保健食品功效成分检测广州会课件

*,提 纲,一、保健食品及其标准概况,二、保健食品的检验要求,三、保健食品理化检验及常用的分析方法介绍,四、保健食品功效成分和分析检测,五、保健食品分析方法建立和分析方法学验证,六、保健食品功效成分检测其它有关问题,1,一、保健食品及其标准概况,1,、保健食品的特点,2,、保健食品的标准现状,3,、健食品的标准内容,4,、保健食品和药品标准的区别,5,、保健食品及其质量标准存在的问题,和对策,2,1,、保健食品的特点,保健食品注册管理办法,明确指出保健食品是指,是指声称具有特定保健功能或以补充维生素、矿物质为目的的食品。即适宜于特定人群食用，具有调节机体功能，不以治疗疾病为目的，并且对人体不产生任何急性、亚急性或慢性危害的食品。,保健食品首先必须是食品，它必须无毒无害。,两个基本特征：,一是安全性，对人体不产生任何急性、亚急性或慢性危害；,二是功能性，对特定人群具有一定的调节作用，但与药品有严格的区分，不能治疗疾病，不能取代药物对病人的治疗作用。,3,保健食品与普通食品药品的区别,项目,普通食品,保健食品,药品,作用,营养、感官、无保健作用,营养、感官、保健、无治疗作用,治疗疾病，,有治疗作用,属性,传统食品,有传统食品和药品属性,药品属性,食用量,不限量,有限量,有限量,长期服用,可以,可以,不可以,适宜人群,各类人群,特定人群,特定人群,形态,食品,食品、药品,药品,副作用,不允许,不允许,允许,4,2,、保健食品的标准现状,标准化是保健食品行业的迫切需要，要鼓励保健产业创新、提升保健产品质量就要从源头抓起，从规范保健品原料做起，而大部分保健产品原料，特别是天然产物标准匮乏,目前保健食品原料的标准体系不健全，许多大类的原料品种既无国家标准，也无行业标准，仅有企业标准，使行业规范和监管存在局限。原材料品质缺乏参照，到底有多少功能成分，活性是否稳定一致，缺少判定的标准依据。,5,保健食品的标准现状,多元管辖。目前，保健食品的注册与评价管理类似药品，归口在食药监局，生产与卫生监督管理、市场监督等靠近普通食品，归口在卫生部和质量技术监督部门。,国家对保健食品及原料的标准管理十分重视，保健食品的标准建设已纳入发改委制定的“十一五”规划的重点专项计划中，其中包括保健食品原料标准、评价标准和检测标准的制定。,6,3,、保健食品的标准内容,标准的编写按照,GB/T1.1-2000,、,GB/T1.2-2002 ,标准化工作导则,、,GB16740-1997,保健（功能）食品通用标准,国家标准的规定,符合国家有关标准化管理和保健食品管理的法律 、法规,7,4,、保健食品和药品标准的区别,标准内容方面,标准体系和形式方面,项目和标准方法,8,保健食品和中药在标准内容方面的区别,1),、食品标准是产品质量检验的依据和技术要求。保健食品标准和药品标准从内容和形式上差别均较大，保健食品标准主要是按照食品标准体系和方式制定的，一个标准往往适用于一类保健食品的检验，如保健食品中人参皂苷成分的含量测定标准方法就适用于所有含有人参、西洋参保健保健食品中人参皂苷成分的含量测定，保健食品中维生素类成分的测定标准方法就适用于所有含有维生素类保健食品中维生素的含量测定。而药品标准相比之下更加苛刻，每个药品都对应一个适用于其自身的特定的质量标准，因为即使同一种有效成分在不同的药品配方中，由于受到其它组分的影响所采用的含量测定方法是不同的。,9,2),、保健食品在剂型上和药品非常相似，如都有片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、茶剂等剂型，因此它们在某些检查方法上有相同之处，如水分、崩解时限、装量或重量差异（净含量负偏差）、相对密度、,PH,值、总灰分、炽灼残渣等是基本相同的，另外由于大多数保健食品配方中含有多种中草药，因此,中国药典,中对相关中药的鉴别、检查和含量测定等方法可适用于保健食品标准。下表一为保健食品标准和中药标准在内容和形式上的差别。,10,保健食品和中药在标准体系、标准内容和形式方面的区别,项 目,保 健 食 品 标 准,中药标准,标,准,体,系,部分引用国家食品标准,GB,T5009-2003,食品卫生检验方法理化部分,（一、二）和行业标准,保健食品通用卫生要求（卫生部,1996,第,38,号）,保健食品检验与评价技术规范,2003,GB16740,1997,保健食品通用标准,参考中国药典、地方标准、企业标准等,没有自己独立、完整的标准体系,中国药典,局颁标准,地方标准,企业内控标准,每个品种都有自己独立完整的质量标准,11,标准内容,和结构组成,保健食品,1,、主题内容与适用范围 （标准的主题内容和适用范围）,中药,1,、处方 （药材、提取物、半成品）,2,、引用标准（可供引用的国家标准和行业标准）,2,、制法 （制剂工艺方法，包括辅料等）,3,、定义、术语、产品分类、基本原则,3,、性状 （形色气味等特征）,4,、技术要求,原料和敷料要求、外观和感官要求、理化要求（包括物理指标如净含量负偏差、固形物含量、比容、密度等；化学成分如水分、灰分、功效成分含量或限量、营养素、食品添加剂,GB2760,、营养强化剂添加量,GB14880,，不得含有禁用药品,GB15266,、特定食品不得含有兴奋剂、激素等）、卫生要求（有害物质和金属的限量如铅、汞、砷、氰化物、咖啡因等；农药、兽药残留限量；及微生物限量）和功能,4,、鉴别 （理化试验和反应、,TLC,、,HPLC,、,GC,、,UV,、,IR,等）,5,、检验方法（感官指标和理化指标。按国标、行标及权威机构认可的方法测定，包括营养素和功效成分测定、兴奋剂和激素测定、重金属、农药残留、微生物）。如果无现行方法，可以规定试验方法。化学分析按,GB/T1.4,的格式写。