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血液抗凝剂基础知识培训 研发管理中心 2014年2月17日 一 抗凝剂及其种类 1 血液抗凝剂 应用物理或化学方法 除掉或抑制血液中的某些凝血因子 阻止血液凝固 称为抗凝 能够阻止血液凝固的化学试剂或物质 称为抗凝剂或抗凝物质 2 血液抗凝剂种类 天然抗凝剂 肝素 水蛭素等 Ca 2鳌合剂 柠檬酸钠 氟化钾 EDTA 草酸钠 三聚磷酸钠等 二 抗凝剂抗凝机理 1 血液 血液的主要成分为血浆和血细胞 血浆以血浆蛋白为主要固体成分 血浆蛋白质种类繁多 具有多种营养和生理功能 也是恩彼血浆蛋白粉的原料 而血红蛋白则是血细胞的主要成分 血红蛋白分子包含有亚铁血红素 使血液呈红色 二 抗凝剂抗凝机理 二 抗凝剂抗凝机理 2 血液凝固 血液从流动的液体状态变成不能流动的胶冻状凝块的过程即为血液凝固 二 抗凝剂抗凝机理 3 血液凝固机理 血液凝固是由凝血因子参与的一系列蛋白质有限水解的过程 血液凝固的关键过程是血浆中的纤维蛋白原转变为不溶的纤维蛋白 多聚体纤维蛋白交织成网 将很多血细胞网罗其中形成血凝块 凝血因子是血液和组织中直接产于凝血的物质的统称 共有12种 包括钙离子和众多蛋白酶 二 抗凝剂抗凝机理 通常血液体外凝固分为以下三个步骤 1 凝血酶原激活物形成凝血开始到形成凝血酶之前为止 血液与异物表面接触时 无活性的凝血因子通过级联反应被激活 形成凝血酶原激活物 2 凝血酶形成凝血酶原激活物与钙离子相互作用 使凝血酶原分子中的精氨酸 异亮氨酸的键发生断裂而激活 从而使无活性的凝血酶原转变为有活性的凝血酶 3 纤维蛋白形成凝血酶的作用下 纤维蛋白原转变成纤维蛋白凝块的过程 由于凝血酶的作用 纤维蛋白原分子中 键与 键 二 抗凝剂抗凝机理 间的精氨酸 甘氨酸键被断裂 并释放纤维蛋白肽A和B 生成纤维蛋白单体 fibrinmon omer 纤维蛋白单体聚合成为纤维蛋白多聚体 受凝血酶和钙离子的作用而活化的第VIII因子 转谷氨酰胺酶 再与钙离子共同地使纤维蛋白分子中的谷氨酰胺和赖氨酸间产生横键 而形成强固的纤维蛋白块 纤维蛋白交织成网 将很多血细胞网罗其中 最终形成血凝块 二 抗凝剂抗凝机理 血细胞 纤维蛋白 二 抗凝剂抗凝机理 钙离子为凝血过程中必需物质 可促进凝血活素 凝血因子 凝血酶和纤维蛋白的形成 以及激活血小板释放凝血因子反应等 二 抗凝剂抗凝机理 4 抗凝剂抗凝机理 抗凝剂抗凝过程主要通过以下两种途径实现 钙离子螯合途径 抗凝血酶途径 不同的抗凝剂其抗凝原理略有不同 1 EDTA EDTA能与血液中Ca离子结合成螯合物 凝血过程被阻断 血液不能发生凝固 EDTA有二钠 二钾和三钾盐 均可与血液中Ca离子结合成螯合物 使Ca失去活性 中断凝血 二 抗凝剂抗凝机理 过程 从而阻止血液凝固 国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA K2 其溶解度最高 抗凝速度最快 EDTA盐通常配成质量分数是15 的水溶液 每ml血液加1 2mgEDTA 即每5ml血液加0 04ml15 EDTA溶液 EDTA盐可在100 下干燥 抗凝作用不变 2 草酸钠 草酸钠优点是溶解度大 溶解后解离的草酸根与血液中的钙离子形成草酸钙沉淀 使钙离子失去凝血功能 凝血过程被阻断 常用的草酸盐抗凝剂种类有草酸钠 