苯乙胺类肾上腺素药物的分析

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,药物分析,Xiangnan,University,第七章 苯乙胺类拟肾上 腺素药物的分析,教学目的与要求,掌握,典型药物结构与特点、主要理化性质；,掌握,苯乙胺类药物的含量分析方法以及酮体检查。,熟悉,苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质、鉴别试验。,了解,苯乙胺类药物的有关杂质检查。,第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析,乙胺,含苯环的基团,苯乙胺类,1,、苯环常被活泼的酚羟基取代,2,、具有,碱性,的脂肪乙胺侧链，易于被氧化,?,基本结构与性质,?,第一节 结构与性质,(,Phenethylamine,),一、基本结构与性质,R1,R2,R3,HX,肾上腺素,(adrenaline),盐酸克伦特罗,(,clenbuterol,ydrochloride,),硫酸沙丁胺醇,(,salbutamol,sulfate),盐酸麻黄碱,(,ephedrine hydrochloride,),瘦肉精,弱碱性：,烃胺基侧链，仲胺氮,弱碱性,。,游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水,酚羟基特性：,邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色；,在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；,在碱性溶液中更易变色。,*,光学活性：,手性碳原子，具有旋光性,苯环取代基特性,：如盐酸克伦特罗芳伯氨基；,紫外、红外吸收特性,第一节 性质,第二节、鉴别试验,Identification,一、与三氯化铁反应,具有酚羟基的本类药物,第二节、鉴别试验,Identification,药物,鉴别方法,肾上腺素,加盐酸溶液（,9-1000,）,2-3,滴溶解后，加水,2mL,与三氯化铁试液,1,滴，即显翠绿色；再加氨试液,1,滴，即变紫色，最后变成紫红色。,盐酸异丙肾上腺素,加三氯化铁试液,2,滴，即显深绿色；滴加新制的,5%,碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变成红色。,重酒石酸去甲肾上腺素,加三氯化铁试液,1,滴，振摇，即显翠绿色；再缓缓加碳酸氢钠试液，即显蓝色，最后变成红色。,盐酸去氧肾上腺素,加三氯化铁试液,1,滴，即显紫色,盐酸多巴胺,加三氯化铁试液,1,滴，溶液显墨绿色；滴加,1%,氨溶液，即转变成紫红色,硫酸沙丁胺醇,加三氯化铁试液,2,滴，振摇，溶液显紫色；加碳酸氢钠试液，即成橙黄色浑浊液。,表,7-2,苯乙胺类药物与三氯化铁的显色反应,第二节、鉴别试验,Identification,二、与甲醛,-,硫酸反应,具有酚羟基的本类药物,请看具体例子,第二节、鉴别试验,Identification,与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应,药物,三氯化铁,甲醛硫酸,肾上腺素,0.1mol/L,盐酸液中显翠绿色，加氨试液显,紫色,，紫红色,红色,重酒石酸去甲肾上腺素,翠绿色，加碳酸氢钠试液显,蓝色,，,红色,淡红色,盐酸去氧肾上腺素,紫色,玫瑰红,，,橙红,，,深棕红,盐酸异丙肾上腺素,深绿色,，滴加新制,5%,碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色,棕色,，,暗紫色,盐酸多巴胺,墨绿色,，滴加,1%,氨溶液，显紫红色,三、氧化反应,酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色,肾上腺素,碘或过氧化氢,中性或酸性,肾上腺素红,放置,棕红色多聚体,盐酸异丙肾上腺素,偏酸性条件,碘,异丙肾上腺素红,硫代硫酸钠,淡红色溶液,重酒石酸,去甲肾上腺素,酒石酸氢钾饱和液,pH 3.56,碘试液,放置,5min,硫代硫酸钠,溶液为无色,或仅显微红色或,淡紫色,肾上腺素,或盐酸异丙肾上腺素,明显的,红棕色,或紫色,书上说的是还原性反应,第二节、鉴别试验,Identification,第二节、,Identification,四、氨基醇的,双缩脲,反应,盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸去氧肾上腺素等药物分子结构中，芳环侧链具有,氨基醇,结构，可显,双缩脲,特征反应,盐酸麻黄碱,显蓝紫色,加乙醚,乙醚层显,紫红色,，水层显,蓝色,?,例：,Chp,鉴别盐酸麻黄碱,取本品,10mg,，,1ml,水溶解后，加硫酸铜试液,2,滴与,20%,氢氧化钠液,1ml,，即显,蓝紫色,，加乙醚,1ml,振摇、放置，乙醚层显,紫红色,，水层变为,蓝色,。