临床检验科操作SOP概要

临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第1页共196页、检验科检测项目标准操作规程（见附录）A、临检室A1、血常规检验标准操作规程 A2、尿常规标准操作规程B、生化室B1、糖尿病检测（诊断酶联试剂盒）标准操作规程、检验室工作流程图各实验室接收各类标本并核对定期检验标本按要求处理 标本、存放调整各类仪 器运行状态特殊结果或疑难结 果，报各实验室组实验室技术主管核 准质控及分析结果*记录仪器有关参 数室内质控结果签发报告修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室管理规范文件文件编号：CY-QMP-8-05版 序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第2页共196页住院病人就诊检验流程医生在电脑网络中申请检验项目各类穿刺液等穿刺标本按要求处理护士工作站打印条码粘贴1血液1大卜r嘱病人按要便求留取标本按有关要求抽取血液样本*”检验科各实验室”41签收r具体实验室进行检验各头验至检验后签发报告单1送回各病房并签收修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/0生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第3页共196页门诊病人就诊检验流程血液标本大小便体液修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/0生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第4页共196页三、检验科各项规章制度（一）生物安全制度1、医务人员1）每12年做体检一次，并接受乙肝疫苗接种。2）每1 2年检查乙肝病毒抗原抗体水平，发现乙型肝炎者应进行隔离治 疗。3）检验人员进入实验室应穿好工作服，不允许在实验室进食和吸烟。4）检验人员在工作前后和被污染后，应用肥皂和流水清洗，必要时由消毒液浸泡双手，每季度抽查检验人员的手，并做细菌培养一次。2、环境消毒隔离1）实验室应分为清洁区和操作区，清洁区要注意保护不受污染。操作有 气溶胶可能的标本应配置生物安全柜及其它防护设置，如紫外线灯，排气 扇等操作区的工作台及地面每日用消毒液擦拭一次，有污染时随时消毒， 每周大扫除一次。2）采血室每日操作前用清水擦拭操作台一次，采血结束用消毒液擦拭操 作台、桌子和地面一次，紫外线每日照射消毒一次，每月空气细菌培 养一次，紫外线强度定期测定。并做记录。3、各种检验标本的收集，送检必须用相应指定的容器留取，不得外溢污染。4、静脉及末稍采血，应严格执行消毒隔离措施，静脉抽血做到一人一针一筒 一巾一带一消毒，所用止血带及纸垫每日消毒，末稍采血一人一片一管， 杜绝交叉污染。5、一次性医用器具包括采血针，注射器、尿杯、血红蛋白微量吸血吸管，应 严格做好领发登记，注射器先浸泡消毒后由供应室一对一调换，统一处 理，其余一次性器具浸泡消毒后装入污物袋送焚烧炉焚烧。6、检验人员在进行静脉抽血时应严格遵守无菌操作技术，操作前必须洗手必 须戴好帽子与口罩，操作台和手被污染时应用肥皂和流水认真洗手，必要 时用消毒液浸泡双手，酒精、碘酒瓶每周更换消毒两次。7、凡是肝炎病人和透析病人的血液标本及疑有黄疸的血标本，都视为肝炎的 污染标本，应贴上红色危险标记，放在规定区域内，引起警惕和防止扩大 污染面。8、溢出试管外的血液，应立即用碘酒棉签擦拭干净，注意防止玻璃碎片刺伤 手，并注意试管有无破裂。修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第5页共196页9、当针头和碎玻璃刺伤手时，用流水冲洗，挤出血水，应立即用碘酒消毒局部。10、实验室操作时应戴上手套。吸取标本，离心振荡等应严格按操作规程，防 止自身和实验室受污染。11、已检查标本与容器分别浸泡于施康 1号消毒液（2000mg/L）中两小时后，标本倾弃，一次性容器送焚烧，重复使用的经清洗消毒和灭菌后再使用，均要有记录。有毒化学试剂和放射性试剂使用后要经无害化处理，防止污染 环境。12、菌种、毒种按传染病防治法进行管理。13、三级医院必须设置清洁区，污染区，操作有气溶胶可能的标本应配置生物 安全柜及其它防护设置，如紫外线灯，排气扇等。14、非科室工作人员不准进入实验室，外来人员参观需经科主任同意方可进入（二） 质量管理制度1、各专业实验室根据省临检中心的有关规定，开展实验室内的质量控制，并 制定有关措施。对室 內质控应每日有记录，对失控情况有纠正方法，有预 防性措施，对于目前尚无完整的室内质控体系的实验室，应积极创造条件，建立室内质量控制体系。2、各专业实验室必须参加部、省的各次室间质控活动，对每次质控评价应有 记录。3、计量仪器（包括分析天平，天平、分光光度计等）应定期校正，每年一 次。4、大型分析仪器必须专人负责，有使用维修记录。5、商品化的试剂盒的申购由各专业室的组长负责申报，每月一次报科主任审 批，不得使用过期，无批准文号的劣质试剂，进货统一由科室管理，自配 试剂须严格校正后方可使用。6、各专业实验室必须建立完整的操作程序，并应严格按程序执行。