2019-2020年高考复习生物学案 第一章微生物培养技术.doc

2019-2020年高考复习生物学案 第一章微生物培养技术【课标要求】进行微生物的分离和培养【知识梳理】背景知识原核类：包括 、 、 、 一、微生物的类群 真核类:包括 、 非细胞类：包括 二、微生物的培养 概念：根据微生物 和 的需要，将各种 混合在1、培养基 一起，配制成适合微生物生存的营养基质。 培养基的种类： 固体培养基（加 ）: 用于微生物的 、按物理性质分为 、 、 等。 液体培养基：用于 。 2、接种：在平板培养基上接种的方法有 、 、 。3、纯培养：通过一定的方法，将 从 中分离出来，获得 ，这个过程称为纯培养。 4、培养： :大多数微生物适宜生长的温度在 之间，实验室中常用 微生物的培养 培养微生物。需要适宜的 :一般细菌适合于 环境生长，放线菌适合于 环境，而酵母菌和霉菌适合于 环境。5、无菌技术：泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。对实验操作的空间、操作者的手进行 。用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行 。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作的整个过程应在 进行。灭菌：是指用 杀死 内外所有的 ，包括芽孢和孢子。消毒：是指用 方法杀死 上的 和 的 。实践案例：大肠杆菌的分离和纯培养配制培养基：此实验中所用培养基为 。接 种：此实验中的接种方法是 。划线的方法包括 和 。 培 养：接种完毕，将培养皿 ，放入 培养24小时。观察记录纯化培养：挑取单个大肠杆菌菌落接种，培养，可获得大肠杆菌的纯培养。如有杂菌，进一步划线挑菌，直至纯化。探究活动：1、从豆科植物根瘤中分离和培养根瘤菌选用 比较完整， 大而 的新鲜 作为材料。2、从酒曲中分离和培养酵母菌：酒曲中含有 、 、 等大量微生物。宜选用 培养基培养，再用 法在 培养基上分离培养。【复习指要】1、学法指导：本节课应初步学会用平板划线法分离微生物并得到某种微生物的纯培养。学会微生物培养的具体操作，并运用所学知识和方法去分离相应的微生物。本节课的微生物分离的方法和无菌技术的知识应引起重视，在高考选择题和实验题中都有可能体现。2、疑难解析：灭菌和消毒：灭菌是指用强烈的理化因素杀死环境或物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒一般是用相对温和的理化方法杀死环境或物体上的病原微生物和有害微生物的营养细胞（不包括芽孢和孢子）。常 灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯用 火焰上灼烧。(1) 灭 干热灭菌：能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）等放入菌 干热灭菌箱内在160170加热12小时。方 高压蒸汽灭菌：将培养微生物的培养基放入高压蒸汽灭菌锅内，在压力98100Kpa,温法 度121条件下，维持1530min。(2) 常用的消毒方法有：煮沸消毒法、射线消毒法和化学药剂消毒法。纯培养：既可以把通过一定的方法，将所需要的微生物从混杂的微生物群体中分离出来，获得纯种微生物的过程称为纯培养。也可以把由一个单细胞繁殖得到的后代称为纯培养。【典题解析】1.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（ ）A.接种环、手、培养基 B.高压锅、手、接种环 C.培养基、手、接种环 D.接种环、手、高压锅解析此题考查学生对无菌技术的掌握。高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。答案C2.不同物理形态的培养基其作用不一样，用于菌种分离、鉴定时可选用（ ）A.液体培养基 B.固体培养基 C.半固体培养基 D.以上都可以解析固体培养基是不流动的，接种后的微生物在固体培养基上可以形成菌落，用于微生物的鉴定、纯化，在选种、育种、微生物计数上应用很广。液体培养基用于大规模培养和工业生产。半固体培养基用于观察微生物的运动、对微生物进行趋化性研究等。答案B【聚焦高考】【自我测评】一、选择题：1.获得纯净培养物的关键是（ ）A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌B.