,5,、检查 （相对密度、熔点、旋光度、折光率、,pH,值、杂质检查，重金属（镉砷铅汞铜）、农药残留、氯化物、铁盐、砷盐检查，水分、灰分、干燥失重、炽灼残渣、膨胀度、酸败度、不溶性微粒、有关物质（注射剂）、浸出物、溶液颜色、粒度、可见异物检查、重量差异、装量差异、最低装量检查、崩解时限、融变时限、溶散时限、外观均匀度、无菌检查、微生物限度、总固体、溶化性、细菌、热原、内毒素、皂化值、碘值、羟值、过氧化值）,6,、标签（按,GB16740,的规定，包括名称、配料表、功效成分和营养成分、保健功能、净含量与固形物、制造者名称及地址、生产日期、保质期或,/,和有效期、贮藏条件、食用方法、产品标准号或审批文号、特殊标注内容（含兴奋激和激素的要求具体名称和含量）,6,、含量测定 （含氮量、乙醇量、甲醇量、脂肪与脂肪油测定、柔质、挥发油、桉油精及有效成分含量测定）,7,、标准附录,7,、功能与主治,8,、提示附录,8,、用法与用量、注意,9,、规格、贮藏,12,保健食品与中药在检测项目和标准方法的比较,保健食品常用的检测方法与药品标准方法由于侧重点不同，有相似的地方，也有许多不同点。有些检测方法相同或相似但限量要求不同，如重金属、农药残留量的检测，保健食品按照食品标准的要求，规定的限量比药品标准要低。而一些通用的检查方法如水分、灰分、崩解时限、,PH,值等方法基本相同。下表为保健食品和药品常见的检测项目和使用的标准情况。,13,保健食品与中药在检测项目和标准方法的比较,检测项目,保健食品标准检验方法,药品标准方法,水分,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,灰分,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,崩解时限,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,PH,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,相对密度,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,装量差异（净含量负偏差）,JJF-1070-2005,中国药典,一部,2005,重量差异（净含量负偏差）,JJF-1070-2005,中国药典,一部,2005,农药残留,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,重金属,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,稳定性,方法不够成熟,方法较成熟,14,检测项目,保健食品标准检验方法,药品标准方法,钙的测定,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,铁的测定,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,锌的测定,GB/T5009-2003,锰的测定,GB/T5009-2003,硒的测定,GB/T5009-2003,铜的测定,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,维生素类,GB/T5009-2003,中国药典,二部,2005,氨基酸的测定,GB/T5009-2003,中国药典,二部,2005,纤维,GB/T5009-2003,DHEA,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,二部,2005,DHA,，,EPA,，,DPA,GB/T5009-2003,15,检测项目,保健食品标准检验方法,药品标准方法,烟酸，咖啡因等,GB/T5009-2003,中国药典,二部,2005,蛋白质,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,总黄酮,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,总皂苷,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,银杏类,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,人参类、西洋参类,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,蜂皇浆（,10-,羟基癸烯酸）,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,腺苷,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,肌醇,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,肉碱,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,洛伐它定,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,二部,2005,16,检测项目,保健食品标准检验方法,药品标准方法,牛黄酸,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,二部,2005,褪黑素,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,二部,2005,红景天类,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,芦荟类（芦荟苷）,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,软骨藻酸,GB/T5009-2003,吡啶甲酸铬,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