7、当日发出的全部检验报告单须经当日科室总值班人员严格审核后方可发 出。8、科室在完成严格的室内、室间质量控制体系的同时，应逐步建立全面质量 控制体系，对标本的采集，运送，保存等纳入严格的管理之中。每日送检 的标本应签收。9、急诊检验应严格按照急诊制度执行。修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/0生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第6页共196页（三）安全制度1、菌种、毒种、剧毒品及贵重仪器物品指定专人保管、有防盗措施，建立帐 册，记录进出数量，定期检查制度。剧毒药品专人保管，由科室主任，主 管试剂的同志负责，放保险柜，领用时须有主管同志在场，作好领用登 记。2、易燃物品专柜存放，普通试剂按常规分类存放，并由科室主任和主管试剂 同志负责，注意用电安全，特别是电炉子、大烤箱、火焰光度计，由各科 使用同志负责安全，严防火灾。3、对工作中可能发生的触电、失火、玻璃割伤、针头刺伤、烧伤、不慎中 毒、传染性标本的污染，各实验室应有应急处理的方法，有关人员均应熟 悉。4、用电设备、电源线路、CO2气体、给排水系统的安全性符合使用要求，不能带电检修仪器。5、使用强酸碱腐蚀品时，应在适当的环境下正确操作，防止腐蚀、灼伤、中 毒、火灾和爆炸等事件发生。6、注意安全，随手随时关门，下班时要做好水，电，门的安全保卫工作，防 火防盗防水。7、科室安全保卫负责：郑军（四）试剂管理制度1、各专业实验室应根据各自的工作需要，按月向科主任申报所购试剂，并应 做到及时盘存清点，入库做到心中有数。2、所有试剂的申请，进货一律由科室统一管理，严格按市卫生局招标要求执 行，做到三证齐全。无三无产品。3、各专业实验室应对试剂库存定期检查，不使用过期变质的试剂。4、自配试剂须以严格校正后方可使用。5、试剂的保存应严格按照要求，以保证有效期内能有效地使用，杜绝浪费现 象。6、试剂外借一律须经科主任同意方可执行。修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第7页共196页7、剧毒试剂必须由科主任和负责科室保卫的同志负责保存，放保险箱内，使 用时应有两人在场，并做好登记。8、易燃，易爆试剂应分开存放远离火源和电源。9、供应商所送的试剂必须先经药库清点才能接受，检验科人员清点后必须在 货单上签字，有出入者必须向科主任或试剂管理员、组长报告，再将货单 交给试剂管理员，以便月底结帐。10、科室试剂管理员：钟梁。（五）实习生管理制度1、科室按实习大纲安排实习时间表，如遇特殊情况科室统一安排。2、实习生必须服从实习单位和科室的直接管理，遵守实习单位的规章制度， 参加实习单位的政治、业务学习和有关活动、会议。3、实习生必须加强医德医风修养，文明行医，礼貌待人，主动热情为病人服 务。4、实习生应在指导老师指导下进行实习和工作，一切实验结果均须指导老师 签名后方能发出报告。不得擅自签名发出报告，指导老师应严格把关逐步 培养学生独立工作能力。5、严格请假制度，学生一般情况下不得请事假，节假日按国家法定给与准 假，请假一律写报告，一天内经指导老师同意，科主任批准，报告交俞北 伟老师登记，三天内经医教科批准，三天以上经学校批准。6、实习生必须准时上班，不迟到早退，要有严格的实习作风，不得离岗，为 了培养学生的应急处理能力，实习生必须每天晚上轮流跟班（6.00-9.00）7、实习生必须严格保护实验仪器和公物，科室贵重仪器必须在指导老师具体 指导下进行操作。（六）标本管理制度、标本采集1按每个项目要求，告诉病人、病房护士或本室米血人员最佳米血时间、米血前空腹或饮食注意、用药情况、活动情况、体位等。2、明确抗凝剂种类、抗凝剂与血的比例、抽血时注意事项修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第8页共196页3、体液、分泌物、细菌培养标本按要求留足量、及时送检。二、标本运送1运送过程中，原则上带盖（不能用棉花等吸水物品），以防倒翻和溢出或雨淋。凡含传染源的标本必须带盖，外套尼龙袋，以防溢出而污染环境。2、不能剧烈振荡，以防标本溶血和有形成分破坏。3、必须及时送检。三、标本接收1必须认真核对标本上病人姓名、病区、床号、联号与申请单符合。2、必须观察标本的量、标本类型、是否抗凝或有小凝块、细菌培养标本是否符合无菌要求。是否有明显溶血或脂浊。3、不符要求的标本，必须及时填写退回理由单，及时反馈临床。四、标本检测1在检测每一过程中，都应复核标本接收过程中的每一步骤。2、在标本足够的情况下，不能浪费、随意丢弃或损坏标本。五、标本储存1当天不能完成的标本，必须分离血清，按要求储存在2C-8 C或-20 C。2、 当天检测完成的标本，血常规储存在2C -8 C 3天以上，生化免疫储在 2C -8C 7天以上，脑脊液、胸腹水等重要标本储存在 2C -8 C 7天以上。3、特殊标本按要求保存。六、标本处理检验标本先用含2-3g/L有效氯消毒灵浸泡半小时，再煮沸清洗试管，烘干备用。用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾。送专门存放医修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室管理规范文件文件编号：CY-QMP-8-05版序：A/0生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第9页共196页用垃圾处统一处理。并做好登记。.七. 外单位标本外单位送检的样本，一律由服务台同志登记后，再转交各实验室检测。实验室保留原始申请单。八、多张检验单标本凡有两张以上的检验申请单（包括其他实验室或外送兄弟医院）原则上 要分装各管，随检验申请单一起分别放置各样本盒，对米样困难者要主动跟 踪样本,并作详细记录以免漏检，分清责任。修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第10页共196页附录：检验科检测项目标准操作规程A、检室A1、血常规检验（1）标本用EDTA-K0.2ul抗凝静脉血1ml,门诊病人在CD-1700仪器上做三分类 测定,住院病人在COULTER HM仪器上做五分类测定。（2）试剂及仪器COULTER HM五分类血球分析仪及配套试剂，质控用 COULTER 4C PLUS 全血质控品，COULTER HM五分类血分析仪及配套试剂，质控用COULTER 5（全血质控品。（血液细胞自动化分析仪介绍）（3）操作1）门诊：a）收到血常规标本后，查看核对检验项目，立即编号，放混匀器上混匀 3分钟。b）如有血型立即用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。c）血标本在ABBOT CD-仃00上检测，结果入库。d）对于中间细胞比较多的应当 手工涂片染色分类，对于血小板等图形不 好或结果异常较大的应手工复查。e）结果核对后，在半小时内报告。2）病房：a）采集血常规标本后，立即编号，试管加盖后放于专用试管架上放入 HMX上自动混匀，b）如有血型用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。c）血标本在COULTER HMX 上机检测，结果入库。d）对于分类图形不好的结果应当手工涂片染色分类，对于血小板等结果图形不好或结果异常较大的应手工复查。（复查条件）e）结果核对后，签发报告单。如果急诊则电话报告，有血型的话，通知病房来拿报告单。（血液项目）（4）项目代号1I中文名单位WBC白细胞计数9X109/LLY%(LY) 1淋巴细胞分类%MO%单核细胞分类%NE%(GR)中性细胞分类%LY#淋巴细胞计数9X109/L修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第11页共196页MO#单核细胞计数X109/LRe#中性细胞计数X109/LRBC红细胞计数X1012/LHGB血红蛋白g/LHCT红细胞压积MCV平均红细胞体积flICH平均红细胞血红蛋白含量pgMCHC平均红细胞血红蛋白浓度g/LRDW红细胞分布宽度PLT血小板计数X109/LhPV平均血小板体积flPCT血小板比积%PDW血小板分布宽度EO%嗜酸性细胞分类%BO%嗜碱性细胞分类%eo#嗜酸性细胞计数9X10/Lbo#嗜碱性细胞计数9X10/L（5）特殊规定在检验血常规时，科室所有工作人员及同志如发现以下样本结果过高可过低，务必作登记，复查和及时报告，以备查询。1. 血红蛋白低于100g/L.2. 白细胞低于3000/ul.3. 血小板低于8万/ul.4. 发现白细胞分类异常图形时.5. 发现其中一项过高时，或是临床指定要镜检时（6）临床意义（6. 1） WB（计数 参考范围94-10 3 10 /L1、增加（I）生理性：初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动 后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。修改次数修改单号修改内容修改人日期生效日期：2008年5月30日临床检验诊断学标准化实验室管理规范文件文件编号：CY-QMP-8-05 版 序：A/0责任部门：检验科页码：第12页共196页病理性：大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧 伤、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、急性出血、 组织损伤、手术创伤后、白血病等。2减少I煮沸，待冷备用修改次数修改单号修改内容修改人日期病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度 严重感染、X线及镭照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。（6. 2）白细胞分类计数（621）染色液1.瑞氏一姬姆萨复合染色液I液取瑞氏染粉lg、姬姆萨染粉1g,加入甲醇（分析纯），充分振摇，第二 天加甘油10ml,混匀即能使用。U液pH6. 46. 8磷酸盐缓冲液（或用H2O替代缓冲液）磷酸二氢钾（无水）6. 648磷酸氢二钠（无水）2. 56g加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整 pH，加水至1000ml。