接种纯种细菌C.适宜条件下培养D.防止外来杂菌的入侵2.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱的目的是（ ）A.对比观察培养基有没有被微生物利用B.对比分析培养基上是否生有杂菌C.没必要放入未接种的培养基D.为了下次接种时再使用 3.有关平板划线操作正确的是（ ）A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需要马上塞上棉塞C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置，放入恒温箱中培养4.高温灭菌的原理是（ ）A.每种微生物生长的最适温度是一定的B.微生物对高温环境不适应C.高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动D.高温降低了环境中氧的浓度5.将配制好的培养基进行灭菌应用（ ）A.灼烧灭菌 B.高压蒸汽灭菌 C.干热灭菌 D.煮沸灭菌6.下列属于菌落特征的是（ ）菌落的形状 菌落的大小 菌落的多少 隆起程度 颜色 有无荚膜A. B. C. D.7.灭菌的标准是（ ）A.杀死所有的病原微生物 B.杀死所有的微生物C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子 D.是病原菌不生长8.对不同微生物的培养过程中正确的是（ ）A.细菌培养时将PH调至酸性 B.霉菌培养时将PH调至中性或微酸性C.培养厌氧微生物时则需要提供无氧环境条件D.培养乳酸杆菌时在培养基中不需要添加维生素9.平板划线操作中错误的是（ ） A.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红B.将烧红的接种环在火焰旁边冷却C.接种环在平板上划线位置是随机的D.在挑取菌种谦和接种完毕后均要将试管口通过火焰10.平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是（ ）A.接种时再拿起来方便 B.在皿底上标记日期等方便C.正者放置容易破碎 D.可以使培养基表面的水分更好地挥发11.微生物分离和培养正确方法步骤是( )A.灭菌、培养基的配制、搁置斜面、接种、培养B.培养基的配制、灭菌、搁置斜面、接种、培养C.接种、灭菌、培养基的配制、搁置斜面、培养D.培养基的配制、接种、灭菌、搁置斜面、培养12.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上划3条等长的平行线（3条线均与图中链霉素带接触），将平板置于37条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果看，以下关于链霉素的哪一叙述是不正确的（ ）A.它能阻止结核菌生长 B.它对结核菌比对霍乱菌更有效C.它对结核菌比对伤寒菌更有效 D.它可以用于治疗伤寒病人二、非选择题 13.无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。实验室中常用的消毒方法有 消毒法和 消毒法。常用的灭菌方法有 灭菌、 灭菌和 灭菌。 14.平板培养基上的接种方法有 、 、 。通过平板划线，聚集的多种微生物被 到培养基的表面。在数次划线后，可以分离得到 。【拓展提高】某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的设计实验。1.主要步骤：（1） 。（2）采用 法进行 。（3） 。将培养皿 放入恒温箱。（4）分别挑取两种不同的菌落，重复步骤（2）（3）。2.回答问题：在步骤（1）（2）中，为保证无杂菌感染，实验中应采取的主要措施有 、 、 。第（4）个步骤的目的是 。 第二节 培养基对微生物的选择作用课标要求1简述纤维素的种类及作用2从土壤中分离出分解纤维素的微生物，讨论这类微生物的应用价值。知识梳理背景知识：一、选择培养基 1 定义：能让 微生物生长，抑制 生长，从而将 从 中 出来的培养基。 根据 或 微生物的 要求， 某些物质或 某些 （例如碳源、氮源等），抑制 的生长，从而有利于2 配制 或 生长。原理 根据某些微生物对一些 、 因素的 ，在培养基中添加某种 ，以 不需要的微生物生长繁殖，造成有利于 微生物种类优先生长的条件。