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吉林黑龙江八校联合体2016-2017学年高二下学期期中考试生物试题一、选择题1. 基因工程技术引起的生物变异属于A. 染色体变异 B. 基因突变C. 基因重组 D. 不可遗传的变异【答案】C【解析】基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，基因工程技术引起的生物变异属于基因重组。【考点定位】基因工程的原理及技术【名师点睛】本题考查了基因工程的原理，要求考生能够识记基因工程的原理为基因重组；明确基因工程能够定向地改造生物遗传性状，难度不大，属于考纲中识记层次的考查。2. 能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是A. 单倍体育种 B. 杂交育种C. 基因工程育种 D. 多倍体育种【答案】C【解析】试题分析：单倍体育种将某一物种配子直接培养为个体，只表现该物种性状，故A错。杂交育种能够集中同一物种不同个体优良性状，不能表现其他物种性状，故B错。基因工程育种通过转基因技术，使一个物种表现另一个物种性状，故C正确。多倍体育种也只能表现该物种性状，故D错。【考点定位】本题考查了不同育种方式的优点，属于对识记、理解层次的考查。【名师点睛】理清脉络，弄清基因工程的定义基因工程（gene engineering），又称为重组DNA技术，是按着人们的科研或生产需要，在分子水平上，用人工方法提取或合成不同生物的遗传物质（DNA片段），在体外切割，拼接形成重组DNA,然后将重组DNA与载体的遗传物质重新组合，再将其引入到没有该DNA的受体细胞中，进行复制和表达，生产出符合人类需要的产品或创造出生物的新性状，并使之稳定地遗传给下一代。按目的基因的克隆和表达系统，分为原核生物基因工程，酵母基因工程，植物基因工程和动物基因工程。基因工程具有广泛的应用价值，为工农业生产和医药卫生事业开辟了新的应用途径，也为遗传病的诊断和治疗提供了有效方法。基因工程还可应用于基因的结构，功能与作用机制的研究，有助于生命起源和生物进化等重大问题的探讨。 基因工程有两个重要的特征，第一是可把来自任何生物的基因转移到与其毫无关系的任何其他受体细胞中，因此可以实现按照人们的愿望，改造生物的遗传特性，创造出生物的新性状;第二是某一段DNA可在受体细胞内进行复制，为准备大量纯化的DNA片段提供了可能，拓宽了分子生物学的研究领域。.3. 下图是基因工程中基因表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是A. 目的基因插入位点 B. 启动子C. 标记基因 D. DNA聚合酶识别位点【答案】B【解析】基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成。图中有终止子、标记基因(抗生素基因)、目的基因(插入的基因)、复制原点等,还缺少启动子。启动子位于目的基因的首端，所以X最可能是启动子，B选项是正确的。4. 人们常常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因.该抗性基因的主要作用是A. 提高受体细胞在自然环境中的耐药性B. 有利于对目的基因是否导人进行检测C. 加强质粒分子的感染性D. 便于与外源基因连接【答案】B【解析】试题分析：抗菌素抗性基因属于标记基因，有利于对目的基因是否导入进行检测，而不是提高受体细胞的抗药性，故A错误，B正确；细菌质粒分子的感染性与抗菌素抗性基因无关，故C错误；质粒上含有限制酶切割位点，便于与外源基因连接，抗菌素抗性基因与外源基因的连接无关，故D错误。考点：本题考查基因工程的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。5. 下列有关质粒的叙述.正确的是A. 质粒是存在于细菌中的一种细胞器B. 质粒改造后可用作基因工程的载体C. 质粒上基因的表达不遵循中心法则D. 质粒必须具有抗生素基因以便筛选【答案】B【解析】质粒是存在于细菌中一种环状DNA分子，不是细胞器，A错误；天然的质粒经过改造后可作为基因工程的运载体，B正确，基因的表达都遵循中心法则，C错误；质粒必须具有标记基因以便筛选，但标记基因不一定是抗生素抗性基因，也可以是荧光基因，D错误。6. 应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是A. 用于检测疾病的医疗器械B. 用放射性同位素标记的目的基因C. 基因表达载体上的标记基因D. 