实验五 果蝇的观察及饲养

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验四果蝇的性状观察 与饲养管理,生命科学学院,了解果蝇的生活习性，掌握果蝇饲养管理的方法，鉴定果蝇的雌雄性别和突变性状。,一、实验目的,二、实验原理,普通果蝇（,Drosophila,melanogaster,）为双翅目昆虫，具完全变态。用果蝇做实验材料有许多优点：,1.,生长迅速，,每,12,天左右即可完成一个世代；,2.,繁殖能力强，,每只受精的雌蝇可以产卵,500,个左右，,因此在短时间内即可获得大量的子代,便于遗传分析；,3.,饲养容易，,以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；,4.,突变性状多,达,400,以上,且多数是形态变异,容易观察。,三、实验材料,野生型果蝇,(,灰身、红眼、长翅、直刚毛,),及几种常见的突变型：如白眼、小翅、卷刚毛、黑檀体等。,四、实验器具和药品试剂,生化培养箱、双筒解剖镜（或放大镜）、镊子、锅、电磁炉、高压灭菌器、电热恒温干燥箱、培养瓶、棉花塞、烧杯、玻棒、棉签、滤纸。,乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。,五、实验内容和步骤,（一）生活史的观察,果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个连续的发育阶段。,图,1,果蝇生活史,卵：,卵白色，长椭圆形，长约,0.5mm,，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。,幼虫：,幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期,体长可达,4-5mm,。,在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；,稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸，然后会合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。,蛹：,幼虫生活七天左右即化蛹,化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一个棱形的蛹。,起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色,这就显示即将羽化了。,成虫：,刚羽化出的果蝇，身体狭长，翅还没有展开，身体较白嫩，此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的，没有多大区别。,不久，蝇体变为粗短椭圆形，双翅展开，体色加深,如野生型果蝇的体色成为灰褐色，突变型黑檀体果蝇的体色成为乌黑色。,图,1,果蝇生活史,1.,卵,2.,一龄幼虫,3.,二龄幼虫,4.,三龄幼虫,5.,蛹,6.,成虫,(,雄,),7.,成虫,(,雌,),果蝇生活周期的长短与温度关系密切，,30,以上时果蝇则将不育并可导致死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低。培养果蝇的最适温度是,20-25,。,10 15,20,25,卵幼虫蛹成虫,57,天,18,天,15,天,12,天,用手轻拍果蝇的培养瓶，使果蝇震落瓶底，迅速拔去棉塞，并将麻醉瓶与培养瓶的两口相对，培养瓶在下、麻醉瓶在上，并朝向灯光处，双手遮住培养瓶，利用果蝇的趋光性和向上性，将果蝇引入麻醉瓶；,先在棉签上滴上数滴乙醚，将培养瓶口朝下，果蝇即向上爬行。轻抽出棉塞，插进棉签，将棉塞塞住，平放在桌面上约半分钟，果蝇即被麻醉。,（二）果蝇麻醉,注意不能麻醉过度，如果果蝇的翅膀与身体呈,45,度角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡；,摇动麻醉瓶，使果蝇震落瓶底，之后立即将果蝇倒白瓷板或滤纸上，用毛笔小心拨动观察；,检查后的果蝇可以放回原培养瓶中，也可以进行处死。,（三）果蝇雌雄性别的鉴别,果蝇有雌雄之分，幼虫期较难区别，成虫期则较易区别：,1.,体型：,雌果蝇,体型较大，雄果蝇较小；,2.,腹部末端：雄性腹部,钝圆,，雌性末端末端,稍尖,；,3.,腹部背面：雌性有明显,5,条黑色条纹，雄性有,7,条，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈现一,明显黑点,。,4.,腹部腹面：雌性有较明显的,7,个腹片，雄性有,5,个腹片。,5.,性梳：雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳，雌性则无。性梳的有无，是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一。,图,3,左：雄性果蝇的左前足 中：跗节基部的性梳 右：雌果蝇无性梳,C,、基节,TR,、转节,F,、腿节,TI,、胫节,TA,、跗节,（四）果蝇培养基,果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以水果为食，而是采食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇的饲料。,配方,水,/ml,琼脂,/g,蔗糖,/g,玉米粉,/g,丙酸,/ml,酵母粉,/g,1,80,1.5,13,10,0.5,0.5,2,100,1,10,10,0.5,0.5,按配方称量各成分；,用,2/3,的水将琼脂调匀，加热熔化；,加入蔗糖使溶解；,用,1/3,的水将玉米粉调成糊状，倒入上液中，不断搅拌，煮沸至粘稠为止；,为防止培养基长霉，可加,2ml,丙酸或苯甲酸搅拌均匀,将培养基倒入灭菌的培养瓶中；,用棉塞封口，使冷却凝固；,用前,1-2,天，在培养基表面撒少量干酵母粉，使培养基发酵后即可使用。,实验室常用的培养基配制方法是：,（五）几种常见的突变性状,实验中常用的果蝇突变性状多可用肉眼鉴别，有一些则可借助于解剖镜辨认，这些性状一般都是明显而稳定的。,作 业：,1.,如何区分果蝇的雌雄个体？,2.,果蝇麻醉是的注意事项有哪些？,