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2019-2020年高三生物第一轮总复习 第一编 考点过关练 考点43 DNA和蛋白质技术1xx江苏高考 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，错误的是()A酵母和菜花均可作为提取DNA的材料BDNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水C向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物DDNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝解析：酵母和菜花都含DNA物质，都可用来提取DNA，A项正确。DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小，所以DNA在2 mol/L的NaCl溶液或者蒸馏水中都能溶解，B项正确。鸡血细胞加水搅拌，细胞吸水涨破释放出DNA，DNA存在于溶液中，C项错误。DNA与二苯胺在沸水浴条件下反应，冷却后变蓝，D项正确。答案：C2xx江苏高考某同学用洋葱进行DNA 粗提取和鉴定实验，操作错误的是()A加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNAC加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析：加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作，A错误；利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开，起到纯化的作用，B正确；加入酒精溶液，静置溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA，用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌，防止断裂，C正确；用二苯胺鉴定DNA需要水浴加热，D正确。答案：A3xx江苏高考下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是()A洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后变蓝C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA 的提取D用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA 获得量减少解析：本题考查DNA提取和鉴定。DNA溶解度与洗涤剂无关，DNA与二苯胺在沸水浴条件下反应，冷却后变蓝；用玻璃棒搅拌，使DNA吸附在玻璃棒上，且DNA量不会减少。答案：C1xx上海普陀一模下列有关蛋白质和DNA的提取和分离的说法，正确的是()A可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪红细胞中提取DNA和蛋白质B提取DNA时，可用不同浓度的NaCl溶液反复溶解以析出蛋白质C透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜D用玻璃棒快速搅拌有利于提取DNA解析：哺乳动物的成熟的红细胞没有细胞核，不能提取到DNA；不同浓度的NaCl溶液反复溶解去除杂质，并在0.14 mol/L时，溶解度最小，析出DNA；用玻璃棒快速搅拌容易使DNA断裂，不利于DNA的提取。答案：C2xx安徽蚌埠检测下列关于操作过程的叙述中错误的是()APCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌BPCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在20 储存CPCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化D在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换解析：为了防止外源DNA等因素的污染，PCR反应中所用的微量离心管、枪头、缓冲液及蒸馏水等，在使用前要进行高压灭菌；还要将所用的缓冲液和酶分装成小份；并且使用一次性吸液枪头，则A、B、D三项都正确。在使用前，将PCR所需试剂从冰箱内拿出后，应放在冰块上缓慢融化，则C项错误。答案：C3xx江苏扬州中学检测下列有关血红蛋白提取和分离的程序的描述，不正确的是()A采血时在采血器皿中加柠檬酸钠是为了防止血液凝固B混合液离心后分为4层，从上往下，第4层是血红蛋白水溶液C经过透析可对样品进行粗分离，透析的目的是除去分子量较小的杂质D通过凝胶色谱法可以除去分子量较大的杂蛋白解析：血液离体后会凝固，采血时在采血器皿中加柠檬酸盐可以防止凝固；透析袋能使小分子自由出入，而血红蛋白等大分子则保留在袋内；通过凝胶色谱法可以将相对分子质量大的杂质蛋白除去；混合液离心后分为4层，从上往下，第3层是血红蛋白水溶液。