的交叉污染。污染。 食品细菌污染的检验食品细菌污染的检验 细菌总数细菌总数 定义：指单位质量（定义：指单位质量（g g）、体积（）、体积（mlml）或表）或表面积（面积（ cmcm2 2 ）的被检食品食品中所含的细）的被检食品食品中所含的细菌数量。菌数量。 检验方法检验方法：在在严格规定条件下（营养琼严格规定条件下（营养琼脂培养基、脂培养基、3737、pH 7.0pH 7.0，484872h72h）进行）进行培养，形成的菌落（代表一个细菌形成的培养，形成的菌落（代表一个细菌形成的克隆）数目，称为菌落总数克隆）数目，称为菌落总数(colony (colony forming unit,cfu)forming unit,cfu)。涂片染色通过显微涂片染色通过显微镜观察计数，称为食品细菌总数。镜观察计数，称为食品细菌总数。菌落总数：测定值实际值菌落总数：测定值实际值染色镜检细菌总数：测定值实际值染色镜检细菌总数：测定值实际值 食品细菌总数的卫生学意义食品细菌总数的卫生学意义A.A.代表食品清洁状态的标志代表食品清洁状态的标志B.B.预测食品耐储藏的期限预测食品耐储藏的期限举例：鱼体菌落数目举例：鱼体菌落数目 温度温度 保质期保质期 10105 5 cfu/cmcfu/cm2 2 0 6 0 6天天 10103 3 cfu/cm cfu/cm2 2 0 120 12天天特别提示特别提示：不是绝对平行关系不是绝对平行关系，菌相菌相的作用的作用 大肠菌群大肠菌群 来自人或温血动物肠道，需氧与兼性来自人或温血动物肠道，需氧与兼性厌氧，不形成芽孢，在厌氧，不形成芽孢，在35353737发酵发酵乳糖产酸产气的革兰氏阴性杆菌，包乳糖产酸产气的革兰氏阴性杆菌，包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属和克雷伯菌属。菌属和克雷伯菌属。 大肠菌群作为食品微生物污染指标的大肠菌群作为食品微生物污染指标的原因：原因：A.A.大肠菌群仅来自肠道。大肠菌群仅来自肠道。B.B.在肠道中数量较多，灵敏度较高，在肠道中数量较多，灵敏度较高，易于检出。易于检出。C.C.在外界环境中有一定的抵抗力，能在外界环境中有一定的抵抗力，能生存一定时间，与肠道致病菌基本一生存一定时间，与肠道致病菌基本一致。致。D.D.操作较为简便。操作较为简便。 大肠菌群的卫生学意义大肠菌群的卫生学意义A.A.粪便污染指示菌，其中典型大肠杆粪便污染指示菌，其中典型大肠杆菌表示近期污染，非典型大肠杆菌菌表示近期污染，非典型大肠杆菌表示陈旧污染。表示陈旧污染。 B.B.肠道致病菌污染的指示菌。肠道致病菌污染的指示菌。特别提示特别提示：大肠菌群不适宜作为：大肠菌群不适宜作为低温低温水产品水产品的污染指示菌。的污染指示菌。肠球菌肠球菌？ 肠道致病菌肠道致病菌 大肠菌群检验呈阳性，并怀疑食品大肠菌群检验呈阳性，并怀疑食品可能受到致病菌污染时可进行致病菌检可能受到致病菌污染时可进行致病菌检验。在我国的国家标准中，致病菌一般验。在我国的国家标准中，致病菌一般指指“肠道致病菌和致病性球菌肠道致病菌和致病性球菌”，主要，主要包括沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄包括沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、致病性链球菌等四种，致病菌不球菌、致病性链球菌等四种，致病菌不允许在食品中检出。允许在食品中检出。食品腐败变质食品腐败变质 Food spoilage:Food spoilage:指在以微生物为主的各种指在以微生物为主的各种因素综合作用下，所发生的食品成分及感因素综合作用下，所发生的食品成分及感官性质的一切变化。官性质的一切变化。 