草鱼鱼蛋白水解工艺的研究.ppt

草鱼鱼蛋白水解工艺的研究,虽然已有文献报道迟缓爱德华氏菌具有抵抗血清杀菌作用，但其分子机制尚不清楚。为此，将同等菌量的迟缓爱德华氏菌与不同体积的鱼血浆孵育，获取全菌蛋白，进行基于等电聚焦双向电泳的蛋白质组学分析，发现YihK和GpmA为显著上调的差异蛋白。这些发现有助于阐明病原菌对鱼血浆反应的分子机制。根据中国金枪鱼渔业观察员项目于2006年211月在东太平洋水域作业的中国金枪鱼延绳钓渔船上收集的数据，本研究对大眼金枪鱼摄食强度的时空变动进行了分析。结果表明，小个体大眼金枪鱼的摄食强度较大个体大眼金枪鱼高，叉长小于140cm的大眼金枪鱼摄食强度相对较大。34月的摄食强度较小，511月的摄食强度相对较大。3月空胃率相对较高，511月，大眼金枪鱼空胃率均低于15%。200350m水层中的大眼金枪鱼摄食活动非常活跃。各月份和不同叉长组大眼金枪鱼摄食强度均存在显著性差异，且不同水层大眼金枪鱼摄食强度也存在显著性差异。本试验比较研究了黄颡鱼和青梢红鲌在形态学参数、营养组成和A/E比值等方面的差异。结果表明，黄颡鱼的脏体比、肝体比、肠脂比和性腺成熟系数显著高于青梢红鲌（P0.05）。黄颡鱼全鱼、肌肉、卵巢中脂肪含量显著高于青梢红鲌（P0.05），而全鱼和卵巢中蛋白质含量显著高于青梢红鲌（P0.05）。这两种鱼肌肉和卵巢中脂肪酸组成也存在显著差异（P正交子代官井洋自交子代。Gad-1座位对应的1条酶带，正交子代相对迁移率Rf0.082低于其他3个家系的0.096，7528肉眼已能从凝胶上清晰分辨，可将此酶带作为区别正交子代和其他3个子代间的标记。采用随机扩增多态DNA（RAPD）技术对大黄鱼四个子代各20个样本进行群体遗传差异的检测。14条引物共检测到89个位点，各子代的多态位点比例在24.01%29.41%之间，平均遗传杂合度为0.21350.2644，Shannon多样性指数在0.08710.1673之间。遗传多样性水平，反交子代岱衢洋自交子代正交子代官井洋自交子代，提示通过杂交试图提高乃至恢复大黄鱼的遗传多样性水平的方法是可行的。结合生产实际情况，推测反交子代可能同时具有双亲的优良性状，显示出较强的杂种优势，岱衢族雄鱼与闽-粤东族雌鱼的反交组合可能成为大黄鱼杂交育种的最优组合。研究探讨了紫菜共附生真菌Cladosporiumsp.的次生代谢产物的粗提物N5及两种纯化物DLF3、DLF4对坛紫菜（Porphyrahaitanensis）叶状体和丝状体生长的影响。研究结果表明：粗提物N5在低浓度10-810-6mg/mL范围时，对丝状体和叶状体的生长有促进作用，但随N5浓度的升高，促进作用降低，甚至表现抑制作用。,N5在10-6mg/mL时，丝状体日相对生长速率可增长18.8%（p0.01），同时藻胆蛋白的生物合成量相对增加了2.90mg/g；N5在10-8mg/mL时，叶状体日相对生长速率变化较大，增加了2.76%（p0.05），同时藻胆蛋白相对增加量可达14.16mg/g（p0.01）。在10-810-4mg/mL范围内，纯化物DLF3和DLF4对丝状体生长均表现了完全的抑制作用，并且随浓度升高，抑制作用加强。在10-8mg/mL时，DLF3和DLF4分别可降低丝状体日相对生长速率4.5%和76.5%。DLF3和DLF4对叶状体生长影响均极显著（p0.01），低浓度时促进其生长，随浓度升高而表现抑制作用，但最适浓度范围有所不同，分别在10-8mg/mL和10-6mg/mL时表现较强的促进作用，叶状体日相对生长速率分别增加了7.94%和2.00%。香鱼(Plecoglossusaltivelis)是一种名贵的经济鱼类。本研究建立香鱼巨噬细胞培养，检测鳗弧菌对巨噬细胞呼吸爆发和噬菌能力影响。巨噬细胞由头肾组织经梯度离心，贴壁分离来获得，并通过姬姆萨染色证实。进一步的研究发现鳗弧菌（Listonellaanguillarum）可以刺激香鱼巨噬细胞产生呼吸爆发，其还原NBT的能力比静息状态显著性增高。