江苏专版2019版高考生物一轮复习鸭部分生物技术实践课时跟踪检测三十九微生物的利用.doc

课时跟踪检测（三十九） 微生物的利用一、选择题1(2018东台模拟)下列有关微生物培养的叙述，错误的是()A用平板划线法分离大肠杆菌时，需要多次灼烧接种环B倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落，造成污染C新配置的培养基可以用高压蒸汽灭菌或干热灭菌的方法灭菌D获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染解析：选C用平板划线法分离大肠杆菌时，第一次划线前和每次划线后，都要对接种环进行灼烧灭菌，A正确；倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落，造成污染，B正确；新配置的培养基一般采用高压蒸汽灭菌的方法灭菌，C错误；获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，D正确。2(2018如皋检测)消毒和灭菌是两个不同的概念。下列各项中必须进行灭菌处理的是()A牛奶B培养基C离体培养的植物组织 D注射药物时的皮肤解析：选B牛奶需要消毒，A错误；培养基需要用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，B正确；离体培养的植物组织需要消毒，不能灭菌，C错误；注射药物时的皮肤，需要用酒精棉球消毒，D错误。3下列关于灭菌和消毒的叙述，错误的是()A接种环、接种针用灼烧的方法灭菌B灭菌是杀死物体内外所有微生物C消毒是杀死物体内外绝大多数的微生物D高压蒸汽灭菌的原理是使细菌DNA变性解析：选D接种环、接种针用灼烧的方法灭菌。灭菌是杀死物体内外所有微生物。消毒是杀死物体内外绝大多数的微生物。高压蒸汽灭菌的原理是杀死所有微生物。4下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是()A应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基pHB实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触C待培养基冷却至室温后，在酒精灯火焰附近倒平板D使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃解析：选C培养基冷却到50 左右即可倒平板。5下列关于制备牛肉膏蛋白胨培养基的叙述，错误的是()A培养基应先调pH再进行灭菌B培养基应先灭菌再分装到培养皿C溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦D高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方向依次旋紧螺栓解析：选D制备培养基灭菌时，培养基应该先调节pH后灭菌。培养基在分装到培养皿之前要先进行灭菌处理，以防止杂菌的污染。溶化琼脂时要用玻璃棒搅拌，防止琼脂烧焦，搅拌的过程不能让琼脂溢出。高压蒸汽灭菌锅加盖时要以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，而不是依次旋紧。6(2017南京一模)下列有关用平板划线法和稀释涂布平板法纯化培养大肠杆菌的叙述，正确的是()都需要用固体培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用菌落数来计数活菌A BC D解析：选B平板划线法和稀释涂布平板法纯化培养大肠杆菌都需要用固体培养基，在火焰旁进行接种，防止杂菌污染；平板划线法需要使用接种针进行接种，只能分离微生物，不能计数；稀释涂布平板法需要用涂布器接种，可根据菌落数来计数活菌。7(2017盐城二模)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)，实验的主要步骤如图所示。下列有关叙述错误的是()A培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌B实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触C实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染D将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种解析：选D本实验的目的是“筛选到能高效降解化合物A的细菌”，因此培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌，A正确；实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触，B正确；实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染，C正确；本实验中需要振荡培养，因此所用培养基为液体培养基，D错误。8(2018海安中学月考)下列有关微生物培养、纯化及筛选的叙述，错误的是()A为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应立即快速挑取菌落B平板划线操作中第二次及其后的划线应从上一次划线的末端开始C筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源D在纤维素刚果红培养基上，能产生透明圈的为纤维素分解菌解析：选A为了防止污染，接种环经火焰灭菌后需要冷却后再挑取菌落，否则高温使菌种死亡，A错误；平板划线操作中，第二次及其后的划线应从上一次划线的末端开始，B正确；筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源，C正确；在纤维素刚果红培养基上，能产生透明圈的为纤维素分解菌，D正确。9(2017盐城三模)如图为纤维单胞菌(能产生纤维素酶)的获取过程。