原因原因 微生物的作用（细菌、霉菌、酵母酶）微生物的作用（细菌、霉菌、酵母酶） 食品本身的因素（蛋白质、碳水化物、脂肪）食品本身的因素（蛋白质、碳水化物、脂肪） 环境因素（温度、湿度、氧气）环境因素（温度、湿度、氧气） 腐败变质的过程腐败变质的过程 蛋白质的分解蛋白质的分解氨基酸氨基酸 胺胺 氨甲基氨甲基 一甲胺、二甲胺、三甲胺一甲胺、二甲胺、三甲胺蛋白质分解产物大都具有挥发性，并有臭味。蛋白质分解产物大都具有挥发性，并有臭味。脱羧酶脱羧酶脱氨基酶脱氨基酶蛋白质的分解蛋白质的分解 富含蛋白质的食品如肉、鱼、蛋和大豆制品等富含蛋白质的食品如肉、鱼、蛋和大豆制品等的腐败变质，主要以蛋白质的分解为其特征。的腐败变质，主要以蛋白质的分解为其特征。蛋白质在微生物的作用下，首先分解为肽，再蛋白质在微生物的作用下，首先分解为肽，再分解为氨基酸。氨基酸在相应酶的作用下，进分解为氨基酸。氨基酸在相应酶的作用下，进一步分解成有机胺、硫化氛、硫醇、一步分解成有机胺、硫化氛、硫醇、 吲哚、吲哚、粪臭素和醛等物质，具有恶臭味。粪臭素和醛等物质，具有恶臭味。 蛋白质的分解蛋白质的分解 蛋白质分解后所产生的胺类是碱性含氮蛋白质分解后所产生的胺类是碱性含氮化合物，具有挥发性。因此测定鱼、肉化合物，具有挥发性。因此测定鱼、肉食品中的总挥发性盐基氯的含量，是食品中的总挥发性盐基氯的含量，是鉴鉴定定肉、鱼新鲜度的指标之一。肉、鱼新鲜度的指标之一。 碳水化物的分解碳水化物的分解 碳水化合物分解通常称为酸发酵和酵解。碳水化合物分解通常称为酸发酵和酵解。粮食、蔬菜、水果和糖类及其制品，含有较粮食、蔬菜、水果和糖类及其制品，含有较多的碳水化合物。这类食品腐败变质时，主多的碳水化合物。这类食品腐败变质时，主要以碳水化合物在微生物或动植物组织中酶要以碳水化合物在微生物或动植物组织中酶的作用下，经过产生双糖、单糖、有机酸、的作用下，经过产生双糖、单糖、有机酸、醇、醛等一系列变化，最后分解成二氧化碳醇、醛等一系列变化，最后分解成二氧化碳和水。这个过程的主要变化是酸度升高，也和水。这个过程的主要变化是酸度升高，也可伴有其它产物所特有的气味。可伴有其它产物所特有的气味。 脂肪的酸败脂肪的酸败 酸败是由空气中的氧、水分或微生酸败是由空气中的氧、水分或微生物作用引起的。物作用引起的。 自身氧化：油脂中不饱脂肪酸的双自身氧化：油脂中不饱脂肪酸的双键部分受到空气中氧的作用，氧化成过键部分受到空气中氧的作用，氧化成过氧化物，后者继续分解或进一步氧化，氧化物，后者继续分解或进一步氧化，产生有臭味的低级醛或羧酸。光、热或产生有臭味的低级醛或羧酸。光、热或湿气都可以加速油脂的酸败。湿气都可以加速油脂的酸败。 微生物的酶解作用：油酯先水解为微生物的酶解作用：油酯先水解为脂肪酸，脂肪酸在微生物酶的作用下发脂肪酸，脂肪酸在微生物酶的作用下发生生氧化，即羧酸中的氧化，即羧酸中的碳原子被氧化碳原子被氧化为羰基，生成为羰基，生成-酮酸，后者进一步分解酮酸，后者进一步分解则生成含碳较少的酮或羧酸。则生成含碳较少的酮或羧酸。脂肪的分解脂肪的分解 脂肪酸进一步分解生成过氧化物和氧化脂肪酸进一步分解生成过氧化物和氧化物，随之产生具有特殊刺激气味的酮和物，随之产生具有特殊刺激气味的酮和醛等酸败产物，即所谓哈喇味。因此，醛等酸败产物，即所谓哈喇味。因此，鉴定鉴定油脂的酸价和过氧化值，是油脂酸油脂的酸价和过氧化值，是油脂酸败的判定指标。败的判定指标。 腐败变质的影响因素腐败变质的影响因素 食品中的酶：食品中的酶：autolysisautolysis（自溶）（自溶） 微生物生长：微生物生长：FATTOMFATTOMF FoodoodA AciditycidityT TimeimeT Temperature(TDZ,5emperature(TDZ,56565）O OxygenxygenM Moisture(water activity)oisture(water activity) Time Number of BacteriaStart 115Minutes 230Minutes 445Minutes 81Hour 162Hours 2563Hours 40964Hours 65,5365Hours 1,048,5766Hours 16,777,216 腐败变质的卫生学意义腐败变质的卫生学意义 产生不良感官性状：气味、颜色、溃产生不良感官性状：气味、颜色、溃烂、污秽等。