生化检验质控方法之大全文稿教学课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,生化检验质控方法之大全文稿演示,质量控制（,quality control,，,QC,）是利用现代科学管理的方法和技术检测分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，确保实验结果的准确可靠。也称为实验室质量保证。,定义：,1947,年,Sundeman,首先调查发现不同实验室对同一份标本的实验结果有惊人的误差。,1950,年,Levey,和,Jennings,就将工业质控图移植临床生化实 验室，此后，质控图和数理统计一直成为临床生化检验质量控制（,QC,）的重要手段。,1953,年世界上出现了商品性的控制血清。,1954,年发展到国与国之间的质量调查。,1960,年代初已发展为全面质量控制。,1974,年在日本召开了第一次临床生化检验质量控制国际 专题讨论会。,随后,WHO,和国际临床生化学会都设有质控领导机构，向各国提供标准品和控制物，领导和管理国际性的质量控制工作。,专业发展,3,主要内容,第一节 全过程质量控制,第二节 室内质量控制,第三节 室间质量评价,第四节 实验室认可,第五节 试剂盒的选择和评价,4,第一节 全过程质量控制,全面质量控制的内容, 分析前质量控制, 分析中质量控制, 分析后质量控制,5,全面质量控制的内容主要包括标本分析前的,质量保证、分析中的质量控制和分析后的质量评,估三个主要过程的质控。它们之间的实验保证体,系见图,4-1,。,全面质量控制的内容,内容主要为：, 人员的素质和稳定性, 实验室的设置和工作环境, 实验仪器的质量保证, 检测方法的选择和评价, 试剂盒的选择与评价, 病人准备, 标本的采集、处理和储存, 实验室用水等,（一）分析前质量控制,7,内容主要包括：, 标本的正确处理和应用, 项目操作规程的建立, 室内质控和结果分析, 登记和填发报告等,(,二,),分析中的质量控制,8,内容主要有：, 运送实验报告, 室内质控的数据管理, 参加室间质评, 病人投诉调查, 临床信息反馈等,（三）分析后的质量评估,9,图,4-1,全面质量控制实验保证体系,分析后质量评估,分析中质量控制,分析前质量保证,分析中质量控制,检查病人,申请检验,病人,准备,标本,采集,标本,运送,人员素质,工作环境,实验用水,实验室管理,临床医生,运送报告,病人投诉,室间质评,仪器质量保证,方法选择与评价,试剂选择与评价,反馈信息,标本处理,建立操作规程,室内质控及分析,标本分析测定,室内,复查,保留标本,随时复查,登记,填发报告,10,第二节,室内质量控制,临床生化实验室常规开展的室内质控（,Internal quality control,，,IQC,），旨在检测和控制常规工作的精密度和准确度，提高常规工作中天内和天间标本检测的一致性。能及时地、准确地报告检验结果。,11,人员培训,建立标准化操作规程,仪器的检定与校准,质控品,一、室内质量控制的任务,12,实验室每个工作人员都应对开展质量控制工作的重要性、基础知识、一般方法有充分的了解，并在实践过程中不断学习、提高。每个实验室都应培养一批开展质控工作的技术骨干。,1,人 员 培 训,13,标准化操作规程（,standard operational procedure,，,SOP,）包括仪器使用及维护的操作规程，试剂、质控品、标准品等使用的,操作规程和每个检验项目的操作规程等。,2,建立标准化操作规程,14,对本实验室的相关仪器如分光光度计、量具、自动生化分析仪以及其它测定仪器等要定期按要求进行检定和校准如对自动化分析仪、分光光度计的摩尔吸收系数,的定期校准。所有校准和检定都应有时间、结果、变更和频度的记录和说明。,3,仪器的检定与校准,15,4,质控品,定义,为质控,目的而制备的标本称为质控品。