36种常用微生物培养基配制汇总

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资源描述
36 种微生物常用培养基配制 1 牛肉膏蛋白胨培养基 用于细菌培养 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 水 1000mL pH7 4 7 6 2 高氏 1 号培养基 用于放线菌培养 可溶性淀粉 20g KNO3 1g NaCl 0 5g K2HPO4 3H2O 0 5g MgSO4 7H2O0 5g FeSO4 7H2O0 01g 水 1000mL pH7 4 7 6 配制时注意 可溶 性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中 3 马丁氏 Martin 培养基 用于从土壤中分离真菌 K2HPO41g MgSO4 7H2O0 5g 蛋白胨 5g 葡萄糖 10g 1 3000 孟加拉红水溶液 100mL 水 900mL 自然 pH 121 湿热灭菌 30min 待培养基融化后冷却 55 60 时加入链霉素 链霉素含量为 30 g mL 4 马铃薯培养基 PDA 用于霉菌或酵母菌培养 马铃薯 去皮 200g 蔗糖 或葡萄糖 20g 水 1000mL 配制方法如下 将马铃署去皮 切成约 2cm2 的小块 放入 1500mL 的烧杯中煮沸 30min 注意用玻棒搅拌 以防糊底 然后用双层纱布过滤 取其滤液加糖 再补足至 1000mL 自然 pH 霉菌用蔗 糖 酵母菌用葡萄糖 5 察氏培养基 蔗糖硝酸钠培养基 用于霉菌培养 蔗糖 30g NaNO3 2g K2HPO4 1g MgSO4 7H2O0 5g KCl 0 5g FeSO4 7H2O0 1g 水 1000mL pH7 0 7 2 6 Hayflik 培养基 用于支原体培养 牛心消化液 或浸出液 1000mL 蛋白胨 10g NaCl 5g 琼脂 15g pH7 8 8 0 分装每瓶 70mL 121 湿热灭菌 15min 待冷却至 80 左右 每 70mL 中加入马血清 20mL 25 鲜 酵母浸出液 10mL 15 醋酸铊水溶液 2 5mL 青霉素 G 钾盐水溶液 20 万单位以上 0 5mL 以上混合后倾注平板 注意 醋酸铊是极毒的药品 需特别注意安全操作 7 麦氏 McCLary 培养基 醋酸钠培养基 葡萄糖 0 1g KCl 0 18g 酵母膏 0 25g 醋酸钠 0 82g 琼脂 l 5g 蒸馏水 l00mL 溶解后分 装试管 1l5 湿热灭菌 15min 8 葡萄糖蛋白胨水培养基 用于 V P 反应和甲基红试验 蛋白胨 0 5g 葡萄糖 0 5g K2HPO4 0 2g 水 100mL pH7 2 1l5 湿热灭菌 20min 9 蛋白胨水培养基 用于吲哚试验 蛋白胨 10g NaCl 5g 水 1000mL pH7 2 7 4 121 湿热灭菌 20min 10 糖发酵培养基 用于细菌糖发酵试验 蛋白胨 0 2g NaCl 0 5g K2HPO4 0 02g 水 100mL 溴麝香草酚蓝 1 水溶液 0 3mL 糖类 lg 分别称取蛋白胨和 NaCl 溶于热水中 调 pH 至 7 4 再加入溴麝香草酚蓝 先用少量 95 乙醇溶解后 再加水配成 1 水溶液 加入糖类 分装试管 装量 4 5cm 高 并倒放入一 杜氏小管 管口向下 管内充满培养液 115 湿热灭菌 20min 灭菌时注意适当延长煮沸 时间 尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡 常用的糖类 如葡萄糖 蔗糖 甘 露糖 麦芽糖 乳糖 半乳糖等 后两种糖的用量常加大为 1 5 11 RCM 培养基 强化梭菌培养基 用于厌氧菌培养 酵母膏 3g 牛肉膏 l0g 蛋白胨 10g 可溶性淀粉 lg 葡萄糖 5g 半胱氨酸盐酸盐 0 5g NaCl 3g NaAc 3g 水 l000mL pH8 5 刃天青 3mg L l2l 湿热灭菌 30min 12 TYA 培养基 用于厌氧菌培养 葡萄糖 40g 牛肉膏 2g 酵母膏 2g 胰蛋白胨 bacto typetone 6g 醋酸铵 3g KH2PO4 0 5g MgSO4 7H2O0 2g FeSO4 7H2O0 01g 水 1000mL pH6 5 121 湿热灭菌 30min 