鳗弧菌加入到培养的巨噬细胞，在4h香鱼巨噬细胞大量吞噬细菌，在12h香鱼巨噬细胞内含的细菌减少。这是我国香鱼巨噬细胞体外培养的首次报道，香鱼巨噬细胞对鳗弧菌有很强杀伤能力，是抵抗病原体侵染的重要防线。根据2007年秋季在黄海北部海域进行的定点底拖网调查，对黄鮟鱇（Lophiuslitulon）的摄食生态进行了初步研究。结果表明，北黄海的黄鮟鱇在秋季主要以底层鱼类和虾类为食，优势饵料生物是矛尾虾虎鱼（Chaeturichthysstigmatias）和脊腹褐虾（Crangonaffinis），其中矛尾虾虎鱼在食物组成中所占的比例最高，,免费发布广告jsx,是黄鮟鱇最重要的饵料生物。典范对应分析表明，水深、经度和纬度对黄鮟鱇的食物组成有显著影响（P0.05）。黄鮟鱇摄食矛尾虾虎鱼和脊腹褐虾的体长范围分别是32152mm和3479mm，平均体长分别为80.81.88mm（S.E.）和53.23.11mm（S.E.），它与两种饵料生物的体长之间没有显著的相关关系。黄鮟鱇与矛尾虾虎鱼和脊腹褐虾体长的比率分别为1.195.14和2.386.02，平均值分别为2.670.09（S.E.）和4.230.29（S.E.），黄鮟鱇与两种饵料生物体长的比率与黄鮟鱇的体长之间存在极显著的正相关关系。本文采用常规解剖、石蜡切片、苏木精-曙红染色（H-E）和显微摄像等组织学研究技术，研究了杂食性的鲤鱼和肉食性的鲈鱼肝脏的解剖与组织结构，并对其进行了较为详细的比较。结果表明：两种鱼肝脏的形态、大小、色泽、致密度及胆囊状况等均有区别；组织结构上两种鱼肝脏均外被薄层浆膜，切片上由于伸入肝脏实质内结缔组织较少，很难区分为肝小叶的结构。中央静脉形状多变，且分布很不规则。小叶周缘门管区有小叶间动脉血管、小叶间静脉血管和小叶间胆管分布。胰脏外分泌组织组织包于肝脏组织之内，沿门静脉分枝周围分布，构成肝胰脏，与肝脏组织有薄层结缔组织界膜分开。肝胰脏主要由腺泡构成，腺泡内有泡心细胞。鲤鱼肝胰脏较发达，所含腺泡较多，腺细胞主要含有大量嗜酸性的酶原颗粒，少量腺细胞核致密，胞质被H-E染为桔黄色；花鲈肝胰脏较少且其中所含腺泡较少，腺细胞亦含大量嗜酸性的酶原颗粒。花鲈肝脏内沿门静脉分枝周围分布有大量黑色素巨噬细胞集合体，鲤鱼肝脏中未观察到类似组织结构。,根据2007年秋季在黄海北部海域进行的定点底拖网调查，对细纹狮子鱼（Liparistanakae）的摄食生态进行了初步研究。结果表明，北黄海的细纹狮子鱼在秋季主要以虾类和底层鱼类为食，属于底栖动物食性鱼类，其优势饵料生物是脊腹褐虾（Crangonaffinis）。在调查海域最北部的一个站位，细纹狮子鱼还摄食了较多的大泷六线鱼（Hexagrammosotakii）鱼卵。典范对应分析表明，水深、经度、纬度和体长对细纹狮子鱼的食物组成有显著影响（P0.05）。脊腹褐虾与细纹狮子鱼体长之间呈显著的正相关（r=0.326，P0.05）；脊腹褐虾（r=-0.372，P0.01）和中华安乐虾（r=-0.799，P0.01）与细纹狮子鱼体长的比率与细纹狮子鱼体长之间均呈极显著的负相关关系。回归分析表明，细纹狮子鱼的胃总重和空胃重均随着体长的增加呈指数增长。从患暴发性出血性败血症中华鳖的腹腔液、肠、心、肝、和胃等组织中分离培养得到8株细菌。通过光、电镜观察和16SrDNA序列测定、比对，对所分离细菌进行鉴定。结果表明，它们分别为格氏乳球菌、假单胞菌、海氏肠球菌、屎肠球菌、人苍白杆菌、惰性嗜血杆菌、弗氏柠檬酸杆菌和迟钝爱德华氏菌。用含庆大霉素、头孢唑啉、罗红霉素、阿莫西林和阿米卡星的药敏纸片对格氏乳球菌、弗氏柠檬酸杆菌和迟钝爱德华氏菌进行药敏试验发现，格氏乳球菌对头孢唑啉和阿莫西林中度敏感，抑菌圈直径平均值分别为14mm和16mm；弗氏柠檬酸杆菌对阿莫西林敏感，抑菌圈直径平均值为23mm；迟钝爱德华氏菌对庆大霉素和阿米卡星中度敏感，抑菌圈直径平均值分别为15mm和17mm。