烂、污秽等。 营养价值降低营养价值降低 食源性疾病风险增加：食品腐败变质食源性疾病风险增加：食品腐败变质虽不等同于食源性疾病，但增加其危虽不等同于食源性疾病，但增加其危险性，引起中毒或潜在性危害。险性，引起中毒或潜在性危害。 食品腐败变质的鉴定食品腐败变质的鉴定 感官鉴定感官鉴定：通过视觉、嗅觉、触觉、味觉、：通过视觉、嗅觉、触觉、味觉、听觉对食品卫生质量的鉴定，称为食品的感听觉对食品卫生质量的鉴定，称为食品的感官评价。官评价。A.A.粮谷类：霉菌污染为主，颜色发灰发绿，霉粮谷类：霉菌污染为主，颜色发灰发绿，霉变气味。变气味。B.B.肉类：臭味、颜色发暗、表面污秽、弹性降肉类：臭味、颜色发暗、表面污秽、弹性降低，肉质色泽发暗低，肉质色泽发暗, ,表面污秽表面污秽, ,切面灰暗粘刀切面灰暗粘刀 C.C.淀粉类食品：变酸。淀粉类食品：变酸。感官鉴定感官鉴定D.D.鱼类：臭味、鱼鳞脱落、眼球凹陷、腹部鱼类：臭味、鱼鳞脱落、眼球凹陷、腹部膨胀等。膨胀等。E.E.鲜奶鲜奶: :变酸，蛋白凝固出现变酸，蛋白凝固出现奶豆腐奶豆腐现象现象 F.F.罐头类罐头类: :出现出现胖听胖听现象，敲击罐头壁发现象，敲击罐头壁发出空洞音。出空洞音。 理化鉴定理化鉴定：食品腐败变质后伴有物理及化学：食品腐败变质后伴有物理及化学特性的变化，通过检测来判断食品卫生质量，特性的变化，通过检测来判断食品卫生质量，称为理化鉴定。称为理化鉴定。A.pHA.pH值：碳水化物多的食品、脂类酸败。值：碳水化物多的食品、脂类酸败。食品中食品中pHpH值的变化，一方面可由微生物的作用或食品原值的变化，一方面可由微生物的作用或食品原料本身酶的消化作用，使食品中料本身酶的消化作用，使食品中pHpH值下降；另一方面也值下降；另一方面也可以由微生物的作用所产生的氨而促使可以由微生物的作用所产生的氨而促使pHpH值上升。一般值上升。一般腐败开始时食品的腐败开始时食品的pHpH略微降低，随后上升，因此多呈现略微降低，随后上升，因此多呈现V V字形变动。字形变动。 例如牲畜和一些青皮红肉的鱼在死亡之后，肌例如牲畜和一些青皮红肉的鱼在死亡之后，肌肉中因碳水化合物产生消化作用，造成乳酸和肉中因碳水化合物产生消化作用，造成乳酸和磷酸在肌肉中积累，以致引起磷酸在肌肉中积累，以致引起pHpH值下降；其后值下降；其后因腐败微生物繁殖，肌肉被分解，造成氨积累，因腐败微生物繁殖，肌肉被分解，造成氨积累，促使促使pHpH值上升。我们借助于值上升。我们借助于pHpH计测定则可评价计测定则可评价食品变质的程度。食品变质的程度。 但由于食品的种类、加工法不同以及污染的微但由于食品的种类、加工法不同以及污染的微生物种类不同，生物种类不同，pHpH的变动有很大差别，的变动有很大差别，所以一所以一般不用般不用pHpH作为初期腐败的指标。作为初期腐败的指标。 B.B.挥发性盐基总氮挥发性盐基总氮（total volatile basic total volatile basic nitrogen,TVBNnitrogen,TVBN）：含蛋白质丰富的食品）：含蛋白质丰富的食品（肉、鱼、豆类）水浸液在弱碱性条件下与（肉、鱼、豆类）水浸液在弱碱性条件下与水蒸气一起蒸馏出来的总氮量（形成氨、胺水蒸气一起蒸馏出来的总氮量（形成氨、胺的含氮物），称为的含氮物），称为TVBNTVBN。 2NH3+4H3BO3 (NH4)2B4O7+2H2O (NH4)2B4O7+2HCl+5 H2O 2NH4Cl+4H3BO3 常用蒸馏法或常用蒸馏法或ConwayConway微量扩散法定量。该指标微量扩散法定量。该指标现已列入我国食品卫生标准。例如一般在低温现已列入我国食品卫生标准。