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“十二五”职业教育国家规划教材,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,食品理化检验技术,“十二五”职业教育国家规划教材,食品理化检验技术,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,“,十二五,”,职业教育国家规划教材编写组,食品理化检验技术(第二版),学习情境四 食品中有毒有害成分的检验,子情境三 其他有害物质的测定,学习情境四,学习目标,知识目标:,1.了解食品中其他有害物质的种类及在食品中的限量标准。,2.熟悉食品中黄曲霉毒素和苯并(a)芘的特征、污染途径及对人体的危害。,3.掌握食品中黄曲霉毒素、苯并(a)芘和甲醇的测定方法和操作要点。,技能目标:,1.会进行样品处理、标准溶液配制、比色等操作。,2.能测定白酒中的甲醇含量。,子情境三 其他有害物质的测定,一、食品中苯并a芘的测定,苯并芘的危害,苯并芘为致癌物质多环芳烃中的一种。,3,4-,苯并芘是一种有,5,个苯环构成的多环芳烃,性质稳定;,在有机溶剂中,用波长,365nm,紫外线照射可产生典型的紫色荧光;,3,4-,苯并芘是已发现的,200,多种多环芳烃中最主要的环境和食品污染物,是一种强烈的致癌物质,对机体各器官具有致癌作用;,食品中苯并(a)芘的限量指标 GB 2762-2012,学习情境四,检测依据,GB,/T,5009.,27,-20,03,2,目测比色法,学习情境四,1,荧光分光光度法,测定原理,荧光分光光度法,GB,/T,5009.,27,-20,03第一法,学习情境四,试样先用有机溶剂提取,或经皂化后提取,再将提取液经液,-,液分配或色谱柱净化,然后在乙酰化滤纸上分离苯并,(a),芘,因苯并,(a),芘在紫外光照射下呈蓝紫色荧光斑点,将分离后有苯并,(a),芘的滤纸部分剪下,用溶剂浸出后,用荧光分光光度计测荧光强度与标准比较定量。,(一)仪器及试剂,学习情境四,仪器,脂肪提取器。,层析柱:内径10mm,长350mm,上端有内径25mm,长80mm100mm内径漏斗,下端具有活塞。,层析缸(筒)。,K-D全玻璃浓缩器。,紫外光灯:带有波长为365nm或254nm的滤光片。,回流皂化装置:锥形瓶磨口处连接冷凝管。,组织捣碎机。,荧光分光光度计。,试剂,苯、无水乙醇、丙酮,重蒸;,环乙烷(或石油醚,沸程,3060,)重蒸或氧化柱处理除荧光,二甲基甲酰胺或二甲基亚砜、,95,乙醇、氢氧化钾;,无水硫酸钠,乙醇,(95%),二氯甲烷,(2+1)展开剂,硅镁型吸附剂、层析用(中性)氧化铝、乙酰化滤纸;,100,g/mL,,1.0,g/mL,,0.1,g/mL苯并(a)芘标准溶液,学习情境四,(二),操作方法,样品提取、净化,薄层层析分离,在乙酰化滤纸上一端5cm处,吸取样品液点于,滤纸上,用电吹风从背面吹散溶剂;同样点,苯并(a)芘标准液,滤纸下端浸入层析缸内展开,剂约1cm,待溶剂前沿至20cm时取出阴干;,学习情境四,在,365nm,或,254nm,紫外灯下观察滤纸条,用铅笔划出标准苯并,(a),芘及其同一位置的样品的蓝紫色斑点,剪下此点分别放入小比色管中,各加,4mL,苯加盖,放入,50,60,水浴摇荡浸泡,15min,;,测定,将样品和标准液的苯浸出液移入荧光分光光度计的石英杯中,以,365nm,为激发光波长,以,365,460nm,波长进行荧光扫描,所得荧光光谱与标准苯并,(a),芘的光谱对比;,在分析同时做试剂空白、处理样品所用全部试剂,分别读取样品、标准及试剂空白于波长,4065nm,处荧光强度,按基线法由下式计算数值,为定量计算的荧光强度。,荧光分光光度计,学习情境四,结果计算,样品中的苯并,(a),芘按下式计算:,式中 X样品中的苯并(a)芘含量(,g/Kg),S苯并(a)芘标准斑点的质量(,g),F标准斑点浸出液荧光强度(mm),F,1,样品斑点浸出液荧光强度(mm),F,2,试剂空白斑点浸出液荧光强度(mm),V,1,V,2,分别为样品浓缩液体积和点样体积(mL),m样品质量(g),学习情境四,二、食品中黄曲霉毒素的测定,学习情境四,概述,黄曲霉毒素,(AFT),是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物,温特曲霉也能少量产生,毒素;,黄曲霉毒素是一族结构类似化合物的总称,基本结构是二呋喃环和香豆素,紫外线下能发荧光;,目前已分离鉴定出,12,种,包括,B,1,、,B,2,、,G,2,、,M,1,、,M,2,、,P,1,、,Q,、,H,1,、,GM,、,B,2a,和毒醇;,黄曲霉毒素是剧毒物质,毒性相当于氰化钾的,10,倍,砒霜的,68,倍,具有极强的致癌性,长期摄入会诱发肝癌;,各种黄曲霉毒素中以黄曲霉毒素,B,1,毒性和,致癌性,最强,在食品中污染最为严重。,食品中黄曲霉毒素的限量指标 GB 2761-2012,学习情境四,检测依据,GB5009.,24,-20,10,学习情境四,食品中黄曲霉毒素,M,1,和,B,1,的测定,测定原理,学习情境四,样品经提取、浓缩、薄层分离后,黄曲霉毒素,M1,与,B1,在紫外光(波长,365nm,)下产生蓝紫色荧光,根据其在薄层上显示荧光的最低检出量来测定含量。,甲醇进入人体后分解缓慢,有蓄积作用。少量甲醇也容易引起中毒,因此蒸馏酒必须严格控制甲醇含量。我国食品安全国家标准 蒸馏酒及其配制酒(GB 2757)规定以粮谷类为原料的酒甲醇不得超过0.6g/L,其他不得超过2.0g/L。通过查阅食品安全国家标准 蒸馏酒及其配制酒(GB 2757)和蒸馏酒与配制酒卫生标准的分析方法(GB/T 5009.48),小组讨论后制订检验方案,正确测定白酒中甲醇的含量,并评价甲醇含量是否符合要求。,任务实施,学习情境四,
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