6 食品添加剂 阿力甜.doc

食品添加剂 L-天冬氨酰-N-（2,2,4,4-四甲基-3-硫化三亚甲基）-D-丙氨酰胺（阿力甜）1 范围本标准适用于食品添加剂L-天冬氨酰-N-（2,2,4,4-四甲基-3-硫化三亚甲基）-D-丙氨酰胺(阿力甜)。食品添加剂L-天冬氨酰-N-（2,2,4,4-四甲基-3-硫化三亚甲基）-D-丙氨酰胺(阿力甜)为白色结晶粉末，无味或略有特殊性气味。2 分子式、结构式和相对分子质量 2.1 分子式C14H25N3O4S2.5H2O2.2 结构式2.3 相对分子质量376.5 3 技术要求应符合表1的规定。表1 技术要求项 目指 标检验方法阿力甜（以干基计），w /%98.0101.0附录A 中A.3-异构体（以干基计），w/% 0.3附录A中A.3丙氨酸酰胺（以干基计），w/% 0.2附录A中A.3水分，w/% 1113GB/T 6283比旋光度m(25,D)/( )dm2 kg-1+40+50附录A中A.4灼烧残渣，w/% 1.0GB/T 9741（80025）铅(Pb)/（mg/kg） 1GB 5009.12附录A检验方法A.1 一般规定除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682中规定的三级水。试验方法中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 602和GB/T 603之规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2 鉴别试验A.2.1 溶解性易溶于水和乙醇。A.2.2 红外谱图对照红外谱图与附录B图B.1给出的阿力甜红外标准谱图一致。A.2.3 pH50g/L样品溶液的pH为5.06.0。A.2.4 显色反应A.2.4.1 称取300mg茚三酮加入100mL正丁醇和2mL冰乙酸中配置成溶液，取此溶液5mL，加入10mg样品，加热至缓慢回流，应出现亮蓝紫色。A.2.4.2 取5mL新鲜制备的c(1/5KMnO4)=0.001mol/L高锰酸钾标准溶液，加10mg样品并充分混合，溶液由紫色变成棕色。A.3 阿力甜含量、-异构体含量和丙氨酸酰胺含量的测定A.3.1 方法提要用反相离子对高效液相色谱测定法，在选定的工作条件下，通过色谱柱使样品溶液中各组分分离，用紫外吸收检测器检测，用外标法定量，计算样品中阿力甜、异构体和丙氨酸酰胺的含量。A.3.2 试剂和材料A.3.2.1 甲醇。A.3.2.2 乙腈：色谱级，在210nm透光率大于90%。A.3.2.3 -异构体：标准样品。A.3.2.4 丙氨酸酰胺：标准样品。A.3.2.5 阿力甜：标准样品。 A.3.2.6 缓冲溶液：称取0.69g磷酸一钠（一水合物）和4.32g 1-辛基硫酸钠，精确至0.0001g，置于1000mL容量瓶中。加入200mL水使其溶解，用磷酸调节pH至2.5，加水稀释至刻度。经孔径为0.22m微孔滤膜或相当的滤膜过滤。A.3.3 仪器和设备A.3.3.1 高效液相色谱系统(HPLC)A.3.3.1.1 恒流泵。A.3.3.1.2 紫外吸收检测器。A.3.4 色谱分析条件推荐的色谱柱及典型操作条件见表A.1。其他能达到同等分离程度的色谱柱和色谱操作条件均可使用。表A.1 色谱柱和典型色谱操作条件色谱柱15 cm x 0.4 cm NovaPak C18 柱温室温流动相见A.3.5.1流动速度/( mL /min)1.0检测器检测波长/nm217A.3.5 分析步骤A.3.5.1 流动相的制备准确量取乙腈和缓冲溶液，体积比为1:3，充分混合。经真空脱气。