磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定.ppt

磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定 新乡医学院三全学院任衍开 一 实验目的 1 掌握磺胺类药物血浆药物浓度的测定方法2 掌握药物半衰期的计算方法3 了解药物血浆半衰期测定及计算的临床意义 二 实验原理 1 多数药物在体内按一级动力学规律消除 静脉注射后 如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标 时间为横坐标 其时量关系常呈直线 2 药物血浆半衰期 halflife T1 2 为 Ke 2 303 logC1 logC2 t2 t1 二 实验原理 3 呈色原理 磺胺类药物在酸性溶液中 与亚硝酸钠起重氮反应 生成重氮盐 此重氮盐在碱性溶液中与酚类化合物起偶联反应 生成橙红色的偶氮化合物 偶氮化合物的显色深浅与磺胺的浓度有关 三 实验动物 家兔 体重2 5Kg左右 四 实验器材和药品 1 器材 分光光度计 离心机 兔手术台 手术器械 动脉夹 动脉插管 磅秤 注射器 移液管 离心管 试管等分光光度计离心机 四 实验器材和药品 2 药品 20 磺胺嘧啶钠溶液 1 肝素钠溶液 0 02 磺胺嘧啶钠溶液 标准液 7 5 三氯醋酸溶液 0 5 亚硝酸钠溶液 0 5 麝香草酚溶液 20 NaOH溶液 20 乌拉坦溶液 蒸馏水 五 实验步骤 一 动物基本操作 二 测定液和标准液的配制 三 比色管的配制 四 比色与计算 一 动物基本操作 血液标本的采集 1 抓取家兔1只 称重 用20 乌拉坦溶液5mL kg行耳缘静脉麻醉 然后固定于手术台上 2 气管插管 手术区剪毛 沿正中线剪开颈部皮肤 钝性分离皮下组织及肌肉 找出并游离气管 穿一根线备用 确定甲状软骨的位置 在其下3 4环装软骨处切一倒 T 形切口 插管固定 一 动物基本操作 血液标本的采集 3 游离颈总动脉 分开肌肉层后 找出一侧颈总动脉并分离约2 3cm左右 在其下穿线两根线备用 一 动物基本操作 4 全身肝素化 耳缘静脉注射肝素5ml 线1结扎远心端 待血管充盈后 动脉夹夹闭近心端远心端剪一 V 形口 动脉插管 线2结扎固定 二次固定 5 动脉插管 肝素润洗 一 动物基本操作 6 取血 打开动脉夹取空白血样2ml置于用肝素浸过的试管中待用 然后由耳缘静脉注射20 磺胺嘧啶钠溶液2ml kg 于给药后10min及40min各取血2ml 分别置于同上试管中待用 二 测定液和标准液的配制 测定液的配制 用1ml注射器抽取上述血液各0 2ml 置于已盛有5 8ml7 5 三氯醋酸溶液的玻璃试管中 充分摇匀 然后以1500r min 离心5min待用 标准液的配制 取0 02 磺胺嘧啶钠溶液0 2ml 加入已装有5 8ml7 5 三氯醋酸溶液试管中 摇匀待用 三 各比色管的配制 蒸馏水 0 02 NaSD 1组标本各取0 2ml加入2组 2组各试管先加三氯乙酸5 8ml 2组测定液各取1 5ml清液加入3组 加0 5mlNaNO2 加1ml麝香草酚 标本 1组 测定液 2组 比色液 3组 空白管 标准管 给药前 药后10 药后40 取13支试管分别用记号笔标记 四 比色与计算 用722型分光光度计进行比色 选波长520nm 以空白管调 0 点 读出标准管及各测定管光密度 并记录 六 实验结果 1 各比色管的光密度值 六 实验结果 2 计算Ke及T1 2 Ke 2 303 logC1 logC2 t2 t1 CNaSD C标 OD标 OD给药后 OD给药前 七 注意事项 1 麻醉时一定把握好速度 2 每次取血之前要先将残血放掉 3 各盛血的试管及动脉插管要用肝素浸润 动脉插管前要先注射肝素 全身肝素化 4 将血样加到三氯醋酸试管中应边加边摇匀 否则易出现血凝块 5 配制比色管的时候各个试管要做好标记 6 加亚硝酸钠和麝香草酚的顺序不要混乱 谢谢