实验动物微生物学分类及控制

实验动物微生物学分类及控制实验动物微生物学分类及控制第一节第一节 实验动物微生物学控制实验动物微生物学控制实验动物如受到病原微生物、寄生虫的污实验动物如受到病原微生物、寄生虫的污染，其正常状态的平衡将遭致破坏，引起动物发染，其正常状态的平衡将遭致破坏，引起动物发病，从而给动物的生产及实验的正常进行带来严病，从而给动物的生产及实验的正常进行带来严重影响。有的不立即发病，但处于可能发病的污重影响。有的不立即发病，但处于可能发病的污染状态，即机会致病因子的染状态，即机会致病因子的潜在性感染潜在性感染时，如再时，如再施加做为附加因素的实验处理，动物可能发病。施加做为附加因素的实验处理，动物可能发病。 病原体在动物体内增殖和导致动物发病，致病原体在动物体内增殖和导致动物发病，致使降低动物的生产效率及动物质量，使动物生产使降低动物的生产效率及动物质量，使动物生产设施蒙受重大经济损失，影响实验的进行。此外设施蒙受重大经济损失，影响实验的进行。此外还存在许多人兽共患的传染病，从事动物生产、还存在许多人兽共患的传染病，从事动物生产、实验的饲养者，实验人员也有发病的危险。实验的饲养者，实验人员也有发病的危险。 随着现代科学的发展和西方动物保护随着现代科学的发展和西方动物保护主义运动的影响，实验动物科学已从过去主义运动的影响，实验动物科学已从过去注重于动物的饲养管理和实验操作，愈来注重于动物的饲养管理和实验操作，愈来愈集中于动物的福利和实验结果的质量。愈集中于动物的福利和实验结果的质量。实验动物使用总量下降，高质量实验动物实验动物使用总量下降，高质量实验动物使用量增加。使用量增加。 早在七十年代，发达国家的实验动物在使用量早在七十年代，发达国家的实验动物在使用量上已经趋于平衡。但是，高质量实验动物的使用数上已经趋于平衡。但是，高质量实验动物的使用数量呈上升趋势，普通级、清洁级动物逐渐被量呈上升趋势，普通级、清洁级动物逐渐被SPFSPF级级取代。目前发达国家使用的大、小鼠等小型实验动取代。目前发达国家使用的大、小鼠等小型实验动物大多为物大多为SPFSPF级级. . 2005 2005年在全国基本普及使用清洁级实验大鼠、年在全国基本普及使用清洁级实验大鼠、小鼠。某些重点科研项目用实验动物，达到小鼠。某些重点科研项目用实验动物，达到SPFSPF级级水平。水平。第二节第二节 实验动物的微生物等级实验动物的微生物等级nGB 14922-1994GB 14922-1994实验动物实验动物 微生物学和寄生微生物学和寄生虫学监测等级（啮齿类和兔类）虫学监测等级（啮齿类和兔类） u将我国实验动物分为四级，即将我国实验动物分为四级，即一级动物（普通级）、一级动物（普通级）、二级动物（清洁动物）、三级动物（无特殊病原体二级动物（清洁动物）、三级动物（无特殊病原体动物）和四级动物（无菌动物）动物）和四级动物（无菌动物）。 nGB 14922.2-2001GB 14922.2-2001实验动物实验动物 微生物学等级微生物学等级及监测及监测(2002(2002年年5 5月月1 1日开始实施日开始实施) )u新标准对实验动物等级进行了重新设定，将新标准对实验动物等级进行了重新设定，将实验小实验小鼠和大鼠的微生物学等级分为清洁级、无特定病原鼠和大鼠的微生物学等级分为清洁级、无特定病原体级（体级（SPFSPF）和无菌级，取消了普通级。豚鼠、地）和无菌级，取消了普通级。豚鼠、地鼠和兔仍保留四级。犬和猴分为普通级和鼠和兔仍保留四级。犬和猴分为普通级和SPFSPF级。级。一、普通级动物一、普通级动物应用应用用于医学生物学中的用于医学生物学中的教学示范教学示范和科学实验的预实验和科学实验的预实验。二、清洁级动物二、清洁级动物应用应用三、三、无特定病原体动物无特定病原体动物应用应用国际上公认国际上公认SPFSPF动物适用于所有科研试验，是动物适用于所有科研试验，是目前目前国际标准级别的实验动物，疫苗生产必须应国际标准级别的实验动物，疫苗生产必须应用用SPFSPF动物动物。u利用利用SPFSPF鸡生产疫苗、抗体鸡生产疫苗、抗体：麻疹流行性腮腺炎：麻疹流行性腮腺炎二联活疫苗、抗轮状病毒卵黄免疫球蛋白、抗二联活疫苗、抗轮状病毒卵黄免疫球蛋白、抗大肠杆菌大肠杆菌O157H7O157H7鸡卵黄抗体等。鸡卵黄抗体等。药物安全评价药物安全评价：实验能否持续取决于污染的可能性：实验能否持续取决于污染的可能性老年病学研究老年病学研究：SPFSPF动物的寿命普遍超过普通动物动物的寿命普遍超过普通动物免疫学研究免疫学研究： 免疫缺陷动物只有免疫缺陷动物只有SPFSPF级或以上级别级或以上级别 动物才能保种、繁殖动物才能保种、繁殖. . 四、无菌动物四、无菌动物无菌动物的发展过程无菌动物的发展过程n1895189519101910年年 解决了无菌生命能否生存的问题。