A.3.5.2 标准工作溶液的制备A.3.5.2.1 标准溶液A1：称取异构体和丙氨酸酰胺各约25mg，精确至0.0001g，移入500mL容量瓶中。加50mL甲醇使之溶解，用水稀释至刻度。存储于冰箱中。A.3.5.2.2 标准溶液A2：移取15mL0.02mL标准溶液A1至50mL容量瓶中，用水稀释至刻度。A.3.5.2.3 标准工作溶液W1：称取约50mg阿力甜标准样品，精确至0.0001g，移入10mL容量瓶中，加5mL标准溶液A2，用水稀释至刻度。A.3.5.2.4 标准工作溶液W2：移取5mL0.02mL标准工作溶液W1至50mL容量瓶中，用水稀释至刻度。A.3.5.3 试验溶液的制备A.3.5.3.1 试验溶液S1：称取约50mg样品，精确至0.0001g，置于10mL容量瓶中，用水稀释至刻度。A.3.5.3.2 试验溶液S2：移取5mL0.02mL试验溶液S1至50mL容量瓶中，用水稀释至刻度。A.3.5.4 系统适应性试验按高效液相色谱操作规程开机预热,调节温度及流量,达到分析条件并基线平稳。重复3次分别注入100L标准工作溶液W1和标准工作溶液W2，-异构体、阿力甜和丙氨酸酰胺的近似保留时间如表A.2所示。峰面积的变化系数（100乘以标准偏差除以平均峰面积）不应超过2%。表A.2 各组分的近似保留时间组分名称近似保留时间/min-异构体6阿力甜10丙氨酸酰胺15注：本近似保留时间为150.4cm NovaPak色谱柱得到。如果使用其他色谱柱或长度不同，应调整流动相中乙腈的比例，以获得所需的保留时间。A.3.5.5 测定 将流动相泵入色谱柱，至基线不再漂移。在系统适应性试验条件下分析标准溶液和试验溶液。分三次注入工作标准W1，计算-异构体和丙氨酸酰胺的平均峰面积。分三次注入工作标准W2，计算阿力甜的平均峰面积。分三次注入试验溶液S1，计算-异构体和丙氨酸酰胺的平均峰面积。分三次注入试验溶液S2，计算阿力甜的平均峰面积。A.3.5.6 结果计算阿力甜的含量以w1计，数值以%表示，按式（A.1）计算： （A.1）式中：RA试验溶液S2中检出峰的响应值；WS阿力甜标准样品减去水分后的质量，单位为克（g）；PS异构体或丙氨酸酰胺标准样品的纯度，（%）； RS标准工作溶液W2中检出峰的响应值；WA样品减去水分后的质量，单位为克（g）。异构体的含量以w2计，数值以 % 表示，按式（A.2）计算： （A.2）式中：RA试验溶液S1中检出峰的响应值；WS未除去水分的异构体标准样品或丙氨酸酰胺标准样品的质量，单位为克（g）；PS异构体标准样品的纯度，（%）；RS标准工作溶液W1中检出峰的响应值；WA样品未除去水分的质量，单位为克（g）；DF稀释因子，即0.003。丙氨酸酰胺的含量w3，数值以 % 表示，按式（A.3）计算： （A.3）式中：RA试验溶液S1中检出峰的响应值；WS未除去水分的异构体标准样或丙氨酸酰胺标准样的质量，单位为克（g）；PS异构体标准样品的纯度，（%）；RS标准工作溶液W1中检出峰的响应值；WA样品未除去水分的质量，单位为克（g）；DF稀释因子，即0.003。A.4 比旋光度的测定A.4.1 称取10g样品，精确至0.001g，加水溶解并转移至1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，测定温度为250.5。比旋光度m（25,D）数值以“( )dm2 kg-1”表示，按式(A.4)计算： （A.4）式中： 测得的旋光角,单位为度()； l 旋光管的长度,单位为分米(dm)； 溶液中有效组分的质量浓度,单位为克每毫升(g/mL)。A.4.2 其他按GB/T 613进行。附录B阿力甜红外标准谱图及碳酸二甲酯测定典型色谱图图B.1 阿力甜红外谱图6