染色置玻片于染色架上，滴加染液 35滴，使其迅速盖满血膜，约1min 后，滴加缓冲液5一 10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液 充分混和，5 一 10min后用水冲去染液，待干。或染色液盖满血片后 半分钟即可水洗镜检。I液：磷酸二氢钾6. 648磷酸氢二钠2. 56g水溶性伊红丫 4g（或伊红B2. 5g）蒸馏水1000ml石炭酸40ml煮沸，待冷备用。2 快速染色液临床检验诊断学标准化实验室管理规范文件文件编号：CY-QMP-8-05版 序：A/0责任部门：检验科页码：第13页共196页II液亚甲蓝4g蒸馏水1000m1 高锰酸钾2. 48g煮沸，待冷备用。染色把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s，水洗，再浸入I液30s, 水洗待干。注：本染色法除了能快速用于急症外，对玻片质量要求也不高。随 着染液多次使用，可适当延长染色时间或更换新液。3. 30s快速单一染色液 贮存液磷酸盐缓冲液(PH6.2-6. 8)应用液瑞氏染粉2 . 0g姬姆萨染粉0. 68天青E 0. 6g甘油10. 0ml 聚乙烯D比咯烷酮(PVP) 20. 0g 甲醇1000ml磷酸二氢钾6. 648磷酸氢二钠0. 268石炭酸4. 0ml蒸馏水加至1000mIl液、2液按3： 1比例混合放置14天后备用。LY# : (1. 03. 3) X09/L MO# : (0. 2 0. 7) X09/ L染色将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内，30s后用自来水冲洗注：加表面活性剂PVP可增加染料的溶解度并起稳定作用，加入天青E可缩短染色时间。(6.2.2)参考范围LY: 18 . 7% -47%MO: 3 . 5%-7. 9%修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室管理规范文件文件编号：CY-QMP-8-05版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第14页共196页9GR: 46. 0% 76. 5%GR#: (1. 86. 4) 10/L1. 增多(1)中性粒细胞：急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术 后、尿毒症、酸中毒、急性水中毒、急性铅中毒等。嗜酸性粒细胞：变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、某些血液 病、手术后、烧伤等。(3)嗜碱性粒细胞：慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及 铋中毒等。淋巴细胞：百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白 血病、麻疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。(5)单核细胞：结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热 病、单核细胞白血病、急性传染病的恢复期等。2. 减少(1) 中性粒细胞：伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X线和镭照射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再障、粒细胞缺 乏等。(2) 嗜酸性粒细胞：伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。(3) 淋巴细胞：多见于传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。(6.3 )常见的异常白细胞形态的变化在外周血象中，除了各类白血病幼稚细胞外，通常能见到一些细胞形 态上的异常变化。(6.3.1)中性粒细胞1.核象变化：反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状 核细胞出现，它与分叶核细胞之间的比值约占1: 13。(1) 核左移：是指杆状核细胞增多，常见于感染。如晚幼粒、中幼 粒等细胞增多为核象极度左移，多见于类白血病反应或白血 病。 伴白细胞总数增咼的核左移：称再生性左移，常见于 急性化脓性感染，如大叶性肺炎等。 白细胞总数不增加或减低的核左移：称退行性左移， 常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、伴感 染中毒性休克的败血症等。(2) 核右移：是指不仅分叶核粒细胞增多，且分叶过多，常见4叶、5叶(正常时多分3叶)，这是造血功能衰退或造 血物质缺之的表现。常见于营养性巨幼细胞性贫血和使 用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右 移，表示预后不良。修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第15页共196页2.