口腔清洁护理用品 牙膏中十六烷基氯化吡啶（CPC）的测定 高效液相色谱法(征求意见稿

ICS 71.100.40Y 43QB中 华 人 民 共 和 国 轻 工 行 业 标 准QB/T XXXXXXXXX口腔清洁护理用品口腔清洁护理用品牙膏中十六烷基氯化吡啶(CPC)的测定 高效液相色谱法Oral care and cleansing products Determination of cetylpyridinium chloride in toothpaste High Performance Liquid Chromatography Method点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（征求意见稿）（本稿完成日期：）XXXX - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施中 华 人 民 共 和 国 工 业 和 信 息 化 部 发 布QB/T XXXXXXXXXI前 言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会（SAC/TC492/SC1）归口。本标准起草单位： 本标准主要起草人：本标准为首次发布。 QB/T XXXXXXXXX1口腔清洁护理用品 牙膏中十六烷基氯化吡啶（CPC）的测定 高效液相色谱法1 范围本标准规定了高效液相色谱法测定牙膏中十六烷基氯化吡啶的方法要点、试剂与标准物质、仪器、分析步骤、结果计算、回收率、标准偏差和允许差。本标准适用于牙膏和漱口水中十六烷基氯化吡啶含量的测定。本标准十六烷基氯化吡啶的检出浓度为0.2 g/mL，最低定量浓度为0.70 g/mL。若取0.5 g样品，十六烷基氯化吡啶的检测限为8.0 mg/kg，定量限为28.0 mg/kg。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法3 方法要点将牙膏用80%甲醇水溶液分散，超声波提取其中的十六烷基氯化吡啶成分，然后离心分离并过滤处理，滤液用带紫外检测器的高效液相色谱仪分析测定，外标法通过峰面积进行定量计算。4 试剂与标准物质4.1 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和为 GB/T 6682-2008 规定的一级水。4.2 甲醇：色谱纯。4.3 十六烷基氯化吡啶对照品：含量 99.9%，中国药品生物制品检定所。4.4 25 mmol/L 四甲基氢氧化铵（五水合物）溶液：称取四甲基氢氧化铵五水合物 4.53 g（精确至0.0001g），用水溶解并定容至 1000 mL，乙酸调节 pH 值至 5.0，经 0.45m水相滤膜过滤，并超声脱气 5 min。4.5 水相滤膜：0.45 m4.6 有机相滤膜：0.45 m 。4.7 标准储备液：称取十六烷基氯化吡啶对照品 100.0 mg（精确至 0.0001g），置于 100 mL 棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为含十六烷基氯化吡啶 1000.0 g/mL 标准储备液。4.8 标准工作液：标准储备液用甲醇稀释，配制成浓度为 6.25 g/mL、12.50 g/mL 、25.00 g/mL、50.00g/mL、100.00 g/mL、200.00 g/mL 的标准工作液。5 仪器QB/T XXXXXXXXX25.1 高效液相色谱仪，配紫外检测器。5.2 氰基色谱柱（250mm4.6mm，5m），或具备同等分离效果色谱柱。5.3 涡旋震荡器。5.4 超声波清洗器。5.5 离心机5000 r/min。5.6 分析天平：精度 0.0001 g。6 分析步骤6.1 样品处理牙膏试样先挤去大约20mm，再称取0.5 g（精确至0.0001g）试样于50 mL离心管中，加入数颗研磨玻璃珠，用移液管移入20 mL甲醇水溶液（甲醇：水=80:20（V/V），涡旋震荡至牙膏完全分散，超声提取10 min，5000 r/min离心10 min，取上清液过0.45 m 有机相滤膜，备用。6.2 测定6.2.1 液相色谱参考条件按照表1设定液相色谱条件。表 1 液相色谱条件仪器参数 设定值紫外检测波长/nm 260进样量/L 20流速/(mL/min) 1.5柱温/ 30流动相 25 mM 四甲基氢氧化铵（乙酸调 pH 5.0）：甲醇=20:806.2.2 标准曲线准确吸取4.8制备的标准工作液20 L，分别注入液相色谱仪，按照表1的色谱条件进行测定。以十六烷基氯化吡啶的含量为X轴，其相应的峰面积为 Y轴，绘制标准曲线。十六烷基氯化吡啶标准溶液的液相色谱图，参照附录A 中图A.1 。6.2.3 测定准确吸取20 L经6.1处理的样品溶液，注入液相色谱仪测定十六烷基氯化吡啶峰面积，由标准曲线计算出试样溶液中十六烷基氯化吡啶的浓度。样品溶液的液相色谱图，参照附录A 中图A.2 。7 结果计算试样中十六烷基氯化吡啶的含量X（mg/kg），按着式（1）计算：QB/T XXXXXXXXX3(1)10mKNVCX式中：X 试样中十六烷基氯化吡啶的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C 试样溶液中十六烷基氯化吡啶的浓度，单位为微克每毫升(g/mL)；V 试样定容体积，单位为毫升（mL）；N 稀释倍数；K 标准对照品中十六烷基氯化吡啶的纯度；m 试样质量，单位为克（ g）。计算结果保留一位小数。8 回收率十六烷基氯化吡啶在添加浓度1.96 g/mL200 g/mL范围内，本标准方法的回收率为93.8% 100.2%。9 标准偏差本标准方法的相对标准偏差小于5%（n=6 ）。10 允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的10%。QB/T XXXXXXXXX4A A附 录 A（资料性附录）液相色谱参考谱图图 A.1 液相色谱图图 A.2 牙膏样品液相色谱谱图_