用放射性同位素标记的相应抗体【答案】B【解析】基因探针不是检测疾病的医疗器械，A错误；在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记可以作为探针，B正确；基因表达载体上的标记基因不是基因探针，C错误；基因探针是单链DNA，不是用放射性同位素标记的相应抗体，D错误。【点睛】探针是指能与特定靶DNA分子发生特异性作用、并能被特定方法探知的分子。基因探针是指用放射性同位素或荧光分子标记的DNA单链，利用碱基互补配对原则，检测目的基因是否导入受体细胞的染色体DNA中。7. 下列对基因组文库的叙述不正确的是A. 含有某种生物的全部基因B. 基因中含有启动子和内含子C. 文库的基因是通过受体菌承载的D. 文库中的全部基因可以在物种间交流【答案】D【解析】一种生物的基因组文库含有本物种生物的全部基因，A正确；基因中含有启动子和内含子，B正确；基因文库是以不同片段的DNA在受体菌中保存的，C正确；文库中的部分基因可以在物种间交流，D错误。8. 下列对PCR过程的叙述中，不正确的是A. PCR过程中DNA解旋所需的温度最高B. 一次循环可使目的基因的量增加一倍C. 需要耐高温的DNA聚合酶D. 需要耐高温的解旋酶【答案】D【解析】PCR过程中DNA解旋所需的温度最高(90以上)，A正确；PCR过程中DNA数量的增加呈指数增长，所以一次循环可使目的基因的量增加一倍，B正确；PCR反应需要高温使DNA变性解旋，所以要用耐高温的DNA聚合酶，C正确；PCR技术中，DNA双链的解开不需要解旋酶，是利用高温使其变性解旋，D错误。【点睛】解答本题需识记有关PCR技术的相关知识:概念:PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；原理:DNA复制；前提条件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物；过程:PCR反应过程是:变性复性延伸。高温(90以上)变性:双链DNA解聚为单链；低温(50左右)复性:两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。9. 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列不属于目的基因的检测和鉴定的是A. 检测受体细胞是否有目的基因B. 检测受体细胞是否有致病基因C. 检测目的基因是否转录出mRNAD. 检测目的基因是否翻译出蛋白质【答案】B【解析】目的基因的检测和鉴定一般包含三步：检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因、目的基因是否转录出了mRNA、目的基因是否翻译成蛋白质。有时还需要进行个体生物学水平的鉴定，但无需检测受体细胞是否有致病基因，故本题正确答案为B。10. 下列关于基因工程载体的叙述中，正确的是A. 构建基因文库时不需要载体B. 载体都是环状DNA分子C. 质粒上至少有一个限制酶切割位点D. 只来自于原核细胞【答案】C【解析】构建基因文库时需要载体，A错误；质粒是环状DNA分子，但基因工程的运载体不一定是质粒，也可以是噬菌体或动植物病毒，B错误；基因工程的运载体必须要有一个或多个限制酶切点，便于与目的基因连接形成重组DNA分子，C正确；质粒主要存在于原核生物细胞中，但是在酵母菌中也有分布，D错误。【考点定位】基因工程的原理及技术【名师点睛】作为运载体必须具备的条件：要具有限制酶的切割位点；要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；能在宿主细胞中稳定存在并复制；是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。11. 某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶酶切位点如下图所示，则在进行基因工程操作中最好应选用下列哪种质粒作为载体A. B. C. D. 【答案】D【解析】获得目的基因如用A1Ui处理，目的基因会出现自身环化，因此只能用NheI和SmaI处理，则质粒只能也必须用NheI和SmaI处理，D正确。【名师点睛】确定限制酶的种类(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择Pst。不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择Sma。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用Pst和EcoR两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶Sma会破坏标记基因；如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。