13 玉米醪培养基 用于厌氧菌培养 玉米粉 65g 自来水 1000mL 混匀 煮 10min 成糊状 自然 pH 121 湿热灭菌 30min 14 中性红培养基 用于厌氧菌培养 葡萄糖 40g 胰蛋白胨 6g 酵母膏 2g 牛肉膏 2g 醋酸铵 3g KH2PO4 5g 中性红 0 2g MgSO4 7H2O0 2g FeSO4 7H2O0 01g 水 1000mL pH6 2 121 湿热灭菌 30min 15 CaCO3 明胶麦芽汁培养基 用于厌氧菌培养 麦芽汁 6 波美 1000mL 水 1000mL CaCO310g 明胶 10g pH6 8 121 湿热灭菌 30min 16 BCG 牛乳培养基 用于乳酸发酵 A 溶液 脱脂乳粉 100g 水 500mL 加入 1 6 溴甲酚绿 B C G 乙醇溶液 1mL 80 灭菌 20min B 溶液 酵母膏 10g 水 500mL 琼脂 20g pH6 8 121 湿热灭菌 20min 以无菌操作趁热将 A B 溶液混合均匀后倒平板 17 乳酸菌培养基 用于乳酸发酵 牛肉膏 5g 酵母膏 5g 蛋白胨 10g 葡萄糖 10g 乳糖 5g NaCl 5g 水 1000mL pH6 8 121 湿热灭菌 20min 18 酒精发酵培养基 用于酒精发酵 蔗糖 10g MgSO4 7H2O 0 5g NH4NO30 5g 20 豆芽汁 2mL KH2PO4 0 5g 水 100mL 自然 pH 19 柯索夫培养基 用于钩端螺旋体培养 优质蛋白胨 0 4g NaCl 0 7g KCl 0 02g NaHCO3 0 01g CaCl 0 02g KH2PO40 09g NaH2PO40 48g 蒸馏水 500mL 无菌兔血清 40mL 制法 除兔血清外的其余各成分混合 加热溶解 调 pH 至 7 2 121 湿热灭菌 20min 待冷却后 加入无菌兔血清 制成 8 血清溶液 然后分装试管 5 10mL 管 56 水浴灭活 lh 后备 用 20 豆芽汁培养基 黄豆芽 500g 加水 1000mL 煮沸 lh 过滤后补足水分 121 湿热灭菌后存放备用 此即 为 50 的豆芽汁 用于细菌培养 10 豆芽汁 200mL 葡萄糖 或蔗糖 50g 水 800mL pH7 2 7 4 用于霉菌或酵母菌培养 10 豆芽汁 200mL 糖 50g 水 800mL 自然 pH 霉菌用蔗糖 酵母菌用葡萄糖 21 LB Luria Bertani 培养基 细菌培养 常在分子生物学中应用 双蒸馏水 950mL 胰蛋白胨 l0g NaCl l0g 酵母提取物 bacto yeast extract 5g 用 lmol L NaOH 约 l mL 调节 pH 值至 7 0 加双蒸馏水至总体积为 1L 121 湿热灭菌 30min 含氨苄青霉素 LB 培养基 待 LB 培养基灭菌后冷至 50 左右加入抗生素 至终浓度为 80 100mg L 22 复红亚硫酸钠培养基 远藤氏培养基 用于水体中大肠菌群测定 蛋白胨 10g 牛肉浸膏 5g 酵母浸膏 5g 琼脂 20g 乳糖 10g K2HPO40 5g 无水亚硫酸钠 5g 5 碱性复红乙醇 溶液 20mL 蒸馏水 1000mL 制作过程 先将蛋白胨 牛肉浸膏 酵母浸膏和琼脂加入到 900mL 水中 加热溶解 再加入 K2PO4 溶解后补充水至 l000mL 调 pH 至 7 2 7 4 随后加入乳糖 混匀溶解后 于 115 湿热灭 菌 20min 再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中 用少许无菌水使其溶解 在水浴中煮沸 10min 后 立即滴加于 20mL 5 碱性复红乙醇溶液中 直至深红色转变为淡粉红色为止 将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中 混匀后立即倒平板 待凝固后存放冰箱备用 若颜色由淡红变为深红 则不能再用 23 乳糖蛋白胨半固体培养基 用于水体中大肠菌群测定 蛋白胨 10g 牛肉浸膏 5g 酵母膏 5g 乳糖 10g 琼脂 5g 蒸馏水 1000mL pH7 2 7 4 分装试管 l0mL 管 115 湿热灭菌 20min 24 乳糖蛋白胨培养液 用于多管发酵法检测水体中大肠菌群 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 