,大豆异黄酮类,参考文献方法或企业标准,中国药典,一部,2005,多糖类,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,大蒜素,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,黄曲霉毒素,B1,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,蚂蚁类（锰）,GB/T5009-2003,17,检测项目,保健食品标准检验方法,药品标准方法,甲壳质类（脱乙酰度）,保健食品检验与评价技术规范,2003,灵芝类（膳食纤维）,GB/T5009-2003,角鲨烯,GB/T5009-2003,植物油类（脂肪酸）,GB/T5009-2003,蚯蚓类,保健食品检验与评价技术规范,2003,，,-,亚麻酸,同上,中国药典,一部,2005,IgG,同上,中国药典,二部,2005,五味子类,同上,中国药典,一部,2005,金雀异黄酮,同上,麦牙低聚糖等,同上,原花青素,同上,中国药典,一部,2005,红曲产品,同上,18,检测项目,保健食品标准检验方法,药品标准方法,核苷酸,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,二部,2005,茶氨酸,保健食品检验与评价技术规范,2003,葛根素,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,甘草,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,陈皮,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,大黄,保健食品检验与评价技术规范,2003,中国药典,一部,2005,违禁药物（抗疲劳、减肥、改善生长发育、调节血糖）,参考中国药典或文献,中国药典,二部,2005,胆固醇（降血脂类）,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,酸价、过氧化值（鱼油类）,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,海产品（镉）,GB/T5009-2003,中国药典,一部,2005,磷脂类（丙酮不溶物）,GB5009.197-2003,葡萄籽提取物,参考文献方法或企业标准,番泻叶,参考文献方法或企业标准,中国药典,一部,2005,总蒽醌化合物,参考文献方法或企业标准,鲨鱼软骨素,GB/T5009-2003,19,5,、,保健食品及其质量标准存在的问题和对策,1),、标准管理,2),、标准内容及方法,3),、发挥中药特长开发有中国特色的保健食品,4),、安全性问题,5),、添加化学药和违禁药的检测,20,5,、,保健食品及其质量标准存在的问题,和对策,6),、有害成分的检测,7),、稳定性研究和有效期制定,8),、对照品问题,9),、提高保健食品的科技含量,10),、引导科学的保健食品理念,21,1),标准管理,由于诸多方面的原因，我国保健食品从研发、注册审批、生产、市场等多个环节存在多元管辖的问题，目前保健食品产业还没有统一的行政归口管理部门，卫生、医药、工商、质检等部门各自为政，还没有制定一个可操作性的产业标准以及规范统一的检测手段、审查程序和管理办法。保健食品标准也是如此，注册审批的标准和市场监督检查等用于质量控制的标准不统一，这种管理上的混乱和割据一方的局面对保健食品统一管理极为不利。目前保健食品标准往往是引用一些食品标准的方法和药典及文献的方法组成的，针对性不够强，严格地说，保健食品没有自己的质量标准。因此建议针对特定的保健食品制定相应的标准和方法，并适当参考药品标准的格式和管理形式逐步建立一套完整的保健食品自己的标准，必将大大推动我国保健食品的整体质量。,22,2),标准内容及方法,1,、标准方法重现性差，有些标准制定欠合理,2,、某些保健食品没有功效性成分的检测或检 测方法粗浅,3,、适当增加鉴别项,4,、维生素和矿物类膳食补充剂,5,、多糖类的测定方法,23,3),发挥中药特长开发有中国特色的保健食品,我国有着,5000,多年的中医药养生保健传统，中国传统的中药疗法以及养生之道，具有防治统一、极少毒副作用的优势，在国际上日益受到重视，在发达国家已经成为一种时尚。发挥传统中医药优势，积极地“走出去”，是我们保健食品开发的一条重要思路。当前，我们在中医药保健食品上要尽快形成一套完善的验证系统，包括中医现代化系统、中药质量、毒理安全及临床疗效评估验证系统、统一的中药实验室分析方法的标准化系统和配套系统，以便尽快获得发达国家的保健食品认证。,24,4),安全性问题,药品的质量主要围绕安全、有效、稳定、可控八字方针制定注册审批方案和质量控制标准。而保健食品作为食品的范畴更应该强调安全第一。因此保健食品在制定质量标准时仍然要遵循我国的食品标准，对涉及食品安全性的因素应重点考虑，如化学污染（重金属、农药残留、有机溶剂残留、树脂残留等有毒成分、有害物质）和生物污染（致病微生物细菌、毒素等）。同时应参考药物稳定性的研究方法，制定科学合理的有效期。,25,5),添加化学药和违禁药的检测,目前市场上常见的添加化学药品和违禁药品的保健食品主要集中在减肥类（安非他明、西布曲明、咖啡因、氯苄苯丙胺、芬妥拉明、氯噻嗪、赛尼可）、延缓衰老（己烯雌粉、雌二醇、雌激素酮、甲羟孕酮、去氧孕烯）、调节血糖类（格列苯脲、格列吡嗪、二甲双胍、苯乙双胍）、调节血压（卡托普利、依那普利、甲基多巴、尼卡地平、利血平）、抗疲劳类（达那唑、甲基睾酮、司坦唑、前列地尔、西地那非、他打拉非）、免疫调节类（甲基睾丸激素、睾丸激素及其酯、生长激素）等。这些违法添加物严重影响了保健食品的质量和安全性。