下列有关叙述错误的是()A培养基都应以纤维素为唯一碳源B图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C所用的接种方法可对培养的微生物进行计数D可用刚果红染料鉴定，看菌落周围是否出现透明圈解析：选C培养基中以纤维素作为唯一碳源时，只有能利用该物质的微生物才能生长、繁殖，A正确；对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法，对接种环采用火焰灼烧法进行灭菌，B正确；的接种方法是平板划线法，利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离，但是不能对微生物进行计数，计数一般采用稀释涂布平板法，C错误；当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，D正确。10(2017苏州一模)科研人员利用实验室保藏的酵母及市场上出售的面包酵母菌种，设计了相关实验，成功培育出能在20 条件下冷冻保存56天，存活率达到90%以上的耐冻性面包酵母菌菌种。下列有关叙述错误的是()A酵母菌能利用蛋白胨作为碳源与氮源B在配制培养基时可选择添加适宜种类和浓度的抗生素C应将不同来源的菌株接种到培养液后置于20 条件下冷冻保存56天D应采用稀释涂布平板法和平板划线法分别测定冷冻培养前后的活菌数解析：选D蛋白胨可以提供碳源与氮源；配制培养基时可添加适宜种类和浓度的抗生素以防止细菌污染；将不同来源的菌株接种到培养液后置于20 条件下冷冻保存56 d，可以筛选出耐冻性面包酵母菌菌种；只有稀释涂布平板法可以测定活菌数。11(2017泰州一模，多选)下列操作中，能防止杂菌污染的有()A早期胚胎的培养液中添加维生素B分离酵母菌的培养基中添加青霉素C腐乳装瓶腌制时在近瓶口处加大用盐量D微生物培养时在酒精灯火焰旁倒平板解析：选BCD早期胚胎的培养液中添加维生素是为了提供营养，加入抗生素能防止杂菌污染；青霉素可以抑制细菌、放线菌等原核生物细胞壁的形成，从而防止杂菌污染；腐乳装瓶腌制时在近瓶口处加大用盐量及在酒精灯火焰旁倒平板都能防止空气中的杂菌污染。12(2018淮安5月模拟，多选)某生物科技小组的同学用刚果红染色法从土壤中分离得到了能够分解纤维素的微生物，下列有关此实验历程的阐述，错误的是()A本实验既可以起到选择培养的作用又可以起到鉴别培养的作用B纤维素的分解产物纤维二糖和葡萄糖能与刚果红作用形成红色的复合物C涂布平板时，应用涂布器沾少量菌液并转动培养皿以使菌液涂布均匀 D应只选择平板中有较大透明圈的菌落进行计数解析：选BCD刚果红染色法从土壤中分离得到了能够分解纤维素的微生物，起到选择培养的作用，同时也起到鉴别的作用，A正确；刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，B错误；取少量菌液滴加在培养基表面，涂布时，涂布器可以不动，转动培养皿使涂布均匀，C错误；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30300之间的平板进行计数，D错误。二、非选择题13(2017南通一模)土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：实验原理：固体培养基中，难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈(如图1)，透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。实验步骤：步骤1：取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1 mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72 h。步骤2：在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养34d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株(如表)。菌株透明圈直径(D)菌落直径(d)D/dM30118.812.31.5B35620.78.02.6T14019.16.51.4分析回答：(1)从物理形态看，培养基A属于_培养基。培养基中磷源应该是_。(2)步骤1中接种方法是_，步骤2中接种环的灭菌方法是_。(3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_。(4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37 、200 rmin1 摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到图2所示曲线。用摇床进行培养的好处是_。结果表明最优良的解磷菌株是_。解析：(1)菌落必需在固体培养基上才能形成(培养过程中菌体不能运动)；要筛选溶解难溶性磷能力强的菌株，必须以难溶性磷酸盐作为唯一磷源。(2)步骤1的目的是从土壤微生物中筛选解磷微生物，由于土壤样液中微生物种类和数量多，因此，最好采用稀释涂布平板法进行接种。接种环灭菌的方法是灼烧灭菌。(3)根据实验原理中“透明圈直径与菌落直径的比值代表微生物溶解磷的能力大小”，结合表格数据可以确定解磷能力最强的菌株是B356。(4)摇床培养是实验室培养需氧微生物的常用方法，使用摇床培养，不仅可以增大培养液中溶氧量，促进微生物的有氧呼吸，而且能够增加菌株与培养液的接触，提高营养物质的利用率。根据实验曲线图得出M301是最优良的解磷菌株。答案：(1)固体难溶性磷酸盐(2)稀释涂布平板法灼烧(3)B356(4)增加培养液中的溶氧量；使菌株与培养液充分接触，有利于物质的交换M30114(2017常州一模)自生固氮菌可不与其他植物共生，就能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株，并对其固氮能力进行了研究。请回答下列问题：(1)在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项不需要的是_(填序号)。酒精灯接种环高压蒸汽灭菌锅棉塞(2)要从土壤样品中分离出自生固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于_培养基上进行筛选。