质控品含有与测定标本同样的基础物质（通常为小牛血清）其分析物应具有参考值、病理值和医学决定水平三种水平浓度。,16,是指对临床诊治疾病具有决定性作用的被分析物的浓度，是临床上按照不同病情给予不同治疗方案而确定的阈值。,医学决定水平,定义：,17,某一测定成分可,有多个医学决定水平。如血糖有四个决定水平。,2.8mmol/L,表示低于此值出现低血糖症状，,7.1mmol/L,表示空腹时确定糖尿病的水平，,8.9mmol/L,表示出现尿糖，,16.5mmol/L,以上出现高血糖昏迷。,特点：,18,根据质控品的物理性状不同分为冻干质控品、液体质控品和混合血清等。,根据有无测定值可分为定值（蓝色标签）质控品和非定值（红色标签）质控品。,各实验室可根据各自的情况选用以上一种质控品作为室内质控品。,质控品的种类,19,人血清基质，分布均匀。,无,传染性。,添加剂和调制物的数量少。,瓶间,CV%,酶类应小于,2%,，其它应小于,1%,。,冻干品复溶后稳定，,2,8,时不少于,24,小时，,20,时不少于,20,天；某些不稳定成分（如,BIL,，,ALP,等）在复溶后,4,小时的变异应小于,2%,在实验室的有效期应在一年以上。,合理的成本。,质控品应具有的特征是：,20,严格按质控品说明书操作。,冻干质控品的复溶要确保溶剂的质量。,冻干质控品复溶的加量要准确一致。,冻干质控品复溶应轻轻摇匀切忌剧烈震摇。,质控品应按规定方法保存不用超期品。,质控品要与标本同样测定条件下测定。,质控品的正确使用和保存,21,二、室内质量控制的主要方法,确定质量目标,设定靶值和控制限,Levey-Jennings,质控图,多规则质控技术,22,质量目标是实验室选用的质控方法所需达到的目标，质量目标可用总允许误差的形式表示,目前中国尚未确立各项目的总允许误差，可参考美国（表,-,）和欧洲（表,-,）,一、确定质量目标,最佳变异,(optimal,conditions variance,OCV,),表示实验室在最佳条件下测定项目所能达到的最好精密度水平。,常规变异,(routine conditions variance,RCV,),表示实验室在常规条件下测定项目所能达到的精密度水平。,RCV,2OCV,时，不可接受,二者是反映实验室工作水平的基础指标，也是开展室内质控工作的基础工作。,最佳变异和常规变异的设定,24,1,、稳定性较长的质控品,暂定靶值的设定：对新批号的,质控品进行测定，根据至少,20,次质控测定的结果，计算出平均值和标准差，作为暂定靶值和暂定标准差。,常用靶值的设立：以最初,20,个数据和三至五个月在控数据汇集的所有数据的累积平均数作为质控品有效期内的常用靶值和常用标准差。,2,、稳定性较短的质控品,3,、特殊情况的处理,二、设定靶值和控制限,25,对新批号的质控品应确定控制限，控制限通常是以多个标准差表示，即以标准差的倍数表示。不同项目（定量测定）的控制限要根据其采用的质控规则来决定。,4,、设定控制限,26,1,、均数标准差（,-s,）质控图,是临床最常用的质控图，以监测分析的精密度。,均数标准差（,-S,）质控图,三、,Levey-Jennings,质控图,根据前面确定的靶值（ ）和标准差绘制,-s,质控图，得到均值线（ ）、警告线（,2s,）和失控线（,3s,）。与质控图制作相同批号的控制血清，每天随病人标本分析，结果点在图上，直线连接。,（,1,）方法,:,27,d,均数,+2S,-2S,+3S,-3S,正常分布,28,正常分布规律：,95%,数据落在,2s,内, 不能有连续,5,次结果在同一侧, 不能有,5,次结果渐升或渐降, 不能连续,2,个点落在,2s,以外, 不应该有落在,3s,以外的点,（,2,）结果分析：,29,趋势变化,漂移,精密度变化,-3S,+3S,+2S,-2S,d,2S,30,漂移，提示存在系统误差。, 趋势性变化，说明试剂或仪器的性能已发 生变化。