3 应用：对微生物进行 和 。 例如：有些微生物可以分解纤维素作为生命活动所需要的 ，可以在固体培养基中加入 作为唯一碳源，从而分离 的微生物。实践案例：用唯一碳源培养基分离微生物 配制培养基： 此培养基为 培养基（注：该培养基不含有微生物生长所需的 ） 倒平板 接种： 采用 进行接种（接种结束后用无菌镊子取 覆盖于培养基上，目的是提供微生物生长的 。 （注意2、3步操作时均需要注意 操作） 培养 探究活动1 分离苏云金芽孢杆菌 未使用农药的田间，染病死亡的棉铃虫等幼虫大多是因为感染了 中毒所致。可以利用棉铃虫、玉米螟、菜青虫为材料，配置 ，采用可分离 的 培养基，分离培养。2 分离分解纤维素的细菌 实践案例只是分离到能分解纤维素的 。可在此基础上选用相关的 培养基，进一步的分离能分解纤维素的 。复习指要1 学法指导：本节课复习要掌握选择培养基及其配制方法，应用选择培养基分离微生物。在上一节课的基础上进一步巩固微生物培养和无菌技术的具体操作，从土壤中分离分解纤维素的微生物。总结分离纯化微生物的方法，根据条件需要选用相应的分离方法。2 疑难解析：从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：第一种是可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物质，从而使它成为一种加富培养基。第二种办法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势。典题解析 1关于选择培养正确的叙述是（ ）A可以增加纤维素分解菌的浓度 B可以减少纤维素分解菌的浓度C所用培养基是固体培养基 D所用培养基是平板培养基解析选择培养是增加纤维素分解菌的浓度，所用培养基是液体培养基，以便于下一步的稀释涂布操作。因此选A。答案 A2纤维素酶可以将那些物质分解（ ）A牛肉片 B鱼片 C滤纸片 D塑料条解析纤维素酶只能使纤维素分解，本题中只有C项滤纸条的主要成分是纤维素，所以选C。答案 C聚焦高考1（xx年北京理综题 20分）某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题：（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选_，这种培养基属于_培养基。（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是_。（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量_的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量_。（4）转为固体培养时，常采用_的方法接种，获得单菌落后继续筛选。（5）若研究“目的菌”的生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用_的方法进行计数，以时间为横坐标，以_为纵坐标，绘制生长曲线。（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行_处理后，才能倒掉。 自我测评一、选择题：1不能消化分解纤维素的是（ ）A人 B牛 C羊 D兔2用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（ ）A未接种的选择培养基B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D接种了的选择培养基3要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在（ ）A加入指示剂的鉴别培养基上 B含有蛋白胨的固体培养基上C只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上D含四大营养要素的培养基上4寻找纤维素分解菌应到（ ）A 湿润的环境中 B富含纤维素的环境中 C富含无机盐的环境中 D池塘中5在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养，其主要目的是（ ）A完全除去其它微生物 B没有意义，去掉这一步更好C增加纤维素分解菌的浓度 