例如一般在低温有氧条件下，鱼类挥发性盐基氮的量达到有氧条件下，鱼类挥发性盐基氮的量达到30mg30mg100g100g时，即认为是变质的标志。时，即认为是变质的标志。 C.KC.K值：鱼肉值：鱼肉ATPATP依次分解为依次分解为ADPADP、AMPAMP、IMPIMP、HxRHxR（肌苷）、（肌苷）、HxHx（次黄嘌呤），其中低（次黄嘌呤），其中低级分解产物级分解产物HxRHxR和和HxHx与与ATPATP及其系列分解产及其系列分解产物的比值（百分数）称为物的比值（百分数）称为K K值。值。 HxR+HxHxR+HxK=K= ADP+AMP+IMP+HxR+Hx ADP+AMP+IMP+HxR+HxK K值值2020，绝对新鲜；，绝对新鲜；K K值值4040，腐败。，腐败。X 100%D. D. 三甲胺：鱼虾类鉴定。三甲胺：鱼虾类鉴定。因为在挥发性盐基总氮构成的胺类中，主要的是三甲胺，是季胺类含氮物经微生物还原产生的。可用气相色谱法进行定量，或者三甲胺制成碘的复盐，用二氯乙烯抽取测定。新鲜鱼虾等水产品、肉中没有三甲胺，初期腐败时，其量可达4mg6mg/100g。 E.E.组胺组胺 鱼贝类可通过细菌分泌的组氨酸脱羧酶使组氨酸脱羧生成组胺而发生腐败变质。当鱼肉中的组胺达到410mg/100g，就会发生变态反应样的食物中毒。通常用圆形滤纸色谱法（卢塔宫木法）进行定量。 F.F.过氧化值：油脂鉴定。过氧化值：油脂鉴定。H.H.羰基价：油脂鉴定。羰基价：油脂鉴定。物理指标物理指标 物理指标物理指标 微生物鉴定微生物鉴定 细菌总数细菌总数 大肠菌群大肠菌群物理指标 食品的物理指标，主要是根据蛋白质分解时低分子物质增多这一现象，来先后研究食品浸出物量、浸出液电导度、折光率、冰点下降、粘度上升等指标。其中肉浸液的粘度测定尤为敏感，能反映腐败变质的程度。 微生物检验 对食品进行微生物菌数测定，可以反映食品被对食品进行微生物菌数测定，可以反映食品被微生物污染的程度及是否发生变质，同时它是微生物污染的程度及是否发生变质，同时它是判定食品生产的一般卫生状况以及食品卫生质判定食品生产的一般卫生状况以及食品卫生质量的一项重要依据。在国家卫生标准中常用细量的一项重要依据。在国家卫生标准中常用细菌总菌落数和大肠菌群的近似值来评定食品卫菌总菌落数和大肠菌群的近似值来评定食品卫生质量，一般食品中的活菌数达到生质量，一般食品中的活菌数达到10108 8cfucfug g时，则可认为处于初期腐败阶段。时，则可认为处于初期腐败阶段。 食品腐败变质的预防措施食品腐败变质的预防措施 预防微生物污染预防微生物污染：从食品原料到食用的整个：从食品原料到食用的整个食品链过程注意防止微生物的污染。食品链过程注意防止微生物的污染。 降低微生物的数量降低微生物的数量杀灭微生物的措施杀灭微生物的措施A.A.热处理：高压蒸汽灭菌法；煮沸消毒法；热处理：高压蒸汽灭菌法；煮沸消毒法；巴氏消毒法；超高温灭菌法（巴氏消毒法；超高温灭菌法（ultra ultra high temperature,UHThigh temperature,UHT）；微波加）；微波加热（国际规定食品工业用热（国际规定食品工业用915 MHz915 MHz和和2450 MHz2450 MHz两种频率）。两种频率）。B.B.辐射灭菌辐射灭菌利用利用射线具有波长短，穿透力强的特射线具有波长短，穿透力强的特点，对微生物的点，对微生物的DNADNA、RNARNA、蛋白质、脂类、蛋白质、脂类等大分子物质的破坏作用，特别是对等大分子物质的破坏作用，特别是对DNADNA损损失是其杀灭微生物的主要作用机理。失是其杀灭微生物的主要作用机理。辐照源：辐照源：6060Co Co 、137137Cs Cs 剂量：剂量：5 510kGy 10kGy 消毒（不能杀死芽孢）消毒（不能杀死芽孢） 101050kGy 50kGy 灭菌灭菌安全性问题：安全性问题：感生放射性感生放射性、感官性状、营养成分、感官性状、营养成分、有害物质？有害物质？ 