, 精度变化，提示测定的偶然误差较大，如 仪器、试剂不稳定等。,异常表现,:,31,（,1),方法：,要求在常规条件下，同时测定,2,份定值质控血清，并要求质控血清所含测定物浓度最好分别为医学决定水平的上限（高值）或下限（低值），或者是分析方法测定范围的上限和下限。将测定结果分别绘成,2,份不同浓度的 ,s,质控图，当有一份质控血清测定值处于质控图上,2s,3s,界限内，发出,“,警报,”,信号时，即应采用其余各条规则对质控图进行全面检查，若符合其中一条，就应把该批分析测定的结果判为,“,失控,”,。,2.Westgard,多规则质控法,32, 1,2S,警告规则：当,2,份质控血清中的任意,1,份测定值处于,2s,3s,界限内，为“警报”信号。,1,3S,规则：当,2,份质控血清中的任意,1,份测定值超过,3s,界限，为“失控”。提示存在随机误差。,（,2,）判断规则：,2s,-2s,-3s,3s,x,33,R4S,规则：,同一批中二个质控结果之差超出,4s,范围，其中一个超出,2s,限值，另一个超出,2s,限值，为“失控”，属随机误差过大。,22S,规则：,同批两个质控品结果同方向超出,2s,限 值，或同一质控品连续两次质控结果超出,2s,限值为“失控”，多由系统误差造成。,3s,2s,-2s,-3s,3s 2s,X,-2s,-3s,34,4,1S,规则：当,1,份质控血清的测定结果连续,4,次超过,1s,或,1s,界限，或,2,份质控血清的测定结果同时连续,2,次超过,1s,或,1s,界限时，为“失控”，一般由系统误差所至。,10,规则：当,1,份质控血清测定结果连续,10,次偏于均值一侧时，或,2,份质控血清的测定结果同时连续,5,次偏于 一侧时，为“失控”，是系统误差所致。,s,2S,3S,-s,-2s,-3s,s,-s,35,1,、操作者在测定质控时，如发现质控数据违背了质控规则，应填写失控报告单，对失控结果要进行回顾、分析是否人为错误操作等原因。,2,、重新测定一次，若在控，则说明是由于人为原因所致，若仍然失控，则应更换同一批号另一瓶质控血清，若在控则说明是质控物变质或污染。,（三）失控后处理,质控品必须分装、冷冻保存,36,3,、如仍失控，取另外一个批号的质控物或定值血清，以同样方法测定一次，如结果在控，提示前一批质控血清可能存在问题，认真查找质控变质原因，予以改正。,4,、如仍不在允许范围内，则仔细检查仪器各部分性能是否正确，若仍然失控，更换试剂，重新测定，如在控则可能由于试剂放置时间过长变质。,5,、如结果仍失控，则仔细检查仪器各部分性能是否正常，包括光路、水路、电路等系统，维修保养后重测。,37,范例一,BUN,结果偏高,解决方案：,1,、换定标液，将朗道的定标液换成试剂本身的定质控做所有项目质控，然后用质控单独做,BUN,项目质控后，,BUN,标液，结果仍偏高，排除定标液的本身问题。,2,、用定标液做质控结果亦偏高，排除质控品问题。,3,、先用结果降低。,结论：,试剂本身存在一定的系统误差，可能项目之间存在交叉污染。,解决办法：,更换试剂的位置，更换干燥棒，如不行则需更换不同厂家的试剂。,结果：,更换试剂位置，结果恢复正常。,范例二,RF,出现负值,可能原因分析：,1,、,RF,采用的是免疫比浊法，其测定的付波长为,700nm,，仪器在,700nm,处有很强的非特异性吸收峰，导致付波长吸收峰增高，当标本的浓度很低时，主波长的吸光度值比付波长的低，结果出现负值。,2,、定标液浓度较高，而比浊法不能用线性定标方式，必须采用多点定标的方法。低浓度时就很可能出现负值。,3,、抗原抗体反应出现后带现象。,可能的解决方案：,1,、将检测的付波长去掉（可能会结果偏高，乳糜血的干扰）,2,、更换定标液,3,、稀释。