12. 在基因工程的基本操作步骤中，不遵循碱基互补配对的步骤是A. 人工合成目的基因 B. 目的基因与运载体结合C. 将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测和表达【答案】C【解析】A、人工合成目的基因的方法如逆转录法，需要进行碱基互补配对，A正确；B、目的基因与运载体结合时，相同的粘性末端能进行碱基互补配对，B正确；C、将目的基因导入受体细胞时，没有进行碱基互补配对，C错误；D、检测目的基因时需要用到基因探针，进行DNA分子杂交，存在碱基互补配对；基因表达包括转录和翻译过程，都要进行碱基互补培养，D正确。【考点定位】基因工程的原理及技术、碱基互补配对原则【名师点睛】基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。其中人工合成目的基因、基因表达载体的构建、目的基因的检测都进行碱基互补配对原则。13. 利用基因工程生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述不正确的是A. 过程是在小菜蛾细胞的细胞核中进行B. 过程获取的CarE基因中不含有启动子C. 过程进行前需要用Ca2+处理大肠杆菌D. 过程后只有部分工程菌含有CarE基因【答案】A【解析】根据题意和图示分析可知：图中过程表示通过反转录法合成相应的DNA；过程表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程表示将目的基因导入受体细胞；过程表示通过筛选获得工程菌。过程表示通过反转录法合成目的基因，该过程是在体外进行的，不是在小菜蛾细胞的细胞核中进行的，A错误；目的基因是通过逆转录法获得的，该方法获得的目的基因不含启动子，因此过程获取的CarE基因中不含有启动子，B正确；将目的基因导入微生物细胞时采用感受态转化法，感受态细胞可用Ca2+溶液处理得到，C正确；过程获得的工程菌需要进行鉴定，在没有鉴定前只有部分含有CarE基因，D正确。14. 蛋白质工程中直接进行操作改造的对象是A. 氨基酸结构 B. 蛋白质空间结构C. 肽链结构 D. 基因结构【答案】D【解析】蛋白质工程是对控制蛋白质合成的基因进行改造，从而实现对相应蛋白质的改变，ABC错误，D正确。【考点定位】蛋白质工程【名师点睛】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。15. 通过植物组织培养技术繁育农作物，其优点不包括A. 加快繁育速度 B. 保持亲本优良性状C. 培育出无病毒植株 D. 改变植物的基因型【答案】D【解析】试题分析：植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株该技术的原理是植物细胞的全能性，其优点有培养无病毒植株，加快繁殖速度，保持亲本优良性状，但不能改变植物体基因型。考点：本题主要考查植物组织培养的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。16. 下图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径示意图，下列叙述正确的是A. 该技术依据的原理是细胞核的全能性B. 过程需控制好植物激素的比例C. 愈伤组织的细胞是已分化的细胞D. 过程需使用化学方法除去细胞壁【答案】B【解析】分析题图：图示是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，其中表示脱分化过程；表示将愈伤组织分散成单个细胞；表示细胞增殖过程。细胞的全能性是指最后发育成完成个体，而图示表示的获得细胞产物，A错误；在植物组织培养过程中，培养基中需要加入生长素和细胞分裂素，B正确；愈伤组织的细胞是未分化的细胞，C错误；过程表示细胞增殖，不需要使用化学方法除去细胞壁，D错误。17. 下列措施能提高植物突变体出现的是A. 用嫁接方法培育新品种 B. 转基因技术培育植物新品种C. 用紫外线照射愈伤组织 D. 用秋水仙素处理植物细胞【答案】C【解析】采用嫁接方法培育苹果新品种属于无性繁殖，不会提高基因突变的频率，A错误；利用转基因技术将目的基因导入植物细胞中，培育植物新品种属于基因工程育种，不会提高基因突变频率，B错误；愈伤组织具有旺盛的分裂能力，用紫外线对组织培养中的愈伤组织进行照射，可以提高基因突变的频率，加快植物突变体的出现，C正确；使用秋水仙素对植株进行处理会导致染色体加倍，一般不会提高基因突变的频率，D错误。【考点定位】诱变育种【名师点睛】诱变育种指的是在人为的条件下，利用物理、化学等因素，诱发生物体产生突变，从中选择，培育成动植物和微生物的新品种。