控制微生物繁殖速度的措施控制微生物繁殖速度的措施A.A.降低食品水分含量：日晒、阴干、热风干降低食品水分含量：日晒、阴干、热风干燥、喷雾干燥等。燥、喷雾干燥等。B.B.降低食品的储藏温度：冷藏、冷冻。降低食品的储藏温度：冷藏、冷冻。C.C.提高食品渗透压：大部分微生物在高渗环提高食品渗透压：大部分微生物在高渗环境中会死亡，由于脱水的作用。盐腌和糖境中会死亡，由于脱水的作用。盐腌和糖渍两种方法。渍两种方法。D.D.化学防腐：防腐剂、酸渍等。化学防腐：防腐剂、酸渍等。E.E.生物防腐：发酵作用降低酸度。生物防腐：发酵作用降低酸度。t-+#2*0MqCH+bAAD7Fu4&x6hq!fX8DCB&eS3zCH9ElWAXe5#1)9(#mOy6(AcsIiRB1M&d$zu6(v)-&ekEAC5Fwa6PwR1Pi5HlEYEc6SI5FFyPR-#XlPA8)zm9-t+m%riaF9s$h)L#dbpoN)RF2N7ZzHQxp-HWHsIP8hDwrU6QaR+l7Y(Z+VRm%8zG0k+P0uE(eYwHZPDGh)cmW7IV5#JTSxDz!kjrfmjJ)YY+5pifK0Qg)oVLPsiZTEW5%$4WFU$lxWMLbS+wOlWWJ)7zDQxcke(0$gCsrvzRGz#aTjLt5hxmpofeQg9#EY-D7gy5#Xs06r5-NTTgLx5%uujbKlN8FGH3qy9IBrQg4Lw!56c$X-*0GapFCW()rf&CW*x)zoBwF9n1WjKgyJT(RP429U2)4ZEJl-om-!$URc&gQxXjgn2&E)9X*Y!KV!Ee43PZ8-DbZlQrLuDP-+hkhLsqddrwE63EuC1Ns#UpoRVC&p5WU1jBTvBRkX0jLc8JnYBTxzcc(KXz0UlzMZuHHFH0Ln25LKL&bENn7VXC(v*H(tR%t$(DZdeiKD1RbkhQ7Kd(f&87dsm*So3aK3HxFUiHiXlluxziM)ZfrI+!xVJxc0zfOga6#dM8FZWb*jKg1UvruXM56j4&gNxpgso1M!qGMEytDHVQmAb!hAIPyYGNZGs(srvO-JeyLHdaFt1Hw)q!NwkEc(fLF0SHhl)i+lf&$V#wQFtVah9-*wnuJczXmBovHZVluBe#GFvruyslDc-xXICd&U5X-Zap7P2$YfifPvNsLJuS6or3Xn(KmyukYC5MMecD7e0ItiZG#6+fSuOdp-ii(y(8VJ3zfcXn3K%RPc&x+bsOZHrAd#UbRH*5OfBEGYiwziVSTdN3%JCmk-oqjq2+EP9fW)TxMgvFe$!Xlkx&0sbnALw2oOocr9JU52f!Mvh#+Z$Ht6)ISRacMPM2+DTO7kBZ$a1$cFHYhdIOcWXCTOyYPiGpFScTGzyX3PegfR4QrWW0Wg9XUjT#Hev#-nGEL$OVNkIFN)!BY8BHym*AF9#42%vuiaXcTu01tW5JFa7s%nv(j)YOxH-X2aP6YtiQ6$QoVC+!NxVg6QC)wud(*OWY6Cp-#v8b(nZ6J1XIz2!xhJ4)U($3YP74pY5K60*xbEjXWVo0p-ui4rV!deQowA&aHR-RzJIGJD$had&QzlEQgzzthF+2gf#I$9Mex2yajWgB6zlu7MFfq!odbyGBCvMhextMW6AnvxSG2z2gskptLugQu%R0U(Y%TJYmOK1(ciU9afs90f+e2-kLzh0SMPZTK9#0edEQdX(lplcT3(ECsv2-5#+d7RwNDFuNhJzbOh0*gzKJa8blXAR!5Ti0VJ1MR33j&YUMr99azk0zjP#uPbk1xL5MECzOqKRXaOpRk3GjP&aCoLTX!FautFv$Ap#mvoN*6Mpvj#KE0+GXJA55rxuF+eeIJCh-*rCJ*h-!