药物分析12喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析

药物分析药物分析第十二章第十二章: :喹啉与青蒿类喹啉与青蒿类抗疟药物的分析抗疟药物的分析第一节第一节:喹啉类药物结构特征喹啉类药物结构特征喹啉类喹啉类药物药物吡吡啶啶苯苯环环稠和稠和而成而成典型典型药物药物NOH3CNHHOHCHHCH22H2SO42H2O硫酸奎宁典型典型药物药物典型典型药物药物NOH3CNHHOHCHHCH2二盐酸奎宁2HCl典型典型药物药物NNNNNNClCl4H3PO44H2O磷酸哌喹典型典型药物药物NHNCH3NCH3CH3Cl2H3PO4磷酸氯喹换个换个造型造型典型典型药物药物NHNCH3ClNCH3CH32H3PO4磷酸氯喹典型典型药物药物磷酸咯磷酸咯萘啶萘啶How beautiful it is!NNClOCH3NHOHNN4H3PO4给她打给她打扮一下扮一下典型典型药物药物磷酸咯磷酸咯萘啶萘啶How beautiful it is!NNClOCH3NHOHNN4H3PO4典型典型药物药物CH3NNNH2OH3CH2H3PO4磷酸伯氨喹主要主要性质性质碱性碱性含有含有N原子原子,一般都有碱性一般都有碱性旋光性旋光性含有手性原子含有手性原子,一般都有旋光性一般都有旋光性荧光特性荧光特性具有平面共轭结构具有平面共轭结构,一般具有荧光一般具有荧光紫外吸收紫外吸收光谱特性光谱特性吡啶与苯环具有共轭结构吡啶与苯环具有共轭结构,也有紫也有紫外吸收光谱特性外吸收光谱特性1.碱性 环丙沙星：盐酸；环丙沙星：盐酸； 奎宁、奎尼丁：二元酸硫酸（喹核碱含脂环氮，碱性强）奎宁、奎尼丁：二元酸硫酸（喹核碱含脂环氮，碱性强） 奎宁奎宁 ( (左旋体左旋体) )：pKpKb1b1为为5.07 pK5.07 pKb2b2为为9.79.7，饱和水溶液，饱和水溶液pHpH为为8.88.8，易溶于氯仿无水乙醇，易溶于氯仿无水乙醇(2:1)(2:1) 奎尼丁奎尼丁 ( (右旋体右旋体) )：pKpKb1b1为为5.45.4pKpKb2b2为为1010，易溶于沸水或乙醇，易溶于沸水或乙醇喹啉环上的喹啉环上的N N原子具有碱性，与强酸成盐原子具有碱性，与强酸成盐2.旋光性硫酸奎宁硫酸奎宁 ( (左旋体左旋体) )硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁( (右旋体右旋体) )3.荧光特性硫酸奎宁和硫酸奎宁丁在稀硫酸中显蓝色荧光，盐酸环丙沙星硫酸奎宁和硫酸奎宁丁在稀硫酸中显蓝色荧光，盐酸环丙沙星无荧光。无荧光。例如例如一、绿奎宁反应一、绿奎宁反应（Thalleioquin）奎宁和奎尼丁奎宁和奎尼丁鉴别鉴别NHONHOClCl2Cl2NOClClNH3NNNONH4O二醌基亚胺的胺盐u 取其水溶液加溴试液取其水溶液加溴试液2 23 3滴滴和氨试液和氨试液1ml1ml，即显，即显翠绿色翠绿色；u 加酸至加酸至中性中性显蓝色；显蓝色；u 酸性酸性则呈则呈紫红色紫红色；u 翠绿色可转溶于醇、氯仿中翠绿色可转溶于醇、氯仿中不溶于醚。不溶于醚。二、光谱特征二、光谱特征 UV盐酸环丙沙星：取本品，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中含8g的溶液，照分光光度法(附录 A)测定，在 277nm与315nm的波长处有最大吸收。 FLD硫酸奎宁：取本品约20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即显蓝色荧光。IR 红外光谱也可以应用于鉴别 基于无机酸盐的鉴别基于无机酸盐的鉴别硫酸盐硫酸盐加加BaCl2生成白色沉淀生成白色沉淀不溶于盐酸和稀硝酸不溶于盐酸和稀硝酸加醋酸铅生成白色沉淀加醋酸铅生成白色沉淀溶于醋酸铵或溶于醋酸铵或NaOH加加HCl不产生沉淀不产生沉淀基于无机酸盐的鉴别基于无机酸盐的鉴别氯化物氯化物加稀硝酸和硝酸加稀硝酸和硝酸银生成白色凝乳银生成白色凝乳状沉淀状沉淀加铵试液溶解加铵试液溶解,加硝酸再沉淀加硝酸再沉淀加二氧化锰产生加二氧化锰产生氯气使氯气使KI试纸遇试纸遇淀粉变蓝淀粉变蓝基于无机酸盐的鉴别基于无机酸盐的鉴别磷酸盐磷酸盐反应反应加硝酸银生成浅加硝酸银生成浅黄色沉淀黄色沉淀在铵试液或稀硝在铵试液或稀硝酸中均易溶解酸中均易溶解加氯化铵镁生成加氯化铵镁生成白色结晶性沉淀白色结晶性沉淀加钼酸铵试液与硝酸后加钼酸铵试液与硝酸后,加热生成黄色沉淀加热生成黄色沉淀一、硫酸奎宁一、硫酸奎宁1.