,五、亚硝基铁氰化钠反应,脂肪族伯胺的,Rimini,专属反应,二、,Identification,重酒石酸间羟胺,水,溶解,亚硝基铁氰化钠试液,丙酮,(,无甲醛,),数滴，碳酸氢钠少量,红紫色,Rimini,反应,例子,丙酮中不能含有甲醛,?,二、,Identification,六、,UV,和,IR,药物,溶剂,浓度,(mg/ml),max,(nm),吸收度,(A),重酒石酸间羟胺,水,0.10,272,盐酸异丙肾上腺素,水,0.05,280,0.50,盐酸多巴胺,0.5%,硫酸,0.03,280,盐酸芬氟拉明,0.1mol/L,盐酸,0.25,263,270,盐酸苯乙双胍,水,0.01,234,0.60,盐酸克伦特罗,0.1mol/L,盐酸,0.03,243,296,硫酸沙丁胺醇,水,0.08,274,盐酸伪麻黄碱,水,0.50,251,257,263,三、,Detection of specific impurities,一、酮体杂质的检查,生产工艺：,酮体,氢化还原,制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。,降解产物,肾上腺素红,多聚体,三、,Detection of specific impurities,通过,UV,光谱检测,三、,Detection of specific impurities,药物,杂质,溶剂,C(mg,/ml),(nm),A,肾上腺素,肾上腺酮,HCl(92000),2.0,310,0.05,盐酸去氧肾上腺素,酮体,水,2.0,310,0.20,重酒石酸去甲肾上腺素,去甲肾上腺酮,水,2.0,310,0.05,盐酸异丙肾上腺素,酮体,水,2.0,310,0.15,盐酸甲氧明,酮胺,水,1.5,347,0.06,紫外分光光度法检查酮体的条件及要求,特殊杂质检查,光学纯度检查：,ChP2010,药物,溶剂,C(mg,/ml),比旋度,肾上腺素,HCl(9,2000),20,-50.0-53.5,盐酸去氧肾上腺素,水,20,-42-47,重酒石酸去甲肾上腺素,水,50,-10.0-12.0,盐酸麻黄碱,水,50,-33-35.5,盐酸伪麻黄碱,水,50,+61.0+62.5,手性碳原子,三、,Detection of specific impurities,二、有关物质,肾上腺素,HPLC,盐酸苯乙双胍,纸色谱法,盐酸去氧肾上腺素,TLC,其它药物,HPLC,一些方法的特征还是要记住的,四、,含量测定,原料药：多采用非水溶液滴定法，也有溴量法和亚硝酸钠法。,制剂：,UV,、比色法、,HPLC,四、,含量测定,一、非水溶液滴定法,定义：是指在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法,.,应用：主要用于测定有机碱及其氢卤素盐、硫酸盐以及有机酸碱金属盐类药物的含量，也用于测定某些有机弱酸的含量。,四、,Assay,一、非水溶液滴定法,溶剂种类：,（,1,）酸性溶剂：,有机,弱碱,在酸性溶剂中可显著地增强其相对碱度，最常用的酸性溶剂是,冰醋酸,。,(?),（,2,）碱性溶剂：,有机,弱酸,在碱性溶剂中可显著地增强其相对酸度，最常用的碱性溶剂是,二甲基甲酰胺,。,(?),（,3,）两性溶剂：,兼有酸碱两种性能，最常用的是甲醇。,（,4,）惰性溶剂：,溶剂没有酸碱性，如甲苯、三氯甲烷、丙酮。,四、,Assay,一、非水溶液滴定法,(,弱碱性,),为什么要应用非水滴定法？,这是因为本类药物多为,弱碱性,，在水溶液中用酸碱滴定液直接滴定,没有明显的突跃,，终点难以观测，常不能获得满意的测定结果。而在非水酸性溶剂中，只要在水溶液中的,p,Kb,10,，均可以被冰醋酸,均化,到溶剂醋酸根水平，,相对碱度显著增强,。因而可使弱碱性的药物都能顺利进行滴定。,以高氯酸滴定弱碱为例，在冰醋酸中：,弱碱,B,p,K,b,8,的有机碱性药物及其盐的含量测定。