答案：B4xx湖北黄冈检测已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如下图所示，下列有关该样品中蛋白质的分离的叙述正确的是()A将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内，则分子丙也保留在袋内B若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快C若将样品以2000 r/min的速度离心10 min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存在于沉淀中D若用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远解析：分子甲的相对分子质量最小，进入凝胶内部通道而移动速度最慢；分子乙留在透析袋内，说明其相对分子质量比较大，分子丙比分子乙相对分子质量大，所以分子丙也留在袋内；分子戊比分子甲的相对分子质量大，故离心后分子甲可能不存在于沉淀物中；SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的样品，其电泳迁移率取决于分子的大小，相对分子质量相差越大，形成的电泳带相距越远。答案：A5xx安师大附中月考下列对PCR扩增实验的描述错误的是()A实验中通过加热使目的基因DNA解旋，没有加入解旋酶和ATPB在设计2种引物时，需要让引物和引物之间的碱基序列互补C缓冲溶液中要提供DNA模板、引物、原料、耐热的DNA聚合酶D为避免外源DNA污染，实验中的枪头、缓冲液等在使用前必须高压灭菌解析：PCR过程中不需要解旋酶和ATP，A正确；PCR需要DNA模板、引物、原料、耐热的DNA聚合酶、缓冲溶液等条件，C正确；若外源细菌、病毒等的DNA随枪头、缓冲液等进入PCR反应体系，将影响PCR反应，D正确。两种引物之间不能互补，引物自身折叠后也不能互补，引物应与相应的DNA模板连的3端是互补的，B错误。答案：B6xx江苏无锡期末DNA分子经PCR反应循环一次后，新合成的那条子链的脱氧核苷酸的序列应与()A模板母链相同B非模板母链相同C两条模板母链相同D两条模板母链都不相同解析：PCR反应的原理是DNA复制技术，遵循DNA碱基互补配对原则，以DNA的一条链为模板合成新的子链，新合成的那条链的脱氧核苷酸的序列应与非模板母链相同。答案：B7xx山东泰安期末下列关于DNA的粗提取与鉴定实验的相关叙述，错误的是()A可以选择DNA含量较高的生物组织为材料，如鸡的血细胞BDNA不溶于酒精，且在0.14 mol/L的氯化钠溶液中析出C可以利用嫩肉粉把杂质多糖和RNA去除D洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有DNA的滤液解析：鸡血细胞中含DNA，可作为提取DNA的生物组织材料，但不可选用哺乳动物成熟的红细胞；DNA不溶于酒精，NaCl溶液浓度为0.14 mol/L时DNA溶解度最小，此时可大量析出；嫩肉粉中含有蛋白酶，可将蛋白质水解，从而除去蛋白质；洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有DNA的滤液；故C不正确。答案：C8xx河北质检如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。(1)图中实验材料A可以是_等，研磨时加入的B应该是_。(2)通过上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是_，再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是_ _。(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2 mL的4种溶液中，经搅拌后过滤，获得如表所示的4种滤液，含DNA最少的是滤液_。1B液中搅拌研磨后过滤滤液E22 mol/L的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液F30.14 mol/L的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液G4冷却的95%的酒精溶液中搅拌后过滤滤液H(4)DNA鉴定的原理是_。答案：(1)洋葱(菜花等)洗涤剂和食盐(2)使DNA溶解使DNA(溶解度下降而沉淀)析出(3)H(4)在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈蓝色9xx雅礼中学模拟某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10 g。剪碎后分成两组，一组置于20 、另一组置于20 条件下保存24 h。DNA的粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤。取滤液备用。第二步：先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液，再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取6支试管，分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。材料保存温度花菜辣椒蒜黄20 20 分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验课题名称是_。(2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少_。(3)根据实验结果，得出结论并分析。结论1：与20 相比，相同实验材料在20 条件下保存，DNA的提取量较多。结论2：_。针对结论1，请提出合理的解释：_。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：_，然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。解析：(1)从表格可以看出，该实验有两个自变量：材料和温度。所以该探究性实验课题名称为探究不同材料和不同温度对DNA提取量的影响。低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢，提取的DNA较多。