实验三果蝇的性状、生活史观察及饲养

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验三 果蝇的性状、生活史观察及饲养,一、实验目的,1.了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点；,2.区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征；,3.掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。,二、实验原理,果蝇的优点：,1.生活史短，20-25条件下完成一个世代需12-15天。2.繁殖率高，一对果蝇可产卵400-500只。3.个体小，饲养方便，培养费用低廉。4.突变率高。5.形态容易辨认。,6.染色体数目少，只有4对，且具有较大的唾腺染色体。,因此，果蝇是遗传学、细胞学、发育生物学等研究中最好的模式动物。,三、实验材料、用具及试剂,果蝇种类：野生型(18#)、残翅(2#)、白眼(22#)、黑檀体(e#)、三隐性(6#)。,双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板或 白纸、毛笔、乙醚、酒精。,四、实验内容,1.果蝇的生活史,果蝇（,Drosophila melanogaster,2n=8）中文名：黑腹果蝇,果蝇属于,节肢动物门、,昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属，与家蝇是不同的种。,果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。30以上的温度能使果蝇不育和死亡，15 以下则使它的生活周期延长，同时生活力也降低，果蝇培养的最适温度为20-25。,10,15,20,25,卵,幼虫,8,天,5,天,幼虫,成虫,57,天,18,天,6.3,天,4.2,天,从表中可以看出，25时，从卵到成虫约10天；在25时成虫约活2030天。,生活史：,属于完全变态。,最适温度：20-25,生活史周期：,12-15 day(20-25),10 day(26),57 day(10),羽化后：,8-12h 后交配,两天后产卵,成虫存活：,20-30 day(25),卵：,羽化后的雌蝇一般在,12小时后开始交配,，,两天后才能产卵,。卵长0.5mm，为椭圆形，腹面稍扁平，,被绒毛膜，,在背面的前端伸出一对触丝,（filament）,，它能使卵附着在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。,三龄幼虫4.5mm，在培养基上作沟穿孔。,幼虫,：从卵孵化出来后，经过两次蜕皮，发育成三龄幼虫，此时体长可达4-5mm。肉眼可见其前端稍尖部分为头部，上有一黑色斑点即为口器。口器后面有一对透明的唾液腺，透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的两侧，,精巢较大，外观上是一明显的黑点,，而,卵巢则较小,，可以此作为鉴别。幼虫活动力强而贪食，它们在培养基上爬行时，留下很多条沟，沟多而且宽时，表明幼虫生长良好。,蛹,：幼虫生活7-8天准备化蛹，化蛹前从培养基上爬出，附着在瓶壁上，逐渐形成一梭形的蛹。在蛹前部有两个呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹壳颜色淡黄而柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，表明即将羽化了。,成虫,：幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化，最后从蛹壳前端爬出。刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长，翅膀尚未展开，体表尚未完全几丁质化，故呈半透明的乳白色。透过腹部体壁，可以看到黑色的消化系统。不久，变为短粗圆形，双翅展开，体色加深。如野生型初为浅灰色，然后呈灰褐色。,2.形态构造,头部：有一对复眼，三个单眼和一对触角。,胸部：有三对足，一对翅和一对平衡棒。,腹部：背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器在腹部末端，全身有许多体毛和刚毛。,3.成虫雌雄的鉴别,雌果蝇,雄果蝇,体形较大,体形较小,腹部椭圆形，末端稍尖,腹部末端钝圆,腹部背面有明显的五条黑色条纹,腹部背面有三条黑色花纹，前两条细，后一条宽且延续至腹面,腹部腹面有明显的,6,个腹片,(,刚毛围成一圈,),四个腹片,无性梳,第一对跗节基部的一节有性梳,外生殖器外观比较简单,外生殖器外观较复杂，刚羽化的幼蝇用低倍镜可明显观察到生殖弧、肛口板及阴茎,果蝇识别,果蝇识别,果蝇识别,雄果蝇,雌果蝇,果蝇识别,果蝇识别,雄果蝇,雌果蝇,4.