我们近期对市场上以上几类保健食品进行了添加药物的检测，主要建立了,HPLC,法、,HPLC-MS,法、,GC,法和,GC-MS,法等检测保健食品中添加盐酸芬氟拉明、盐酸二甲双胍、格列吡嗪、格列苯脲、盐酸麻黄碱、洛伐他丁、西地那非、咖啡因等的方法，发现将近三分之一的被测样品检测以上成分结果为阳性。因此对这类成分的严格控制将是今后保健食品质量控制和市场监督的主要工作内容之一。,26,6),有害成分的检测,保健食品中的有害成分包括化学有害物（重金属、农药残留、有机溶剂残留、树脂残留等、其它可能的污染物）、生物有害物（黄曲霉毒素、其它细菌毒素、微生物等）。近年来国际上对中草药、植物药有害物质的控制日益严格，我国药品标准也建立了相应的检测方法。食品标准对有害物质的控制更加严格，保健食品中对重金属、农药残留的检测标准和方法参考食品国家标准，对有机溶剂残留、树脂残留的检测药根据具体品种的生产工艺而制定适宜的方法。目前对中药和保健食品中黄曲霉毒素的检测仍然在技术和可操作性上比较薄弱，急待进一步研究和制定标准方法。,1,27,7),稳定性研究和有效期制定,安全、有效、稳定、可控是药品质量管理强调的八字方针，其中安全问题是首要的。对于保健食品而言，也应该强调八字方针。除了安全性和有效性外，保健食品的稳定性也非常重要，它直接影响着保健食品的安全性和有效性，乃至有效期的制定。保健食品的稳定性是指原料及制剂保持其物理、化学、生物学和微生物学性质的能力。稳定性研究目的是考察原料或制剂的性质在温度、湿度、光线等条件的影响下随时间变化的规律，为保健食品的生产、包装、贮存、运输条件和有效期的确定提供科学依据，以保障消费者的安全和利益。 稳定性研究是保健食品质量控制研究的主要内容之一，与保健食品质量研究和质量标准的建立紧密相关。稳定性研究具有阶段性特点，贯穿保健食品研究与开发的全过程，即使在保健食品上市后还应继续进行稳定性研究。,28,7),稳定性研究和有效期制定,我国保健食品的稳定性研究还处于初级阶段，没有标准的方法和指导原则，保健食品的有效期制定不够合理，因此可参考药品稳定性的研究方法和指导原则。稳定性研究的设计应根据不同的研究目的，结合原料的理化性质、剂型的特点和具体的处方及工艺条件进行。通过对影响因素试验、加速试验、长期试验获得的药品稳定性信息进行系统的分析，确定保健食品的贮存条件、包装材料,/,容器和有效期。保健食品的有效期应综合加速试验和长期试验的结果，进行适当的统计分析得到，最终有效期的确定一般以长期试验的结果来确定。对保健食品的稳定性和有效期确定也是保健食品质量标准研究应该重点考虑的内容之一。,29,8),对照品问题,保健食品检验所需的对照品主要来源于中国药品生物制品检定所对照品中心、一些经营对照品和试剂的公司，还有一些来源于社会机构如科研院所、高校等，这些对照品来源各异、纯度不同，没有统一的标定，直接影响其检测结果，不同检验机构的检验结果因所使用不同来源的对照品而导致结果不同，无法比对。因此，对照品的缺乏和不统一，严重阻碍了保健食品的检验和质量控制。,30,8),对照品问题,近年来，我国药品标准在中药鉴别和含量测定方面提高较大，增加了许多检测项目，因此也增加了许多中药化学对照品和对照药材，这些对照品在中药材、尤其是复方制剂中有关组分的鉴别和含量测定中起了非常重要的作用。相比之下，保健食品标准中对中药化学对照品和对照药材的使用较少，许多复方保健食品仅检测其中的一味中草药，而对组方中其它组分没有任何鉴别和含量测定要求，因此目前的标准很难反映产品的真实质量情况。建议以后增加对照品和对照药材对保健食品中相关组分的控制和检测。另外有一些品种目前仍缺乏合适的对照品或对照药材的，应组织有关部门进行此方面的基础研究工作。对有些中草药为原料的保健食品，由于同一中药中可能含有多种功效成分，以哪个（些）作为对照品较为合适，也是今后需要研究的课题。,31,9),提高保健食品的科技含量,在面临大量的国外保健食品进口中国和日益加剧的市场竞争的环境下，所有从事保健食品生产的中国企业都应该清醒地认识到，未来保健食品竞争的核心必将是科技含量，加强科技投入迫在眉睫。特别是已经有一定经济实力的企业更要重视保健食品的应用基础研究，努力提高新产品的科技含量和质量水平，使保健食品企业向高新技术企业过渡，科技含量高的产品成为主流。只有保健食品企业不断更新技术和提高技术含量，开发出效果好、质量高、有特点的第三代保健食品，使产品从低层次的价格战、广告战中走出来，转向高层次的技术战、服务战，才能在“入世”后，缔造出我国的保健食品世界品牌，才有能力进军国际市场。,32,10),引导科学的保健食品理念,随着人民生活水平的提高和保健意识的加强，有专家断言：“生物保健食品将是,21,世纪的食品。” 保健食品将成为人们日常生活中的普通消费品。然而，目前保健食品大多被定位为高档奢侈消费品，其价格较昂贵。从经济学的角度来看，保健食品属于需求弹性较大的产品，即价格的降低，将会导致保健食品需求量的成倍增加。目前大多数保健食品在价格上还存在比较大的降价空间，如果保健食品企业实行低价策略，实行规模经营，保健食品生产企业由此所获得的规模效益不仅可弥补降价所造成的损失，而且企业的利润也会增加。因此制定科学合理的价格标准，能够促使保健食品由奢侈消费品向普通消费品转变。另外，成熟的产业离不开成熟的消费者，但目前消费者对保健及保健食品缺乏必要的知识，不恰当地否定真正保健食品的作用。因此，今后的保健食品广告宣传要从功效宣传转向保健知识宣传，以保健知识宣传和品牌宣传为核心，提高消费者的保健意识，帮助消费者树立正确的保健意识和健康观念。,33,二、保健食品的检验要求,1,、检验依据,2,、检验要求,34,1,、主要检验依据,保健食品管理办法（,1996,年卫生部,46,令）,保健食品注册管理办法,卫生部健康相关产品检验机构认定与管理办法（卫法监发,1999,第,76,号 ）,卫生部发布的与保健食品相关的文件,保健食品通用卫生要求（,1996,年）,保健（功能）食品通用标准（,GB16740,）,保健食品检验与评价技术规范（,2003,年版）,食品国标,GB/T 5009,2003,企业标准,35,2,、检验要求,保健食品检验机构,CDC,系统,药检系统,36,检验要求,保健食品应具有与产品配方和申报的保健功能相适应的功效成分或特征成分，申报时须检测配方中主要原料所含的,功效成分,或,特征成分,。