D使纤维素分解菌充分长大6鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成的，这些物质是（ ）A指示剂或化学药品B青霉素或琼脂C高浓度食盐D维生素或指示剂7生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌，其新陈代谢类型是（ ）A自养需氧型 B异养厌氧型 C异养需氧型 D自养厌氧型 8使用选择培养基的目的是（ ）A培养细菌B培养真菌C使需要的微生物大量繁殖D表现某微生物的特殊形状，与其它微生物加以区别9筛选出纤维素分解菌后还需要用下列哪一实验来确定（ ）A发酵产纤维素酶B发酵产纤维素C纤维素酶分解滤纸D纤维素分解产生葡萄糖10纤维素酶能够分解（ ）A 纤维素的微生物 B淀粉的微生物 C纤维素 D淀粉11选择培养的结果：培养液变（ ）A 清澈 B浑浊 C红色 D产生透明圈12某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R比较理想的方法是采用（ ）A天然培养基 B稀释涂布平板法C利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D用显微镜直接观察、寻找，再培养二、非选择题13培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质。先用完全培养基培养混合菌种，然后分别放在A、B、C三种特殊培养基上培养，分别得到菌落、；其中A培养基以蛋白质为唯一碳源；B培养基中缺氮源；C培养基中成分如下表：成分粉状硫MgSO47H2O(NH4)2SO4FeSO4KH2PO4CaCl2H2O剂量10g0.5g0.4g0.01g4g25g100ml请分析回答：菌落同化作用类型最可能的是（ ）A 光能自养型 B化能自养型 C异养型 DA或B如果要获得具有固氮能力的菌株，应选用菌落 ；如果要培育获得大量蛋白酶的菌株，应选用菌落 。从题中分析可见，生物进化的内在因素是 ，对生物生存起决定作用的因素是 。在细菌种群进化过程中，其主要作用的变异来源是（ ）A 环境条件 B基因重组 C基因突变 D染色体变异14下表是一种培养基的配方。请回答：成分牛肉膏蛋白胨琼脂NaCl水重量0.5g1g2g0.5g100ml此培养基的营养要素有 类，其中蛋白胨主要提供的是 。各成分重量确定的原则 。在各种成分溶化后分装前，需进行的是 。该培养基按物理性质划分属于 培养基，能培养的细菌代谢类型是 。如要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标，需加入 ，观察它的 特征。此培养基能否用于培养产生人的生长激素的工程菌？ 。原因是 。若有几种杂菌混合在一起，可采用什么方法将它们分离？ ；如细菌中混杂有酵母菌，要将酵母菌分离出来，可采用 。拓展提高大肠杆菌在人体肠道内一般不致病，能合成维生素B和维生素K，对人体有益，但某些菌型能引起婴儿腹泻，侵入人体其它部位可引起感染，大肠杆菌在粪便中数量极多，请据此回答：在人的消化道内，大肠杆菌利用的碳源主要是 ，其利用的氮源主要是 。其代谢类型属于 。检查水源是否被粪便污染的标志是 。检查的方法是：在培养基中加入 和 ，取水样 ，如果有 其代谢产物就与之结合使菌落呈 ，并带有 。 德州一中 赵俊霞第三节测定微生物的数量课标要求1 研究培养基对微生物的选择作用。2 进行微生物数量的测定。知识梳理背景知识一、测定微生物数量的方法：1 ：常用的是 ，该方法的优点是：所需 ，可 得到结果，而且在计数的同时能 ，缺点是：死细胞与活细胞不能区分；细胞密度低于106/ml便不能保证视野中能见到所有细胞；难以计数 的细菌。2 ：常用的是 ，这种方法在样品中含菌数 的情况下，也可以完成计数，注意该方法需要将待测样品制成均匀的 ，尽量使样品中的 ，应用该种方法可以推算出检测样品中的 。实践案例：土壤中好气性细菌的计数制备土壤稀释液 取 的土样；制备系列稀释液取样及倒平板 该实验的接种方法是 。 培养 观察记录 （实验用到的实验设计原则：平行重复原则、对照实验原则 理解实验原则选取的目的） 结果：每克土壤样品菌数= 探究活动：测定样品中的微生物数量1 检测天然水源中细菌总数和大肠菌群数 细菌总数通常是指 检测样品中所含 的总数。大肠菌群数通常是指 检测样品中所含 的实际数值。2 检测某种食品中的菌落总数和大肠菌群数一般说来， 总数越多，说明食品的卫生质量 。