酸度酸性杂质 取本品取本品0.2g0.2g，加水，加水20ml20ml溶解后，测定溶解后，测定pHpH值应为值应为5.75.76.6 6.6 。 2.氯仿乙醇不溶物 取本品取本品2g2g，加氯仿无水乙醇，加氯仿无水乙醇 (2:1) (2:1) 的混合液的混合液15ml15ml，在，在5050加热加热10min10min后，用称定重量的垂熔坩埚滤过，滤渣用上述混合液后，用称定重量的垂熔坩埚滤过，滤渣用上述混合液分分5 5 次洗涤，每次次洗涤，每次10ml 10ml ，在，在105 105 干燥至恒重，遗留残渣不得干燥至恒重，遗留残渣不得过过2mg2mg。 3.其他金鸡纳碱 (TLC、HPLC)1.酸度 取本品取本品1.0g1.0g，加水，加水25ml25ml溶解，测定溶解，测定pHpH值应大于值应大于2.42.4。 2.水中不溶物 取本品加水溶解后，稍放置即有黄色不溶物产生取本品加水溶解后，稍放置即有黄色不溶物产生, ,影响品质影响品质. .3.氯化物 系生产工艺带入系生产工艺带入.检查时为了避免溶液颜色干扰碱使咯萘啶检查时为了避免溶液颜色干扰碱使咯萘啶沉淀析出沉淀析出,过滤后进行检查过滤后进行检查.4. 甲醛甲醛5.四氢吡啶四氢吡啶磷酸咯萘啶的纯度检查硫酸喹啉硫酸喹啉含量测定含量测定非水溶液非水溶液滴定法滴定法CHPUSPHPLC法法甲磺酸的作用甲磺酸的作用?醋酸的作用醋酸的作用?乙二胺的作用乙二胺的作用?体内测定体内测定注意样品注意样品处理处理溶剂种类 使用范围常用溶剂酸性有机弱碱冰醋酸碱性有机弱酸二甲基甲酰胺两性酸/碱甲醇惰性酸/碱甲苯、氯仿、丙酮一、非水溶液滴定法当当HAHA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HAHA的的酸性，使反应顺利地完成。酸性，使反应顺利地完成。BH+ A-+HClO4BH+ ClO4+HA游离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸B. 硫酸奎宁测定NNH3COHHHCH=CH2HONNH3COHHHCH=CH2HOSO42-+ HClO43H+H+NNH3COHHHCH=CH2HONNH3COHHHCH=CH2HO+H+H+HSO4-ClO4-ClO4-ClO4-Ion-Pair 原理测定杂环类药物中吡啶类、喹啉类等药物时，主要采用烷基测定杂环类药物中吡啶类、喹啉类等药物时，主要采用烷基磺酸盐（如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠）或其他盐类。磺酸盐（如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠）或其他盐类。pH3.5BH+C7H15SO2O-BH+C7H15SO2O-影响条件：流动相一般呈酸性，以利于生物碱的离解；离子对试剂的非极性部分越大，形成的离子对分配系数越大，保留时间越长（十二烷基磺酸钠庚烷磺酸钠戊烷磺酸钠）。第二节第二节:青蒿素类药物的分析青蒿素类药物的分析v青蒿素又名黄蒿素青蒿素又名黄蒿素,是我国从菊花科植物黄是我国从菊花科植物黄花蒿中提取分离得到的一个含过氧基团的花蒿中提取分离得到的一个含过氧基团的新型倍半萜内酯新型倍半萜内酯研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 中国抗疟新药的研究源于1967年成立的五二三项目，其全称为中国疟疾研究协作项目，成立于1967年的5月23日,因绝密军事项目,遂设代号523。 研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 历经380多次鼠疟筛选，1971年10月取得中药青蒿素筛选的成功。1972年从中药青蒿中分离得到抗疟有效单体，命名为青蒿素，对鼠疟、猴疟的原虫抑制率达到100%。 