,37,检验要求,保健食品评审专家委员会可根据产品的具体配方、工艺等相关资料，要求申报单位检测指定的项目。,检验机构受理保健食品检测时，申报单位应提供该产品的配方、工艺及企业标准等相关资料。,保健食品的功效成分检测工作应在,SFDA,和卫生部原来认定的检测机构进行。,38,检验要求,功效成分或指标性成分、含量及其检验方法,根据产品及原料确定，应与申报的功能有一定的关系,功效成分或指标性成分、含量及其检验方法应分别列出,依据以下二方面确定产品的功效成分（或标志性成分）并说明理由,与申报保健功能有关的功效成分,代表产品特性的标志性成分,按标准（规范）规定的检测方法检测,无标准检测方法的，应用比较权威的检测方法，并标明方法的出处,无相关检测方法的，申请人应提供详细的检测方法和方法学研究及验证结果。研究及验证结果包括检验方法、线性范围、精密度、准确度和至少,5,批加样回收率等内容及验证报告,39,检验要求,功效成分、特征成分、营养成分及卫生学指标的检测方法应根据其产品适用的方法学范围选择以下进行测定：,国家标准,卫生部部颁标准,行业标准,国际上权威分析方法,40,检验要求,在没有相应的标准方法时， 企业应建立自己的企业标准。,自主开发研究的分析方法，,申报单位需向检测机构,提供方法学研究的相关资料,。,41,检验要求,质量标准,质量标准中文文本编写格式须符合,GB,T1.1,2000,标准化工作导则第一部分：标准的结构和编写规则的规定,内容须包括资料性概述要素（封面、目次、前言）、规范性一般要素（产品名称、范围、规范性引用文件）、规范性技术要素（技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输、储存、规范性附录）以及质量标准编写说明,附录中列出,检验方法和原料的质量标准,42,检验要求,质量标准（续）,功效成分标示范围，具体标示方法,一般性功效成分（或标志性成分）按指标值标示，如总氨基酸、粗多糖、膳食纤维等,功效成分（或标志性成分）需要限定范围的，可按指标值,x%,作为限定范围，如总蒽醌、芦荟苷等。,X,值依据研制产品的检测资料确定,对于每日摄入量需严格控制的化合物，如褪黑素等，其指标范围上限折算成每日摄入量不得大于允许摄入量,营养素补充剂中维生素类按指标值的,0.8-1.8,倍确定其指标范围，矿物质按指标值的,0.75-1.25,倍确定其指标范围,质量标准编制说明中应详细提供功效成分（或标志性成分）指标值的确定依据及理由,43,三、保健食品理化检验及常用的分析方法介绍,1,、保健食品常见的检验项目,2,、保健食品检验常用的分析方法,44,1,、保健食品常见的检验项目,感官指标（性状）,水分,灰分,净含量与负偏差,崩解时限,微生物限度,重金属（,Pb,、,As,、,Hg,）,农药残留量（六六六、滴滴涕）,功效成分,其它,45,2,、保健食品检验常用的分析方法,感官检查法,物理检查法,化学分析法,物理化学分析法,46,感官检查法,主要依靠人的感觉器官，即视觉、嗅觉、味觉等来鉴定被检物质的外观、颜色、气味和滋味等。感官检查在对某些保健食品进行卫生学评价时具有重要的意义。,47,物理检查法,测定被测物的物理性质，如密度、旋光、折光率等，用以判定物质的纯度。不溶性固形物物。,48,化学分析法,定性分析,化学反应的颜色、沉淀,定量分析,重量分析,挥发法、萃取法、沉淀法,容量分析,中和法、氧化还原法、沉淀法、络合滴定法,49,物理化学分析法,比色和分光光度法,原子吸收分光光度法,荧光分析法,原子荧光光谱法,电位分析法,层析法,气相色谱法,高效液相色谱法,50,物理化学分析法,IR,HPCE,HPLC-MS/MS,GC-MS/MS,ICP-MS,51,四、保健食品功效成分的分析检测,（一）、保健食品原料,（二）、保健食品功效成分类别和相应检测指标,（三）、保健食品功效成分检测方法,（四）、实例分析,52,（一）、保健食品原料,普通食品,植物类（中草药）,动物类,真菌类,益生菌类,核酸类,新资源食品,营养素,其他,53,保健食品原料,植物类（中草药）、动物类,既是食品又是药品的物品名单，,87,个 主要是中国传统上有食用习惯、民间广泛食用，但又在中医临床中使用的物品。卫生部已第四次调整,丁香、八角茴香、刀豆、小茴香、小蓟、山药、山楂、马齿苋、乌梢蛇、乌梅、木瓜、火麻仁、代代花、玉竹、甘草、白芷、白果、白扁豆、白扁豆花、龙眼肉（桂圆）、决明子、百合、肉豆蔻、肉桂、余甘子、佛手、杏仁（甜、苦）、沙棘、牡蛎、芡实、花椒、赤小豆、阿胶、鸡内金、麦芽、昆布、枣（大枣、酸枣、黑枣）、罗汉果、郁李仁、金银花、青果、鱼腥草、姜（生姜、干姜）、枳椇子、枸杞子、栀子、砂仁、胖大海、茯苓、香橼、香薷、桃仁、桑叶、桑椹、桔红、桔梗、益智仁、荷叶、莱菔子、莲子、高良姜、淡竹叶、淡豆豉、菊花、菊苣、黄芥子、黄精、紫苏、紫苏籽、葛根、黑芝麻、黑胡椒、槐米、槐花、蒲公英、蜂蜜、榧子、酸枣仁、鲜白茅根、鲜芦根、蝮蛇、橘皮、薄荷、薏苡仁、薤白、覆盆子、藿香,54,保健食品原料,可用于保健食品的物品名单,114,个 不能在普通食品中使用,人参、人参叶、人参果、三七、土茯苓、大蓟、女贞子、山茱萸、川牛膝、川贝母、川芎、马鹿胎、马鹿茸、马鹿骨、丹参、五加皮、五味子、升麻、天门冬、天麻、太子参、巴戟天、木香、木贼、牛蒡子、牛蒡根、车前子、车前草、北沙参、平贝母、玄参、生地黄、生何首乌、白及、白术、白芍、白豆蔻、石决明、石斛（需提供可使用证明）、地骨皮、当归、竹茹、红花、红景天、西洋参、吴茱萸、怀牛膝、杜仲、杜仲叶、沙苑子、牡丹皮、芦荟、苍术、补骨脂、诃子、赤芍、远志、麦门冬、龟甲、佩兰、侧柏叶、制大黄、制何首乌、刺五加、刺玫果、泽兰、泽泻、玫瑰花、玫瑰茄、知母、罗布麻、苦丁茶、金荞麦、金樱子、青皮、厚朴、厚朴花、姜黄、枳壳、枳实、柏子仁、珍珠、绞股蓝、胡芦巴、茜草、荜茇、韭菜子、首乌藤、香附、骨碎补、党参、桑白皮、桑枝、浙贝母、益母草、积雪草、淫羊藿、菟丝子、野菊花、银杏叶、黄芪、湖北贝母、番泻叶、蛤蚧、越橘、槐实、蒲黄、蒺藜、蜂胶、酸角、墨旱莲、熟大黄、熟地黄、鳖甲,55,保健食品原料,有关规定,有不同食用部位、产地、制作方式的应予标明,列入名单的物品，但为新的食用部位，视为新的物品，应作新资源食品评价。