,39,40,41,42,43,44,第三节 室间质量评价,室间质量评价（,external quality assessment,，,EQA,）是指多家实验室分析同一标本，由外部独立机构收集、分析和反馈实验室检测结果，评定实验室常规工作的质量，观察实验的准确性，建立起各实验室分析结果之间的可比性。,45,鉴定实验室的工作缺陷（操作程序、制度）,建立方法的可接受限,鉴定方法的可信性,为实验室执照评定或认可提供客观依据,评价实验室工作人员的能力,评价实验室结果的可比性,目的是通过实验室间的比对，观察各实验室结果的准确性、一致性，并采取一定措施，使各实验室结果渐趋一致。,（一）室间质评的目的,46,（二）室间质评应具备的条件, 要有一支素质较高的质控技术队伍, 室间质评要有室内质控的基础, 要有良好质控血清作为调查样本, 样本定值方法可靠，有参考实验室作后盾, 统一测定方法及校准品,47,1,方法,组织若干实验室，共同在规定时间内测定同一批样品、收集测定结果，作统计分析并按规定评分。,（二）室间质评的方法,48,能力比对分析（,proficiency testing,PT,）是室间质量评价技术方案之一，现已成为全球性室间质量保证系统的主要内容，以保护病人的利益和公众的福利。,PT,方案是通过实验室之间的比对判断实验室的检测能力的活动。,美国国会,1988,年临床实验室修正案（,Clinical laboratory improvement amendment,CLIA88,）强制性地将,PT,作为实验室认可的主要内容之一。,能力比对分析,49,表,4-3,美国,CLIA,88,能力比对检验对临床化学的分析质量要求,项目,可接受范围,丙氨酸氨基转移酶,靶值,20%,清蛋白,靶值,10%,总蛋白,靶值,10%,碱性磷酸酶,靶值,30%,淀粉酶,靶值,30%,天冬氨酸氨基转移酶,靶值,20%,胆红素,靶值,6.84mmol/L,或,20%,（取大者）,总钙,靶值,0.25mmol/L,氯,靶值,5%,胆固醇,靶值,10%,高密度脂蛋白胆固醇,靶值,30%,50,肌酸激酶,靶值,30%,肌酐,靶值,0.265,mol/L,或,15%(,取大者,),葡萄糖,靶值,0.33m,mol/L,或,10%(,取大者,),甘油三酯,靶值,25%,尿素,靶值,0.71,或,9%(,取大者,),尿酸,靶值,17%,铁,靶值,20%,乳酸脱氢酶,靶值,20%,镁,靶值,25%,钾,靶值,0.5mmol/L,钠,靶值,4mmol/L,血气,PCO,2,靶值,5mmHg,或,8%(,取大者,),血气,PO,2,靶值,3S,血气,pH,靶值,0.04,51,国际,CLIA,88,的,PT,方案规定，临床生物化学项目每年至少进行,3,次,PT,调查，每次调查至少包括,5,个不同的质控样本，在一年内，对于任一项至少可得,15,个测定结果。通过各实验室间持续的比较，作出结果判断。,（一）方法,52,针对某一项目的得分（,Score,）：,S,1,=,对调查的全部项目的得分：,S,2,=,（二）计算,53,国际,CLIA88,技术细则规定，,S,1,、,S,2,均应大于,80,，否则判为不满意。,且如果,S,1,或,S,2,连续两次或两次以上不满意，即为失败，对于某一个接受结果，不再进行优劣分级。,（三）判断,54,PT,是对实验室常规工作进行评价的活动，目的是为了全面提高检验的质量。,所以对,PT,调查的标本应完全按照病人标本一样对待，与病人标本同时进行分析，切忌互相核对结果，这样才能反映实验室真正的日常工作水平。,各实验室应该与,PT,组织者密切合作，解决实验中出现的各种问题，不断提高检验质量。,（四） 目的意义,1,目的,55,通过能力比对分析可获得本实验室与使用同一方法的其他实验室结果的差异，以及与做同一试验但使用不同方法的实验室结果比较的情况。,能力比对分析还可评价实验室的分析能力，监控实验室可能出现的技术问题，可作为实验室质量保证的外部监督工具。