研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 1973年经临床研究取得与实验室一致的结果、抗疟新药青蒿素由此诞生。 研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 1981年年10月在北京召开的由月在北京召开的由世世界卫生组织界卫生组织主办的主办的“青蒿素青蒿素”国国际会议上，中国际会议上，中国青蒿素的化学青蒿素的化学研究研究的发言，引起与会代表极的发言，引起与会代表极大的兴趣，并认为大的兴趣，并认为“这一新的发这一新的发现更重要的意义是在于将为进一现更重要的意义是在于将为进一步设计合成新药指出方向步设计合成新药指出方向”。 研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 1986年，青蒿素获得新一类新药证书，双氢青蒿素也获一类新药证书。这些成果分别获得国家发明奖和全国十大科技成就奖。 研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。 研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。 研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。 研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。 研究历史研究历史:资料来源于资料来源于baidu 2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。 研究历史研究历史:很遗憾事情很遗憾事情 这个药物虽然由我国发现,但我国却没有取得专利.因此,虽然这个药物每年在全球产生巨大的效益,但我国还是处于原料供应的地位,而这个地位还受到严重威胁.好可怜好可怜,好遗憾好遗憾青蒿素类药物结构与性质青蒿素类药物结构与性质OCH3HHHOOCH3H3COO青蒿素青蒿素类药物结构与性质青蒿素类药物结构与性质OCH3HHHOOCH3H3COHHO双氢青蒿素青蒿素类药物结构与性质青蒿素类药物结构与性质OCH3HHHOOCH3H3COOHOHOO青蒿琥酯青蒿素类药物结构与性质青蒿素类药物结构与性质OCH3HHHOOCH3H3COOHCH3蒿甲醚青蒿素类药物化学性质青蒿素类药物化学性质氧化性氧化性过氧桥键具有氧化性过氧桥键具有氧化性旋光性旋光性手性原子手性原子,具有旋光性具有旋光性紫外吸收特性紫外吸收特性环状结构虽然不具有共轭特性环状结构虽然不具有共轭特性,但取代基具有一定吸收特性但取代基具有一定吸收特性青蒿素类药物的鉴别试验青蒿素类药物的鉴别试验呈色反应呈色反应过氧桥键具有氧化性过氧桥键具有氧化性酸性条件下能将碘离子氧化酸性条件下能将碘离子氧化成碘与淀粉指示液显蓝紫色成碘与淀粉指示液显蓝紫色青蒿素类药物的鉴别试验青蒿素类药物的鉴别试验羟肟酸羟肟酸铁反应铁反应含内酯的化合物、羧酸衍生物和含内酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯类化合物在碱性条件下与一些酯类化合物在碱性条件下与羟胺反应生成羟肟酸。在稀酸溶羟胺反应生成羟肟酸。在稀酸溶液中与高铁离子呈色液中与高铁离子呈色显紫色显紫色青蒿素类药物的鉴别试验青蒿素类药物的鉴别试验香草醛香草醛-硫酸反应硫酸反应使分子中的羧基脱水，增加双使分子中的羧基脱水，增加双键位移，分子缩合反应生成其键位移，分子缩合反应生成其轭系统，在酸作用下形成阳碳轭系统，在酸作用下形成阳碳离子盐而显色离子盐而显色青蒿素类药物的鉴别试验青蒿素类药物的鉴别试验吸收光谱特征吸收光谱特征红外，与标准红外，与标准谱图对照谱图对照紫外，取代基末端紫外，取代基末端吸收以资鉴别吸收以资鉴别青蒿素类药物的鉴别试验青蒿素类药物的鉴别试验色谱法色谱法HPLC法法保留时间定性保留时间定性青蒿素类药物的鉴别试验青蒿素类药物的鉴别试验纯度检查纯度检查HPLC法法TLC法法青蒿素类药物的含量测定青蒿素类药物的含量测定HPLC法法青蒿素类药物的体内药物分析青蒿素类药物的体内药物分析HPLC/MS/MS注意样品处理注意样品处理