乳糖 5g NaCl 5g 蒸馏水 l000mL 1 6 溴甲酚紫乙醇溶液 lmL 调 pH 至 7 2 分装试管 l0mL 管 并放入倒置杜氏小管 l15 湿热灭菌 20min 25 三倍浓乳糖蛋白胨培养液 用于水体中大肠菌群测定 将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大 3 倍加入到 l000mL 水中 制法同上 分装于放有 倒置杜氏小管的试管中 每管 5mL 1l5 湿热灭菌 20min 26 伊红美蓝培养基 EMB 培养基 用于水体中大肠菌群测定和细菌转导 蛋白胨 l0g 乳糖 10g K2HPO4 2g 琼脂 25g 2 伊红 Y 曙红 水溶液 20mL 0 5 美蓝 亚甲 蓝 水溶液 l3mL pH7 4 制作过程 先将蛋白胨 乳糖 K2HPO4 和琼脂混匀 加热溶解后 调 pH 至 7 4 1l5 湿热灭菌 20min 然后加入已分别灭菌的伊红液和美蓝液 充分混匀 防止产生气泡 待培养基冷 却到 50 左右倒平皿 如培养基太热会产生过多的凝集水 可在平板凝固后倒置存于冰箱 备用 在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖 其余成分不变 27 加倍肉汤培养基 用于细菌转导 牛肉膏 6g 蛋白胨 20g NaCl 10g 水 1000mL pH7 4 7 6 28 半固体素琼脂 用于细菌转导 琼脂 1g 水 100mL 121 湿热灭菌 30min 29 豆饼斜面培养基 用于产蛋白酶霉菌菌株筛选 豆饼 100g 加水 5 6 倍 煮出滤汁 100mL 汁内加入 KH2PO4 0 1 MgSO4 0 05 NH4 2SO4 0 05 可溶性淀粉 2 pH6 琼脂 2 2 5 30 酪素培养基 用于蛋白酶菌株筛选 分别配制 A 液和 B 液 A 液 称取 Na2HPO4 7H2O 1 07g 干酪素 4g 加适量蒸馏水 并加热溶解 B 液 称取 KH2PO4 0 36g 加水溶解 A B 液混合后 加入酪素水解液 0 3 mL 加琼脂 20g 最 后用蒸馏水定容至 1000mL 酪素水解液的配制 1g 酪蛋白溶于碱性缓冲液中 加入 1 的枯草芽孢杆菌蛋白酶 25mL 加水至 100mL 30 水 解 l h 用于配制培养基时 其用量为 1000mL 培养基中加入 100mL 以上水解液 31 细菌基本培养基 用于筛选营养缺陷型 Na2HPO4 7H2O 1g MgSO4 7H2O0 2g 葡萄糖 5g NaCl 5g K2HPO4lg 水 l000mL pH7 0 1l5 湿热灭菌 30min 32 YEPD 培养基 用于酵母原生质体融合 酵母粉 10g 蛋白胨 20g 葡萄糖 20g 蒸馏水 1000mL pH6 0 115 湿热灭菌 20min 33 YEPD 高渗培养基 用于酵母原生质体融合 在 YEPD 培养基中加入 0 6mol L 的 NaCL 3 琼脂 34 YNB 基本培养基 用于酵母原生质体融合 0 67 酵母氮碱基 YNB 不含氨基酸 Difco 2 葡萄糖 3 琼脂 pH6 2 另一配方为 葡萄糖 10g NH4 2SO4 1g K2HPO40 125g KHPO4 0 875g KI 0 0001g MgSO4 7H2O0 5g CaCl2 2H2O0 lg NaCl0 1g 维量元素母液 lmL 维生素母液 lmL 母液均按常规配制 水 1000mL pH5 8 6 0 35 YNB 高渗基本培养基 用于原生质体融合 在 YNB 基本培养基中加入 0 6mol LNaCl 36 酚红半固体柱状培养基 用于检查氧与菌生长的关系 蛋白胨 1g 葡萄糖 10g 玉米浆 10g 琼脂 7g 水 1000mL pH7 2 在调好 pH 后 加入 1 6 酚红溶液数滴 至培养基变为深红色 分装于大试管中 装量约为试管高度的 1 2 1l5 灭菌 20min 细菌在此培养基中利用葡萄糖生长产酸 使酚红从红色变成黄色 在不同部位生长的细菌 可使培养基的相应部位颜色改变 但注意培养时间太长 酸可扩散 以致不能正确判断结果 以上各种培养基均可配制成固体或半固体状态 只需改变琼脂用量即可 前者为 1 5 2 0 后者为 0 3 0 8
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