,2,意义,56,变异指数得分法,1985,年全国临床检验质量控制会议上通过的提案，建议变异指数得分计算公式如下：,V = VI =,其中，为各实验室某项目的测定值，,T,为靶值，,V,为变异百分数，,VI,为变异指数，,CCV,为已选定的变异系数。,补 充,57,CCV,（,%,）,测定项目,测定项目,CCV,（,%,）,表,4-5 WHO,推荐的,CCV,值,K,+,Na,+,Cl,-,Ca,2+,P,3+,Glu,2.9,1.6,2.2,4.0,7.8,7.7,5.7,7.7,8.9,3.9,7.5,9.6,BUN,UA,Cr,TP,Alb,TBIL,58,判 断 标 准,在计算时，,VIS,只计整数位，不带正负符号。当,VI 400,时,VIS = VI;,当,VI,400,时，,VIS = 400,。,我国的标准为：,VIS,80,为优良,80,VIS150,为及格,VIS,200,，表明结,果中有临床上不允,许的误差。,VIS=400,的测定结果,会造成临床的严重失,误，是绝对不许可的,WHO,的标准为,:,VIS,50,为优秀,VIS,100,为良好,VIS,150,为及格。,59,VIS,方案过去运用的相当广泛，但随着科学的发展，已暴露出自身的不足，比如说酶、,HDL,、胆固醇等指标已成为当今实验室的常规项目，但由于,VIS,方案还没有给出它们的,CCV,值，所以无法计算,VIS,。而,CCV,值的确定是一个复杂而漫长的过程，并需要随着仪器的更新随时进行调整，从而使,VIS,的计算值无法真正代表当前的实际水平。,VIS,方案的评价,60,一、定义,实验室认可（,laboratory accreditation,）是由权威性专业组织按照一定的标准对实验室或实验室工作人员进行检查、考核，认可能够开展或胜任某些工作，并授予资格的过程。,第四节 实验室认可,61,认可委员会,一系列标准及档案,经选拔和培训并取得资格的评审员,二、,基本组成,62,第五节临床生物化学实验方法的选择与评价,一、实验方法的选择,二、实验方法的评价,三、临床诊断实验的性能评价,63,一、实验方法的选择,方法分级,1,、决定性方法：准确度最高，系统误差最小，经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法。用于发展及评价 参考方法和标准品。,2,、参考方法：指准确度和精密度已经充分证实的分析方法，干扰因素小，系统误差小，有适当的灵敏度、特异性直线性及较宽的分析范围。用于鉴定常规方法和二级标准品。,3,、常规方法：指性能符合临床或其他目地的需要，有适当的分析范围，而且经济实用。,64,标准品的分级：,标准品：,一,种或几种物理化学性质已经充分确定，被用于校准仪器或证实一种测定方法的物质。,1,、一级标准品：已经确定为稳定而均一的物质，它的数值已经由决定性方法确定，或由高度准确的若干方法确定，所含杂质也已经定量，且有证书，用于校准决定性方法，评价及校准参考方法以及为二级标准品定值。,2,、二级标准品：这类标准品可由实验室自己配制或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值，主要用于常规方法的标化或为控制物定值。,3,、控制物：控制物有冻干或是溶液，以参考方法用一级或二级标准品定值，用于质量控制，一般不用于标化。,一、实验方法的选择,65,实验方法的选择要求,1,、实用性,2,、可靠性,3,、真实性,66,二、实验方法的评价,评价实验与分析误差类型的关系,分析误差的类型,评价实验,初步实验,指标,偶然误差 重复性实验 精密度,恒定误差 干扰实验 准确度,比例误差 回收实验 准确度,67,三、诊断性试验评价的相关指标,1.,敏感度,2.,特异度,3.,阳性似然比,4.,阴性似然比,5.,受试者工作曲线,三、临床生物化学诊断实验的性能指标,1,、灵敏度 诊断实验检出的阳性病人的百分率,临床灵敏度（,%,）,=,实际上检测为阳性病人数,/,理论上为阳性病人数,2,、临床特异度 指诊断实验检查确定未患病的百分率,临床特异度,=,检查结果为阴性的人数,/,全部受检未患病的人数,69,3,、参考值：,系指一个地区的健康人群中，规定若干条规格标准，在总体中抽样进行调查测定，将测定结果经统计学处理求出均值和标准差，通常将均值定为参考值，将,X2S,定为参考范围。