3土壤中分解尿素细菌的计数某些细菌中含有 ，能将培养基中的 分解成 ，该物质的水溶液会使 指示剂呈现 。复习指要 1、学法指导：本节课应学会微生物数量测定的方法，学会各种方法的具体操作。间接计数法中的最常用的是稀释涂布平板法，注意该种方法中系列稀释液的制备，掌握间接计数法计数微生物数量的计算方法。2、疑难解析：以本节实验为例着重复习制备系列稀释液的方法是：将1g土样放入99ml无菌水中，制成102倍的稀释液，用1ml无菌移液管吸取上述浓度的溶液0.5ml，移入装有 4.5ml无菌水的试管中，即配制成103倍的稀释液，用同样的方法可以配制成104、105、106倍的稀释液。将待测样品进行稀释的目的是使微生物细胞分散开，使实验结果更接近真实值。典题解析1 分析下面培养基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答：在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是 和 。想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又是如何进行选择的？解析碳源是提供碳元素的物质，氮源是提供氮元素的物质。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。绝大多数生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以这种培养基对微生物有选择作用。选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。答案葡萄糖 尿素 有选择作用。因为此配方中尿素是唯一的氮源，所以只有能够利用尿素的微生物才能够生长。2 产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（ ）A一个细菌，液体培养基 B许多细菌，液体培养基C一个细菌，固体培养基 D许多细菌，固体培养基解析菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上肉眼看见，是作为菌落鉴定的重要依据，若是多种细菌形成的菌落则不是标准菌落。答案C聚焦高考自我测评1要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ）A加入青霉素的培养基B固体培养基C加入高浓度食盐的培养基D液体培养基2用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（ ）A涂布了一个平板，统计的菌落数是230B涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、240和250，取平均值163D涂布了一个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值2333在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有（ ）由于土样不同由于培养基污染由于操作失误没有设置对照A B C D4请选出下列正确的操作步骤（ ）土壤取样 称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中 吸取0.1ml进行平板涂布 依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度 . . . 5关于测定土壤中细菌的数量，正确叙述是（ ）A一般选用103-107倍的稀释液分别涂布B测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释C测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释D当第一次测定某种细菌的数量，可以将102-107倍的稀释液分别涂布到平板上培养6某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）（ ）A2.34108 B2.34109 C234 D23.47可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（ ）A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂8用稀释涂布混合平板法来统计样品中活细菌的数目，其结果与实际值相比（ ）A比实际值高B比实际值低C和实际值一致D比实际值可能高也可能低9测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量，一般选用102、103和104倍稀释，其原因是（ ）A细菌个体小，真菌个体大B细菌易稀释真菌不易稀释C细菌在土壤中含量比真菌高D随机的，没有原因10进行系列稀释时，按怎样的顺序进行（ ）A稀释度递增B稀释度递减C不论稀释度大小DA、B两项均可二、非选择题11统计菌落数目一般用稀释涂布平板法，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个 ，来源于样品稀释液中的一个 。统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 个菌落数。12在微生物数量测定时，选取具有 菌落数的稀释倍数并计数。选择的原则是：细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有 个菌落数为宜，霉菌以每个培养皿内有 个菌落数为宜，另外同一稀释倍数各个重复的菌落数 。13将10ml酵母菌培养液在适宜温度下培养，并于不同时间等量均匀取样4次，分别测定样品中酵母菌的数量和PH值，结果如下。请分析回答：样品酵母菌数量（个/mm3）PH112104828205431210374100050（1）表中样品的取样先后次序为 。（2）对酵母菌而言，10ml该培养液的环境负荷量为 。（3）若第五次均匀取样时，样品中的酵母菌数量为760个/mm3，产生这种结果的原因是 。 拓展提高科学工作者做了这样一组实验，把被农药污染的土壤分成两组，一组土壤高压灭菌，另一组土壤不灭菌，然后把两组土壤放入温室中培养数周后，结果如下图，请回答：高压灭菌组为曲线 ；对照组为曲线 。A曲线的形成原是 。B曲线的形成原因是 。 农 药 含 A 量 B 1 2 3 4 5 6 7 周期选修一 参考答案第一章 微生物培养技术第一节 微生物的分离和纯培养【知识梳理】细菌、放线菌、立克次氏体、支原体 酵母菌、霉菌 病毒 生长繁殖、代谢、营养物质 凝固剂、筛选、鉴定、育种、计数 工业生产 平板划线法、稀释涂布平板法、稀释混合平板法 所需要的微生物 混杂的微生物群体 纯种微生物 PH、温度、2540 、2830 、中性、偏碱性、微酸性 消毒、灭菌、酒精灯火焰附近 强烈的理化因素、环境或物体、微生物、相对温和的理化方法、环境或物体上、病原微生物、有害微生物、营养细胞 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、平板划线法、连续划线法、交叉划线法、倒置、37恒温箱中 根系、根瘤、内部红润、豆科植物 霉菌、酵母菌、细菌、酸性液体、划线分离法、固体【自我测评】一、选择题1D 2B 3D 4C B B C C C 10D 11B 12D二、非选择题13. 射线、化学药剂、灼烧、干热、高压蒸汽14. 平板划线法、稀释涂布平板法、稀释混合平板法、分散、由一个细菌繁殖而来的菌落【拓展提高】1.（1）配制培养基 （2）平板划线 接种 （3）培养 倒置2. 培养基高压蒸汽灭菌、接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌、接种过程在酒精灯火焰附近进行、获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌第二节 培养基对微生物的选择作用【知识梳理】特定的 其它微生物 所需要微生物 混杂的微生物群体 分离 某一种 某一类 特殊营养 加入 除去 营养物质 某一类群 某一种特定的微生物 物理 化学 抗性 化学物质 抑制 特定 分离 纯化 碳源 纤维滤纸 能分解纤维素原料称量、溶解 调节pH 分装、包扎 灭菌赫奇逊 碳源 稀释涂布平板法 无菌滤纸 碳源 无菌 苏云金芽孢杆菌 菌液 苏云金芽孢杆菌 选择 微生物类群 选择 细菌聚焦高考答案：（1）目的菌 选择（2）化合物A 异养需氧型（3）减少 增加（4）划线（5）定期取样 细菌数目的对数（6）灭菌【自我测评】一、选择题1A 2C 3C 4B C A B C A 10C 11B 12C二、非选择题13 B 遗传和变异 外界环境条件 C 14. 