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选修37题4练(B)1.(2018河北衡水中学十五模,37)请回答下列有关生物技术实践方面的问题:(1)培养基配制的步骤为:计算-称量-倒平板;为统计样品中活菌的数目,在37 培养箱中培养适当时间后形成菌落,一般选择菌落数在个的平板进行计数。(2)泡菜虽然好吃,但其中的亚硝酸盐会危害人体健康。亚硝酸盐在特定条件下会转变成,这是一种致癌物,测定亚硝酸盐含量的原理是在条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。(3)腐乳制作的流程是:让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。配制卤汤时,要使卤汤中酒的含量控制在左右。(4)某同学釆用血细胞计数板计数(规格为1625,0.1 mm3),统计4个中方格中的细菌数,计算出每个小格所含细菌的平均数为2个,则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为103)个。(5)对于频繁使用的菌种可将试管放入保藏。2.(2018江西八所重点中学联考,37)牛奶中富含蛋白质,长期饮用有助于增强体质,但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30 000个,以下是牛奶消毒及细菌检测实验。(1)图中步骤称为消毒法,步骤是。(2)进行步骤操作时,应选用下列中的哪种工具?。为了避免杂菌污染,此步骤应在附近进行。(3)将接种后的培养基和作为对照的同时放入37 恒温培养箱中,培养36小时。取出后统计各平板的菌落数,结果如下表所示。应该选择其中稀释倍数为的平板进行计数,经过消毒后的牛奶,细菌数(是/否)符合国家标准。该法测得的细菌数一般比实际结果偏,原因是。牛奶稀释倍数102103104平板1菌落数87101平板2菌落数83121平板3菌落数851003.(2018山东、湖北重点中学冲刺五,37)从土壤中分离尿素分解菌和纤维素分解菌,具有下列类似的操作过程: (1)在过程的选择培养基是培养基,过程的选择培养基是培养基(填“固体”或“液体”)。的具体措施是;的选择措施是。(2)在过程样品梯度稀释后,一般只将稀释度为104106倍的菌液分别接种到3个平板培养基上。接种的常用方法为。(3)过程采用的鉴别方法较简单。周围出现透明圈但不能100%确定为纤维素分解菌的菌落,原因是:。4.(2018河北衡水中学十七模,37)青蒿素是一种无色针状晶体,易溶于有机溶剂,不溶于水,不易挥发,60 以上易分解,主要从黄花蒿中提取。近年来又发现青蒿素具有较强的抗肿瘤作用,某科研小组按如下步骤进行了相关实验:从黄花蒿中提取青蒿素;将等量癌细胞分别接种到4组培养瓶中,适宜条件下培养24 h后除去上清液;向4组培养瓶中分别加入等量含2、4、8、16 mol/L青蒿素的培养液,适宜条件下继续培养;72 h后统计并计算各组的细胞增殖抑制率。回答下列问题:(1)提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法,原因是;根据青蒿素的特点,可采用有机溶剂萃取的方法,现有四氯化碳(沸点76.5 )和乙醚(沸点34.5 )两种溶剂,应选用作为萃取剂,不选用另外一种的理由是。(2)萃取青蒿素的过程应采用加热;加热时常在加热瓶口安装回流冷凝装置,目的是 。(3)科研小组进行上述步骤实验的目的是。步骤中需要设罝对照组,对照组的处理方法为。答案全解全析1.答案(1)溶化灭菌30300(2)亚硝胺盐酸酸化(3)12%(4)81094 冰箱解析(1)制作培养基时,首先按配方计算培养基中各种成分的用量,然后称量溶化灭菌倒平板;选择菌落数在30300的平板进行计数。(2)亚硝酸盐转变为亚硝胺,对人体有害。在盐酸酸化条件下亚硝酸与对氨基苯磺酸反应后,再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料;(3)在卤汤中加酒,一般要控制在12%左右。(4)血细胞计数板计数(规格为1625,0.1 mm3),每个小格所含细菌的平均数为2个,稀释倍数为103,则每毫升样品中的细菌数为216250.11000103=8109(个)。