7：亚硝酸盐氮的测定

亚硝酸盐氮的测定亚硝酸盐（NO2-N）是氮循环的中间产物，不稳定。根据水循环条件，可被氧化成硝酸盐，也可被还原成氨。亚硝酸盐可使人体正常的血红蛋白（低铁血红蛋白）氧化成为高铁血红蛋白，发生高铁血红蛋白症，失去血红蛋白在体内输送氧的能力，出现组织缺氧的症状。亚硝酸盐可于仲胺类反应生成具致癌性的亚硝胺类物质，在pH值较低的酸性条件下，有利于亚硝胺类的形成。水中亚硝酸盐的测定方法通常采用重氮偶联反应，使生成红紫色染料。方法灵敏、选择性强。所用重氮和偶联试剂种类较多，最常用的，前者为对氨基苯磺酰胺和对氨基苯磺酸，后者为N-（1-萘基）-乙二胺和a萘胺。亚硝酸盐在水中可受微生物等作用而很不稳定，在采集后应尽快进行分析，必要时以冷藏抑制微生物的影响。N-（1-萘基）-乙二胺光度法1. 方法原理在磷酸介质中，pH值为1.8土0.3时，亚硝酸盐与对-氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料。在540nm波长处有最大吸收。2. 干扰及消除氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。水样呈碱性（pH11）时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸溶液至红色消失。水样有颜色或悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。3. 方法的适用范围本法适用于饮用水、地表水、地下水、生活污水和工业废水中亚硝酸盐的测定。最低检出浓度为0.003mg/L;测定上限为10.0mg/L亚硝酸盐氮（以NO2-N）。4. 仪器分光光度计。5. 试剂实验用水均为不含亚硝酸盐的水。1）无亚硝酸盐的水：于蒸馏水中加入少许高锰酸钾晶体，使呈红色，再加氢氧化钡(或者氢氧化钙)使呈碱性。置于全玻璃蒸馏器中蒸馏，弃去50mL初馏液，收集中间约70%不含锰的馏出液。(2)磷酸p=1.70g/mL。(3)显色剂：于500mL烧杯内，加入250mL水和50mL磷酸，加入20.0g对-氨基苯磺酰胺，再将1.00gN-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐(C10H7NHC2H4NH22HCI)溶于上述溶液中，转移至500mL容量瓶中，用于稀释至标线，混匀。此溶液贮于棕色瓶中，保存在25C,至少可稳定一个月。注意：本试剂有毒性，避免与皮肤接触或摄入体内。(4)亚硝酸盐氮标准贮备液：称取1.232g亚硝酸钠(NaN02)溶于150mL水中，转移至1000mL容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含约0.25mg亚硝酸盐氮。本溶液贮于棕色瓶中，加入1mL三氯甲烷，保存在25C,至少可以稳定一个月。贮备液的标定如下：在300mL具塞锥形瓶中，加入50.00ml0.050moI/L的高锰酸钾标准溶液，5mL无分度吸管，使下端插入高锰酸钾溶液下面，加入50.00mL亚硝酸钠标准贮备液，轻轻摇匀。置于水浴上加热至7080C,按每次10.00mL的量加入足够的草酸钠标准液，使红色褪去并过量，记录草酸钠标准溶液用量(V2)。然后用高锰酸钾标准溶液滴定过量草酸钠至溶液呈微红色，记录高锰酸钾标准溶液总用量(V1)。 再以50mL水代替亚硝酸盐氮标准贮备液，如上操作，用草酸钠溶液标定高锰酸钾溶液的浓度(C1).按下式计算高锰酸钾标准溶液浓度：Ci(1/5KMnO4)=0.0500XV4/V按下式计算亚硝酸盐氮标准贮备液的浓度：亚硝酸盐氮(N，mg/L)=(ViCi0.0500V2)X7.00Xi000/50.00=i40ViCi7.00XV2式中：Ci经标定的高锰酸钾标准溶液的浓度(moI/L);Vi滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入高锰酸钾标准溶液总量mL）；V2滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入草酸钠标准溶液量（mL）;V滴定水时，加入高锰酸钾标准溶液总量（mL）；V4滴定空白时，加入草酸钠标准溶液总量（mL）；7.0亚硝酸盐氮（1/2N）的摩尔质量（g/mol）;50.00亚硝酸盐标准贮备液去用量（mL）；0.0500草酸钠标准溶液浓度（1/2Na2C2O4，mol/L）。（5）亚硝酸盐氮标准中间液：分取50.00mL亚硝酸盐标准贮备液（使含12.5mg亚硝酸盐氮），置于250mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含50.0用亚硝酸盐氮。中间液贮于棕色瓶内，保存于25C,至少可稳定一周。（6）亚硝酸盐氮标准使用液：取10.00mL亚硝酸盐标准中间液，置于500mL容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含1.00pg亚硝酸盐氮。此溶液使用时，当天配制。（7）氢氧化铝悬浊液：溶解125g硫酸铝钾（KAI（SO4）212出0）或硫酸铝胺（NH4AI（SO4）212H2O）于1000mL水中，加热至60C，在不断搅拌下，徐徐加入55mL浓氨水，放置约1h后，移入1000mL量筒内，用水反复洗涤沉淀，最后至洗涤液中不含亚硝酸盐为止。澄清后，把上清液尽量全部傾出，只留稠的悬浮物，最后加入100mL水，使用前应振荡均匀。（8）高锰酸钾标准溶液（1/5KMnO4）=0.050mol/L:溶解1.6g高锰酸钾于1200mL水中，煮沸0.51h,使体积减少到1000mL左右，放置过夜。用G-3号玻璃砂芯滤器过滤后，滤液贮存于棕色试剂瓶中避光保存，按上述方法标定。（9）草酸钠标准溶液（1/2N&C2O4）=0.0500mol/L:溶解经105C烘干2h的优级纯无水草酸钠3.350g于750mL水中，移入1000mL容量瓶中，稀释至标线。（10）酚酞指示剂（C=10g/mL）:0.5g酚酞溶于95%乙醇50mL中。6. 步骤（1）校准曲线的绘制在一组6支50mL比色管中，分别加入0、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00mL亚硝酸盐氮标准使用液，用水稀释至标线。加入1.0mL显色剂，密塞，混匀。静置20min后，在2h以内，于波长540nm处，用光程长10nm的比色皿，以水为参比，测量吸光度。从测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸收度后，获得校正吸光度，绘制以氮含量（冯）为校正吸光度的校准曲线。（2）水样的测定当水样PH11时，可加入1滴酚酞指示液，边搅拌边逐滴加入（1+9）磷酸溶液至红色刚消失。水样如有颜色和悬浮物，可向每100mL水中加入2mL氢氧化铝悬浮物，搅拌、静置、过滤，弃去25mL初滤液。分取经预处理的水样于50mL比色管中（如含量较高，取分取适量，用水稀释至标线），加1.0mL显色剂，然后按校准曲线绘制的相同步骤操作，测量吸光度。经空白校正后，从校准曲线上查得亚硝酸盐氮量。（3）空白试验用水代替水样，按相同步骤进行测定。计算亚硝酸盐氮（N，mg/L）=m/V式中：m有水样测得的校正吸光度，从校准曲线上查得相应的亚硝酸盐氮的含量（）；V水样的体积（mL）。4