,70,4,、似 然 比,（,Likelihood ratio,；,LR,）,似然比指的是患某种疾病的患者进行某种检测所得的,指定,数值范围内,敏感度,和特异度之间关系,.,阳性似然比：诊断实验的真阳性率与假阳性率之比。,PLR =,敏感度,/,（,1-,特异度）,阴性似然比：诊断实验的假阴性与真阴性之比。,NLR=,（,1-,敏感度）,/,特异度,5,、,ROC,曲 线,ROC,曲线,(Receiver Operator,Characteristic curve),：真阳性率对假阳性率作图。并将所对应的点连接起来所得到的曲线。,血糖测定及其,sen,与,spe,血糖（,mmol/c,）,Sen(%),Spe(%),1-spe(%),3.88,4.44,4.99,5.55,6.10,6.66,7.21,7.77,8.33,98.6,97.1,94.3,88.6,85.7,71.4,64.3,57.1,50.0,8.8,25.5,47.6,69.8,84.1,92.5,96.9,99.4,99.6,91.2,74.5,52.4,30.2,15.9,7.5,3.1,0.6,0.4,第六节 试剂盒的选择和评价,本节主要内容,生化检验试剂的发展,试剂盒的选择和评价,75,临床生化试剂盒,临床生化商品试剂与标准液按检测项目组合成一套放在一个包装盒内叫试剂盒（,reagent kit,），或叫试剂组合（,reagent set,）。,与自动化分析仪匹配的试剂盒的研制、生产和供应走向产业化的道路，它无疑是临床生化发展史上一个巨大的技术进步。,76,试剂盒的分类和,发展,临床生化诊断试剂种类繁多，有液体型、粉剂型、片剂型，有单一试剂、双试剂、干试剂、多试剂等。,纵观近,20,多年来的发展，临床生化体外诊断试剂盒的分类和发展历史可表示如下：,77,化学分析法,方法学 物理性状 组合形式 操作方式,液体型自配试剂,液体多剂型试剂,手工法多步操作,酶法分析,干粉片型试剂,液体单剂型试剂,流动离心式分析仪,免疫学法,液体型商品试剂,液体双剂型试剂,任选分立式分析仪,干化学法,干式多层胶片型试剂,单剂型干片式试剂,干片式分析仪,78,（一）液体型试剂,优点是液体型试剂的试剂组分高度均一，瓶间差异小，测定重复性好和使用方便；它也无需加入任何辅助试剂及蒸馏水，避免了外源性水质对试剂的影响，性能较稳定，测定结果较为准确。,缺点是液体型试剂（尤其是酶试剂）保存时间较短，不便于运输。,一、液体型试剂和粉（片）剂型试剂,79,所谓液体单试剂就是将某种生化检验项目所用到的试剂科学地混合在一起，组成为一种试剂。应用时，只须将标本和试剂按一定比例混合，即可进行相应的生化反应，然后用适当的方法检测结果。,1,液体单试剂,80,内源性甘油给甘油三酯测定的干扰。,内外源性,NH,4,+,对尿素酶法测定的干扰。,内源性丙酮酸对,ALT,、,AST,测定的干扰等。,维生素,C,和胆红素对,Trinder,反应的干扰。,单试剂存在抗干扰能力差的缺点，给测定结果带来相当大的分析误差。例如：,81,所谓液体双试剂就是将某些生化检测项目所用到的试剂，按用途科学地分成两类，分别配成两种试剂，通常第一试剂加入后可起到全部或部分消除某些内源性干扰的作用，第二试剂为启动被检测物质反应的试剂，两种试剂混合后才共同完成被检项目的生化反应。然后用适当的方法检测结果。,2,液体双试剂,82,所谓粉剂型及片剂型试剂，即是将试剂的各组分用球磨技术粉碎成粉剂或混合后压成片剂，使用前再加入指定的溶液复溶成液体试剂。