五 氮源 生长因子 根据所培养微生物的营养需要 调pH 固体 异养型 伊红美蓝 菌落 不能 液体培养基常用于生产 平板划线法或稀释后涂布平板；培养基中加入青霉素拓展提高葡萄糖、氨基酸、脂肪酸和甘油等含碳有机物 氨基酸等含氮有机物 异养厌氧型水中是否有大肠杆菌 伊红 美蓝 培养 大肠杆菌 深紫色 金属光泽第三节 测定微生物的数量知识梳理直接计数法 显微镜直接计数法 设备简单 迅速 观察所研究微生物的形态特征 微小 间接计数法 稀释平板计数法 较少 系列稀释液 微生物细胞分散开 活菌数 土壤表层3-5cm处 稀释混合平板法 某稀释倍数的菌落平均数稀释倍数/涂布平板时所用稀释液的体积 1g或1ml 细菌菌落 每100g或100ml 大肠菌群 菌落 越差 尿素分解酶 尿素 氨 酚红 红色自我测评一、选择题1 2 3 4 10 二、非选择题 11菌落 活菌 少 1 12合适 30-300 10-100 相差不太悬殊 13. 2 4 1 3 1.21107 培养液中的营养物质不断被消耗，部分酵母菌因营养缺乏而死亡并解体。拓展提高 A B 高压灭菌杀死了土壤中的微生物，农药分解慢 没有经过灭菌，土壤中的微生物能分解农药且速度快。第二章 食品加工与食品安全第一节 发酵与食品加工 德州一中 生物教研组 杨书风 审稿人：德州实验 侯洲彤【课标要求】尝试利用微生物进行发酵来生产特定的产物、运用发酵食品加工的基本方法。【知识梳理】背景知识一、发酵的定义: 在生产中，利用微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备 及 的过程。二、发酵的分类：1、根据发酵过程对氧的需求可分为 和 。2、根据发酵生成产物，可分为 和 等。三、发酵的过程：例一：食用酒精 1、发酵的方法： 。2、发酵的原料：通常选用高粱、玉米、大麦等谷物以及红薯作为酿制 的原料，选用葡萄、苹果等作为酿制 的原料。3、发酵选用的菌种： ，其代谢类型为 。4、发酵的原理：先将淀粉水解成葡萄糖；再利用酵母菌分解葡萄糖生成 ，丙酮酸在厌氧和微酸条件下，转变成 。例二：果醋1、发酵的方法： 。2、发酵的原料：通常选用 作为酿制果醋的原料。3、发酵选用的菌种： ，其代谢类型为 。4、发酵的原理：在适宜的条件下，醋酸菌能将 分解成醋酸；当糖类不足时，还可以将 转变成 ，进一步将 转变成醋酸。实践案例：酒精案例酒精在生产、生活中使用广泛，在医药上常用于 和 ，在工业生产中常用作 和 ，在食品制造中常用来配制 。1、配制培养基 按 配方配制培养基，分装，灭菌。2、接种培养 接种微生物 。3、蒸馏 因为酒精的沸点 于水，所以先被蒸馏出来，用锥形瓶收集。4、结果分析 用 测量所得酒精的酒精度。探究活动：利用微生物发酵技术可以制作白酒、果酒、果醋、氨基酸、有机酸、维生素等。利用酵母菌生产的真菌蛋白质食品，是从微生物的菌体中获得的蛋白质，称为 。1、制作果酒以苹果为原料，制作果酒。可先将原料切成小块蒸煮，使果肉稍软，然后冷却至30-36OC，再接种 ，充分进行发酵后， 可得果酒。2、制作果醋选用新鲜葡萄作为原料，榨取果汁，然后接种 ，可得果酒，再以果酒为原料，接种 ，制作果醋。【复习指要】1、学法指导：本节课应初步学会运用发酵食品加工的基本方法。学会微生物发酵的具体操作，并运用所学知识和方法去进行发酵生产。本节课的微生物发酵的原理和发酵过程的知识应引起重视，在高考选择题和实验题中都有可能体现。2、疑难解析：酒精发酵：葡萄糖分解为丙酮酸，丙酮酸在厌氧和微酸性条件下转变成酒精。酒精发酵的总反应式：C6H12O6 + 2ADP+2Pi2C2H5OH + 2CO2+2ATP乳酸发酵：乳酸发酵乳酸发酵也不需要氧的参与，1分子葡萄糖经乳酸发酵后，形成2分子乳酸。乳酸发酵的总反应式是：C6H12O6 + 2ADP+2Pi2C3H6O3 + 2ATP【典题解析】1.下列关于果醋的制作，错误的是（ ）A.果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，所以在制作过程中需通氧气 B.醋酸菌是一种嗜温菌，温度要求较高，一般在50度左右C.醋酸菌能将果酒变成果醋 D.当氧气、糖源充分时，醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸解析醋酸菌是好氧菌，所以发酵过程中要适时地通入氧气；醋酸菌的最适生长温度是30-35度；在糖、氧气充足时，醋酸菌能将葡萄中的糖分解成醋酸；当缺少糖时，可以把乙醇氧化成醋酸。