如三七茎叶、人参花、杜仲籽,列入食物成份表动植物物品（原料）作为普通食品原料,提供省级卫生行政部门的证明，证明该原料为在当地（较大范围）长期食用的，一般也作为普通食品原料,一个产品中使用的动植物物品,(,原料,),不得超过,14,个。其中，既是食品又是药品的物品名单外的动植物物品,(,原料,),不得超过,4,个。,两个名单外的动植物物品,(,原料,),不得超过,1,个,56,保健食品原料,保健食品禁用物品名单,59,个,八角莲、八里麻、千金子、土青木香、山莨菪、川乌、广防己、马桑叶、马钱子、六角莲、天仙子、巴豆、水银、长春花、甘遂、生天南星、生半夏、生白附子、生狼毒、白降丹、石蒜、关木通、农吉痢、夹竹桃、朱砂、米壳（罂粟壳）、红升丹、红豆杉、红茴香、红粉、羊角拗、羊踯躅、丽江山慈姑、京大戟、昆明山海棠、河豚、闹羊花、青娘虫、鱼藤、洋地黄、洋金花、牵牛子、砒石（白砒、红砒、砒霜）、草乌、香加皮（杠柳皮）、骆驼蓬、鬼臼、莽草、铁棒槌、铃兰、雪上一枝蒿、黄花夹竹桃、斑蝥、硫磺、雄黄、雷公藤、颠茄、藜芦、蟾酥,生大黄、三黄（黄芩、黄连、黄柏）、石菖蒲、天花粉、蚓激酶、急性子、钩藤、半枝莲、白花蛇舌草、鹅不食草、王不留行、脱氢表雄酮、水飞蓟素、漏芦、路路通、生长激素等一般也不能用于保健食品,57,保健食品原料,真菌类,利用可食大型真菌或小型丝状真菌的子实体或菌丝体生产的保健食品,可用于生产保健食品的真菌菌种有,11,种,酿酒酵母 产朊假丝酵母,乳酸克鲁维酵母 卡氏酵母,蝙蝠蛾拟青霉 蝙蝠蛾被毛孢,灵芝 紫芝,松杉灵芝 红曲霉,紫红曲霉,58,保健食品原料,益生菌类,能够促进肠内菌群生态平衡，对人体起有益作用的微生态产品。益生菌菌种必须是人体正常菌群的成员，可以是活菌、死菌或代谢产物,可用于生产保健食品的益生菌,10,种,两岐双岐杆菌 婴儿两岐双岐杆菌,长两岐双岐杆菌 短两岐双岐杆菌,青春两岐双岐杆菌 保加利亚乳杆菌,嗜酸乳杆菌 嗜热链球菌,干酪乳杆菌干酪亚种,罗伊氏乳杆菌,59,保健食品原料,新资源食品,核酸类,核酸类保健食品评审规定,以,DNA,、,RNA,为主要原料生产的保健食品，只辅以相应的协调物质。即没有其他的具有功能的原料。核苷酸,只可申报增强免疫力功能。,核酸原料的纯度应大于,80%,。,对检验评价、申报资料有特殊的要求。,60,保健食品原料,营养素补充剂,以补充维生素、矿物质为目的,不以提供能量为目的的产品。其作用是补充膳食供给的不足，预防营养缺乏和降低发生某些慢性退行性疾病的风险性,营养素补充剂与,0TC,药品的区别,目的不同,剂量不同,食用时间不同,补充的营养素应为中国居民缺乏的营养素,营养素补充剂产品形式主要为片剂、胶囊、颗粒剂或口服液；颗粒剂每日食用量不得超过,20,克，口服液每日食用量不得超过,30,毫升,61,保健食品原料,营养素补充剂（续）,只能以一种或多种维生素、矿物质和辅料组成，所加入的各种辅料必须是为满足产品工艺需要或改善产品色、香、味为目的,产品中不能加入氨基酸、中药等有功效作用的物质,成人食用营养素补充剂的营养素每日推荐摄入量应在,营养素名称和用量表,的范围内,18,岁以下人群、孕妇、乳母的营养素每日推荐摄入量应控制在我国该人群该种营养素推荐摄入量（,RNI,）的,1/3,2/3,水平,62,保健食品原料,营养素补充剂（续）,营养素原料为化合物的，应符合,营养素来源表,的规定。营养素原料从食物的可食部分提取的，不应含有一定作用剂量的其他生物活性物质,。,使用,营养素来源表,以外的原料，应参照对新资源食品的要求对该原料进行安全性毒理学评价，并提供在人体内代谢过程和人体安全摄入量的科学证明。,使用食品可食部分提取的维生素一般不要求进行安全性毒理学评价，但在其原料用量大于该食品最大日常食用量时，应进行安全性毒理学评价,。,63,保健食品原料,营养素补充剂（续）,从营养素补充剂中摄入的能量可忽略不计,不得同时申报保健功能,膳食纤维应申报功能,产品不得宣传功能，包括产品名称中表示功能的词语,64,（二）、保健食品类别和功效成分检测指标,1,、增强免疫力功能,多糖（灵芝、虫草、香菇等） 、腺苷、氨基酸、人参皂苷类、花粉、党参、黄芪、伏苓、枸杞、人参、阿胶、大枣、灵芝、灵芝孢子粉、桑葚、西洋参、螺旋藻、冬虫夏草、蜂王浆、铁皮石斛、蜂胶、牛初乳、杜仲、银耳、牛膝等,2,、辅助降血脂功能,黄酮类、鱼油（,EPA,、,DHA,、,DPA,）、亚麻酸、亚油酸、绞股蓝皂苷、卵磷脂 、山楂、芦荟、丹参、牛磺酸、茶多酚、苦荞粉、钝顶螺旋藻、决明子、维生素,E,、银杏叶、荷叶、月见草油、沙棘油、红曲制剂、甲壳素、植物甾醇、,-,谷维素等,65,保健食品类别和功效成分检测指标,3,、辅助降血糖功能,苦瓜总苷、三价铬、多糖类、黄酮类、红曲、三七、葛根、泽泻、田七、何首乌、黄芪、黄精、人参、乌梅、知母、生地、决明子、山药、山楂、红花、甘草、有机铬、苦瓜、魔芋精粉、麦芽糖醇、木糖醇、山梨酸糖醇、异麦芽糖醇、乳糖醇、蜂胶、桑叶、,D-,甘露、糖醇、百合,4,、抗氧化功能,茶多酚、黄酮类、维生素,C,、硒,66,保健食品类别和功效成分检测指标,5,、辅助改善记忆功能,EPA,、,DHA,、,DPA,、,Ve,、磷脂、牛磺酸,6,、缓解视疲劳功能,B-,胡萝卜素、叶黄素、维生素类,7,、促进排铅功能,N-,葡萄糖基,L-,半胱氨酸 