条件选用适当的话,8-13,的弱碱均可采用。,对于碱性较弱的药物,p,Kb,为,810,时，宜选用,冰醋酸,，,p,Kb,为,1012,时，宜选用,冰醋酸与醋酐,混合溶剂，,p,Kb,大于,12,时，就以,醋酐,为溶剂。,原因：,醋酐有利用增加碱性药物的碱性,。！,要注意方法适用范围,四、,Assay,一、非水溶液滴定法,(,弱碱性,),酸根影响：在醋酸溶剂中：,置换顺序：高氯酸,氢溴酸,硫酸,盐酸,硝酸,磷酸,有机酸,。,不同的酸对滴定终点的显示有影响，对滴定结果也有影响！,细节方面的内容自己多注意,四、,Assay,一、非水溶液滴定法,(,弱碱性,),滴定剂的稳定性：,挥发性溶剂，结果需要校正。,终点指示方法：,电位滴定法、指示剂法。,其它干扰,指示剂的选用及终点颜色的判断要注意,二、溴量法,四、,Assay,原理：药物分子中的苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与过量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法硫代硫酸钠滴定测定剩余的溴。根据与药物定量反应消耗的溴滴定液的量，即可计算供试品的含量。,二、溴量法,四、,Assay,游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失,不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过量,2,为宜。,平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。,二、溴量法,三、亚硝酸钠法,四、,Assay,盐酸克伦特罗，芳伯氨基，重氮化，,永停滴定法,指示终点,四、,Assay,四、,紫外分光光度法：,苯乙胺类药物分子具有苯环结构具有特征的紫外吸收，,Chp2010,采用这种方法测定多种紫类药物。如盐酸甲氧明注射液，重酒石酸间羟胺注射液。,比色法：,分子中具有芳伯胺基的药物采用重氮化,-,偶合反应显色，分子中含有酚羟基可与亚铁离子显色，然后进行比色测定。,Chp2010,采用比色法测定盐酸克伦特罗栓和盐酸异丙肾上腺素。,四、,Assay,四、,UV,和比色法,五、,HPLC,瘦肉精,ChP2010,采用,HPLC,作为盐酸肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液、盐酸异丙肾上腺素注射液、盐酸多巴胺注射液、硫酸沙丁胺醇注射液（及其片剂、胶囊、缓释片与缓释胶囊）、盐酸苯乙双胍片、盐酸氯丙那林片、盐酸麻黄碱注射液与滴鼻液、盐酸氨溴索（及其口服溶液、片剂、胶囊与缓释胶囊）等的含量测定方法。,五、体内药物分析,(GC-MS),动物组织中的,盐酸克伦罗特,残留的测定,盐酸克伦特罗是肾上腺类神经兴奋剂。,克伦特罗在家畜和人体内吸收好，而且与其它,-,兴奋剂相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。,又称“瘦肉精”,应用,GC-MS,法进行测定。,五、体内药物分析,(GC-MS),人血浆中特布他林的,LC-MS/MS,分析,特布他林是,2,-,受体激动剂，临床用于治疗,支气管哮喘,，喘息性支气管炎，肺气肿等。,其血药浓度低，需要用到灵敏的分析检测方法：,LC-MS/MS,。,总结,结构与性质：易氧化；弱碱性；旋光性,鉴别试验：与铁盐的反应；与甲醛硫酸反应；氧化反应；双缩脲反应；脂肪伯胺的,Rimini,试验,含量测定：非水溶液滴定法、溴量法,练习与思考,1,、下列苯乙胺类药物中，可与三氯化铁试剂显深绿色，再滴加碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变成红色的是,A,、硫酸苯丙胺,B,、盐酸甲氧明,C,、盐酸异丙肾上腺素,D,、盐酸克仑特罗,E,、盐酸苯乙双胍,练习与思考,2,、下列药物中，可显双缩脲反应的是,A,、盐酸多巴胺,B,、盐酸麻黄碱,C,、对氨基苯甲酸,D,、苯佐卡因,E,、氧烯洛尔,练习与思考,3,、下列药物中，可显,Ramini,反应的是,A,、盐酸多巴胺,B,、氧烯洛尔,C,、对氨基苯甲酸,D,、苯佐卡因,E,、重酒石酸间羟胺,练习与思考,A,、与甲醛,-,硫酸反应显玫瑰红,-,橙红,-,深棕红的变化过程,B,、加碘试液产生明显的红棕色,C,、与亚硝基铁氰化钠反应,D,、与硫酸铜和氢氧化钠试液反应即显蓝紫色