诱变育种具有的优点是可以提高突变率，缩短育种周期，以及能大幅度改良某些性状。缺点是成功率低，有利变异的个体往往不多；此外需要大量处理诱变材料才能获得所需性状。18. 将三倍体鲫鱼的肾脏细胞核移植到二倍体鲫鱼的去核卵细胞内，培养获得的克隆鱼A. 是二倍体 B. 遗传物质来自于二倍体鲫鱼C. 高度不育 D. 性状与三倍体鲫鱼完全相同【答案】C【解析】克隆鱼的核遗传物质都来自三倍体鲫鱼，因此克隆鱼属于三倍体，A错误；克隆鱼的细胞核遗传物质来自于三倍体鲫鱼，细胞质遗传物质来自于二倍体鲫鱼，B错误；该克隆鱼是三倍体，在减数分裂联会时发生紊乱，不能产生正常的生殖细胞，所以高度不育，C正确；该克隆鱼的细胞核遗传物质来自三倍体鲫鱼，而细胞质遗传物质来自二倍体鲫鱼，因此其性状与三倍体鲫鱼相似，但不是完全相同，D错误。【考点定位】动物细胞核移植技术19. 克隆技术不能用于A. 增加生物多样性 B. 保存濒危物种C. 繁殖某一性别的家畜 D. 繁殖家畜中的优良品种【答案】A【考点定位】动物体细胞克隆【名师点睛】克隆技术已展示出广阔的应用前景，概括起来大致有以下四个方面：（1）培育优良畜种和生产实验动物；（2）生产转基因动物；（3）生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法；（4）复制濒危的动物物种，保存和传播动物物种资源。20. 在培育紫罗兰脱毒种苗的过程中，不涉及A. 基因的选择性表达 B. 形成愈伤组织C. 脱分化 D. 减数分裂和受精作用【答案】D.21. 下图为小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)培养的过程图，下列叙述不正确的是A. 可用胶原蛋白酶分散组织块中的细胞B. MEF细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化C. 加入培养液中的MEF细胞最好是来自传代培养的细胞D. 细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象【答案】C【解析】将动物组织细胞分散成单个细胞，可以用胶原蛋白酶或胰蛋白酶，A正确；分析图发现：在胚胎干细胞培养液中加入MEF细胞后，不分化，但未加的一组，易分化。对比分析可以推导：MEF细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化，B正确；加入培养液中的MEF细胞最好是来自原代培养的细胞，C错误；在动物细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象，D正确。22. 注射抗小鼠Thy1抗原的单克隆抗体，可以抑制小鼠同种皮肤移植产生的排斥反应，有关制备抗小鼠Thy1抗原的单克隆抗体，下列叙述不正确的是A. 应向小鼠体内注入Thy1抗原B. 可用灭活的病毒诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合C. 融合后的细胞即为所需的杂交瘤细胞D. 该过程涉及动物细胞融合和动物细胞培养【答案】C【解析】应向小鼠体内反复注入Thy1抗原，使小鼠产生相应的免疫B淋巴细胞，A正确；可用灭活的病毒诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，这是动物细胞融合的特有的方法，B正确；融合后的细胞不一定就能大量增殖并产生专一的抗体，还需要筛选，才可以得到所需的杂交瘤细胞，C错误；该过程涉及动物细胞融合和动物细胞培养，D正确。23. 将鱼的体细胞核植入去核的卵细胞中，所得重组细胞可培育为克隆鱼。下图中能正确表示动物克隆技术原理的是A. B. C. D. 【答案】C【解析】A、A图中是直接将精子与卵细胞融合，不是核移植过程， A错误；B、B图中是将2个体细胞核融合，也不是核移植过程， B错误；C、C图中是将体细胞核取出移入去核卵细胞内，与题意相符， C正确；D、D图中是将卵细胞核与去核的体细胞质融合，与题意相反， D错误。故选C。24. 下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是A. 动物细胞培养所需的营养物质与植物细胞培养相同B. 传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞C. 癌细胞在培养瓶中培养不会出现接触抑制现象D. 