、谷胱甘肽、牛初乳粉、珍珠粉、维生素,C,、葡萄糖酸锌、酪蛋白磷酸肽、牛磺酸、木糖醇,8,、清咽功能,金银花、胖大海青果、冰片、薄荷脑,9,、辅助降血压功能,黄酮类,67,保健食品类别和功效成分检测指标,10,、改善睡眠功能,褪黑素、松果体素、低聚糖,11,、促进泌乳功能,12,、缓解体力疲劳功能,人参、西洋参皂苷类、多糖类、维生素类、淫羊藿苷,13,、提高缺氧耐受力功能,角鲨烯、维生素,E,、角鲨烯、沙棘籽油、枸杞子、黄精、冬虫夏草、螺旋澡、胶股蓝、茶多酚、珍珠粉、牛初乳、党参、红景天、马鹿葺、川芎、当归、刺五加、灵芝、黄芪、三七、银杏叶、红花,68,保健食品类别和功效成分检测指标,14,、对辐射危害有辅助保护功能,红景天、茶多酚、维生素,C,、当归、蜂胶、原花青素、灵芝、银耳、维生素,E,、螺旋藻、壳聚糖、枸杞、银杏叶、女贞子、黄芪、香菇、番茄红素、刺五加、,-,胡萝卜素等,15,、减肥功能,决明子、芦荟、黄芪、山楂、番泻叶、黄酮、肉碱、大黄酸、茶多酚、荷叶等,69,保健食品类别和功效成分检测指标,16,、改善生长发育功能,钙、锌、,Vd,、,Vb6,等,17,、增加骨密度功能,钙、牛磺酸、,Vd,、,Vc,18,、改善营养性贫血功能,Fe,，芦荟,19,、对化学性肝损伤有辅助保护功能,黄酮、多糖,70,保健食品类别和功效成分检测指标,20,、祛痤疮功能,栀子、丹皮、银花、薄荷、芦荟、野菊花,21,、祛黄褐斑功能,芦荟、山药、茯苓、薏米,22,、改善皮肤水份功能,23,、改善皮肤油份功能,71,保健食品类别和功效成分检测指标,24,、调节肠道菌群功能益生菌、低聚糖类,25,、促进消化功能,(,成人和儿童,),山楂、麦芽、鸡内金、山药、党参、莱服子、扁豆、陈皮、伏苓、大枣、木香、神曲、佛手、生地、低聚果糖、牛磺酸、乳酸锌、果寡糖、微晶纤维素、膳食纤维、低聚半乳糖、大豆低聚糖,72,保健食品类别和功效成分检测指标,26,、通便功能,制何首乌、火麻仁、决明子、枳实、莱菔子、桃仁、百合、玉竹、阿胶、芦荟、黄芪、膳食纤维、大豆膳食纤维、低聚果糖、低聚半乳糖、大豆低聚糖、螺旋藻、橘皮、蜂蜜、山楂、几丁聚糖、番泻叶、罗汉果、大黄、甘草、郁李仁、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、燕麦、桑椹、乳酸菌、决明子胶、瓜尔豆胶、阿拉伯胶,27,、对胃黏膜损伤有辅助保护功能,73,部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目,产品类型,检测项目,营养素补充剂,产品中标识的营养素,(,包括维生素和矿物质,),五加科参类,皂甙,蕈类（灵芝、蘑菇等）,膳食纤维,冬虫夏草菌丝体,腺苷,红景天类,红景天甙,74,部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目,芦荟类,芦荟甙,大蒜类,大蒜素,螺旋藻类,蛋白质、胡萝卜素、维生素,B1,、维生素,B2,茶叶类,茶多酚,魔芋类,膳食纤维,75,部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目,纤维素类,膳食纤维,磷脂类（原料）,丙酮不溶物、乙醚不溶物等,红曲类,洛伐它丁,植物油类,脂肪酸、维生素,E,动物油类,脂肪酸,76,部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目,初乳类,免疫球蛋白,鹿血类,蛋白质、氨基酸,蚂蚁类,锰、蛋白质,蚯蚓类,蚓激酶（溶纤酶）、蛋白质,蛇、蝎等,蛋白质、氨基酸,77,部分常见保健食品原料为主的产品指标检测项目,角鲨烯,角鲨烯,蜂皇浆,10-,羟基癸烯酸,蜂花粉、蜂胶,总黄酮,甲壳质产品,脱乙酰度，产品如为复方应检测原料的脱乙酰度,蛋白质、氨基酸制品,蛋白质、氨基酸,褪黑素产品,褪黑素 产品原料（褪黑素）需提供原料纯度证明并检测,78,（三）、保健食品功效成分检测方法,保健食品中红景天甙的测定,保健食品中大蒜素的测定,保健食品中芦荟甙的测定,保健食品中脱氢表雄甾酮（,DHEA,）的测定,保健食品中吡啶甲酸铬的测定,保健食品中盐酸硫胺、盐酸吡哆醇、烟酸、烟酰胺和咖啡因的测定,79,保健食品功效成分检测方法,保健食品中肌醇的测定,保健食品中肉碱的测定,保健食品中,亚麻酸、,亚麻酸的测定,保健食品中免疫球蛋白,IgG,的测定,保健食品中人参皂甙的高效液相色谱测定,保健食品中原花青素的测定,80,保健食品功效成分检测方法,保健食品中核苷酸的测定,保健食品中洛伐他丁的测定,保健食品中中药功效成分的鉴别方法,保健食品中银杏叶总黄酮的高效液相色谱测定,保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定,保健食品中金雀异黄素的测定,81,保健食品功效成分检测方法,保健食品中茶氨酸的高效液相色谱测定,五味子类保健食品中五味子醇甲、五味子甲素和乙素的高效液相色谱测定,保健食品中腺苷的测定,保健食品中褪黑素的测定,82,保健食品功效成分检测方法,保健食品中总皂甙的测定,保健食品中总黄酮的测定,壳聚糖的游离氨基测定及脱乙酰度的计算,蚓激酶活性的测定,红曲产品中桔青霉素的测定,83,（四）、,保健食品功效成分检测实例分析,HPLC-DAD-MS,法同时测定保健食品中六种大豆异黄酮类成分的含量,84,提 纲,1,、,大豆异黄酮类成分概况,2,、,HPLC-DAD,法多成分同时测定,3,、,HPLC-DAD-MS,法多成分同时测定,4,、总结与讨论,85,1,、大豆异黄酮类成分概况,中文名称,英文名称,R1,R2,R3,大豆苷元,Daidzein,OH,H,H,大豆苷,Daidzin,O-Glu,H,H,染料木素,Genistein,OH,H,OH,染料木苷,Genistin,O-Glu,H,OH,黄豆黄素,Glycitein,OH,OCH3,H,黄豆黄苷,Glycitin,O-Glu,OCH3,H,86,化学结构,大豆异黄酮类成分概况,功效和用途：,大豆异黄酮作为天然的植物雌激素，具有明显的缓解更年期综合症和抗骨质疏松症的功效，同时又有延缓衰老以及预防心血管疾病，降低乳腺癌、前列腺癌等疾病的发病率等多种功效，近年来引起国内外广泛的关注和研究。