解决了无菌生命能否生存的问题。uPasteur认为动物没有肠道菌参与不能生存。生物学认为动物没有肠道菌参与不能生存。生物学家家NenK提出了相反的看法，由此开展了一场学术提出了相反的看法，由此开展了一场学术上的争论。十年后，上的争论。十年后，1895年年Nuttall 和和Thierfelder经经剖腹产，用牛奶饲喂获得了无菌豚鼠，第八天后处剖腹产，用牛奶饲喂获得了无菌豚鼠，第八天后处死，肠道内未检出细菌。死，肠道内未检出细菌。1898年年Scottellies获得了无获得了无菌鸡，无菌环境中养活了菌鸡，无菌环境中养活了17天，至此建立了无菌生天，至此建立了无菌生命可以存活的论点。命可以存活的论点。无菌动物的特点无菌动物的特点（一）形态学改变形态学改变n消化系统消化系统：无菌动物盲肠及其内容物重量可达体重：无菌动物盲肠及其内容物重量可达体重25%25%，多数情况下，无菌动物盲肠是普通动物的多数情况下，无菌动物盲肠是普通动物的5 51010倍。无菌倍。无菌动物由于盲肠膨大，肠壁菲薄，常易发生肠扭转导致肠动物由于盲肠膨大，肠壁菲薄，常易发生肠扭转导致肠壁破裂而死亡。有关盲肠膨大原因尚无定论。壁破裂而死亡。有关盲肠膨大原因尚无定论。n血液循环系统血液循环系统：心脏相对变小，白细胞数少，且数量波：心脏相对变小，白细胞数少，且数量波动范围小，与无病原体入侵有关。动范围小，与无病原体入侵有关。n免疫系统免疫系统：由于无菌动物几乎没有受过抗原刺激，其免：由于无菌动物几乎没有受过抗原刺激，其免疫机能基本上处于原始状态。胸腺中网状上皮细胞较大，疫机能基本上处于原始状态。胸腺中网状上皮细胞较大，其胞浆内泡状结构和溶酶体较少，胸腺和淋巴结处于不其胞浆内泡状结构和溶酶体较少，胸腺和淋巴结处于不活跃状态，脾脏变小。活跃状态，脾脏变小。无菌动物的应用无菌动物的应用n抗体制备研究抗体制备研究五、五、悉生动物悉生动物悉生动物的特性悉生动物的特性悉生动物在生物医学研究中的应用悉生动物在生物医学研究中的应用微生物学研究微生物学研究第三节第三节 洁净动物与普通动物的洁净动物与普通动物的 特性比较特性比较 一、各等级动物的相关关系一、各等级动物的相关关系二、微生物控制比较二、微生物控制比较按微生物控制程度的实验动物分类原则按微生物控制程度的实验动物分类原则三、对科研实验结果影响的比较三、对科研实验结果影响的比较四等级动物优缺点比较四等级动物优缺点比较四、如何选择不同等级的实验动物？四、如何选择不同等级的实验动物？五五. .等级动物优缺点比较等级动物优缺点比较选择标准选择标准无菌动物 无特定病原体动物 清洁动物 普通动物 研究领域 短 期 实 验 长 期 实 验 短 期 实 验 长 期 实验 短 期 实 验 长 期 实 验 老年学 + + - - * 微生物学 + + + + * 病理学 + + + - + * 肿瘤学 + + + + - - * 免疫学 + + - - - - * 药理学 - + + + + - * 生物化学 + + + + + + - 生理学 + + + + + * 营养生理学 + + + + - - * 遗传学 + + + 器官移植 + + 实验外科学 + + - + - 注：注：“+”+”可能或必须用；可能或必须用；“-”-”不可能或适用；不可能或适用；“* *”不用或不能用不用或不能用不同等级动物在生命科学的应用不同等级动物在生命科学的应用 第五节第五节 实验动物的卫生防疫与实验动物的卫生防疫与隔离措施隔离措施一、实验动物的防疫原则一、实验动物的防疫原则二、平时的预防措施二、平时的预防措施三、发生疫病时的扑灭措施三、发生疫病时的扑灭措施四、消毒措施四、消毒措施五、隔离措施五、隔离措施第六节第六节 洁净动物的培育及洁净动物的培育及 饲养管理饲养管理( (一一) )无菌动物的培育无菌动物的培育在无菌隔离器中进行在无菌隔离器中进行一、无菌动物的培育及饲养管理一、无菌动物的培育及饲养管理剖腹产仔鼠的哺育剖腹产仔鼠的哺育无菌检测无菌检测（二）悉生动物的培育（二）悉生动物的培育二、二、SPFSPF动物、清洁动物培育动物、清洁动物培育1 1、种群来源种群来源 来源于无菌动物来源于无菌动物。即将无菌动物或悉生。即将无菌动物或悉生动物饲养于屏障系统或半屏障系统。培育动物饲养于屏障系统或半屏障系统。培育SPFSPF动物时是动物时是以卵或子宫无病原体为前提，防止某些病原体通过胎以卵或子宫无病原体为前提，防止某些病原体通过胎盘垂直传染给胎儿。盘垂直传染给胎儿。2 2、饲养设施饲养设施 SPFSPF动物动物 屏障系统屏障系统 清洁动物清洁动物 半屏障系统半屏障系统3 3、饲养管理饲养管理 严格的微生物学检测严格的微生物学检测