(5)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法,将装有已长成的菌落的试管放入4 冰箱中保藏。2.答案(1)巴氏系列稀释(或梯度稀释)(2)B酒精灯火焰(3)一个未接种的培养基102是少当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的是一个菌落解析(1)图中步骤利用80 、15 min对牛奶进行消毒,此种方法称为巴氏消毒法;步骤是系列稀释(或梯度稀释)。(2)步骤表示采用稀释涂布平板法对微生物进行接种,因此操作时应选用B选项所示的涂布器。为了避免杂菌污染,此步骤应在酒精灯火焰附近进行。(3)将接种后的培养基和作为对照的一个未接种的培养基同时放入37 恒温培养箱中培养36小时。用稀释涂布平板法测定同一样品中的细菌数时,在每一个梯度浓度内,至少要涂布3个平板,确定对照组无菌后,选择菌落数在30300的平板进行记数,求其平均值。表格信息显示:当牛奶稀释倍数为102时,三个平板的菌落数在8090之间,其余的牛奶稀释倍数,三个平板的菌落数均小于或等于12。可见,取出后统计各平板的菌落数,应选择其中稀释倍数为102的平板进行计数,经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是=(87+83+85)3102=8 500(个/mL),而国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30 000个,因此经过消毒后的牛奶符合国家标准。因当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的是一个菌落,所以该法测得的细菌数一般比实际结果偏少。3.答案(1)固体液体以尿素为唯一氮源以纤维素为唯一碳源(2)稀释涂布平板(或平板划线)法(3)倒平板时加入刚果红染液不分解纤维素(或分解刚果红或淀粉)的微生物菌落也可能出现透明圈解析(1)将微生物接种在固体培养基上培养,才能形成菌落,可见,过程的选择培养基是固体培养基。进行梯度稀释并接种前要进行过程所示的选择培养,因此过程的选择培养基是液体培养基。选择培养的目的是筛选尿素分解菌,所以具体的措施是应以尿素为唯一氮源;选择培养的目的是筛选纤维素分解菌,所以的选择措施是以纤维素为唯一碳源。(2)常采用稀释涂布平板(或平板划线)法,将稀释度为104106倍的菌液分别接种到3个平板培养基上。(3)刚果红可与纤维素形成红色复合物,但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。当纤维素被纤维素酶水解后,刚果红纤维素复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。可见,过程采用倒平板时加入刚果红染液的鉴别方法较简单。由于不分解纤维素(或分解刚果红或淀粉)的微生物菌落也可能出现透明圈,所以周围出现透明圈的菌落不能100%确定为纤维素分解菌。4.答案(1)青蒿素不易挥发,不能随水蒸气蒸馏出来(或水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质,而青蒿素不易挥发)易溶于有机溶剂乙醚青蒿素在60 以上易分解,应选择低沸点的萃取剂(2)水浴防止有机溶剂挥发(3)探究青蒿素的浓度与细胞增殖抑制率的关系在另一培养瓶中加入等量的不含青蒿素的培养液,适宜条件下继续培养解析(1)青蒿素不易挥发,不能随水蒸气蒸馏出来,所以提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法;青蒿素易溶于有机溶剂,所以可采用有机溶剂萃取的方法;由于青蒿素在60 以上易分解,因此应选择低沸点的乙醚作为萃取剂。(2)由于有机溶剂易燃,所以萃取青蒿素的过程应采用水浴加热;为防止有机溶剂挥发,加热时可在加热瓶口安装回流冷凝装置。(3)步骤实验的目的是探究青蒿素的浓度与细胞增殖抑制率的关系;步骤中缺少空白对照组,需要设置一组加入等量的不含青蒿素的培养液,在适宜条件下培养作为对照组,以排除细胞自身原因的死亡。
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