答案B2.用酵母菌发面做馒头时，若发面的时间过长，面里的含水量会增加。其原因是酵母菌（ ）A.长时间的无氧呼吸产生大量的水 B.有氧呼吸产生二氧化碳和水 C.自身有机物氧化分解产生水 D.使面粉中的结合水转变成自由水解析酵母菌发面是有氧呼吸，在此过程中产生的水是有氧呼吸第三阶段H和氧气结合形成的。同时还产生一些酸类物质需用碱中和，否则馒头发酸不好吃。答案B【聚焦高考】例1.（xx年广东高考综合题）利用酵母菌发酵生产酒精时，投放的适宜原料和在生产酒精阶段要控制的必要条件分别是A、玉米粉和有氧 B、大豆粉和有氧 C、玉米粉和无氧 D、大豆粉和无氧讨论：本题的命题意图是考查利用利用酵母菌进行酒精发酵时所需的条件，属于理解层次。大豆粉的主要成分是蛋白质；而玉米粉的主要成分是糖类（淀粉）。酵母菌属于兼性厌氧微生物，在无氧条件下能生产酒精。答案：C。【自我测评】一、选择题：1.下列关于酵母菌的叙述中，错误的是 （ ）A.酵母菌是异养生活的真菌B.酵母菌无氧呼吸时能产生乳酸C.酵母菌在有氧气存在时，能将葡萄糖分解成二氧化碳和水D.酵母菌的无氧呼吸是发酵2.与醋酸发酵相关的微生物是（ ）A.一种真菌和另一种细菌 B.丝状真菌和细菌C.酵母菌和细菌 D.酵母菌和丝状真菌 3.甲酵母菌进行有氧呼吸，而乙酵母菌进行无氧呼吸，若它们消耗了等量的葡萄糖，问它们共同放出的二氧化碳和吸入的氧气的体积之比是（ ）A.1：2 B.1：1 C.2：1 D.4：34.利用酵母菌酿酒时，一开始持续通入空气后再封闭，其结果是 （ ）A.酵母菌大量死亡，酒精减产 B.酵母菌数量不变，酒精增产C.酵母菌数量增多，酒精增产 D.酵母菌数量增多，不产生酒精5.酵母菌进行有氧呼吸和酒精发酵分解葡萄糖，如果两种作用产生了等量的二氧化碳，那么两种作用消耗葡萄糖的量之比是（ ）A.1：2 B.2：1 C.1：3 D.3：16.葡萄酒呈现红色的原因是（ ）A.在发酵过程中产生了红色物质 B.在发酵的最后程序中，加入了红色的食用色素 C.红色葡萄皮中的色素溶解在发酵液中 D.酒精发酵的最终产物是红色的7.下列哪项操作会引起发酵液受污染（ ）A.榨汁机用温水冲洗，并晾干 B.发酵瓶先用温水冲洗，再用75%的酒精擦拭后晾干C.葡萄先除去枝梗，再冲洗多次 D.每次排气时，只拧松瓶盖，不能将盖完全揭开8.果汁发酵后，检测是否有酒精产生，可用（ ）A.斐林试剂 B.苏丹III或IV C.双缩脲试剂 D.重铬酸钾溶液9.制果醋时，要适时通过充气口进行充气是因为（ ）A.醋酸菌是好氧菌，将酒精变成醋酸时需要氧气的参与B.酵母菌进行酒精发酵时需要氧气C.通气，防止发酵液霉变D.防止发酵时产生的二氧化碳过多而引起发酵瓶的爆裂10.在发酵条件的控制中，错误的是（ ）A.葡萄汁装入发酵瓶时，要留有约1/3的空间 B.要想一次得到较多的果酒，在葡萄汁装入发酵瓶时，要将瓶装满C.制葡萄酒的过程中，除在适宜的条件下，时间应控制在10-12d左右 D.制葡萄醋的温度要比制葡萄酒的温度高些，但时间一般控制在7-8d左右11.对发酵中灭菌的理解，不正确的是( )A.防止杂菌感染 B.灭菌就是杀死培养基中的一切细菌C.培养基和发酵设备都必须消毒 D.灭菌必须在接种前12.以下发酵产品中不属于微生物代谢产物的是（ ）A.味精 B.啤酒 C.“人造肉” D.人生长激素二、非选择题 13.有人用酵母菌在含有葡萄糖的培养液中进行培养，测定单位时间内的吸氧量（气体体积）和二氧化碳的发生量（气体体积）。请回答下列有关问题：（1）在酵母菌只进行有氧呼吸时，其吸氧量和二氧化碳的发生量 。（2）与酵母菌相比，乳酸菌细胞结构的主要差别是 。（3）用酵母菌酿酒的开始阶段即充分供氧的情况下，酵母菌大量繁殖的方式是 。（4）密封发酵阶段，酵母菌的新陈代谢的方式是 。（5）此时，酵母菌若分解360g葡萄糖，则可生成 mol的乙醇。（6）当这一密封的培养液中的乙醇达到一定量后，二氧化碳不再增加的原因可能是 。 14.将10ml酵母液放在适宜温度下培养，并于不同时间内等量均匀取液4次，分别测定样品中酵母菌的数量和pH，结果如下表。请分析回答：样品酵母菌数量（个/mm3）pH112104.828205.4312103.7410005.0（1）表中样品的取样先后次序为 。（2）对酵母菌而言，10ml该培养液的环境负荷量为 个。（3）若第五次均匀取样时，样品中酵母菌的数量为760个/ mm3，产生这一结果的原因是