,北京DHL电话www.dhl-jsx,采用紫外分光光度法和酶学分析方法研究了盐度（14和36）胁迫下12h内经溶藻弧菌（Vibrioalginolyticus）筛选过的三疣梭子蟹（Portunustrituberculatus）F2代（以下简称筛选蟹F2）的血蓝蛋白含量及血清酶活力的变化，用普通三疣梭子蟹F1代（以下简称普通蟹F1）作为对照。结果表明：在高盐和低盐胁迫下，筛选蟹F2和普通蟹F1的血蓝蛋白含量、三种保护酶（SOD、POD和CAT）和磷酸酶（ACP和AKP）活力随时间变化呈现有升有降的不同变化趋势。另外，无论在低盐还是高盐胁迫下，筛选蟹F2的血蓝蛋白含量和各项血清酶活力分别在0h（正常水平）和盐度胁迫下均显著高于普通蟹F1（p0.05）。总结：低盐和高盐胁迫对三疣梭子蟹的非特异性免疫影响显著且表现出时间效应；在正常和抗盐度胁迫下，筛选蟹F2比普通蟹F1在非特异性免疫因子方面更具免疫优势。采用Winkler法测定水中溶氧含量，通过比较对照呼吸室与试验呼吸室水中溶解氧含量之差确定长蛸耗氧率及窒息点，并在不同程度的溶氧胁迫下测定长蛸体内多种酶的活力变化。结果表明：长蛸耗氧率在一个昼夜内呈现“低-高-低-高”的趋势；耗氧率与水温(1030)呈正相关，与pH值(6.49.2)呈负相关；随着盐度的升高(1431)，长蛸耗氧率表现为两头大,中间平稳,曲线呈凹状分布；雌性长蛸耗氧率高于雄性。窒息点随长蛸体重的增加而降低，平均体重为（30.56.0277）g的长蛸窒息点为0.4179mg/L；平均体重为(54.54.6547)g的长蛸窒息点为0.3902mg/L；平均体重为(9711.3578)g的长蛸窒息点为0.2738mg/L。随着溶氧胁迫程度的增加，LDH活力呈先升后降趋势，脂肪酶活力下降，SOD、POD、CAT、ACP、AKP和蛋白酶活力均呈“降-升-降”趋势。,通过测定黄姑鱼精子的激活率、运动时间及寿命研究了不同环境因子对黄姑鱼精子活力的影响。结果表明，黄姑鱼精液中精子浓度为（1.410.12）1010个/ml；精子激活与运动的适宜盐度为2535、适宜pH为7.58.5。在pH8.08.3、盐度25条件下，精子激活率达（87.005.54）%，运动时间及寿命分别为（33614.02）s及（405.3312.22）s。精子激活与运动的适宜NaCl、KCl、MgCl2及葡萄糖溶液浓度分别为300500mmolL-1、600mmolL-1、8001000mmolL-1及900mmolL-1；精子在CaCl2溶液中有聚集现象出现，且运动时间及寿命明显缩短；精子在缺少HCO3-的人工海水中未能被激活；精子在无Ca2+或Mg2+的人工海水中激活率均超过80%，但运动时间及寿命均有所缩短。于2008年11月在浙江新昌采集20尾光唇鱼，采用垂直聚丙烯酰胺平板电泳，对光唇鱼的肝脏、脾脏、心脏、肾脏、脑、鳃耙、眼睛、背鳍和肌肉等9种组织器官中的10种同工酶进行研究，并分析了其酶谱表型。结果表明，除了过氧化氢酶（CAT）和酸性磷酸酶(ACP)只显示微弱且不稳定的区带外，乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、苹果酸酶(MEP)、醇脱氢酶(ADH)、过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)、淀粉酶(AMY)都显示出清晰稳定的酶谱,且这些酶在表型、分布和活性上均表现出高度的组织特异性,与各组织的生理功能相一致。本文采用正交试验确定了草鱼鱼肉最适酶解条件，在pH6.5、温度45、加酶量0.5%(以鱼肉质量计)、液固比1：1条件下，水解4小时后蛋白质回收率可达到92.63%；为进一步提高蛋白质回收率，又进一步研究了复合蛋白酶与风味蛋白酶双酶水解实验，蛋白质回收率可达到94.51%；实验结果表明3%的酵母粉或4%的活性炭对草鱼鱼蛋白水解液的脱腥苦效果较好。,宠物狗cwg,