,（二）粉（片）剂型试剂,83,用固体原料研磨后制成粉剂或片剂，则存在许多问题：,要使试剂各组分混合得非常均匀，技术难度很大；,分装过程中的称量误差及复溶时加水量的准确性影响试剂的瓶间差；,水质优劣对试剂的稳定性和测定的可靠性有相当大的影响。,84,（一）检查包装是否完整,（二）试剂质量初评,（三）试剂性能特征的评估,二、试剂盒的选择和评价,85,（一）检查包装是否完整,商品试剂盒不仅应具有优质的试剂内容，而且应有完整牢固的包装和详尽明确的说明书。,1,、外包装 外包装应完整牢固，封口严密。,2,、内包装 内包装应有清晰完整的标签，牢固贴于容器表面。,3,、说明书 内容包括试剂名称、用途、测定原理和技术要求、标本要求、卫生部批准的文号等。,86,一、说明书审查,说明书是用户了解和正确使用试剂盒的指南。审查内容包括：,试剂名称；,用途；,测定原理和技术要求；,试剂盒内的包装内容；,适用仪器；,87,一、说明书审查,标本要求；,测定步骤及注意事项；,贮存的条件及有效期；,性能特征，包括准确度、精确度、特异性、,受干扰的程度、线性范围、参考范围；,生产单位名称、地址、邮编及电话。,88,（,二）试剂质量初评,通过观察试剂的颜色、性状及溶解度等对试剂质量进行初步评价。,粉剂型应均匀无凝块，不粘附瓶壁；,液体型试剂应无沉淀，无混浊，无渗漏。,89,（三）试剂性能特征的评估,（一）准确度 （二）精密度,（三）干扰物试验 （四）线性范围,（五）稳定性,90,（一）测定准确度,1,、通常用回收试验来衡量试剂盒的准确度。回收率越接近,100%,，准确率越高，一般以,100%5%,为合格。,2,、也可以用对比试验来衡量 ：将被检试剂盒与公认的参考方法同时测定若干样本，计算两组结果的相关系数和直线回归方程。,相关系数,在,0.9,1.0,之间，斜率,b,越接近,1.0,，截距,a,越接近,0,，则准确度越高（,y=a+bx,）。,b,表示比例系统误差，,a,表示恒定系统误差。,91,（二）检验精密度,试剂批内精密度和批间精密度均以变异系数来表示，一般批间,CV,值应大于批内，但二者应无显著差异，否则，试剂盒的均一性不符合要求。,1,批内精密度 同一样品用同一瓶试剂测定,10,次，求平均值、标准差、变异系数。,2,批间精密度 同一样品，用不同批号的,10,瓶试剂测定，求平均值、标准差、变异系数。,92,（三）干扰物试验,通过试验观察试剂对干扰物影响的耐受程度。,方法 取一混合标本，从中分出几份，分别加入不同以知量的干扰物，然后测定出不同干扰物浓度下的待测物量，比较其测定结果，从各自的偏差程度即可了解试剂对干扰物的耐受程度。,93,（四）测定线性范围,线性范围指该试剂盒按其说明使用时可准确测量的范围。,试剂盒的线性范围应能覆盖临床上的参考值范围和常见疾病的医学决定水平，以减少样品稀释重测的机会。一旦线性范围变窄即应废弃。,造成线性范围变窄的原因常见的有：,生产中组份投料量不足；,生产后组分稳定性差；,运输和贮存不当等。,94,（五）稳定性试验,试剂盒稳定性是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其性能指标的期限。该期限应符合规定的储存期。方法有以下三种。,1,原包装试剂的稳定性 按说明书的保存方法储藏，于不同时期取出一瓶复溶，测定试剂吸光度值、标准品含量、定值血清含量、线性范围、酶促反应时间曲线或化学反应速度时间曲线及其他性能指标，直到这些指标变化超出规定值的,10%,以上的期限，为原包装试剂的稳定期。,95,2,复溶后试剂的稳定性 将复溶试剂分别放在,4,、,25,保存，逐日与新复溶试剂对比，观察上述指标（见原包装试剂稳定性），直到测定结果与新复溶试剂的差值,10%,以上，这一期限为复溶后试剂的稳定期。,3,不同温度下的保存期 将原包装试剂盒置,25,、,37,、,45,、,4,保存，以出现说明试剂变质的指标来确定在不同温度下的保存期。,96,