(2)第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取DNA絮状物，所以若速度快，易造成DNA的断裂。(3)本实验的结论可从两个方面来考虑：相同材料在不同温度下的结论；不同材料在相同温度下的结论。(4)氯仿能使蛋白质变性，而对DNA影响极小，所以可将第三步获得的溶液与氯仿混合，又氯仿密度大于水，所以蛋白质沉淀位于溶液下部，DNA位于上清液中。答案：(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)DNA的断裂(3)等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混和，静置一段时间，吸取上清液10xx上海普陀区期末在基因工程中通常需要利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR如图所示，包括三个基本反应步骤：模板DNA的变性：模板DNA经加热至93 左右一定时间后双链解离；模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55 左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板引物结合物；引物的延伸：DNA模板引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，合成一条新的与模板DNA 链互补的脱氧核苷酸链。重复循环变性退火延伸三过程，就可获得较多的目的基因。(1)温度降至55 左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板引物结合物时所遵循的原则是_。(2)在PCR技术中，引物的作用是_。(3)从理论上推测，第三轮循环产物中含有引物B的DNA片段所占比例为_。(4)下图表示利用PCR技术获取目的基因X的第一次循环产物。则至少需要在第_轮循环产物中才能开始出现独立且完整的X基因。如果经过n次循环，则产物中所示DNA分子数为_。解析：分析文字与图形，获取信息：与靶序列两端互补的寡核苷酸引物与靶序列之间通过碱基互补配对原则结合，并引导子链延伸；读图可知，1次循环产物中的DNA分子的两条链不等长；且1个DNA分子含引物A,1个DNA分子含引物B；据此类推，n次循环获得的2n个DNA中：产物中、所示DNA分子数各1个，独立且完整的X基因2n4个；含引物A的DNA分子2n1个，含引物B的DNA分子2n1个，含引物A和引物B的DNA分子2n2个。基因工程中需要大量目的基因，PCR循环中获得的并不都是独立完整的X基因。以极少量的目的基因为模板，重复循环变性退火延伸三过程，就可获得较多的目的基因。在第3轮循环产物中开始出现独立完整的X基因，随着循环次数的增加，独立完整的X基因所占比例越大。DNA模板与引物结合时遵循碱基互补配对原则；引物能与模板链碱基互补配对，引导并作为子链合成的起点；第三轮循环产物中含有引物B的DNA片段所占比例为(231)/237/8；至少需要在第3轮循环产物中才能开始出现独立且完整的X基因。如果经过n次循环，则产物中所示DNA分子数为1个。答案：(1)碱基互补配对(2)能与模板链碱基互补配对，引导并作为子链合成的起点(3)7/8(4)31个 1下列关于物质分离的原理及操作不正确的是()A提取玫瑰精油时直接加热，提取胡萝卜素时采用水浴加热B在凝胶色谱法的洗脱过程中，大分子物质不能进入凝胶内部而最先流出CSDS聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中，蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小D分离红细胞时应进行低速长时间离心处理 解析：选项A，提取玫瑰精油可直接加热，胡萝卜素的提取过程采用水浴加热，因为后者用的是有机溶剂，明火加热容易引起燃烧、爆炸；选项B凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成。在小球内部有许多贯穿的通道，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢，而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离；选项C，SDS能与各种蛋白质分子形成蛋白质SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差异，使电泳迁移率完全取决于分子的大小；选项D，分离红细胞时，应进行低速短时间离心。 答案：D2在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是()A用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物B调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D切碎的菜花和新鲜的鸡血中都需要加入适量柠檬酸钠溶液解析：DNA的粗提取与鉴定实验中，用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，此时析出的丝状物主要是DNA，过滤后取析出物，弃去滤液；鉴定DNA时需要沸水浴加热；在用鸡血做实验材料时，加柠檬酸钠的作用是防止血液凝固。答案：B 3下列有关PCR反应的总结性叙述，正确的是()A需要两种能与DNA母链互补配对的小段DNA作引物BPCR反应获得的DNA分子只含有引物或引物C每次循环可以分为三个阶段DDNA在860 nm的红外线波段有强烈的吸收峰，据此可以进行DNA含量的测定解析： PCR反应的引物可以是小段DNA或小段RNA；PCR反应获得的DNA分子大多数既含有引物又含有引物，只有极少数只含有引物或引物；每次循环可以分为变性、复性、延伸三个阶段；DNA在260 nm的紫外线波段有强烈的吸收峰。答案：C