毒性变化：严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等症时，中性粒细胞可出现形态变异。(1) 细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。(2) 毒性颗粒：胞浆中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小 不等。可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致。(3) 空泡：可在胞浆或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未 能着色所致。(4) Dohle体：脑浆内出现嗜碱性点、线、梨形或云雾状物质，可能为核 浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现。(5) 核棘突：胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、癌转移、严重放射损伤等有关。3. 退行性变：表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行变可以是细胞衰老死亡的表现。(632)淋巴细胞淋巴细胞形态变异在多种疾病如各种病毒感染、传染性单核细胞增 多症最为常见。此外，疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见，统 称为异型淋巴细胞。传染性单核细胞增多症患者血液中常可出现3种异型淋巴细胞，即空泡型、不规则型和幼稚型。(6.4) 血红蛋白参考值男:120-160g/L女:110-150g/L(6.5 )红细胞分布宽度RDV为反映红细胞体积异质性的参数，常以所测得红细胞体积大小的变异 系数(CV%)来表示。它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观、 准确。RDW增大时有临床意义。(l) 用于缺铁性贫血(IDA)的诊断与疗效观察：缺铁性贫血时RDW增大，尤其是MCV尚处于参考值范围时(缺铁性贫血 时MCV应下降)RDW增大更是早期缺铁的指征；MCV减小时，RDV增大更 为显著，当给予铁剂治疗有效时，RDW各比给药前更大，以后逐渐降至正常水平。产生这种现象的原因，主要是因补铁后产生网织红细 胞，及正常红细胞生成并释放人血与给药前的小红细胞并存，故RDW先增大，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减少，RDW便逐渐降至参考范围。(2)用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断:修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第16页共196页IDA和轻型地中海性贫血时，MCV匀可减小。但IDA时RDW曾大，而 轻型地中海性贫血时RDW正常。(3)用于贫血的分类(Bessman分类法)：MCV只能反映红细胞平均体积的大小，不能代表红细胞体积大小的异质 性，对红细胞体积大小的评价，过去靠血涂片上红细胞形态的观察， 这种观察常受血涂片制作以及观察者的主观因素的影响较大，而且不 能定量，RDV能较好地反映红细胞体积的异质性，把 MCV和RDW结合 用于对贫血的分类将更为完善(表I I 2)。表 1-1-2 Bessman MCV /RDV贫血分类|类别MCVRDW正常缺铁性贫血=T巨幼细胞性贫血T溶血性贫血T铁粒幼细胞贫血T再生障碍性贫血单纯小细胞性贫血注：无变化；T增大；J减少(6.6 )平均血小板体积MPV勺临床意义要结合PLT变化才有价值。(1) 鉴别血小板减少的原因： 当骨髓造血功能损伤致血小板减少时，MPV减少； 当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少，MPV增大； 血小板分布异常致血小板减少时，MPVE常。(2) MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：骨髓造血功能衰竭时，MPVf PLT同时持续下降；造血功能抑 制越严重，功能恢复时，MP增大常先于PI 。 T升高。MPV 越小；当造血(3) 其他方面应用： MPV增大：见于骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫痰 (ITP)、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小 板综合征、镰刀细胞性贫血等。 MPV减小：见于脾亢、化疗后、再障、巨幼细胞性贫血等。修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第17页共196页(6.7 ).血小板比积(plateletcrit，PCT)参考范围男 0 . 108% -0 . 272%女 0 . 114% 0. 282%PCT与 PLT和MPV正相关，所以PLT MPV勺增减均可使PC%生变化。增高：见于骨髓纤维化、脾切除、慢粒等。 