(3)在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是_。(4)涂布培养4天后，可通过观察_的形态特征来统计土壤中自生固氮菌的种类。(5)为了进一步筛选高效固氮菌，研究人员将上述获得的等量的4种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量，结果见下表：甲菌乙菌丙菌丁菌菌量/个mL12.11052.51051.81052.0105含氮量/K3.324.385.345.32培养过程中需不断振荡的目的是_。可以采用_方法对固氮菌进行计数，假设计数室长和宽均为1 mm，深0.1 mm，每个小方格中平均有7个固氮菌，则10 mL培养液中有固氮菌的数量为_个；如果小方格中固氮菌的数量太多，无法数清，则应_。由上述结果可知，_菌的固氮效率最高。解析：(1)在配制含琼脂的培养基时需要将培养基分装到锥形瓶中用棉塞塞住瓶口，再用高压蒸汽灭菌锅灭菌。倒平板时，为了防止杂菌污染需要在酒精灯火焰旁操作。接种环进行平板划线时用到。(2)因为自生固氮菌能够独立进行固氮，所以用缺氮培养基可以筛选分离自生固氮菌。(3)为了防止培养基表面的菌悬液出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果，在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多。(4)由于不同种类的细菌形成的菌落特征不同，故可以通过观察菌落的形态特征来统计土壤中自身固氮菌的种类。(5)为了让固氮菌与培养液充分接触，培养过程中需要不断振荡。对固氮菌进行计数可以采用抽样检测法。每个计数室的容积为0.1 mm3，有400个小方格。若每个小方格中平均有7个固氮菌，则计数室内固氮菌为2 800个。10 mL培养液中固氮菌的数量为102 8001042.8108个。若小方格中固氮菌的数量太多，无法数清，可以稀释后再计数。由表中结果可知，丙菌菌量少而含氮量高，所以丙菌的固氮效率最高。答案：(1)(2)缺氮(3)培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果(4)菌落(5)让固氮菌与培养液充分接触抽样检测2.8108对培养液稀释后计数丙15(2018南京9月调研)如图是某同学分离和培养洗衣机中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图。(1)图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，该操作称为_，若用该培养基培养洗衣机中滋生的细菌时，除考虑各种营养条件外，还要考虑_和渗透压等条件(至少写两个)。(2)在培养洗衣机中细菌的实验中，应在接种前检测固体培养基是否被污染，具体检测的方法是_。(3)图2是平板划线法接种操作示意图，操作顺序是AB_(用字母和箭头表示)；以上操作中存在错误的步骤是_(用字母表示)。(4)将以上接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置，原因是_。(5)在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时，也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液，然后用移液枪取0.1 mL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养，这种方法称为_。经一段时间培养后，该同学统计发现该培养皿中共有57个菌落(如图3)，他得出的结论是0.1 mL菌液中有57个细菌，你认为他的判断是否正确，说明原因。_。(6)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，此目的是_。解析：(1)图1所示是倒平板过程；若用该培养基培养洗衣机中滋生的细菌时，除考虑各种营养条件外，还要考虑温度、pH、氧气、无菌和渗透压等条件。(2)检测固体培养基是否被污染的方法：将未接种的培养基在适宜的环境中放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。(3)图2是平板划线法接种操作示意图，由以上分析可知，正确的操作顺序是ABEDCF；为了防止杂菌污染，接种应在酒精灯的火焰旁进行，因此以上操作中存在错误的步骤是C。(4)为了防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，需要将接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置。(5)在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时，也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液，然后用移液枪取0.1 mL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养，这种方法称为稀释涂布平板法。采用该方法计数时，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此计数的结果比实际值偏小。(6)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，目的是防止造成环境污染。答案：(1)倒平板温度、pH、氧气、无菌等(2)将未接种的培养基在适宜的环境中放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生(3)EDCFC(4)防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染(5)稀释涂布平板法不正确，应大于或等于57个细菌，因为当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(6)防止造成环境污染