果蝇常见的几种突变类型,突变形状名称,基,因,符,号,形,状,特,征,所在染色体,残翅,vg,翅退化，部分残留不能飞,IIR,黑檀体,e,体呈乌木色，黑亮,IIIR,白眼,w,复眼白色,X,小翅,m,翅较短,X,焦刚毛,sn,卷曲，似烧焦状,X,身,体 颜 色,野生型：灰色，符号为+,突变型：黑檀体色，符号为 e,眼 睛 颜 色,野生型：砖红色，符号为+,突变型：白色，符号为 w,翅 膀 形 状,野生型：圆卵型，长度约为腹部的2倍，符号+,残翅型：翅膀退化残缺不全，符号 vg,白眼w，小翅 m,X染色体,刚,毛,形 状,野生型：刚毛长粗、黑硬、平直，先端略弯，符号+,焦刚毛：刚毛先端分叉弯曲，,符号,sn,3,白眼 w、小翅 m、焦刚毛 sn(刚毛卷曲如烧焦状),（全在X染色体）,性状、染色体和基因型,红眼（+）,白眼（w）,第一连锁群,长翅（+）,残翅（vg）,第二连锁群,灰身（+）,黑檀体（e）,第二连锁群,第三连锁群,长翅（+）,小翅（m）,第一连锁群,直刚毛（+）,卷刚毛（sn）,第一连锁群,灰身（+）,黑体（b）,第二连锁群,5.果蝇的饲养,1）培养基的配制,果蝇以酵母菌为食，常采用发酵的培养基繁殖酵母菌来饲养果蝇。培养基常用玉米粉、米粉或香蕉配制，本实验采用玉米粉红糖培养基，其配方如下：,果蝇培养基成分,水,1000ml,玉米粉,105g,红糖,75g,琼脂,7.5-10g,苯甲酸,0.75g,酵母粉,5-10g,配制方法,配制时先将水分成两份：一份用于加热溶解琼脂和糖，另一份煮玉米粉，玉米粉要先用冷水搅拌，再加到煮沸琼脂红糖溶液中，边倒边搅拌。继续煮15-20分钟，关掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶)，要,充分搅拌后再分装培养瓶。每瓶培养基厚度在2-3cm，置121高压蒸汽灭菌15分钟。,待培养基冷却后，在培养基的表面滴加新鲜酵母液，插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。,2）果蝇继代培养,将果蝇转移到新配制的培养基中繁殖。,转移时要注意转移的手法，不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞出。,一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶，使其飞入带有新培养基的培养瓶,准备转移果蝇的亲本及培养基,果蝇的转移,幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。,6 果蝇性状的观察,1）果蝇的麻醉处理,在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持安静状态。麻醉方法如下：,（1）准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶，并配以脱脂棉塞。,（2）去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶在上，一手稳住两瓶，另一手轻轻震拍培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶中。,（3）滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内，迅速将两瓶塞住，约30s，麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态。,注意：,不能麻醉过度,。,若蝇翅与蝇体呈45角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡,。,2）观察 选取一张10 x10cm白纸，在白纸中央画一个半径为0.5cm小圆圈及圆心，在体视镜下找到圆圈后将白纸固定好，将麻醉后的果蝇放在白纸小圆圈内，用毛笔移动果蝇进行观察，观察完毕的果蝇务必倒入死蝇盛留器中及时处死，防止品系间混杂。,转移到麻醉瓶中观察结果,麻醉时转移果蝇手法,果蝇的麻醉,滴加乙醚的方法,果蝇的麻醉剂,死亡果蝇的标志,死亡果蝇的标志,果蝇识别,个体,大,小,腹纹,5,3,腹部末端,尖,圆,性梳,无,有,果蝇性状观察,（3）眼睛的颜色,（2）翅的大小,（1）身体的颜色,（4）刚毛形状,五.观察结果,性状,表现型,野生型,黑檀体,残翅,白眼,三隐性,体色,眼色,翅形,刚毛形态,六.思考题,1.描述果蝇的形态特征。,2.如何从外部形态区分雌雄果蝇？,