减低：见于再障、化疗后、血小板减少症等。(6.8 )血小板体积分布宽度(platelet volume distributenwidth，PDW )参考范围0. 155-0 . 181(15 . 5%-18 . 1%)(以血小板体积变异系数 CV%表示)PDW是反映血小板体积大小的异质性 参数。增大：急非淋化疗后、巨幼细胞性贫血、慢粒、脾切除、巨大血小板综合征、 血栓性疾病等。(6.9 )血细胞体积分布直方图的应用(I)红细胞体积分布直方图：将MCV和RDV配合直方图分析，可直接观察红细胞体积的分布情况。 只现一个峰：见于正常人、缺铁性贫血(峰左移)、巨幼细胞性贫血 (峰右移)。 可现两个峰：缺铁性贫血给予铁剂治疗有效时，可出现一个小红细胞峰和另一个正红细胞(或网织红细胞)峰。巨幼(红)细胞性贫血给 予叶酸、维生素BI2治疗有效时亦可见两个峰。(2) 白细胞体积分布直方图：静脉血比毛细管血白细胞数量略低。中档的血细胞分析仪一般为 三分群，它是根据加入溶血剂后，白细胞膜通透性改变而发生皱 缩，不同类型的白细胞皱缩后体积有明显差别，每个皱缩白细胞 通过血细胞分析仪的微孔时产生的脉冲信号经放大、甄别后，微 机处理数据得到其体积分布直方图。淋巴细胞群为35 90 fl大小 中间细胞群为90 一 160 fl大小 粒细胞群为160 450 fI大小三群细胞的百分比与白细胞数量的乘积为其绝对数修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第18页共196页正常人白细胞体积分布直方图，可见两个明显分离的峰，左峰为小细胞群(淋巴细胞)，右峰为大细胞群(粒细胞)，两峰之间为中 间细胞群的分布。急性白血病时，由于异常的原始、幼稚细胞增多，可见中间细胞 明显增高，这时直方图上见一个峰，峰值常在90 一 160 fl之间。这时必须推片染色镜检。(3) 血小板体积分布直方图：正常人血小板体积主要分布在 220 fl之间，21 30 fl之间有少 量大血小板，一般仪器以30 fl为最大的分析界标。血小板体积增大时，直方图会出现明显拖尾现象。有小红细胞或红 细胞碎片干扰时，直方图尾部会抬高。(6.10 )三种红细胞参数平均值的计算1、原理根据红细胞、血红蛋白浓度和红细胞比积，计算红细胞平均容量、 红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度，用作贫血的形 态学分类。2、计算方法(1) 平均红细胞体积(mean corpuscularvolume ， MCV):是指每 个红细胞的平均体积，以飞升(fI)为单位。每L血液中红细胞体积(L) 10MCV = = XXfl每L血液红细胞数(个)(2) 平均红细胞血红蛋白含量(mean Corpuscular hemoglobin ，MCH)是指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量，以皮克(pg)为单位。每L血液中血红蛋白浓度(g) X012MCH = = Xpg每L血液红细胞数(个)(3) 平均红细胞血红蛋白浓度(mean Corpuscular hemoglobin concentration ，MCHC:)是指平均每L红细胞中所含血红蛋白浓度 (g/L)。每L血液中血红蛋白g数(g/L)MCHC = = Xg/L每L血液红细胞比积(L/L)3、临床意义正常人和各型贫血时红细胞平均参考值表修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第19页共196页平均值MCH(pg)MCV(fl)：MCHC(g/L)正常27-3182-95J320-360大细胞性贫血-正常细胞性贫血-单纯小细胞性贫血J 二-小细胞低色素性贫血o注：-正常；T增大；J减少(6.11 )红细胞参数1、红细胞(red blood cell , RBC)男(4 . 0-5 . 5)310 12/ L女(3 . 5-5 . 0)310 12/ L2、血红蛋白(hemoglobin , HGB)男 120 一 160 g / L 女 110-150 g / L3、红细胞比积(hematocrit , HCT)男 0 . 400. 50 (40 % 50%) 女 0 . 350. 45 (35 %一 45%)修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第20页共196页A2、嗜酸性粒细胞直接计数标本EDTA-K2 10ul抗凝静脉血1ml原理手工法血液中嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色，而红细胞及其 他白细胞破裂或溶解。仪器法（VCS原理）试剂手工法嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液种类较多，各有一定的优缺点，尚待大家 继续实验，找出最佳配方。下列 3种稀释液供参考。1. Hinkelmann 液伊红0 . 2g95%石炭酸0 . 5m140% 甲醛 0 . 5ml蒸馏水加到100m12. 乙醇一伊红稀释液90% 乙醇 30ml甘油10ml碳酸钾lg枸橼酸钠0 . 