,市场概况：,我国市场上有关大豆异黄酮类成分的中药、天然药物、植物提取物、保健食品（进口、国产）名目繁多，质量参差不齐。,87,大豆异黄酮类成分概况,目前大豆异黄酮类成分常见的分析方法：,紫外分光光度法,薄层扫描法,高效液相色谱法,这些方法在准确性、合理性、可操作性等方面均有欠缺，大多数方法只报道了测定其中,1,2,个成分的含量，不能较为全面地反应产品的真实质量。,88,研究目标,多成分同时测定？,对照品,检测成本,单成分 多成分,89,同时测定,2,、常规的,HPLC,法用于多成分分析,90,1,、大豆苷,2,、黄豆黄苷,3,、染料木苷,4,、大豆苷元,5,、黄豆黄素,6,、染料木素,1,3,2,4,5,6,色谱条件,91,液相色谱仪：,Waters Alliance,2690,高效液相色谱仪,色谱柱：,Agilent zorbax SB-C18,（,4.6150mm,5m,）,柱温：,25 ,流动相：,0.2%,甲酸,-,乙腈（梯度）,流速：,1 ml/min,检测波长：,DAD,流动相梯度表,时间,0.2%,甲酸（,%,）,乙腈（,%,）,0 min,90,10,18 min,78,22,25 min,78,22,43 min,70,30,45 min,50,50,92,样品测定,93,S4,S3,S1,S2,S5,CRS,3,、,HPLC-DAD-MS,法用于多成分同时测定,94,B,用一个对照品同时测定多个成分,校正因子法,A,校正因子（,以染料木素计,）,化合物,浓度,(mg/ml),校正因子,平均校正因子,RSD(%),染料木甙,0.204,1.35,1.39,2.27,0.408,1.38,0.816,1.42,1.632,1.39,2.04,1.35,3.06,1.42,黄豆黄甙,0.15,2.18,2.12,2.94,0.3,2.05,0.6,2.20,1.2,2.08,1.5,2.14,2.25,2.07,黄豆黄素,0.0256,1.67,1.66,1.46,0.0512,1.62,0.1024,1.69,0.2048,1.64,0.256,1.66,0.384,1.66,95,计算因子（,以染料木素计,）,化合物,浓度,(mg/ml),校正因子,平均校正因子,RSD(%),大豆甙,0.21,1.98,1.94,2.13,0.42,1.92,0.84,1.88,1.68,1.94,2.1,1.99,3.15,1.92,大豆甙元,0.076,1.21,1.21,2.93,0.152,1.26,0.304,1.17,0.608,1.23,0.76,1.18,1.14,1.2,96,两种方法测定结果比较,中文名称,含量（常规法）,含量（校正因子法）,大豆苷元,0.05%,0.08%,大 豆 苷,0.05%,0.03%,染料木素,0.04%,0.06%,染料木苷,1.67%,1.63%,黄豆黄素,0.93%,0.96%,黄豆黄苷,0.25%,0.28%,97,以单成分为对照同时测定多成分时，最大的困难,被测成分的识别？,98,F,A,B,C,D,E,HPLC-DAD-MS,法用于多成分同时测定,99,HPLC-DAD-MS,提供的信息,100,HPLC-DAD-MS,提供的信息,中文名称,分子量,保留时间,UV,光谱,大豆苷元,254,26.1,218,，,249,，,302,大 豆 苷,416,10.6,218,，,251,染料木素,270,41.3,223,，,260,染料木苷,432,15.9,218,，,260,黄豆黄素,284,28.2,218,，,254,，,320,黄豆黄苷,446,11.7,218,，,258,，,320,101,HPLC-DAD-MS,条件,102,液相色谱条件：,液相色谱仪：,Waters Alliance 2690,高效液相色谱仪,色谱柱：,Agilent zorbax SB-C18,（,4.6150mm,5m,）,柱温：,25 ,流动相：,0.2%,甲酸,-,乙腈（梯度）,流速：,1 ml/min,（,DAD,）；,0.2ml/min,（质谱检测器）,质谱条件：,Waters micromass ZQ,液质联用仪，,ESI,正离子检测：毛细管电压,3.0 KV,，锥孔电压,40v,，源温度,120,，去溶剂温度,150,。去溶剂气（,N2,）流速：,300L/hr.,离子扫描范围：,100-700 m/z,；选定,m/z 255, 271, 285, 417,，,433,和,447,进行选择性离子扫描（,SIM,）,HPLC-DAD-MS,法用于多成分同时测定,103,4,、总结与讨论,104,多对照多成分同时测定,单对照多成分同时测定,校正因子,HPLC-DAD,HPLC-DAD-MS,总结与讨论,HPLC-DAD-MS,可以建立以一种对照品同时测定多种成分的方法。该方法简便、快速、高效，同时经济实用，缓解了中药和天然产物化学对照品分离制备困难、成本高，检测费用高等问题。,105,总结与讨论,该法要求被测的每种成分均在其分析测定的线性范围内。,该法尤其适用于化学和物理性质相似成分的分析（如黄酮类、皂苷类），对特定品种、特定提取物、或特定工艺产品的常规例行检测有较大的优势。,106,总结与讨论,耐用性（仪器、色谱柱类型、流动相比例、柱温、,PH,等）,107,五、保健食品分析方法的建立和分析方法学验证,（一）分析方法的选择,（二）分析方法学验证的内容,（三）分析方法建立实例分析,108,（一） 分析方法的选择,根据分析对象的性质选择准确、可靠的方法,分析方法的科学性，应根据分析方法的评价