高中生物微生物检测题.doc

“微生物的培养与应用”知识归纳及试题一、知识归纳1、培养基的分类和应用划分标准培养基种类特点用途物理性质 液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、分类、鉴定固体培养基加凝固剂，如琼脂微生物分离、鉴定、活菌计数化学组成天然培养基含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基培养基成分明确（用化学成分已知的化学物质配成） 分类、鉴定 目的用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物2、消毒与灭菌的区别比较项目消毒灭菌条件使用较为温和的理化方法使用强烈的理化因素结果杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子） 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 适用实验操作的空间、操作者的衣服和手 微生物的培养器皿、接种用具和培养基等 常用方法煮沸消毒法（如在100，煮沸56 min）、巴氏消毒法（如在80，煮15 min）；使用酒精、氯气、石炭酸等化学药剂进行消毒 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 3、三种常用灭菌方法的比较灭菌方法灭菌条件灭菌时间适用材料或用具灼烧灭菌酒精灯火焰的充分燃烧层直至烧红接种环、接种针或其他金属工具干热灭菌干热灭菌箱内，16017012 h玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等高压蒸汽灭菌100kPa，1211530 min培养基等4、微生物的纯化培养包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段，纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。5、微生物的分离和计数（1）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。测定微生物数量的常用方法：统计菌落数目和显微镜直接计数。土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察。（2）分解纤维素的微生物的分离实验原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。流程：土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落。二、相关试题1（2009安徽理综，6）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 （）A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置，37恒温培养2448小时D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数2下列对四种微生物相关的叙述，错误的是（）ACO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化BCO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能C糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解D葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源3酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基（）A牛肉膏蛋白胨培养基B麦芽汁琼脂培养基C蛋白胨酵母膏培养基DMS培养基4下列关于微生物的培养和运用的叙述，错误的是（）A通过消毒不能杀死物体内所有的微生物B利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目C平板划线法和稀释涂布法常用于微生物的接种D微生物所用的培养基成分和植物组织培养用的培养基成分不同5下列有关微生物的培养或纯化的叙述，错误的是（）A微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种B培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径C分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法D分离自养型微生物的方法是用纤维素作为唯一碳源的培养基6在做分离“分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应10-6培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述正确的是（双选）（）AA同学出现这种结果的原因是土样不同B可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误DB、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则7（2009宁夏理综，40）（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑、和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 （2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌处理，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是；操作者的双手需要进行清洗和；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能。 （3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的。 （4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的。 （5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。 （6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。8（2010山东理综，34）生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。（1）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供，培养基灭菌采用的最适方法是法。（2）测定培养液中微生物数量，可选用法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用技术使脂肪酶能够重复使用。（3）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的技术。9从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是，获得图B效果的接种方法是。（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行，接种前要进行，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。10（2011广东汕头一模，26）有机磷农药杀虫能力强，在粮食增产、传染病防治等方面作用显著，但污染环境并危害人体健康。在众多的有机磷农药残留物降解技术中，生物降解有高效、彻底、无二次污染的优势，其中，微生物由于具有较复杂多样的代谢途径，是有机磷农药降解的主力军。（1）在富含有机磷农药残留成分的土壤中，更容易分离到能降解农药的微生物。根据达尔文的理论，这是因为有机磷农药对于此类微生物具有作用。（2）微生物具有复杂多样的代谢途径，从根本上说，是由微生物的所决定的。（3）微生物主要通过酶促反应，将有机磷农药分解为无毒或者低毒的化合物。研究发现，利用有机磷农药降解酶净化农药比利用微生物菌体更有效。微生物群体中，最初的降解酶基因是由于而产生的。从微生物中提取到一种降解酶后，需要确定在何种环境中该酶的活性高，检测酶活性高低的指标可以是。从天然菌株中提取降解酶的含量低，成本高，难以大量应用，科学家通过基因工程解决了这一难题。他们在获得降解酶基因后，通过技术对该基因进行大量扩增，再利用酶、酶和运载体等作为基本工具，通过一定的手段构建，并将其导入大肠杆菌体内，从而实现了高效表达。天然的降解酶对有机磷农药的降解率比较低，不能达到预期效果，科学家对降解酶特定部位的氨基酸序列进行重新设计、改造，显著提高了其降解能力，这项技术称为。复习之四答案及解析1 D 2 C 3 B 4 B 5D 6 BC 7（1）温度pH易培养生活周期短 （2）干热灭菌法消毒损伤DNA的结构（3）比例合适 （4）鉴定（或分类） （5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生（6）灭菌8（1）碳源高压蒸汽灭菌 （2）显微镜直接计数酶活性（或：酶活力）固定化酶（或：固定化细胞）（3）PCR9（1）海滩等高盐（2）以淀粉为唯一碳源高温（3）稀释涂布平板法平板划线法（4）pH调整高压蒸汽灭菌无菌