5g20g几伊红液10ml 蒸馏水加至100m1本配方背景清晰，嗜酸性粒细胞着色鲜明，缺点是含10%甘油，比较粘稠，细胞不易混匀，故计数前必须充分振摇。3. 伊红一丙酮稀释液20g/L伊红液5mI丙酮5mI蒸馏水90ml新鲜配制效果好，每周配1次。仪器法修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室管理规范文件文件编号：CY-QMP-8-05版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第21页共196页COULTER HM五分类血细胞仪及专用试剂操作手工法1小试管中加稀释液0. 38ml。2. 常法取末梢血20卩l，加入管内混匀，待红细胞溶解后两侧充池。3. 静置3 5min,用低倍镜(必要时用咼倍镜)镜下计数10个大方格内 嗜酸性粒细胞数。仪器法操作同血常规计算10个大方格内嗜酸性粒细胞数3203 10 =嗜酸性粒细胞 /L参考值(50- 300)310 6/ L(50-300 八 1) 附注1. 血液稀释后应于1h内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞会逐渐被破坏，使结 果偏低或不易辨认。2. 充池前要充分混匀，但又不宜用力过猛，特别是使用含甘油的稀释液要 适当延长混匀时间。3. 注意与中性粒细胞区别，以免误认，中性粒细胞一般不着色，但也有着浅红 色的,其颗粒较小。4. 住院病人采标本时间力求统一，以免受日间生理变化的影响。5. 用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计数结果准确。临床意义1. 直接计数主要用于观察传染病预后、手术和烧伤病人的预后及测定肾上 腺皮质功能。2. 其他变化的临床意义同白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞的增减。修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第22页共196页A3红细胞沉降率测定标本200ul枸橼酸钠抗凝静脉血1.1ml，颠倒混匀。原理离体抗凝血液置于特制刻度测定管(魏氏法血沉管)内，垂直立于室 温中，一定时间时观察上层血浆高度的毫米数值报告之。仪器及试剂MONITOR JI血沉仪、专用血沉管109mmoFL(32g/L)枸橼酸钠溶液：取含二分子结晶水的枸橼酸钠 (分子量294. 12)3 . 28,用蒸馏水溶解，稀释至100ml。此液在室 温保存不得超过2周。操作1. 专用血沉管1支，加抗凝剂0. 2ml。2. 静脉采血后，取下针头，加血至刻度，颠倒混匀。3. 用血沉管(300mm32 5mm)取上述混匀血液至“ 0”刻度处，拭去管外 附着的血液，将血沉管直立在血沉架上。(MONITOR J操作)4. 记时，室温中静置lh，读出血沉仪上的读数即是血沉值。参考值男：v 15mrp/60min女：v 20m叶60min附注1. 红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量和质，血浆中脂类的量 和质，红细胞的大小与数量，是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁 度、放置位置是否垂直，室温高低等因素都有关系。2. 要求(1) 标本采集时避免脂肪血。(2) 血液和抗凝剂比例要准确。(3) 血沉管内径要标准(2 . 5mm)放置要垂直。(4) 做血沉的标本要在采集后3h内测定，并充分混匀。3. 室温过低、过高和贫血时，对结果都有影响。为此，血沉应尽量 放在18 25C室温下测定。室温过高时血沉加快，可以按温度系 数校正。室温过低时血沉减慢，无法校正。临床意义增快：(l)生理性：年幼小儿、经期、妊娠3个月至产后1个月。病理性：急性炎症、结缔组织病、活动性结核、风湿热活动期、组织 严重破坏、贫血、恶性肿瘤、高球蛋白血症、重金属中毒修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室管理规范文件文件编号：CY-QMP-8-05版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第23页共196页A4血型鉴定（1）ABO血型鉴定根据红细胞上有或无 A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型 4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗一A和抗一B分型血清来测定红细胞上有无相应的 A抗原或/和B 抗原；所谓反定型，是用已知 A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗一 A或 /和抗一Bo试剂和材料1. 抗一A（B型血）、抗一B（A型血）及抗一A十B（O型血）分型血清，制备方 法见本节附注；2. 5%A B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；3. 受检者血清；4. 受检者5%红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。