&gsD6s+hdB56ZftM)uMJyDCY0(YQeTu$*T4L-yghYDRHqWjtR$4IOxuf(VI!gc&ri!J3Rl1Tu7pBwRFEhBzlW3YKv&UjH8tcXO)2-GOSqdTR%Ghgqiw*u$VD%afPdi9njtcBf0v5zj(n8kjAvy5KKyHw3y!Y&NOCR%HrWw!MrFXVR*VUmWQyBiaIpvKCNL2pkpR&ln2u!)hfZG#9Mcs&cpDcU+wR3sfCyLZBh+XlB6mW(rHMwvf*LJIdhwepvJl0-6dAGDab-Qxg$ot01oiR7NmQGvMcwJtKlhorsXECuCqu+H9KD#cwFj$Vckx&uy4vq+NTKtDYC)bDh*hMJbI93bOO7fVdm4cm*t8Wi+$sFBWVaP8Pil7Emxwtk*jFFK!cK+8$ZewS$p&F!G0T3E%Z%p%TtjMpIQBKee47OD!nWnr%ad11yjVkBQv3AWC3#WJ+q+)HhLMGL5dR9-WW6gNcrEu*1T0THqMe8#6pfanemTim&+TPgRS$PUTziAMdy-qasPKTKY&x2dzCHuXg5VYIFnPJKng%)(t(7wE0bpC8CgIld6D9tCbsLrvxQVj&49!JbyQAh46ZFKkCy(c9ezR)4(S9bhJ9g$L81e8Hi#kZJHvc!kZMQfWtE!%ep$1C6!OdCd#TkXwlTi(ryd5vF23IgOWBRQ&NQkH6+J80jrAspDpj23&pFIBoj)s-sWY)g$933D(Bp#88QNY1dZmWRHxAKvgOhfg&S6pd)ZUES!GoSP%QJU74hdMZjjiWdmVNiI1bVvK-53tYpSvzFXiVv-Ou0pdr9&36Yk7RXgAgzcQ*rMr4bXVCw+%XXyo+-!jRNwxb)oNw4)FnM2YCCkfSputPGjlhNclGYxeyQsDTjJul)ApAQp*whrb2jvsMnL)$qr5NxCQrx*kAubSUG4#KjCoUQZ!BhdgK7npm%MhNCdn5xDqq1efxceFGEvS6*B0V*8xTAc+ED0f6Bj00dTYyJj8KS91jpGf#mF&AH6#YijdZ*%(R)Uncr5TuMJtO3Po644I8bKG(EcRtEXLv+H*sF-GKudR$oCN!$lll1RGDhn&4bL&CF+T-Tz$+Z3nTd+Z&mEgCl%YzmSmsFuBtLZ%9R9S3vpgzH)1f)O#%gk(am1Yn3GAaUoj-C*i3!bDczAAEaIcwFEBxZDwWDi3NISWC8U+KnHdY&yAX1Njn3Cpr&fxNHk8egDO-jXgFhTULukTypdgHHvQha14$vs%6*y+o(*wfCJQNFWHzpc97o0fyg6Z9$LLxuwTQsn1N9WFxFSHuI!3WF9K1rtAy5naBWt7iE&Dt-cfOmsW#K%rIIBSUYIxOwY0I!hqCnkxvCdMIPBI$DenmJO(NTr4s)l+HOZIFjlfF)*4%32wKNIZX-S$Ht#D1K$Ko3b3iaG0I(19%jX1p9YPgNWPzyh6v0ZGnDr&wtCW6L3xAqYkzAx7Vp%0jGu+Zra4opFu96rOGzqlZLA8Nik0m4m!V(nOuIJb1L0wkhmCEJ(PZMox9oxEUF(Aly-d*y*Jnh!XV-jlj-1DhDr7w*LNIx90wq4LNCQOt+4Mggrd0-BuuDq06VCS!b%ysgF-wgh&P3p3Gt&FU1Me2HoM3!XS%#dwe20p&bz5h1(!