动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染【答案】A【解析】试题分析：动物细胞培养所需的营养物质有血清、血浆，植物细胞培养需要蔗糖等，A错；传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，B正确；癌细胞膜表面的糖蛋白减少，细胞间信息交流受到限制，在培养瓶中培养不会出现接触抑制现象，C正确；动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染，D正确。考点：本题考查动物细胞培养，意在考查考生能理解所学知识的要点。25. 下图是人工种子的结构图，下列有关胚状体和人工种子的叙述正确的是A. 胚状体的培育运用了植物体细胞杂交技术B. 同一批次培育的胚状体具有相同的基因型C. 利用人工种子繁殖子代的生殖方式属于有性生殖D. 人工种子能够克服远缘杂交不亲和障碍等问题【答案】D【解析】胚状体的培育运用了植物组织培养，A错误；因为人工种子是由组织培养而来,同一批次培育的胚状体来自同一亲本，因此具有相同的基因型，B正确；人工种子是利用植物组织培养得到的，如果利用植物的体细胞进行植物组织培养得到人工种子，则该人工种子繁殖属于无性生殖；如果利用花粉进行植物组织培养得到人工种子，则该人工种子繁殖属于有性生殖，C错误；人工种子是利用植物组织培养得到的，植物组织培养是利用植物细胞的全能性，将离体组织或细胞培养成生物体，属于无性繁殖，保持亲本的遗传特性，D错误。26. 下列有关核移植的说法不正确的是A. 用核移植得到的动物称为克隆动物B. 核移植的受体细胞最好是受精卵C. 核移植可以充分发挥优良种畜的生殖潜力D. 核移植得到的克隆动物多数存在健康问题【答案】B【解析】用核移植得到的动物称为克隆动物，A正确；核移植的受体细胞是减数第二次分裂时期的卵母细胞，B错误；核移植可以充分发挥优良个体的繁殖潜力，促进优良种群繁育，C正确；克隆技术并没有完全成熟，大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题，D正确。27. 实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是A. 甲过程需要在无菌条件下进行B. 乙过程需要将获得的皮肤细胞制成细胞悬液C. 丙过程是原代培养出现接触抑制现象D. 丁过程是传代培养，细胞不能保持二倍体核型【答案】D【解析】分析题图：图示表示小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程，甲表示从实验小鼠获取皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒；乙表示用胰蛋白酶将组织细胞分散成单个细胞；丙表示原代培养过程；丁表示传代培养。离体动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，A正确；动物细胞培养前需用胰蛋白酶处理皮肤组织使组细胞分散开，制成细胞悬液，B正确；丙表示原代培养，出现接触抑制现象，C正确；丁是传代培养过程，该过程少部分细胞遗传物质可能发生了变化，大部分能保持二倍体核型，D错误。28. 下列有关动物细胞工程的叙述，不正确的是A. 培养的动物细胞可用于检测有毒物质B. 体细胞核移植技术能用于治疗人类某些疾病C. 克隆动物的产生主要通过核移植实现D. 克隆动物的遗传物质来自供体细胞核【答案】D【解析】检测有毒物质，判断某种物质的毒性，属于动物细胞工程的应用，A正确；动物体细胞核移植技术的应用前景包括加速家畜遗传改良进程；培养可用于移植的组织、器官；作为疾病模型,研究疾病的发展和治疗疾病，B正确；克隆动物是通过核移植实现的，C正确；克隆动物细胞核遗传物质来自供体细胞核，细胞质遗传物质来自于受体细胞，D错误。29. 下列关于植物组织培养和动物细胞培养的叙述，正确的是A. 都需要无菌的条件 B. 都从单个细胞开始C. 都使用液体培养基 D. 都能实现细胞的全能性【答案】A【解析】植物组织培养和动物细胞培养都需要防止杂菌污染，即需要无菌的条件，A正确；植物组织培养从外植体开始,即离体的器官、组织或细胞,动物细胞培养是从单个细胞开始，B错误；植物组织培养使用固体培养基，动物细胞培养使用液体培养基，C错误；植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，D错误。30. 下图是单克隆抗体制备流程的示意图。下列有关叙述正确的是A. 从小鼠脾脏中获得细胞主要参与细胞免疫B. 过程利用细胞膜选择透过性原理C. 细胞同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D. 是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群【答案】D【解析】分析图解可知：表示已免疫的B淋巴细胞，表示细胞融合，表示重组细胞,表示筛选过程。