方法1.试管法 取洁净小试管（内径10mm360mm）3fe，分别标明抗一A、抗一B和抗一A 十B,用滴管分别加抗 A、抗 B和抗 A十B。分型血清各1滴于试管 底部，再以滴管分别加入受检者 5%红细胞盐水悬液1滴，混和。另取洁净小试管（内径10mm360mm）3支，分别标明A B和O细胞。用 滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部，再分别以滴管加入 A、B和O 型5%试剂红细胞悬液1滴，混和。（3）立即以 1000r/ min 离心 Imin。修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/0生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第24页共196页(4)将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检 查。(5) 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。(6) 凝集强度判断标准4十红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。3十红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。2十红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。1十肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞土镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞MF混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝集，而极MF大多数红细胞仍呈分散分布。一 表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。2 玻片法(1) 取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B 和抗-A十B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清I滴 于标明的方格内，再各加受检者 2%红细胞悬液1滴，混和。(2) 另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、 B细胞和0细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A B和0型试剂红细胞悬液1滴。(3) 将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约 15min，以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。如以玻片作试验时，也 可用低倍镜观察结果。结果判定ABC血型正反定型结果分型血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试剂红细胞修改次数修改单号修改内容修改人日期临床检验诊断学标准化实验室文件编号：CY-QMP-8-05管理规范文件版序：A/O生效日期：2008年5月30日责任部门：检验科页码：第25页共196页抗-A抗-B抗-A十BA细胞B细胞O细胞十十A十十十B十-一1O十十十十十AB注：十为凝集；一为一不凝集。附注1分型血清质量性能符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。2试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混和，用生理盐水洗涤1次，以除却存在于血清中的抗体及可溶性抗原。3试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。4操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实 是否漏加血清。5按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以4C为最强，但为了防止 冷凝集现象的干扰，一般仍在室温(20 24C)内进行试验，37C可使反应 减弱。6. 离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。7. 观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。8. 判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。正反定型结果不一致的原因有技术性问题或红细胞和血清本身的问题，常见者有以下几种：1. 分型血清效价太低、亲和力不强。如抗一 A血清效价不高，可将A亚型误 定为0型，AB型误定为B型。修改次数修改单号修改内容修改人日期