高效液相色谱仪校验方案.doc

登 记 号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01仪器编号：QC-0072高效液相色谱仪校验方案JSALPHARMPage 13 of 13题 目Title高效液相色谱仪校验方案方 案 号Document #PQP-QC072-02设备编号Equipment #QC-0072安装地点Location高效液相色谱室生产厂家Manufacturer日本岛津（Shimadzu）公司方案审批：Approved By姓名Name职位Position签名Signature日期Date陈凯QC分析人员于勇QC主管莫远略质量部长江苏阿尔法药业有限公司Jiangsu Alpha Pharmaceutical Co., Ltd.目 录1. 目的2. 确认人员及职责 3. 确认前确认4. 确认依据及判定标准5. 确认内容6. 再确认要求7. 确认结果汇总8. 结果评价1. 目的明确稳定性试验箱的校验项目、校验条件、校验方法、接受标准、校验周期等，便于检验人员按规程进行稳定性试验箱的校验操作。 保证实验室使用的称量点称量的准确性。2确认人员及职责 QC分析人员：负责起草确认方案和报告、组织协调开展确认；QC主管：审核确认报告和报告；质量部长：批准确认报告和报告。3. 确认前确认3.1人员确认姓名职务职责签名日期陈 凯QC分析人员起草确认方案和报告，执行确认、组织培训赵家宽QC分析人员协助执行确认于 勇QC主管监督确认的进行3.2文件培训序号培训内容是否培训1 LC-2040C型高效液相色谱仪标准操作规程（QC-3079）是 否2LC-2040C型高效液相色谱仪维护保养标准操作规程（QC-3080）是 否3液相色谱仪的校验操作规程（QC-4002）是 否4高效液相色谱仪校验方案（PQP-QC072）是 否5检验室安全管理规程（QC-1018）是 否3.3 校验设备确认序号设备及要求是否符合1秒表： 分度值不大于0.1s是 否2分析天平： 最大称量200g,最小分度值0.1mg是 否3容量瓶： 10.0ml A级 不少于10支是 否4温度计： 分度值不大于0.1是 否5以上设备应在校验有效期内是 否3.4标准物质和试剂确认序号标准物质、试剂及要求是否符合1甲醇： HPLC级是 否2纯水： HPLC级 是 否3丙酮： 分析级是 否4萘： 是 否 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4. 确认依据及判断标准4.1 确认依据 4.1.1LC-2040C型高效液相色谱仪安装使用说明 4.1.2液相色谱仪校验规程 JJG 705-2014 4.1.3中国药典2010年版二部附录 4.1.4药品GMP指南2010年版4.2 评判标准4.2.1性能确认(PQ)系 统校验项目标 准输液系统1、 泵耐压2、 泵流量设定值误差SS3、 泵流量稳定性SR4、梯度误差Gi符合规定2%2%3%柱温箱系统1、 温度设定最大误差2、 温度稳定性21/h检测器系统1、 基线噪音2、 基线漂移3、 最小检测限510-4AU510-3AU/30min510-6g/ml(萘/甲醇溶液)整机性能1、 定性重复性2、 定量重复性 3、 线性测定1.0%3.0%相关系数R0.9995. 确认内容5.1性能确认(PQ)5.1.1 输液系统确认5.1.1.1泵耐压：仪器连接完好后，以100%甲醇为流动相，流速0.2ml/min.启动仪器，待压力平稳后，观察10分钟，应无漏液现象。卸下色谱柱，堵住泵出口（压力传感器以下），使压力达到最大允许值的90%，保存5分钟，应无漏液现象。5.1.1.2泵流量设定值误差SS、稳定性误差SR：启动仪器，按上表的要求设定流量，压力稳定后，用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、（2）计算SS、SR 流量（ml/min）次数W1W2W2-W1SSSR0.51231.01232.0123表1注： Fm=(W2-W1)/(t) Ss=(-Fs)/Fs100% 式（1） SR=(Fmax-Fmin)/ 100% 式（2） 式中：Fm 实测流速； W2 容量瓶+流动相的质量，g； W1 容量瓶的质量，g； 试验温度下流动相的密度，g/mL； t 收集流动相的时间，min； 同一组测量的算术平均值，mL/min； FS 流量设定值，mL/min； Fmax 同一组测量中流量最大值，mL/min； Fmin 同一组测量中流量最小值，mL/min。5.1.1.3 梯度误差Gi： 色谱条件： 色谱柱：限流阻尼管 流速：2.0ml/min 检测波长：265nm 流动相A：纯化水 流动相B：0.1%丙酮水溶液 以流动相A平衡系统，按表2梯度程序测试2次，记录色谱图。画出B溶剂经5段阶梯从0%到100%B梯度变化曲线（如图1），求出由B溶剂变化所产生的每一段阶梯对应的响应信号的变化值Li；按下列公式（1）计算每一段阶梯对应的响应信号值的变化平均值；按下列公式（2）计算五段阶梯对应的响应信号值的总平均值；按下列公式（3）计算每一段阶梯的误差Gi，取Gi的最大值作为仪器梯度误差报告。