是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞，参与体液免疫，A错误；在动物细胞融合的过程中,利用细胞膜的流动性，B错误；效应B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，只考虑两两融合会有三种结果：杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、B细胞自身融合细胞等，只有杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生特异性抗体，C错误；过程表示用抗体阳性检测，筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D正确。二、非选择题31. 下图是利用基因工程方法培育抗虫棉的过程示意图。请据图回答下列相关问题:（1）从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具酶是_。（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上有_，它能把目的基因整合到受体细胞的_上。（3）除质粒外，能作为基因工程运载体的有_、_。（4）要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做_实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用_方法进行检测。【答案】 (1). 限制性核酸内切酶(限制酶) (2). T-DNA(可转移的DNA) (3). 染色体DNA (4). 噬菌体的衍生物 (5). 动(植)物病毒 (6). 抗虫(或抗病)接种 (7). 抗原一抗体杂交【解析】根据题意和图示分析可知：图示为某转基因抗虫棉的培育流程图，其中A表示基因表达载体的构建过程，这是基因工程的核心步骤；BCD表示采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞；E表示采用植物组织培养技术将棉花体细胞培养成转基因抗虫棉。(1)从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用限制性核酸内切酶(限制酶)。(2)构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上有T-DNA (可转移的DNA)，它能把目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上。(3)质粒是基因工程常用的运载体，除质粒外，能作为基因工程运载体的还有噬菌体的衍生物、动(植)物病毒。(4)要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做抗虫(或抗病)接种实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用抗原一抗体杂交方法进行检测。【点睛】本题关键要熟悉农杆菌转化法的操作流程以及每步的操作方法。32. 转基因抗虫棉是人们较早应用基因重组技术的推广项目，目前转基因技术有了新的改进。如下图所示。请根据所学知识回答下列问题：（1）启动子的作用是与_进行识别和结合，从而驱动基因的转录过程。目的基因与载体结合主要依靠二者含有相同的_。若限制酶切出了平末端，要选用_进行连接。图中构建重组质粒选择的限制酶是_。（2）般试管苗的形成先诱导生成_（填“丛芽”或“根”）。原因是_。（3）将目的基因导入植物受体细胞的方法有_、_、_等。【答案】 (1). RNA聚合酶 (2). 黏性末端 (3). T4DNA连接酶 (4). EcoR和BamH (5). 丛芽 (6). 进行光合作用合成有机物，利于生长 (7). 农杆菌转化法 (8). 基因枪法 (9). 花粉管通道法【解析】分析图解：图中Sal限制酶的切割位点存在于目的基因的中间位置，若使用该限制酶切割目的基因会导致目的基因失活，因此应选择EcoR、BamH两种酶切割目的基因和质粒。（1）启动子是RNA聚合酶进行识别和结合的位点，从而驱动基因的转录过程。目的基因与载体结合主要依靠二者含有相同的黏性末端。若限制酶切出了平末端，要选用T4DNA连接酶进行连接。图中Sal限制酶的切割位点存在于目的基因的中间位置。若使用该限制酶切割目的基因会导致目的基因失活，因此应选择EcoR、BamH构建重组质粒。（2）一般试管苗形成后，可进行光合作用合成有机物，利于生长，因此先诱导生成丛芽。（3）将目的基因导入植物受体细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法等。