第二章鉴别试验

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,Contents,概述,鉴别试验项目,鉴别方法,鉴别试验条件,概述,药物的鉴别试验（,identification test,）,目的,判断药物的真伪，是药品质量检验的首项任务,药典收载的鉴别试验,均为用来证实贮藏的药物是否为其所标示的药物,这些方法有一定的专属性，但不能赖以鉴别未知物,对于原料药，还应结合性状项下的外观和物理常数进行综合判断,鉴别试验的项目,性状（,description,）,鉴别（,identification),鉴别（,identification),性状：反映了药物特有的物理性质,1,、外观,聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质,2,、溶解度,3,、物理常数,相对密度、熔点、比旋度、吸收系数等,晶型,药物的多晶型现象极为普遍，晶型不同，它们的物理性质如密度、熔点、硬度、外观、溶解度和溶出速度等方面均有显著性差异，从而影响药物稳定性、生物利用度、毒副反应等,P39,鉴别晶型主要是依据不同晶型具有不同的理化特性及光谱学特性，采用熔点法、热分析法、红外分光光度法及,X-,射线衍射法等进行鉴别,熔点,定义,固体,液体的温度（,1.0,1.5/min,）,熔融同时分解的温度（,2.5,3.0/min,）,初熔至全熔的一段温度,ChP,收载的方法,第一法：测定易粉碎的固体药品,第二法：测定不易粉碎的固体药品,第三法：测定凡士林或其他类似物,要求报告初熔和终熔,比旋度,t,D,是手性药物特性及其纯度的主要指标,在一定波长（,589.3nm,）与温度（,20,）下，偏振光透过长,1dm,，含旋光性物质,1g/1mL,的溶液时测得的旋光度,，称为比旋度。,注意：溶剂，,pH,，浓度等对比旋度的影响,吸收系数,在给定波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度（,C,）、单位液层厚度（,L,）时的吸光度，称为吸收系数（,E,1%,1cm,）,E,1%,1cm,：中国药典收载的方法是指在一定波长下，溶液浓度为,1%,（,W/V,），厚度为,1cm,是的吸光度,一般鉴别试验,依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪,无机药物,阴、阳离子的特殊反应,有机药物,典型的官能团反应,阴、阳离子的特殊反应,例：钠盐、钾盐、钙盐的焰色反应,取铂丝，盐酸湿润，蘸取供试品，无色火焰中燃烧，火焰显各离子的特征色,钠离子,钾离子,钙离子,典型官能团反应,丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、水杨酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐等鉴别反应,例：有机氟化物鉴别,氟离子的茜素氟蓝比色法,有机氟化物经氧瓶燃烧法破坏，被碱性溶液吸收成为无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在,pH4.3,溶液中形成蓝紫色络合物,专属鉴别试验,根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。是证实,某一种,药物的依据,例：,巴比妥类,药物,甾体激素类,药物,三、鉴别方法,常用的方法有：化学法，光谱法，色谱法,要求：专属，再现，灵敏，操作简便，快速,1.,化学鉴别法,呈色，沉淀，荧光，气体,三氯化铁,酚羟基（紫色）,重氮化,-,偶合,芳伯胺基（橙红）,茜素氟蓝法,有机氟化物（蓝紫色）,双缩脲,氨基醇结构（蓝紫色）,Vitali,反应,托烷生物碱类（深紫色）,四氮唑,肾上腺皮质激素类（红色或蓝色）,茚三酮,类似氨基酸结构（蓝紫色）,沉淀、荧光反应,硝酸银,丙二酰脲类、氯化物、微,C,银镜反应,异烟肼,氧化亚铜,葡萄糖,铜盐,磺胺类,三氯化铁,苯甲酸盐,重金属离子,利多卡因,生物碱沉淀剂,氮杂环类,在硫酸性溶液中本身有荧光,硫酸奎宁,于适当试剂反应产生荧光,维,B,1,的硫色素反应,气体反应,强碱处理,氨气,强酸处理,硫化氢气体,直火加热,碘蒸气,硫酸水解，加乙醇,醋酸乙酯香味,使试剂褪色,如维,C,的二氯靛酚反应；司可巴比妥钠与溴、碘试液的反应,测定生成物熔点,操作繁、费时，应用少,其它反应,光谱鉴别法,1,、紫外光谱法（,UV,）,（,1,）测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长,（,2,）测定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度,（,3,）规定吸收波长和吸光度比值法,（,4,）经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性,应用举例,地蒽酚的鉴别试验：,取含量测定项下的溶液扫描,240,400nm,范围，在,257,、,289,与,356nm,的波长处有最大吸收。规定：,A257/A289,应为,1.06,1.10,A356/A289,应为,0.90,0.94,对于一个药物多个吸收峰的峰值相差较大时，采用单一浓度不易观察到全部吸收峰，可采用两种浓度的供试液分别测定其最大吸收波长。,红外光谱法（,IR,）,IR,是一种专属性强、应用广（固体、液体、气体样品）的鉴别方法。主要用于,组分单一、结构明确,的原料药，特别适合用于其他方法不易区分的同类药物，如磺胺类、甾体激素类和半合成抗生素类药品,测定方法：,标准图谱对照法（,ChP,）,对照品比较法（,USP,）,中国药典试样制备方法,用于固体,（溴化钾）压片法、糊法,用于液体,膜法、溶液法,测定前应录制,聚苯乙烯薄膜光谱图,，并与标准谱图对照，应检查仪器性能,注意问题,（,1,）规定样品前处理方法,（,2,）当未规定药用晶型时，可采用对照品，并用适当溶剂进行重结晶,（,3,）已规定药用晶型的，则应采用相应药用晶型的对照品依法比对,制剂的红外鉴别,（,1,）品种正文中规定预处理方法,（,2,）辅料无干扰，与原料药的标准图比对,（,3,）如辅料干扰不能完全消除，在指纹区可规定,3,5,个待测成份的特征吸收峰（,cm,-1,），其误差应小于,0.5%,一些新的鉴别方法,近红外光谱法（,12800,4000cm,-1,）,核磁共振法（,NMR,）,亚硝酸戊酯的,NMR,法鉴别（,USP,法）,亚硝酸戊酯（,Amyl Nitrite,）是,3-,甲基,-1-,丁醇和,2-,甲基,-1-,丁醇亚硝酸酯的混合物,X,射线粉末衍射法,例如：氨苄西林四种固体的粉末,X-,射线衍射图谱,P33,色谱（,TLC,HPLC,GC,）鉴别法,利用物质各自的特征色谱行为（,R,f,值或,t,R,值）进行鉴别试验,采用与对照品在相同条件下进行色谱分离，根据两者保留行为和检测结果是否一致来验证药品的真伪,鉴别试验条件,影响因素,被测物浓度,试剂的用量,溶液的温度,溶液,pH,反应时间,共存的干扰物质等,鉴别试验必须在规定条件下完成，否则将会影响结果的判断,鉴别试验的专属性要求,空白试验（阴性对照）,在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外（或以等量溶剂代替供试液），其它试剂均同样加入而进行的试验,对照试验（阳性对照）,取被检纯品与供试品同法鉴别,本章学习要求,掌握：,比旋度、吸收系数等重要的物理常数的定义,典型化学法、光谱法和色谱法鉴别药物的原理和应用,熟悉：,鉴别试验条件对结果的影响,鉴别试验专属性要求,课外泛读,阅读中国药典二部附录,一般鉴别试验，附录,分光光度法,Thank You !,