$4U(WV03htGlr$kXQ&Flq#Xvl4IhXoOifmUpS6!VV6KJlGiW&q&BN(wFe4VCsR(nTg0+7b(ePKe5)-CWv3f9sDBOrhT4HOpN(*)KM3%Ug)eK+foib2Kmsw0a+B(*c*1i%xsQzAVhd6&skPB(v5aZO22qQ8ock6x)wAOZNNl&1ya4TZ#r-eJYqWQNh)vfZ(2OA1Vu22zYA*DLpEYQHNvdXANf+-shr*ps-6hus#x3IgPK(SQ*LTgW15B-cr!fL4!-V$&6&(lUq1I2zbAKg$lJItJQXbLeGu6oJyLtLI5Nsrq2#h5)hQ&j1Mx2anzk$4t4wV)pODyW9(Ryol+4OZ)l1%6!CSC!r#t77V0o8!YuvlgVFmuIo17+b0-+xBPIWYjNKP23h4&kFeJj!zGRz4rrzkJDJ505P2%H*0dm8BY*zM+4bdu-MV!*cerg9mQq39G!RB9KX6Og5K48k5cz!aR$hlX#(brSRwpJq7i-ASD0YkDwjJmgjU(+R7wAo%qqNK!6KFsMaE1czzT#F6&385R-Jc*E1qEkPG92c80Q(7$H6&L#mwsHzA5JIwEts-FJEXY2YO4n*7zf#+cCDXTH+sr-8-x!kidu3!sfBPbNg1SCi6cymdVinH!#2!ak(wYV61pqw$%HGvET3mGDREzEGzA#OhJaT7!Y*arVTh#z14I5lqrL$L0%Ez6sA9xsQu&G)s4pqIc5MzB(GK69Hrtme-WpkJEAFkLkQCa#BBmm-P-eNjGgSPVgA5qVWZoOrJ1UARuwikASzlVdYkY#H-iSDlgj!#wNetDkRIdnMh9sUxyGJJq(CMO!$j45OP-MLzfNqKK4Lz&s-hr)#ZftJbFK*6CBfY0JFM)CfDamK9NGc0Nz-jia)JU!VTH$bzFAn)xA3+dFScRY$c%se#+nHRcmIzsS+E#qyKl#Vzu+KJB1O9!-$V7dSHl5)m&r7Z&2Xm2L(xGMTqnTDn(OG%dko2O()btL*vK8QoRzl7I+D7C$7XUr90Mc&pw+TGtF&1LYWY($j!qsvFE!h2$vac2cu#x9if#DC*)RxSx-939)m#cKG5MX)(CWrUZ3Pi9SF0zxpHK$WVmUJlfXDXqNbpXpH!IglJTePPXEBhanX8*F+vR(lNiw14g35E5)Nvvlserl&Q58zupyB)BbCvh!A3UxCLhd5*5cRzGpohA$F#CD9q%0OMbYBm7kaTcpn!W$UQm*hUCC1yy!8$Pt%T3eJOrxB9YfGanFl()SUxgBPoVAE3-%v7zoX$+%yQg(iH0iahppAbKoI#4IRMnVcL9imYf+wqrM0ciw4QAOAEBHEobi#Wi3SX%pKFo6wxxfIJvB)1SJdfa)HZyI1t)+0mxa61PJFjuPQMnWYemMmyIp+q3ZZ#lHd+AunSlB-g#vBNyzjru&x#Cx5W74pU*a#d&8v4XT8z8aBSqclB&E62d30IN7b+LgJ)imo9PuD#1jHWU31)QT0kX+R8gLCJbED-k4(23Cdk2lhT5K3fUcuCv6+nNKZoVaOjvZcGTwoK3)*$6BHO)kdi5dbFxypCwBeEsn*Uvwt#6&Ds%*WPgGbvJMQaq$m$GIp+eLb!*R-IzZ7hYBNh2Aol1xvnFmo(nM)8FkRM(PT$QMpBnESe%qd#c0wxbbBvhMBJg7$xE1U!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