【点睛】注意两种DNA连接酶区别EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶EcoliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。33. 请根据下图回答有关问题:（1）在上图所示的蛋白质工程流程中，A、B分别是_、_。（2）对获得的目的基因可采用_技术以扩增其数量，依据的原理是_。在该过程中所用酶的最大理化特点是_。（3）过程中将构建的基因表达载体导入受精卵常用的方法是_；配制受精卵培养液时，通入一定浓度二氧化碳的目的是_。【答案】 (1). 蛋白质的三维结构 (2). 相应的脱氧核苷酸序列 (3). PCR(多聚酶链式反应) (4). DNA双链复制 (5). 耐高温 (6). 显微注射法 (7). 维持培养液的pH【解析】分析题图：A为蛋白质的三维结构，B表示相应的脱氧核苷酸序列。表示蛋白质工程，表示获取目的基因，表示基因表达载体的构建过程，表示胚胎移植。(1)蛋白质工程的基本途径为：预期蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有氨基酸序列找到对应的脱氧核苷酸序列(基因)。因此,图中A为蛋白质的三维结构，B表示相应的脱氧核苷酸序列。(2)PCR技术可在体外扩增目的基因，其原理是DNA双链复制；PCR技术是在较高温度下进行的，因此该过程所用酶的最大理化特点是耐高温。(3)将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；动物细胞培养时，需要一定的气体环境（95%空气和5%的二氧化碳)，其中一定浓度二氧化碳的目的是维持培养液的pH。【点睛】本题关键要熟悉蛋白质工程的工作流程。34. 下图是“白菜一甘蓝”(均为二倍体)杂种植株培育过程。请据图回答下列有关问题：（1）过程常用_、_去除细胞壁，获得原生质体。过程常用的试剂是_。 （2）过程成功得到杂种细胞的标志是过程是_；过程是_。（3）同白菜和甘蓝的有性杂交后代相比，上述方法得到的新植株理论上_(填“可育”或“不可育”)，原因是_。【答案】 (1). 纤维素酶 (2). 果胶酶 (3). 聚乙二醇(PEG) (4). 杂种细胞再生出细胞壁 (5). 脱分化 (6). 可育 (7). 杂种细胞中有同源染色体，能产生正常的配子【解析】如图是植物体细胞杂交过程，是用纤维素酶或果胶酶处理去除细胞壁获得原生质体，过程采用物理或化学方法促使其发生细胞融合，过程是再生细胞壁,过程是脱分化形成愈伤组织，再分化形成杂种植株。(1)步骤作用是去除细胞壁制备原生质体，最常用的方法是酶解法，即用纤维素酶和果胶酶处理。过程表示原生质体融合，常用的试剂是聚乙二醇（PEG）。(2)过程融合原生质体再生细胞壁，成功得到杂种细胞过程，标志是杂种细胞再生出细胞壁；过程是杂种植物细胞脱分化形成愈伤组织。(3)植物体细胞杂交得到的杂种细胞中有同源染色体，能产生正常的配子，属于可育植株。【点睛】本题关键要熟悉植物体细胞的杂交技术流程以及每步的操作方法。35. 下图是通过小鼠的纤维母细胞获得单克隆抗体的模式图。请回答下列相关问题：（1）Y细胞是_，过程的实质是_。（2）过程需要用_培养基进行筛选，得到的Z细胞还需进行_，经多次筛选，就可以得到能分泌所需抗体的细胞。（3）上图中所用到的生物技术有_。【答案】 (1). 已免疫的B细胞 (2). 基因的选择性表达 (3). 选择 (4). 克隆化培养和抗体检测 (5). 动物细胞培养、细胞融合【解析】据图分析，单抗是指将骨髓瘤细胞与B细胞形成的杂交瘤细胞，所以X为骨髓瘤细胞，Y为效应B细胞，Z为杂交瘤细胞，植物组织培养过程为脱分化和再分化过程，则类似于脱分化过程，是再分化过程，是诱导细胞融合，采用的方法是物理、化学或灭活的病毒，筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞（1）图中的Y细胞表示机体受抗原刺激产生的（效应）B细胞即浆细胞，能够产生特异性抗体；为诱导干细胞的分化过程，其实质基因选择性表达（2）过程表示动物细胞融合，常用灭活的病毒作为诱导剂诱导动物细胞融合但是融合细胞有3种，如XX、YY、XY因此需要在筛选培养过程中必须经过选择培养基才能得到完整的Z细胞，得到的Z细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，即过程，经多次筛选，就可以获得筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞（3）如图中所用到的生物技术有动物细胞培养、细胞融合。
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