表2 梯度程序时间(分)流动相A%流动相B%1.00100.00.01.0180.020.04.0080.020.04.0160.040.07.0060.040.07.0140.060.010.0040.060.010.0120.080.013.0020.080.013.010.0100.016.000.0100.021.00100.00.026.00100.00.0图1 梯度组成准确度示意图 = 公式（1） = 公式（2） Gi= 公式（3） 式中： 第i段阶梯响应信号值的平均值； L1i第i段阶梯第1组响应信号值； L1（i-1） 第（i-1）段阶梯第1组响应信号值； L2i第i段阶梯第2组响应信号值； L2（i-1） 第（i-1）段阶梯第2组响应信号值； 5段阶梯响应信号值的总平均值； Gi第i段阶梯的梯度误差表3iL1iL1（i-1）（）L2iL2（i-1）Gi1 2 3455.1.2 柱温箱系统确认依次设定柱温箱温度为25，35，45值进行校验，这些温度应覆盖实验室使用的柱温范围,当使用柱温超出该范围时，需要增加该温度点校验。设定待校验温度，待测温仪显示的温度稳定后，记录温度显示值，每隔10分钟记录一次，每个温度点记录7次。求出平均值，设定值与平均值之差为设定值误差T，7次测量值中最大值与最小值之差为控温稳定性误差Tc。表4设定温度（）次数测定温度（）平均温度（）T（）Tc2512345673512345674512345675.1.3 检测器系统确认5.1.3.1基线漂移和基线噪声：色谱条件：色谱柱：C18柱 流速：1.0ml/min 检测波长：254nm 流动相：甲醇 在分析界面中点击基线检查，设置参数后，点击运行，工作站会自动记录30分钟，运行完毕后，机器自动计算出结果，给出是否通过的结论。将运行界面复制到Word文档中，打印出来即可。其他型号站基线漂移和基线噪声的测试方法：按不同的仪器配置，设定检测器的灵敏度为最强灵敏度。待系统平衡后，调整基线在图谱的中部位置，记录基线30分钟。以图谱显示的刻度值，计算基线噪音和基线漂移值。基线漂移：_ 510-4AU 基线噪声：_ 510-3AU/30min5.1.3.2最小检测限：按上述色谱条件，平衡系统。取20l的110-7g/ml萘/甲醇溶液进样，记录色谱图。按下列公式计算最小检测限：CL= 注：Nd与H的单位应一致；分母中的20为进样体积，单位为l。 式中： CL 最小检测浓度,g/ml； Nd 基线噪音高度； c 标准溶液浓度,g/ml； V 进样体积，l； H 标准溶液的峰高。 最小检测限（CL）=_ 5.1.4整机性能确认5.1.4.1定性与定量重复性：色谱条件： 色谱柱：C18柱 流速：1.0ml/min 检测波长：254nm 流动相：甲醇取110-4g/ml萘/甲醇标准溶液连续进样6次，记录色谱图，以萘峰的保留时间和峰面积，计算相对标准偏差RSD，即为整机性能的定性与定量重复性。进样次数123456平均值RSDRT（min）峰面积表55.1.4.2进样针性能线性：取110-4g/ml萘/甲醇标准溶液，分别以5l、10l、15l、20l、30l的体积进样，记录色谱图。重复测定3次。以进样体积Vi为横坐标，以3次萘峰平均面积Ai为纵坐标作线性回归，得其线性方程及相关系数R。表6进样体积(l)510152030平均峰面积线性方程，相关系数R5.1.4.3线性：配置萘/甲醇标准溶液，使浓度分别为0.210-4g/ml、0.410-4g/ml、0.610-4g/ml、0.810-4g/ml、1.010-4g/ml、1.210-4g/ml以20l的体积进样，重复测定3次，记录色谱图。以进样体积Vi为横坐标，以3次萘峰平均面积Ai为纵坐标作线性回归，得其线性方程及相关系数R。表7样品浓度10-4g/ml0.20.40.60.81.01.2平均峰面积线性方程，相关系数R 6.再确认要求6.1再验证周期6.1.1 设备大修后需再校验。6.1.2 由于检修、调整、迁移或其它原因，可能对设备的安装情况、主要技术参数和功能有影响时，应进行再验证。6.1.3 高效液相色谱仪的验证周期为12个月，更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证。6.2 再验证内容进行设备的再校验，可针对设备性能中部分必须的项目进行再验证，而不一定要进行全面的验证。 7. 确认结果汇总7.1性能确认(PQ)系 统校验项目标 准测试结果输液系统泵耐压泵流量设定值误差SS泵流量稳定性SR梯度误差Gi符合规定2%2%3%柱温箱系统温度设定最大误差温度稳定性21/h检测器系统基线噪音基线漂移最小检测限510-4AU510-3AU/30min510-6g/ml(萘/甲醇溶液)整机性能定性重复性定量重复性 线性测定1.0%3.0%相关系数R0.9998. 结果评价 起草人/日期： QC审核人/日期： QA审核人/日期：