草酸钾 二 抗凝剂抗凝机理 和草酸铵 草酸钠的常用浓度为O 1mol L 与血液按1 9比例使用 3 肝素 肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖 平均分子质量为15000 其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶 结合引起抗凝血酶 构型发生变化 加速凝血酶 凝血酶复合体形成而产生抗凝作用 此外 肝素还能借助血浆辅助因子 肝素辅助因子 来抑制凝血酶 肝素对血液成分干扰较少 不影响红细胞体积 不引起溶血常用肝素抗凝剂是肝素的 二 抗凝剂抗凝机理 钠 钾 锂 铵盐 其中以肝素锂最好 4 柠檬酸钠 柠檬酸钠可与血液中Ca离子结合成螯合物 使Ca离子失去活性 中断凝血过程 从而阻止血液凝固 柠檬酸钠有Na3C6H5O7 2H2O和2Na3C6H5O7 11H2O两种晶体 通常用前者配成3 8 或3 2 的水溶液 与血液按照1 9体积混合使用 有助于 因子和 因子的稳定 并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小 并且其细胞毒性较小 三 抗凝剂功能特点 四 抗凝剂的使用 我公司各血点目前主要以柠檬酸钠为主要使用抗凝剂 抗凝剂的使用主要分为抗凝剂的配制 采血前的准备 采血时的泼洒与搅拌 四 抗凝剂的使用 1 抗凝剂的配制采血班长根据当日屠宰量 须严格按照本血点的 抗凝剂使用标准 和 消泡剂使用标准 配置抗凝剂溶液 抗凝剂溶液中包括消泡剂溶液 未经相关部门同意决不允许私自改动抗凝剂 消泡剂和自来水的添加量 一般 抗凝剂的使用浓度为6 以血液体积计 使用之前 先将抗凝剂配制成10 的溶液 即按每1kg抗凝剂加9kg水的比例配制 配制时 一边加水一边搅拌 使抗凝剂粉末完全溶解至液体清亮透明 无沉淀 不浑浊 四 抗凝剂的使用 2 采血前的准备采血工用自来水清洗隔膜泵和输血管道 然后用2 的抗凝剂溶液清洗隔膜泵和输血管道 并检查隔膜泵是否正常 输血管道是否漏血 做到隔膜泵和输血管道中无血迹和死血块 用自来水清洗制冷罐和血液储罐 然后用2 的抗凝剂溶液清洗制冷罐和血液储罐 并检查制冷罐和血液储罐运行是否正常 相关管路和阀门能否应用 做到制冷罐和血液储罐中无血迹 无积水 无污物 四 抗凝剂的使用 采血工准备采血工具 查看采血工具是否齐全 如 塑料勺 漏勺 20目过滤网 铁钩 搅血推拉板 先用自来水清洗采血工具 然后用2 的抗凝剂溶液清洗采血工具 做到采血工具无血迹 保证采血工具为原有的颜色 屠宰之前 将所需抗凝剂与水按10 的比例调配成抗凝剂溶液 保证抗凝剂完全溶解 配的量根据血点的实际情况而定 在血槽中倒入适量抗凝剂溶液 以将血槽内壁全部润湿为准 决不允许将抗凝剂溶液一次性全部倒入血槽中 四 抗凝剂的使用 3 采血时的泼洒与搅拌在采血过程中 采血工将剩余的抗凝剂溶液必须随着屠宰量的增加而慢慢泼洒至血槽中 并及时搅拌均匀 在采血搅血过程中 采血工须用搅血推拉板 顺着血槽 将前面的血往后拉 后面的血往前推 推拉的动作幅度不应过大 均匀地轻轻的推拉血液 特别要注意血槽死角和边角处的搅拌 猪血先流入血槽一端的搅拌次数须多于另一端的搅拌次数 并且在搅拌过程中要求纵向搅拌 轻搅 勤搅 避免溶血和大量血沫的产生 五 抗凝剂使用注意事项 五 抗凝剂使用注意事项 谢谢